авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Недоношенные новорожденные: структурно-метаболические параметры клеток иммунной системы при разном гестационном возрасте и респираторном дистресс-синдроме

На правах рукописи

ЛИСИХИНА НАТАЛЬЯ ВЛАДИМИРОВНА НЕДОНОШЕННЫЕ НОВОРОЖДЕННЫЕ:

СТРУКТУРНО-МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ РАЗНОМ ГЕСТАЦИОННОМ ВОЗРАСТЕ И РЕСПИРАТОРНОМ ДИСТРЕСС-СИНДРОМЕ 14.01.08 – педиатрия 14.03.03 – патологическая физиология, медицинские наук

и

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Красноярск – 2010 1

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН, в лаборатории этногенетических и метаболических проблем нормы и патологии.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН Манчук Валерий Тимофеевич доктор биологических наук, профессор Фефелова Вера Владимировна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Таранушенко Татьяна Евгеньевна доктор медицинских наук, профессор Савченко Андрей Анатольевич

Ведущая организация: Хабаровский филиал Учреждения Российской академии медицинских наук Дальневосточного научного центра физиологии и патологии Сибирского отделения РАМН НИИ охраны материнства и детства

Защита состоится «14» октября 2010 г. в 10 часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д.208.037.01 при ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф.

Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации» (660022, г.Красноярск, ул. Партизана Железняка, д.1).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф.

Войно-Ясенецкого Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации» по адресу: 660022, г.Красноярск, ул. Партизана Железняка, д.1.

Автореферат разослан « » 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук, доцент Штарик С.Ю.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы Проблема недонашивания беременности и преждевременного рождения детей является одной из актуальных в пери- и неонатологии. В настоящее время частота рождения детей раньше срока достаточно высока и не имеет тенденции к снижению (Володин Н.Н., 2004;

Абаев Ю.К., 2005;

Янмурзаева З.А., 2006;

Прахов А.В. с соавт., 2008;

Hack M., 1996;

Spenser N.J., 2002). В России недоношенные при рождении составляют от 5 до 12% всех новорожденных (Никулин Л.А., Левченко Л.А., 1999;

Ковалевская О.И., 2004;

Логинова И.А., 2004).

Высокая заболеваемость и смертность недоношенных новорожденных, различные по тяжести неврологические и соматические нарушения, приводящие часто к инвалидизации, а в ряде случаев к полной социальной дезадаптации – являются одной из основных медико-социальных проблем.

Сохранение жизни и здоровья недоношенным детям продолжает оставаться одной из первоочередных задач педиатрии (Володин Н.Н. с соавт., 2001;

Дементьева Г.М. с соавт., 2003;

Amon E., 1999;

Fonceca E.B., 2004).

Несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению различных параметров при недоношенности, патогенез этого состояния до конца не выяснен. Некоторые авторы считают нарушения иммунологических отношений между матерью и плодом одним из важнейших пусковых факторов недоношенности (Говалло В.И., 1987;

Яшвили-Пароксадзе Т.И., 1990;

Сухих Г.Т., Ванько Л.В., 2003;

Макаров О.В. с соавт., 2009;

Верясов В.Н. с соавт., 2010).

Считается доказанным, что изменение функциональной активности клеток иммунной системы происходит только при соответствующих изменениях метаболизма лимфоцитов (Нарциссов Р.П., 1978, 1989;

Захарова Л.Б., 1981, 1999;

Робинсон М.В. с соавт., 1986, 1994;

Савченко А.А., 1996;

Труфакин В.А. с соавт., 1997;

Булыгин Г.В. с соавт., 1999;

Buttgeriet F., 1991).

Метаболизм клеток иммунной системы при недоношенности изучался преимущественно у недоношенных новорожденных (Валюлис А. Р., 1994;

Болотокова Р.А., 2005;

Желев В.А., 2005;

Ильина А.С., 2005). Между тем иммунологические взаимоотношения матери и плода формируются в рамках единой функциональной системы мать-плацента-плод и нарушение нормальных взаимоотношений в этой системе могут явиться ведущим звеном в возникновении патологии беременности и различных нарушений у недоношенных новорожденных (Шабалов Н.П.,1987;

Шищенко В.И., 1988;

Гребеняк О.А., 2008).

В структуре причин неонатальной смертности, особенно при недоношенности, одно из ведущих мест занимает респираторный дистресс синдром новорожденных (РДСН) и его последствия (Гармаева В.В., 2008;

Кузьменко Г.Н. с соавт., 2009). В настоящее время достигнуты значительные успехи в профилактике и лечении РДСН, однако ожидаемого снижения смертности и числа осложнений при данном заболевании не произошло.

В литературе встречаются фрагментарные данные о причинах и механизмах развития РДСН (Коцарев О.С., 1989;

Гилев А.И., 1995;

Ларюшкина Р.М., 1997;

Палилова Л.А., 2001;

Хижняк Д.Г. с соавт., 2007;

Кузьменко Г.Н. с соавт., 2009). Некоторые авторы (Котова Н.В., 1985;

Ларюшкина Р.М. с соавт., 2000;

Палилова Л.А., 2001) считают, что на течение и исход РДСН значительное влияние оказывает повреждение сурфактанта, которое может быть связано с усилением процессов перекисного окисления липидов.



Усиленный катаболизм липидов сурфактанта может быть также связан с измененным функционированием лизосом, именно лизосомы ответственны за катаболические процессы в клетках, в том числе за гидролиз структурных фосфолипидов мембран клеток и сурфактанта (Панин Л.Е., Маянская Н.Н., 1987;

Шаронов А.С., 2007). Представляется актуальным изучение ферментативной активности клеток иммунной системы и липидного спектра мембран лимфоцитов у недоношенных новорожденных и их матерей для уточнения патогенетических аспектов развития недоношенности и РДСН.

Цель исследования: Определить у недоношенных новорожденных патогенетическую значимость изменений структурно-метаболических параметров клеток иммунной системы при разном гестационном возрасте и респираторном дистресс-синдроме.

Задачи исследования:

1. Изучить метаболические параметры лимфоцитов и гранулоцитов в пуповинной крови недоношенных новорожденных с учетом гестационного возраста и в венозной крови их матерей.

2. Исследовать спектр структурных липидов мембран лимфоцитов у недоношенных новорожденных с разным гестационным возрастом и у их матерей.

3. Изучить активность метаболических параметров, в том числе характеризующих активность лизосом, у недоношенных новорожденных с респираторным дистресс-синдромом.

4. Определить особенности липидного спектра мембран лимфоцитов у недоношенных новорожденных с респираторным дистресс-синдромом.

5. Выявить корреляционную зависимость между активностью ферментов клеток иммунной системы и структурными липидами мембран лимфоцитов с учетом гестационного возраста у недоношенных новорожденных.

Научная новизна: Впервые снижение активности митохондриального фермента СДГ в клетках иммунной системы недоношенных новорожденных и их матерей рассматривается как следствие нарастающей иммунной супрессии при недоношенности.

Впервые изучен липидный спектр мембран лимфоцитов у недоношенных новорожденных с разным гестационным возрастом и у их матерей, в сравнении с доношенными новорожденными;

выявлены изменения в липидном бислое мембран, которые связаны с обогащением мембран холестерином, повышением процентного содержания ЛФХ, СМ и снижением ФХ по мере снижения гестационного возраста новорожденного.

Проведено изучение маркерного фермента лизосом лимфоцитов и гранулоцитов – кислой фосфатазы у недоношенных детей с РДСН. Обнаружено статистически значимое повышение активности кислой фосфатазы клеток иммунной системы у недоношенных детей с РДСН по сравнению с недоношенными без РДСН.

Впервые изучено содержание структурных липидов мембран лимфоцитов у недоношенных детей с РДСН, выявлено значительное нарастание процессов деполимеризации фосфатидилхолина мембран у недоношенных новорожденных при РДСН.

Практическая значимость:

В результате проведенных исследований получены данные, позволяющие представить новую интерпретацию процессов формирования изменений метаболических параметров клеток иммунной системы у недоношенных новорожденных, которые впоследствии могут влиять на состояние здоровья недоношенных детей.

Полученные данные о повышении функциональной активности лизосом при РДСН могут быть использованы для формирования комплекса лечебных мероприятий по снижению активности лизосомальных ферментов в процессе предупреждения и лечения РДСН.

Внедрение в практику:

Результаты исследования внедрены в практику работы МУЗ «Родильный дом №2» (г.Красноярск), МУЗ «Родильный дом №5» (г.Красноярск).

Показатели активности метаболизма клеток иммунной системы используются в научных исследованиях Учреждения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте медицинских проблем Севера Сибирского отделения РАМН.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Однонаправленный характер изменений метаболических параметров клеток иммунной системы у недоношенных новорожденных детей и их матерей – снижение активности митохондриального фермента СДГ, рассматривается как проявление нарастающей супрессии иммунной системы при недоношенности.

2. Выявленные у недоношенных новорожденных показатели, свидетельствующие об усилении процессов деполимеризации фосфатидилхолина, являющегося основным структурным компонентом мембран клеток и сурфактанта, позволяют заключить, что дефицит сурфактанта у недоношенных новорожденных обусловлен не только незрелостью, но и нарастанием процессов его деполимеризации.

3. Установлено повышение активности маркерного фермента лизосом у недоношенных новорожденных с РДСН, что свидетельствует о нарастании их функциональной активности;

деполимеризация фосфатидилхолина в мембранных структурах может быть связана у недоношенных детей с РДСН с высокой активностью лизосом, содержащих ферменты, субстратом для катаболических процессов которых является фосфатидилхолин.

Личный вклад автора:

Лично автором проведено планирование работы, поиск и анализ литературы по теме диссертации. Автором проведено обследование человек, из них 104 новорожденных, у которых изучены особенности течения периода новорожденности;

и у 101 их матери, у которых изучены особенности анамнеза, характер течения настоящей беременности и исходы родов. В ходе сбора материала для диссертационной работы автором были проведены клинико-анамнестические, цитохимические, хроматографические и иммунологические методы исследования, позволяющие оценить структурно метаболические параметры клеток иммунной системы у недоношенных новорожденных и их матерей. Автором самостоятельно проводилось выполнение расчетов, обработка и анализ результатов, оформление диссертации и автореферата.

Апробация материалов исследования:

Материалы диссертации доложены на: итоговой научно-практической конференции с международным участием «Вопросы сохранения и развития здоровья населения Севера и Сибири (Красноярск, 2005), на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 15-му юбилею Красноярского Краевого Центра по профилактике и борьбе со СПИДОМ «Дни иммунологии в Сибири» (Красноярск, 2005), VII Международной научно практической конференции «Здоровье и Образование в XXI веке» (Москва, 2006), на научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы здравоохранения Сибири» (Красноярск, 2007), на XI межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицины» (Абакан, 2008), на научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы здравоохранения Сибири» (Красноярск, 2008), на XII межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицины» (Абакан, 2009), на X Международном конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Казань, 2009).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, из них статья в центральной печати.

Объем и структура диссертации: Диссертация изложена на 161 странице печатного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, клинической характеристики обследованных групп, 4-х глав собственных исследований, заключения и списка литературы. Работа включает 32 таблицы, 29 рисунков. Список литературы включает 308 источников, из них 225 работ отечественных и зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. В работу включены результаты обследования 205 человек, из них 104 новорожденных и 101 их мать, которые обследованы на базе родильного дома №2 г.Красноярска (главный врач Ковалевская О.И.) с 2003 по 2006 год.





Для исследования отбирались здоровые новорожденные, родившиеся доношенными (38-40 недель гестации) 39 детей и новорожденные, родившиеся недоношенными (28-36 недель гестации) 65 детей, у соматически здоровой матери.

Новорожденные, родившиеся недоношенными, были разделены на группы в соответствии с гестационным возрастом. В первую группу вошли дети, родившиеся со сроком гестации 36-35 недель – 36 новорожденных ( группа). Вторую группу составили 19 новорожденных с гестационным возрастом 32-34 недели (2 группа). В третью группу (3 группа) вошли новорожденных со сроком гестации 28-31 неделя. Все наблюдаемые матери были разделены на группы, в соответствии с распределением на группы их детей. Кроме того, среди всех недоношенных была выделена группа с РДСН (тяжелой степени) – 15 новорожденных.

Критерии включения новорожденных в исследование: гестационный возраст доношенных новорожденных 38-40 недель беременности, гестационный возраст недоношенных новорожденных менее 37 и более 28 недели беременности, родоразрешение через естественные родовые пути, новорожденные без врожденных пороков развития, новорожденные без показателей признаков воспаления в общем анализе крови и биохимических анализах, новорожденные без клинических признаков местной гнойно воспалительной патологии, новорожденные без генетической патологии.

Критерии исключения новорожденных в исследование: клинические и лабораторные признаки патологического процесса у новорожденных, течение беременности с клиническими и лабораторными данными, свидетельствующими о течении инфекционного процесса у матерей, соматические заболевания матери до и во время беременности, течение беременности у матерей с обострениями хронических очагов инфекции различного генеза.

На каждого наблюдаемого новорожденного ребенка была заведена анкета, в которой были отражены основные анамнестические данные, характеризующие особенности состояния здоровья родителей, течение и исход предыдущих беременностей, особенности течения беременности и родов.

Учитывались данные клинического осмотра, отражающие общее состояние новорожденного.

Исследование ферментного статуса, спектра нейтральных липидов и фосфолипидов в клетках иммунной системы у новорожденных изучалось в пуповинной крови новорожденных, у матерей те же параметры определялись в венозной крови. Выделение лимфоцитов для последующего определения спектра липидов производили центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографин по методу A. Boyum (1968). Активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) определяли по методике Р.П. Нарциссова (1969).

Кислая фосфатаза в лимфоцитах (КФЛ) и в гранулоцитах (КФГ) выявлялась по методу A. F. Goldberg, T. Barka (1962) с использованием нафтола As-E-фосфата.

Спектр нейтральных липидов и фосфолипидов изучали методом тонкослойной хроматографии (Ростовцев В.Н., Резник Г.Е., 1982). В сыворотке пуповинной крови новорожденных и венозной крови их матерей исследовали содержание иммуноглобулинов класса A, M, G, методом радиальной иммунодиффузии (Mancini L. et al., 1965).

Исследования одобрены на заседании этического комитета НИИМПС СО РАМН. Протокол обследования новорожденных детей и их матерей соответствовал этическим стандартам и был разрешен комитетом по биомедицинской этике НИИМПС СО РАМН.

По результатам исследования в пакете электронных таблиц MS Excel была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакетов прикладных программ программ Statistica 6.0, Primer of Biostatistics Version 4. by Stanton A. Glantz производился статистический анализ. Нормальность распределения определяли с помощью критерия Колмагорова-Смирнова. Для выборок с нормальным распределением определяли среднее арифметическое значение (М), ошибку средней арифметической (m). Для выборок с распределением, отличных от нормального, определяли медиану (Ме) и нижний и верхний квартили (С25-С75). Проверку гипотезы о статистической достоверности двух выборок проводили с помощью критерия Т–Стьюдента в случае нормального распределения и Манна–Уитни в случаях распределения, отличных от нормального. Сравнение групп с качественными признаками проводилось с использованием теста «-квадрат». Для качественных данных осуществлялось вычисление доверительного интервала. Связь между отдельными признаками исследовалась при помощи корреляционного анализа.

Оценивалась парная корреляционная зависимость (по Спирмену) каждого параметра по значению коэффициента корреляции r. Достоверность коэффициентов корреляции и различий принимали при p0,05. При значении коэффициента корреляции r0,75 связь между признаками расценивалась как сильная, при коэффициенте 0,25r0,75 – зависимость средней силы, и при значении r0,25 – слабая степень корреляции между признаками (Реброва О.

Ю., 2002).

Результаты исследования и их обсуждение Возраст матерей во всех группах недоношенных новорожденных не имел статистически значимых отличий и составил в среднем 24 [20:28] года. При изучении акушерского анамнеза обращает на себя внимание то, что в группе доношенных новорожденных первородящих - 61,5% [95% ДИ: 46-75] и первобеременых - 56,4% [95% ДИ: 41-71] матерей было почти равное количество, в то время, как в группе недоношенных новорожденных первородящих матерей - 48,3% [95% ДИ: 36-59] было в два раза больше, чем первобеременных - 28,5% [95% ДИ: 18-39], разница статистически значима (p0,05). При анализе данных признаков у матерей, родивших новорожденных с разным гестационным возрастом, прослеживается снижение количества первобеременных матерей с уменьшением срока гестации, особенно у матерей, родивших недоношенных новорожденных третьей группы (p0,05). У матерей в группе недоношенных новорожденных выявлено значительное количество женщин с медицинскими абортами в анамнезе (более одного), в сравнении с матерями, родившими доношенных детей (p0,05): 28,2% [95% ДИ: 16-44] женщин, родивших доношенных детей, имели в анамнезе медицинский аборт, у 7,6 % из них имели от 1 до 5 мед.абортов;

в группе матерей, родивших недоношенных детей, медицинский аборт имели 56,5% [95% ДИ: 45-68] женщин, у 15,6 % из них имелось от 1 до 10 мед.абортов. У матерей, при сравнении контрольной группы с группами недоношенных с разным гестационным возрастом, выявлено увеличение количества абортов во всех трех группах, особенно у матерей, родивших недоношенных новорожденных третьей группы (p0,05). У матерей, родивших недоношенных новорожденных, чаще (p0,02) фиксировалось дородовое излитие околоплодных вод - 59,2% [95% ДИ: 51-74], в сравнении с матерями, родивших доношенных детей 20,5%[95% ДИ: 11-35].

Показатели физического развития недоношенных детей (масса тела, длина тела, окружность головы, окружность груди) находились в широких пределах и зависели от гестационного возраста: чем меньше срок гестации, тем меньшими были физические параметры новорожденного.

Состояние доношенных новорожденных (рис.1) было оценено как удовлетворительное, или близкое к нему у 32 новорожденных – 82,05% [95% ДИ: 67-91], средней степени тяжести – у 7 детей (17,94% [95% ДИ: 9-32]. В отличие от доношенных, среди недоношенных новорожденных в удовлетворительном состоянии было всего 2 ребенка – 3,1% [95% ДИ: 1-10], средней степени тяжести – 32 новорожденных – 49,2% [95% ДИ: 37-61] и почти у половины недоношенных состояние было тяжелым – 47,6% [95% ДИ: 36-59].

Состояние Состояние доношенных недоношенных новорожденных новорожденных 3, 17, 47, 49, 82,1 удовлетворительное удовлетворительное средней степени тяжести средней степени тяжести тяжелое Рис.1 Состояние доношенных и недоношенных новорожденных (%) Тяжесть состояния в основном была обусловлена гестационным возрастом ребенка, наличием РДСН, острой дыхательной недостаточностью шунто-диффузного и смешанного генеза, неврологической симптоматикой.

В результате проведенных исследований метаболических параметров клеток иммунной системы в пуповинной крови у недоношенных новорожденных, по сравнению с доношенными новорожденными, выявлено значительное, статистически значимое снижение активности СДГ (p0,001) (табл. 1). Эти закономерности были установлены и другими исследователями, но изучение метаболических параметров лимфоцитов часто проводилось только у ребенка (Даурова И.Г., 1985;

Никулин Л.А. с соавт., 1999;

Желев В.А., 2005). Авторы расценивали обнаруженные изменения (снижение активности СДГ), как проявление испытываемой недоношенным ребенком гипоксии, плацентарными нарушениями и патологией родов, а также отражением сниженных возможностей иммунитета.

Нами была исследована активность СДГ в лимфоцитах крови не только у недоношенных детей, но и у их матерей (табл. 2). Это позволило установить, что и у матерей, родивших недоношенных детей, активность СДГ также была статистически значимо снижена по сравнению с матерями, родившими доношенных детей.

Таблица Активность ферментов в лимфоцитах и гранулоцитах пуповинной крови доношенных и недоношенных детей Статистическая Доношенные Недоношенные Исследуемый значимость новорожденные новорожденные параметр различий (n=39) (n=63) (p) СДГ 9,6 [6.07:13.37] 5,1 [3.07:8.73] p0, (гранул/кл) КФЛ 100 [82:132] 132 [68:226] p0, (ед.Kaplow) КФГ 158 [110:170] 178 [104:270] p=0, (ед. Kaplow) Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

Известно, что при нормально протекающей беременности формируется толерантность иммунной системы материнского организма, усиливается супрессия, изменяется баланс цитокинов (Черных Е.Р. с соавт., 2004).

Функциональная активность лимфоцитов при беременности угнетается. При недоношенной беременности нами было обнаружено статистически значимое (p=0,001) снижение активности СДГ в клетках иммунной системы у матерей, родивших недоношенных, по сравнению с матерями, родивших здоровых доношенных детей. Это согласуется с данными авторов, которые сообщают об обнаружении нарастающего угнетения клеточного иммунитета матери при патологии беременности, в том числе при привычном невынашивании беременности (Никитин А.И., Сельков С.А., 1992;

Сухих Г.Т., Ванько Л.В., 2003).

Таким образом, очень низкий уровень активности СДГ у матерей, родивших недоношенных детей, по сравнению с женщинами, родившими доношенных детей, может отражать значительное снижение у них процессов обеспечения энергией клеток иммунной системы, следовательно и снижение их функциональной активности, происходящей за счет нарастания супрессии, которая переходит допустимый уровень, обеспечивающий нормальное протекание беременности, когда происходит не отторжение, а вынашивание плода, являющегося наполовину "аллотрансплантатом".

Полученные данные позволяют предполагать, что низкие показатели активности сукцинатдегидрогеназы у недоношенных детей могут быть обусловлены нарушением иммунных взаимоотношений между матерью и плодом при недоношенной беременности, связанных с нарастанием процессов иммуносупрессии.

Таблица Активность ферментов в лимфоцитах и гранулоцитах венозной крови у матерей, родивших доношенных и недоношенных детей Родившие Родившие Статистическая Исследуемый доношенных недоношенных значимость параметр (n=39) (n=62) различий (p) СДГ 3,37 [2,33:6,03] 2,17 [1,43:3,47] p=0, (гранул/кл) КФЛ 124 [100:150] 166 [120:190] p0, (ед.Kaplow) КФГ 157 [136:180] 178 [140:220] p=0, (ед.Kaplow) Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

Так как при недоношенной беременности имеются нарушения иммунных взаимодействий между матерью и плодом (Брагина Л.Б., 2000;

Сухих Г.Т., Ванько Л.В., 2003;

Billington W.D., 1989), отражением этих нарушений, (в том числе регуляторных воздействий) могут быть выявленные нами изменения метаболических параметров клеток иммунной системы при рождении недоношенного ребенка.

Подтверждает это представление отсутствие статистически значимой разницы активности СДГ между группами недоношенных новорожденных с разным гестационным возрастом (табл.3).

Разница обнаружена нами только при сравнении каждой из групп недоношенных детей с доношенными детьми (рис.2), в то время, как показатели активности СДГ в разных группах недоношенных детей статистически значимо не отличались между собой.

Это может свидетельствовать о том, что активность ферментов в клетках иммунной системы у недоношенных детей определяется не столько сроком гестации, сколько связана с проблемой недоношенности, как таковой, которая, в свою очередь, может быть обусловлена нарушением иммунных взаимоотношений между матерью и плодом. Еще одно подтверждение этому представлению получено при анализе корреляционных связей активности ферментов клеток иммунной системы, между матерью и новорожденным. При доношенной беременности фиксируются прямые, достоверные корреляционные связи между матерью и новорожденным для всех изученных ферментов клеток иммунной системы (СДГ, КФЛ, КФГ). В то время как при недоношенной беременности имеется лишь одна прямая достоверная корреляционная связь между показателями матери и ребенка (для КФГ). Причем эта закономерность прослеживается во всех группах недоношенных новорожденных.

14 p0,001 p=0, 12 10 гран./кл.

гран./кл.

8 * * 9, 9, 5,1 5, СДГ СДГ Доношенные Недоношенные 1 группы Доношенные Недоношенные 2 группы p=0, Рис. 2 Активность СДГ в лимфоцитах крови в каждой группе недоношенных новорожденных по сравнению с гран./кл.

доношенными новорожденными 9, * 4, СДГ Доношенные Недоношенные 3 группы Полученные результаты, по-видимому, следует учитывать при анализе механизмов формирования особенностей метаболических параметров клеток иммунной системы у недоношенных детей.

Выявленное нами статистически значимое повышение КФ – гидролитического фермента лизосом, характеризующего катаболические процессы в клетке, в лимфоцитах (p0,001) и гранулоцитах (p=0,009) у недоношенных новорожденных, по сравнению с доношенными, свидетельствует о значительной активации лизосомального аппарата клеток крови у детей, рожденных раньше срока (табл.3). Особенно высокая активность кислой фосфатазы регистрировалась нами у детей третьей группы.

У матерей, родивших недоношенных новорожденных, нами также обнаружено статистически значимое повышение активности КФ в лимфоцитах (p0,001) и гранулоцитах (p=0,035) венозной крови по сравнению с показателями, выявленными у матерей, родивших доношенных детей (табл.2, табл.4). То есть, изменения метаболических параметров клеток иммунной системы при недоношенной беременности носят однонаправленный характер у недоношенных детей и у их матерей.

Таблица Активность ферментов в лимфоцитах и гранулоцитах пуповинной крови новорожденных с разным гестационным возрастом Обследованные СДГ КФЛ КФГ группы (гран./кл.) (ед.Kaplow) (ед.Kaplow) Доношенные (n=39) 9,6 [6,07:13,37] 100 [82:132] 158 [110:170] (контрольная группа) Недоношенные 1 5,16 [3,13:9,15] 125 [110:160] 165 [130:210] группа (n=36) pk0,001 pk0, Недоношенные 2 5,17 [2,71:7,23] 134 [92:184] 178 [162:232] группа (n=19) pk=0,001 pk=0,005 pk=0, Недоношенные 3 4,43 [3,07:6,83] 172 [124:202] 187 [170:208] группа (n=10) pk=0,002 pk0,001 pk=0, Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

pк – различия относительно контрольной группы Таблица Активность ферментов в лимфоцитах и гранулоцитах венозной крови матерей, родивших недоношенных детей с разным гестационным возрастом Обследованные КФЛ КФГ СДГ (гран/кл.) группы (ед.Kaplow) (ед.Kaplow) Родившие доношенных (n=39) 3,37 [2,33:6,03] 124 [100:150] 156 [134:180] (контрольная группа) Родившие 2,47 [1,57:3,9] 165 [112:190] недоношенных 1 174 [140:206] pk=0,017 pk=0, группа (n=36) Родившие 2,25 [1,57:3,2] 156 [128:180] 200 [130:222] недоношенных pk=0,016 pk=0,017 pk=0, группа (n=19) Родившие 1,38 [0,87:3,8] 189 [140:218] 188 [168:228] недоношенных pk=0,009 pk=0,002 pk=0, группа (n=10) Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

pк – различия относительно контрольной группы Считается, что сочетание низкой активности СДГ – наиболее информативного показателя состояния метаболизма и энергообеспечения клеток и высокой активности КФ – фермента, отражающего катаболические процессы в клетке и функциональную активность лизосом, является показателем неблагоприятного состояния метаболизма клеток иммунной системы, свидетельствующем о нарушении энергетического гомеостаза клеток и тканевого дыхания и нарушении функциональной активности клеток (Терновская В.А., 1977).

При анализе липидного спектра мембран лимфоцитов, в том числе содержания фракции свободного холестерина и общих фосфолипидов в мембранах лимфоцитов пуповинной крови у доношенных и недоношенных детей, нами выявлена тенденция к снижению общих фосфолипидов и повышению свободного холестерина в группе недоношенных детей (табл.5).

Таблица Содержание нейтральных липидов и фосфолипидов мембран лимфоцитов в пуповинной крови у доношенных и недоношенных детей Доношенные Недоношенные Липидный Ед.изм. новорожденные новорожденные спектр (n=19) (n=31) % от ОФЛ 38,48 [34,63:43,60] 34,36 [31,25:41,30] структурных липидов СХ 61,51 [56,39:65,36] 65,63 [58,70:68,75] Отн.ед. ОФЛ/СХ 0,62 [0,53:0,77] 0,52 [0,45:0,70] 1,62 [1,05:2,38] ЛФХ 1,05 [0.80:1,56] p=0, 9,20 [7,30:12,34] СМ 7,01 [6,24:8,10] p=0, % от ОФЛ ФХ 50,50 [47,40:52,79] 47,50 [44,60:51,00] ЛОФР 39,00 [33,80:43,16] 38,60 [27,65:42,10] 0,19 [0,15:0,25] Отн.ед. СМ/ФХ 0,14 [0,12:0,16] p=0, Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

В таблице не приводится содержание фракции неидентифицированных фосфолипидов.

Исследовав соотношение свободного холестерина и общих фосфолипидов (ОФЛ/СХ) в мембранах лимфоцитов у недоношенных новорожденных с разным гестационным возрастом, нами также обнаружены данные, свидетельствующие о повышении содержания свободного холестерина и снижении общих фосфолипидов по мере снижения срока гестации. Эти данные свидетельствуют о накоплении холестерина в мембране, нарушении ассиметричности расположения липидов, повышении жесткости мембран лимфоцитов у недоношенных детей по мере снижения срока гестации.

Стерическая форма холестерина такова, что она способствует возрастанию плотности упаковки фосфолипидов. Поэтому нарастание содержания холестерина повышает микровязкость (жесткость) мембраны (Клейменов Д.Я. с соавт., 2007).

Значительные изменения выявлены нами при анализе соотношения различных фракций общих фосфолипидов. У недоношенных новорожденных (в первой, второй и третьей группе) фиксируется увеличение содержания сфингомиелина (СМ) по сравнению с доношенными детьми, особенно высокие показатели выявлены у детей в третьей группе, они почти вдвое превышают значения полученные в группе доношенных новорожденных (p=0,004).

Выявленное нами статистически значимое повышение процентного содержания фракции сфингомиелина (СМ) в мембранах лимфоцитов пуповинной крови, как при сравнении между доношенными и недоношенными детьми, так и в группах недоношенных новорожденных по мере снижения гестационного возраста, указывает на повышение жесткости мембран лимфоцитов. СМ – самый насыщенный фосфолипид, особенностью структуры которого являются внутримолекулярные водородные связи, придающие мембранам значительную жесткость (Крепс Е.М., 1981;

Соловей Л.И., Манчук В.Т., 1996), что отражается на функциональной активности клеток. Эти данные совпадают с показателями индекса ОФЛ/СХ, приведенными выше, которые также свидетельствуют о нарастании жесткости мембран лимфоцитов пуповинной крови у недоношенных новорожденных.

Повышение содержания СМ оценивается авторами неоднозначно. С одной стороны СМ стабилизирует мембраны клеток, повышает их устойчивость. С другой - накопление СМ неизбежно ведет к повышению микровязкости, ригидности мембран, что отражается на функциональной активности клеток (Крепс Е.П., 1981). Известно, что в процессах миелинизации нервной системы принимают участие фосфолипиды (Юрков Ю.А. с соавт., 1980). В то же время, Е.М. Васильева с соавт. (2002) сообщают о том, что у детей с детским церебральным параличом и другими неврологическими нарушениями в мембранах эритроцитов обнаруживается повышенное содержание сфингомиелина. Имеются данные, свидетельствующие о том, что повышение продукции СМ играет важную роль в патогенезе различных заболеваний ЦНС (Новицкий В.В. с соавт., 1999;

Spragno G. C., Hickon-Bick D.

L., 1999). Так что, выявленное нами повышенное содержание СМ в мембранах клеток иммунной системы у недоношенных детей, в дальнейшем может сказываться на предрасположенности к функциональным нарушениям ЦНС.

При изучении в мембранах лимфоцитов пуповинной крови содержание фосфатидилхолина (ФХ) – основного фосфолипида мембранных структур, выявлено его снижение у недоношенных новорожденных, по сравнению с доношенными. Особенно значительное и статистически значимое снижение ФХ фиксируется у новорожденных третьей группы по сравнению с доношенными детьми (p=0,016). В то же время на фоне снижения ФХ отмечается повышение содержания ЛФХ в мембранах лимфоцитов пуповинной крови у недоношенных детей во всех группах, особенно у детей в третьей группе по сравнению с контрольной группой (p=0,004). ЛФХ – продукт реакции гидролитического расщепления ФХ, появление которого связано с активацией фосфолипазы А (Ушакова С.А., 1995;

Сальникова Е.Н., 2006;

Condrea E. 1980). Происходит значительное снижение индекса ФХ/ЛФХ по мере снижения гестационного возраста: у доношенных новорожденных – 43,8 [36,92:61,75], в первой группе недоношенных – 30,2 [24,15:45,51] (p=0,05), во второй группе недоношенных – 33,9 [24,42:45,54], в третьей – 21,1[9,37:23,19] (p=0,002).

Таким образом, у недоношенных новорожденных фиксируется более активное образование лизоформы фосфатидилхолина. Именно с этим может быть связано снижение содержания фосфатидилхолина у недоношенных детей.

Лизофосфатидилхолин обладает значительным литическим действием и является сильным детергентом;

накапливаясь в мембранах, изменяет фазовое состояние мембран, снижает стабильность клеток, приводя к фосфолипазному мембранолизу (Климов Е.Н. с соавт., 1999). Известно, что значительное накопление ЛФХ дестабилизирует мембраны, что приводит к их разрушению (фосфолипазный мембранолиз), так как при этом возможен переход липидного бислоя в монослой с нарушением проницаемости мембран для ионов натрия и калия, образование гидрофильных каналов, ведущих к разобщению свободного и окислительного фосфорилирования, а также к активизации лизосомальных ферментов (Лыкасов А.Г., 1991). Высокий уровень ЛФХ может способствовать нарастанию нестабильности мембран клеток. Возможно, отмеченное выше повышение содержания трудноокисляемой фракции фосфолипидов – сфингомиелина (СМ) у недоношенных новорожденных является компенсаторным, предотвращающим дестабилизацию мембран.

При изучении корреляционных связей между активностью ферментов клеток иммунной системы и структурными липидами мембран лимфоцитов выявлено повышение количества как положительных, так и отрицательных корреляций у недоношенных новорожденных, особенно в 3 группе. Такая особенность корреляционных взаимосвязей отражает высокую интенсивность и напряженность обменных процессов в клетке у недоношенных новорожденных по мере снижения гестационного возраста.

У матерей, родивших недоношенных детей, по сравнению с группой матерей, родивших доношенных детей, выявляются те же тенденции изменений липидного спектра мембран лимфоцитов, что и у новорожденных. Но разница между сравниваемыми группами матерей (в отличие от показателей у новорожденных детей) статистически не значима.

В неонатальном периоде патология органов дыхания является самой частой причиной смерти новорожденных детей (81,7% случаев по данным Демьяновой Т.Г., 2005). К наиболее тяжелой форме патологии органов дыхания у недоношенных новорожденных относится респираторный дистресс-синдром (РДСН) и его последствия (Рюмина И.И., 1996;

Шабалов Н.П., 2004;

Хижняк Д.Г. с соавт., 2007;

Кузьменко Г.Н. с соавт., 2009). Выживаемость новорожденных с РДСН сопровождается физической, интеллектуальной и эмоциональной неполноценностью, определяющей в дальнейшем повышение частоты инвалидизации и ухудшение качества жизни.

В настоящее время, концепция о том, что патогенетической основой респираторного дистресс-синдрома является структурно-функциональная незрелость системы сурфактанта, связанная со сроком гестационного возраста, остается ведущей. Некоторые авторы (Коцарев О.С., 1989;

Палилова Л.А., 2001) считают, что в течении и исходе РДСН большую роль играет повреждение сурфактанта, которое может быть связано с его инактивацией в перинатальный период. Полагают, что при РДСН большое значение имеет активация перекисного окисления липидов (ПОЛ) под воздействием токсических радикалов кислорода (Палилова Л.А., 2001). В то же время можно предполагать, что усиленный катаболизм липидов сурфактанта может быть связан не только с ПОЛ и гипоксией, но и с измененным функционированием лизосом. Известно, что именно лизосомы ответственны за катаболические процессы в клетках. Маркерным ферментом лизосом является кислая фосфатаза (Панин Л.Е., Маянская Н.Н., 1987;

Шаронов А.С., 2007).

При сравнении активности кислой фосфатазы у недоношенных с РДСН и у недоношенных без РДСН (табл.6), нами выявлено повышение активности КФ в лимфоцитах пуповинной крови у недоношенных детей с РДСН, причем разница статистически значима (p0,001). Изучение активности КФ в гранулоцитах пуповинной крови также выявило статистически значимое повышение КФГ у новорожденных с РДСН, в сравнении с новорожденными без РДСН (p=0,015).

Анализ активности кислой фосфатазы в лимфоцитах венозной крови матерей выявил повышение активности этого фермента у матерей, родивших детей с РДСН, по сравнению с матерями, родивших детей без РДСН, хотя разница не достигает статистической значимости. Разница активности кислой фосфатазы в гранулоцитах у матерей, родивших новорожденных с РДСН была статистически значима (p=0,025) по сравнению с активностью этого фермента у матерей, родивших детей без РДСН. По данным литературы выявление повышенного содержания лизосомального фермента в лимфоцитах и гранулоцитах является ранним и весьма чувствительным тестом, свидетельствующим об усилении катаболических процессов и патологических изменениях в клетках и тканях (Маянская Н.Н. с соавт., 2001).

Таблица Активность ферментов в клетках иммунной системы пуповинной крови недоношенных детей без РДСН и недоношенных детей с РДСН Статистическая Исследуемый Недоношенные Недоношенные с значимость параметр без РДСН РДСН различий (p) СДГ 5,10 [3,20:9,13] 5,10 [2,87:7,13] (гранул/кл.) (n=49) (n=15) КФЛ 102 [78:126] 176 [124:198] p0, (ед.Kaplow) (n=47) (n=15) КФГ 160 [124:212] 194 [172:236] p=0, (ед.Kaplow) (n=47) (n=15) Примечание: Сравнение показателей осуществлялось при помощи вычисления медианы (Me) с указанием интерквартильного размаха (C25–C75) и оценивалось по критерию Манна-Уитни.

При сравнении активности фермента СДГ лимфоцитов пуповинной крови у недоношенных новорожденных с РДСН не выявлено статистической разницы в сравнении с активностью у новорожденных без РДСН (табл.6). У матерей, родивших недоношенных с РДСН, прослеживается та же тенденция, что и у новорожденных.

Считается, что важнейшей причиной развития РДСН являются нарушения в системе сурфактанта. Значительная роль в организации и функционировании мембран, отводится липидному бислою, основу которого составляют фосфолипиды (Мусил Я., 1985;

Killian J.A. еt al., 2001;

Pomorski T., еt al., 2001). При исследовании липидного спектра мембран клеток иммунной системы в пуповинной крови у недоношенных с РДСН по сравнению с недоношенными без РДСН достоверные отличия выявлены для ФХ и ЛФХ (рис.3). Нами зарегистрировано статистически значимое снижение ФХ в мембранах лимфоцитов у недоношенных детей с РДСН (p=0,043), по сравнению с группой новорожденных без РДСН. ФХ составляет основу липидных компонентов мембран в организме, в том числе и сурфактанта (Таганович А.Д., 1992;

Wright J. R., Hawgood S., 1989;

Jobe A., 1992). В то же время содержание ЛФХ у недоношенных с РДСН было почти вдвое выше, чем у недоношенных без РДСН (p=0,026). Статистически значимо снижается индекс ФХ/ЛФХ у недоношенных новорожденных с РДСН, в сравнении с недоношенными без РДСН. Эти данные свидетельствуют об усилении процессов деполимеризации ФХ в мембранах и накоплению ЛФХ – продукта гидролиза фосфолипидов, прежде всего ФХ, поскольку известно, что ЛФХ является лизоформой ФХ (Клейменов Д.Я. с соавт., 2007).

p=0,043 p=0, * * 48, 41, 2, % % 1, 0 ФХ ЛФХ Рис.3 Содержание ФХ и ЛФХ в мембране лимфоцитах пуповинной крови у недоношенных новорожденных без РДСН и с РДСН (показатель медианы) Недоношенные Недоношенные без РДСН с РДСН Мембраны в организме построены по единому принципу. Следовательно, можно предполагать, что при РДСН, также и в сурфактанте, строение которого соответствует мембранам клеток, происходят те же процессы, которые выявлены нами в лимфоцитах, а именно – деполимеризация ФХ, что может приводить к деструкции сурфактанта, поскольку известно, что на долю ФХ приходится 66% среди всех структурных компонентов, составляющих сурфактант. Если учесть, что ФХ основной структурный компонент сурфактанта, то можно считать, что нарушение строения сурфактанта, способствующее развитию РДСН, в значительной мере связано с деструкцией сурфактанта, а не только с незрелостью.

Повреждение сурфактанта при РДСН у недоношенных новорожденных связывают с гипоксией, которая приводит к активации процессов ПОЛ и повышению активности фосфолипаз (Палилова Л.А., 2001). Однако S.T. Horwis с соавт. (1964), изучая группу новорожденных, перенесших в перинатальном периоде асфиксию (тугое обвитие пуповины вокруг шеи), не обнаружили учащения РДСН и подвергли сомнению его связь с гипоксией. J. S. Greenspan в 1988г. обратил внимание на парадоксальный феномен: при неосложненной беременности легкие созревали примерно к 35 неделе антенатального развития (в 88% случаев), тогда как у 65% детей родившихся на 26 неделе легкие сразу после рождения функционировали нормально. Таким образом, имеются исследования не подтверждающие высокую значимость гипоксии в развитии РДСН у новорожденных (Валюлис А.Р., 1994).

В 1993 Lachman B., обобщая многолетний опыт применения сурфактанта, резюмировал, что смертность от РДСН в течение 20 лет не изменилась и составила 50-60%. Усилия по замене сурфактанта, снижению активности ПОЛ, повышению антиоксидантной защиты, нормализации гемостаза и т.д. не привели к ожидаемому снижению РДСН и смертности новорожденных.

По-видимому, имеет смысл обратить внимание также и на другие факторы, которые могут иметь значение в патогенезе развития респираторного дистресс-синдрома у новорожденных, в том числе, выявленное нами повышенное функциональное состояние лизосом, (в частности активация маркерного фермента – КФ), в значительной мере определяющих деполимеризацию макромолекул, к которым относится и фосфатидилхолин, составляющий основу фосфолипидной фракции сурфактанта.

Проведенные нами исследования позволяют считать целесообразным к проводимому комплексному лечению РДСН, подключать медикаментозные средства, которые, как сообщается в литературе (Шаронов А.С., 2007), обладают способностью стабилизировать мембраны лизосом и тем самым снижать их функциональную активность.

Подводя итог проведенным исследованиям, можно заключить, что снижение активности СДГ у недоношенных новорожденных может быть связано не только с гипоксией, как это представлялось ранее, но может отражать снижение функциональной активности клеток иммунной системы, обусловленное нарастающей супрессией иммунной системы при недоношенности.

Кроме того, выявленные изменения спектра липидов мембран клеток (повышение содержания лизоформы фосфатидилхолина и снижение содержания фосфатидилхолина, являющегося основой не только мембран клеток, но и мембраноподобной структуры сурфактанта), свидетельствуют в пользу представлений о значительном нарастании процессов деполимеризации мембран и мембраноподобных структур, в том числе и сурфактанта, у недоношенных новорожденных, особенно при РДСН.

При РДСН обнаружена высокая активность маркерного фермента лизосом – кислой фосфатазы у недоношенных новорожденных, свидетельствующая о повышении функциональной активности лизосом, ферменты которых осуществляют деполимеризацию макромолекул, в том числе фосфатидилхолина. Полученные данные могут способствовать формированию дополнительных представлений о роли лизосом в развитии РДСН у недоношенных новорожденных.

ВЫВОДЫ 1. У недоношенных новорожденных выявлено статистически значимое снижение активности СДГ в лимфоцитах и повышение активности КФ в лимфоцитах и гранулоцитах пуповинной крови по сравнению с доношенными новорожденными. Подобное сочетание изменений показателей энергетических и катаболических процессов в клетке свидетельствует о неблагоприятном состоянии энзиматической активности клеток иммунной системы крови у недоношенных детей.

2. У матерей, родивших недоношенных детей, наблюдались те же закономерности изменений метаболических параметров клеток иммунной системы, которые были выявлены у недоношенных детей: статистически значимое снижение активности СДГ в лимфоцитах и повышение активности КФ в лимфоцитах и гранулоцитах венозной крови по сравнению с матерями, родивших доношенных детей, что может быть обусловлено нарастанием супрессии иммунной системы при недоношенности.

3. Не обнаружено статистически значимой разницы активности ферментов СДГ, КФЛ и КФГ в клетках пуповинной крови при сравнении групп недоношенных новорожденных с разным гестационным возрастом между собой. Это свидетельствует о том, что активность ферментов в клетках иммунной системы у недоношенных детей не зависит столько от срока гестации, сколько связана с развитием процессов, приводящих к недоношенности.

4. Соотношение структурных липидов мембран лимфоцитов пуповинной крови у недоношенных детей отличается от показателей у доношенных детей статистически значимым повышением содержания СМ и ЛФХ и снижением содержания ФХ по мере снижения гестационного возраста, особенно у недоношенных в третьей группе.

5. У матерей, родивших недоношенных детей, не обнаружено статистически значимых отличий в соотношении структурных компонентов мембран лимфоцитов по сравнению с матерями, родивших доношенных детей.

6. Выявленное в лимфоцитах крови у новорожденных с РДСН статистически значимое повышение активности маркерного фермента лизосом – КФ и снижение содержания ФХ – основного структурного компонента мембран клеток и сурфактанта, являющегося субстратом для лизосомальных ферментов, свидетельствует о вовлечении лизосом в патогенетические процессы развития респираторного дистресс-синдрома новорожденных.

7. Выявлено нарастание количества корреляционных связей между активностью ферментов клеток иммунной системы и структурными липидами мембран лимфоцитов по мере снижения гестационного возраста у недоношенных новорожденных.

Практические рекомендации 1.Рекомендуется контроль за снижением активности СДГ в лимфоцитах крови недоношенных новорожденных, которое в дальнейшем может определять снижение функциональных возможностей клеток иммунной системы.

2.При диагностике степени тяжести и при прогнозе развития РДСН рекомендуется определять активность маркерного фермента лизосом - КФ в лимфоцитах пуповинной крови у недоношенных новорожденных.

3.При проведении лечебных мероприятий при РДСН рекомендуется обратить внимание на целенаправленное использование препаратов, способствующих снижению функциональной активности лизосом.

Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Фефелова, В.В. Метаболизм иммунокомпетентных клеток при перинатальном поражении ЦНС в свете нейроиммунных взаимодействий /В.В. Фефелова, Т.В. Манчук, Н.В. Лисихина //Метаболические механизмы иммунореактивности: матер. всерос. науч.-практ. конф.–Красноярск, 2004.– С. 102-103.

2. Изменение активности ферментов иммунокомпетентных клеток у матерей и новорожденных детей при преждевременных родах /В.В. Фефелова, Н.В.

Лисихина, Л.А. Нагирная, С.Ю. Скобелева //Дни иммунологии в Сибири:

матер. всерос. науч.-практ. конф., посвящ. 15-му юбилею Краснояр. Краев.

Центра по профилактике и борьбе со СПИДОМ и др. инфекционными заболеваниями.– Красноярск, 2005.–С.116-117.

3. Течение беременности и активность сукцинатдегидрогеназы в иммунокомпетентных клетках у недоношенных детей и их матерей /Н.В.

Лисихина, В.В. Фефелова, Л.А. Нагирная, С.Ю. Скобелева //Вопросы сохранения и развития здоровья населения севера и Сибири: матер. итог.

науч.-практ. конф. с междунар. участием. – Красноярск, 2005. – С.308-309.

4. Активность кислой фосфатазы в лимфоцитах и гранулоцитах пуповинной крови у недоношенных детей /Н.В. Лисихина, В.В. Фефелова, Л.А.

Нагирная, О.И. Ковалевская //Здоровье и образование в XXI веке: матер.

VII междунар. науч.-практ. конф.– М., 2006.–С.304-305.

5. Лисихина, Н.В. Уровень иммуноглобулинов в пуповинной крови у недоношенных новорожденных с разной степенью недоношенности /Н.В.

Лисихина // Вопросы сохранения и развития здоровья населения севера и Сибири: матер. итог. науч.-практ. конф.– Красноярск, 2007.–С.286-287.

6. Активность ферментов лимфоцитов пуповинной крови недоношенных детей с разным гестационным возрастом /Н.В. Лисихина, В.В. Фефелова, Л.А. Нагирная, С.Ю. Скобелева // Вопросы сохранения и развития здоровья населения севера и Сибири: матер. итог. науч.-практ. конф.– Красноярск, 2007. – С.107-109.

7. Сравнительный анализ метаболических параметров иммунокомпетентных клеток крови у недоношенных новорожденных и у их матерей / Н.В.

Лисихина, В.В. Фефелова, В.Т. Манчук и др. //Сиб. мед. журн.–2007.–№5.– С.59-61.

8. Лисихина, Н.В. Липидный спектр мембран лимфоцитов у недоношенных новорожденных в зависимости от степени недоношенности /Н.В.

Лисихина, В.В. Фефелова //Актуальные вопросы охраны здоровья населения регионов Сибири: матер. 6-й науч.-практ. конф. молодых ученых.– Красноярск, 2008.–С.64-66.

9. Лисихина, Н.В. Нейтральные липиды и фракции фосфолипидов лимфоцитов крови у недоношенных детей /Н.В. Лисихина, В.В. Фефелова //Актуальные проблемы медицины: матер. XI межрегион. науч.-практ.

конф.– Абакан, 2008.–С.168.

10. Снижение уровня метаболизма клеток иммунной системы у недоношенных детей как проявление иммунных нарушений в системе мать-плацента-плод /Н.В. Лисихина, В.В. Фефелова Л.А. Нагирная и др.

//Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии: сб. тр. X междунар. конгр.– Казань, 2009.–С.291.

11. Лисихина, Н.В. Ферменты лизосом клеток иммунной системы при преждевременных родах /Н.В. Лисихина, В.В. Фефелова //Дни иммунологии в Сибири: матер. всерос. науч.-практ. конф.– Красноярск, 2010.–С.128-129.

Список сокращений ДИ – доверительный интервал КФГ – кислая фосфатаза гранулоцитов КФЛ – кислая фосфатаза лимфоцитов ЛОФР – легкоокисляемые фракции липидов ЛФХ – лизофосфатидилхолин ОФЛ – общие фосфолипиды РДСН – респираторный дистресс-синдром новорожденных СДГ – сукцинатдегидрогеназа СМ – сфингомиелин СХ – свободный холестерин ФИ - фосфатидилинозитол ФС - фосфатидилсерин ФХ – фосфатидилхолин ФЭА - фосфатидилэтаноламин

 

Похожие работы:


 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.