авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Медицинский университет удк 616. 72 – 002 – 002 – 07: [616.15 – 097: 577. 15] волкова маргарита васильевна особенности иммунопатогенеза и диагностики ранних артритов с учетом ферментативной активности

УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ «БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» УДК 616. 72 – 002 – 002 – 07: [616.15 – 097: 577. 15] ВОЛКОВА МАРГАРИТА ВАСИЛЬЕВНА ОСОБЕННОСТИ ИММУНОПАТОГЕНЕЗА И ДИАГНОСТИКИ РАННИХ АРТРИТОВ С УЧЕТОМ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ И ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.01.22 – ревматология МИНСК, 2012 Работа выполнена в УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет» Научный руководитель: Кундер Елена Владимировна, доктор медицинских наук, доцент, профессор кафедры кардиологии и ревматологии ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования» Официальные оппоненты: Руденко Эмма Владимировна, доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник НИЛ ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования» Мартусевич Наталья Альбертовна, кандидат медицинских наук, доцент, доцент 3-й кафедры внутренних болезней УО «Белорусский государственный медицинский университет» Оппонирующая организация: УО «Гродненский государственный медицинский университет» Защита диссертации состоится 31 января 2013 года в 10.00 часов на заседании совета по защите диссертаций Д 03.18.09 в УО «Белорусский государственный медицинский университет» по адресу: 220116, г. Минск, проспект Дзержинского, 83, e-mail: rector@bsmu.by, тел.: 272-55-98.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке УО «Белорусский государственный медицинский университет» Автореферат разослан «28» декабря 2012 года Ученый секретарь совета по защите диссертаций, кандидат медицинских наук Т.В. Статкевич ВВЕДЕНИЕ Ранние стадии воспалительных заболеваний суставов являются значимой общемедицинской и социальной проблемой во всем мире (J.M.

Hazes et al., 2011) и представляют собой тот период болезни, когда адекватная терапия может изменить характер течения заболевания и повлиять на его исходы (Е.Л. Насонов, 2002). Особенно важное значение имеет ранняя диагностика ревматоидного артрита, парадигма которого в последнее десятилетие претерпела существенные изменения (J.S. Smolen et al., 2005).

Ранняя диагностика ревматоидного артрита является приоритетной задачей современной ревматологии (Е.Л. Насонов, 2004). В многочисленных исследованиях подчеркивается необходимость ранней агрессивной терапии ревматоидного артрита и преимущества данной стратегии (J. Firth, 2011;

J.

Wollenhaupt et al., 2012).

Верифицированный на поздних стадиях ревматоидный артрит характеризуется, как правило, высокой персистирующей активностью воспалительного процесса, быстрой рентгенологической прогрессией, приводит к нетрудоспособности пациентов, сокращению продолжительности жизни и снижению ее качества (V.P. Nell, 2004), что способствует накоплению патологии в популяции и негативно влияет на демографическую ситуацию.

Ранняя диагностика артритов предполагает дифференциальный диагноз суставного синдрома, который зачастую затруднен в дебюте заболевания (D.P. Symmons et al., 2003). Большое значение имеет дифференциация между ревматоидным артритом и острым реактивным артритом, т.к.

терапевтическая стратегия данных заболеваний является принципиально разной (J. Braun et al., 2000).

Следование современной стратегии в ревматологии «treat to target» (лечение до достижения ремиссии) затрудняется также существованием персистирующего артрита при отсутствии клинической картины какого-либо определенного заболевания, когда выставляется диагноз недифференцированный артрит. Встречаемость недифференцированного артрита в когортах ранних артритов варьирует от 23% до 81% (I. Olivieri et al, 2011). Учитывая, что частота трансформации недифференцированного артрита в ревматоидный артрит составляет от 13% до 54% (J. Van Aken et al., 2006), актуальным является поиск маркеров данной трансформации, а также способов прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит.

Значительный вклад в диагностику ранних артритов вносит лабораторное обследование с определением ревматоидного фактора и антител к циклическим цитруллинированным пептидам (J. Steiner et al., 2002). Однако ревматоидный фактор является недостаточно специфическим показателем для ранних стадий ревматоидного артрита (V.P.K. Nell et al., 2005), а антитела к циклическим цитруллинированным пептидам характерны лишь для 41-68% пациентов c ранним ревматоидным артритом (K. Raza et al., 2005;

M.M. Nielen et al., 2005).

Продолжается изучение особенностей иммунопатогенеза ранних артритов, поиск новых способов их дифференциальной диагностики. В этой связи большой интерес представляют собой ферментативные свойства сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов (абзимов).

Ферментативная сывороточная активность изучается при системной красной волчанке (F. Martinez-Valle, 2009), ревматоидном артрите (M. Pszti et al., 2009), спондилоартритах (Е.В. Кундер с соавт., 2010), тиреоидной патологии (M. Dittmar et al., 2009), онкологических болезнях (A. Benitez et al., 2011), кардиоваскулярных заболеваниях (Y. Kawai et al., 2004;

T. Yasuda, 2009;

K. Fujibayashi et al., 2012) и др.

В последнее десятилетие значительно увеличилось количество исследований, посвященных роли каталитических антител при ревматологических заболеваниях, а сами абзимы названы «новым молекулярным инструментом в ревматологической практике» (А.Н. Хитров с соавт., 2006). Различные виды абзимной активности оцениваются при системной красной волчанке (Y. Wang et al., 2006), ревматоидном артрите (И.И. Генералов с соавт., 2000;



A.S. Kamalanathan et al., 2011), спондилоартритах (Е.В. Кундер с соавт., 2010) и т.д.

До настоящего времени при ранних артритах ферментативные свойства сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов не изучались.

Таким образом, верификация диагноза на ранних стадиях суставного синдрома дает возможность управления патологическим процессом. Активно изучаются особенности иммунопатогенеза ранних стадий суставной патологии и проводится поиск новых способов дифференциальной диагностики ранних артритов и способов прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Связь работы с крупными научными программами и темами Исследования выполнялись в рамках ГНТП «Лечебные и диагностические технологии», подпрограмма «Терапия», тема 01. «Разработка критериев диагностики серонегативных артритов с использованием методологии исследования абзимной активности иммуноглобулинов, про- и противовоспалительного потенциала сыворотки крови и синовиальной жидкости, техники ультразвуковой артроскопии» (договор № 15/01.12-06 от 05.06.2006 г., № госрегистрации 20063571 от 16.11.2006 г.).

С 2012 г. исследования выполняются в рамках проекта БРФФИ Наука М «Патогенетическая и диагностическая роль каталитической активности антител и ферментативной активности сыворотки крови при ранних артритах» (договор № М12М-068, № госрегистрации 20122426 от 24.07. г.).

Цель исследования Разработать новые способы дифференциальной диагностики ранних артритов и прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит с учетом ферментативных свойств сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов.

Задачи исследования 1. Исследовать при ранних артритах ферментативную активность сыворотки крови деполимеризующего действия (ДНКазную и гиалуронидазную).

2. Выявить при ранних артритах ферментативную активность поликлональных иммуноглобулинов (деполимеризующую (ДНКазную, протеолитическую – БАПНА-амидазную) и оксидоредуктазную (каталазную и супероксиддисмутазную)).

3. Провести сравнительный анализ ферментативной активности сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов при ранних артритах (раннем ревматоидном артрите, остром реактивном артрите и недифференцированном артрите).

4. Установить особенности иммунопатогенеза ранних артритов с учетом ферментативных свойств сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов на основе взаимосвязей между данными видами активности и клиническими признаками ранних артритов, показателями активности воспаления, лабораторными данными, а также цитотоксического эффекта иммуноглобулинов, обладающих ДНКазной активностью.

5. Разработать новые способы дифференциальной диагностики ранних артритов (раннего ревматоидного артрита, острого реактивного артрита и недифференцированного артрита) на основе ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, а также ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов.

6. Разработать новый способ прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит с учетом ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности.

Объект исследования Пациенты с ранним ревматоидным артритом, острым реактивным артритом, недифференцированным артритом, здоровые лица.

Предмет исследования Ферментативная активность сыворотки крови (ДНКазная, гиалуронидазная), ферментативная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G (ДНКазная, протеолитическая (БАПНА амидазная), каталазная и супероксиддисмутазная).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту 1. При ранних артритах ферментативная и (ДНКазная гиалуронидазная) активность сыворотки крови, деполимеризующая протеолитическая) и оксидоредуктазная активность (ДНКазная, поликлональных иммуноглобулинов повышены по сравнению со здоровыми лицами. Наибольшие уровни ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови, ДНКазной активности иммуноглобулинов характерны для раннего ревматоидного артрита по сравнению с острым реактивным и недифференцированным артритами.

2. Особенности иммунопатогенеза ранних артритов связаны с провоспалительными свойствами деполимеризующей ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной и протеолитической (БАПНА-амидазной) активности поликлональных иммуноглобулинов, а также протективным характером оксидоредуктазной (каталазной и супероксиддисмутазной) активности поликлональных иммуноглобулинов.

3. Разработанные способы дифференциальной диагностики ранних артритов с учетом ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови, ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов позволяют улучшить качество диагностического процесса при ранних артритах.

4. Использование модели на основе определения антител к циклическим цитруллинированным пептидам, ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности позволяет прогнозировать исход недифференцированного артрита в ревматоидный артрит.

Личный вклад соискателя Соискателем совместно с научным руководителем определены цель и задачи исследования, осуществлен выбор методов и объема материала.

Автором лично проведено клиническое обследование и набор групп пациентов и здоровых лиц. Соискатель участвовала в разработке и модификации методов очистки препаратов поликлональных иммуноглобулинов, реакций сывороточной и абзимной активностей. Автором самостоятельно выполнено определение ферментативной активности сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов, уровней антител к циклическим цитруллинированным пептидам, ревматоидного фактора.

Самостоятельно составлена компьютерная база данных, включающая клинические данные, показатели лабораторного и инструментального обследования, результаты собственных исследований. Автором выполнена статистическая обработка результатов, сформулированы выводы диссертации и положения, выносимые на защиту. Полученные результаты внедрены в практику здравоохранения.

Часть исследований выполнялось автором самостоятельно на базе факультета естественных наук Лаузицкого университета прикладных наук, г.

Сенфтенберг, Германия.

Автор выражает благодарность сотрудникам компаний GA Generic Assays GmbH/Medipan GMBH, Германия за предоставление наборов для иммуноферментного анализа;

ОДО «НИКП Ресан», Беларусь за помощь в получении конъюгатов каталитических антител с флюорохромом;

лаборатории ферментов репарации Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАМН, Российская Федерация за дополнительные доказательства ферментативной активности иммуноглобулинов в ходе совместных исследований.

Апробация результатов диссертации Материалы диссертации представлены на научно-практических конференциях студентов и молодых ученых и научных сессиях Витебского государственного медицинского университета (Витебск, 2005, 2006, 2007, 2008, 2011, 2012), на X республиканской научной конференции «НИРС-2005» (Минск, 2005), конференции, посвященной памяти профессора В.Ч.

Бржеского (Гродно, 2008), на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 65-летию СНО ЯГМА (Ярославль, 2011), на II Всероссийском конгрессе ревматологов (Ярославль, 2011), на VII Всероссийской конференции ревматологов России (Владимир, 2012), на XII съезде терапевтов Республики Беларусь (Гродно, 2012), на международных конгрессах Европейской противоревматической лиги (EULAR) (Барселона, 2007;

Лондон, 2011;

Берлин, 2012), на международном ревматологическом конгрессе Exсellence in Rheumatology (Мадрид, 2012).

Опубликованность результатов диссертации Основные положения диссертации опубликованы в 41 научной работе, из них 12 статей в рецензируемых журналах (2 в моноавторстве), соответствующих пункту 18 Положения о присуждении ученых степеней и присвоении ученых званий в Республике Беларусь, общим объемом 6, авторских листа (1,3 авторских листа в единоличном авторстве – 19%), статьей в сборниках научных трудов, 11 тезисов докладов и выступлений на конференциях. Утверждена инструкция по применению. Получено уведомление о положительном результате предварительной экспертизы и установленной дате подачи заявки на выдачу патента Республики Беларусь на изобретение.

Структура и объем диссертации Диссертация состоит из оглавления, перечня условных обозначений и сокращений, введения, общей характеристики работы, главы, посвященной обзору литературы, основной части, состоящей из главы, посвященной материалам и методам исследования и 2 глав, содержащих результаты собственных исследований, заключения, библиографического списка и приложений.

Полный объем диссертации составляет 156 страниц машинописи, из них объем, занимаемый иллюстрациями, составляет 15 страниц, таблицами – 10 страниц, приложениями – 25 страниц. Работа иллюстрирована таблицами, 29 рисунками и 7 приложениями. В работе использовано источника литературы (в том числе 41 собственная публикация), из которых 243 – на английском языке, 89 – русскоязычные.





ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования В исследовании приняло участие 195 человек (155 пациентов с ранним артритом (64 пациента с ранним ревматоидным артритом (рРА), 55 – с острым реактивным артритом (оРеА) и 36 – с недифференцированным артритом (НА)) и 40 практически здоровых лиц (контрольная группа) – доноры Витебской областной станции переливания крови). В исследуемую группу были включены пациенты, впервые госпитализированные в ревматологическое отделение УЗ «Витебская областная клиническая больница» в период с июня 2006 года по апрель 2012 года, а также пациенты, впервые обратившиеся на консультацию к ревматологу в УЗ «Витебский областной клинический диагностический центр» в период с ноября 2010 года по декабрь 2011 года.

Исследование является когортным, сплошным, поперечным с проспективным наблюдением и ретроспективным анализом.

Диагноз ревматоидный артрит (РА) устанавливался согласно критериям ACR (American College of Rheumatology) 1987 года (F.C. Arnett et al., 1988), а также EULAR (European League Against Rheumatism)/ACR 2010 года (D.

Aletaha et al., 2010). Диагноз реактивный артрит устанавливался с использованием предварительных Международных критериев (4th International Workshop on Reactive Arthritis, Berlin 1999) (J. Braun et al., 2000).

Диагноз НА выставлялся при несоответствии клинических, лабораторных и инструментальных данных критериям какого-либо определенного заболевания (J. Van Aken et al., 2006).

В группе пациентов с рРА мужчин было 15 (23,44%), женщин – (76,56%), средний возраст составил 46,84±8,55 года (95%ДИ: 44,70-48,97). В группе пациентов с оРеА обследовано 34 мужчины (61,82%) и 21 женщина (38,18%), средний возраст равнялся 37,87±9,63 года (95%ДИ: 35,26-40,47). В группе пациентов с НА мужчин было 19 (52,78%), женщин – 17 (47,22%), средний возраст составил 39,08±10,45 года (95%ДИ: 35,54-42,62). Группа здоровых лиц состояла из равного количества мужчин и женщин – по человек (50%), их средний возраст равнялся 41,15±11,66 (95%ДИ: 37,52 44,88).

В группе пациентов с рРА у 59 пациентов (92,19%) был выявлен полиартрит, у 5 (7,81%) – олигоартрит. Активность 1 степени имели пациентов (20,31%), 2 степени – 14 (21,88%), 3 степени – 37 (57,81%).

Рентгенологическая 1 стадия заболевания была установлена у 26 лиц (40,63%), 2 стадия – у 30 (46,88%), 3 стадия – у 8 (12,49%). Функциональный класс 1 определялся у 56 пациентов (87,51%), класс 2 – у 8 (12,49%). Средняя величина индекса DAS28 составила 5,74±1,56 (95%ДИ: 5,35-6,13), DAS4 – 4,29±1,25 (95%ДИ: 3,98-4,61), SDAI – 41,42±17,09 (95%ДИ: 37,15-45,69), CDAI – 39,92±16,31 (95%ДИ: 35,84-43,99). Средняя длительность суставного синдрома составила 4,23±2,21 месяца (95% ДИ: 3,68-4,78). У 7 (10,94%) пациентов с рРА выявлена НПВП-гастропатия, у 20 (31,25%) – артериальная гипертензия, у 2 (3,13%) ИБС, стенокардия напряжения 1-го функционального класса.

В группе пациентов с оРеА у 19 пациентов (34,55%) установлен полиартрит, у 29 (52,73%) – олигоартрит, у 7 (12,72%) – моноартрит.

Воспалительная боль в спине выявлена у 21 пациента (38,18%). Активность степени установлена у 24 пациентов (43,64%), 2 степени – у 14 (25,45%), степени – у 17 (30,91%). В 33 случаях (60,00%) выявлена рентгенологическая стадия артрита, в 20 случаях (36,36%) – 2 стадия, в (3,64%) – 3 стадия. Функциональная недостаточность 1 степени установлена у 51 пациента (92,73%), 2 степени – у 4 (7,27%). Средняя величина DAS составила 3,94±0,99 (95%ДИ: 3,67-4,21), DAS4 – 2,69±0,80 (95%ДИ: 2,47 2,90), SDAI – 12,00 (Min 2,00 Max 43,00) (95% ДИ: 11,00-14,08), CDAI – 13, (Min 2,00 Max 43,00) (95% ДИ: 11,00-14,52). Средняя длительность суставного синдрома в группе оРеА составила 3,15±2,11 месяца (95% ДИ:

2,57-3,72). У 45 (81,82%) пациентов диагностирована изолированная хламидийная инфекция, у 7 (12,72%) – хламидийная инфекция и трихомониаз, у 3 (5,45%) пациентов – хламидийная, уреаплазменная инфекция и трихомониаз. У 7 (10,94%) пациентов с оРеА диагностирована НПВП-гастропатия, 3 пациента (5,45%) имели артериальную гипертензию.

В группе пациентов с НА полиартрит наблюдался у 13 пациентов (36,11%), олигоартрит – у 16 (44,44%), моноартрит – у 7 (19,45%). Активность 1 степени установлена в 12 случаях (33,33%), 2 степени – в 18 (50%), степени – в 6 случаях (16,67%). Функциональная недостаточность 1 степени присутствовала у 33 пациентов (91,67%), 2 степени – у 3 (8,33%). Средняя величина индекса DAS28 составила 4,51±1,27 (95%ДИ: 4,08-4,94), DAS4 – 3,11±0,88 (95%ДИ: 2,81-3,41), SDAI – 21,00 (Min 6,23 Max 62,12) (95% ДИ:

12,46-23,03), CDAI – 21,00 (Min 6,00 Max 62,00) (95% ДИ: 14,85-24,29).

Средняя длительность суставного синдрома составила 3,32±2,14 месяца (95% ДИ: 2,59-4,04). У 5 пациентов (13,89%) диагностирована НПВП-гастропатия, у 5 (13,89%) - артериальная гипертензия. Проводили динамическое наблюдение за группой пациентов с НА в течение 12 месяцев с оценкой исходов заболевания.

Все пациенты принимали нестероидные противовоспалительные препараты на догоспитальном этапе.

Материалом для исследования послужили сыворотка крови и поликлональные IgG 1, 2 и 4 подклассов, выделенные из сыворотки крови комбинированным риванол-аффинно-хроматографическим методом (М.Р.

Конорев с соавт., 1999). Контроль чистоты IgG проводили с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (Л.А. Остерман, 1981).

Дополнительный контроль чистоты IgG был проведен в Институте химической и фундаментальной медицины СО РАН (г. Новосибирск) в ходе совместных исследований. Результаты электрофорезов подтвердили чистоту полученных препаратов иммуноглобулинов.

ДНКазную и гиалуронидазную активность сыворотки, ДНКазную активность IgG определяли методом, основанном на образовании и осаждении сгустка субстрата 2-этокси-6,9-диаминоакридина лактатом (риванолом) (К.С. Азаренок с соавт., 1994;

1996). Постановка реакции БАПНА-амидазной, каталазной и супероксиддисмутазной (СОД) активности осуществлялась по модифицированным нами методикам (В.К. Окулич с соавт., 2002;

И.И. Генералов с соавт., 2004, 2005). Активность иммуноглобулинов оценивалась на 1 мг образца (удельная активность IgG).

ДНКазная и гиалуронидазная активность выражалась в баллах, каталазная, БАПНА-амидазная и СОД – в относительных единицах активности (ОЕА).

Определение антител к циклическим цитруллинированным пептидам (АЦЦП) проводили методом иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов «Anti-CCP antibodies» (Axis-Shield, Великобритания), «Medizym® anti-CCP Ref» (GA Generic Assays GmbH/Medipan GMBH, Германия). Определение IgG и IgM ревматоидного фактора (РФ) осуществляли с использованием тест-систем GA Generic Assays GmbH/Medipan GMBH, Германия.

Статистический анализ результатов исследования Статистический анализ был выполнен с использованием аналитического пакета Statistica 5.5 №AXXR010A934027FAN3 и программы MedCalc Statistics 10.2.00. Для описания центральных тенденций и рассеяния признаков при нормальном распределении использовали среднее значение (M) и среднее квадратическое отклонение (s) в виде M±s, в случае распределения отличного от нормального – медиану (Me), размах (Min – Max) и межквартильный интервал (25%...75%). Для средних и медиан рассчитывали 95% доверительные интервалы (ДИ). При сравнении количественных признаков, имеющих нормальное распределение, использовали Стьюдента, не имеющих нормального t-критерий распределения – ранговый анализ вариаций по Краскелу-Уоллису и U-тест Манна-Уитни для парного сравнения групп. Для анализа значимости различий относительных величин использовали критерий 2. Корреляционные взаимосвязи выявляли методом ранговых корреляций Спирмена.

Диагностическую точность разработанных тестов оценивали с помощью ROC (Receiver Operator Characteristic) – анализа, проводили расчет операционных характеристик тестов (Е.Л. Насонов и соавт., 2006).

Для построения моделей исхода НА использовался метод бинарной логистической регрессии, выполненный с помощью статистического пакета программ SPSS for Windows (модуль SPSS Regression Models).

Основные результаты исследования Результаты определения ферментативной сывороточной активности У пациентов с ранними артритами (рРА, оРеА и НА) установлено присутствие ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, уровни которой превышают (p0,01) значения у здоровых лиц. Выявлено превышение (p0,01) уровней сывороточной ДНКазной и гиалуронидазной активности у пациентов с рРА по сравнению с величинами данных показателей при оРеА и НА (таблица 1).

Таблица 1 – Уровни ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности у обследованных лиц Группы обследованных лиц Показатель Здоровые рРА, n=64 оРеА, n=55 НА, n= лица, n= Медиана 3,00 1, 4,50 3, ДНКазная 95%ДИ 4,00-5,00 2,92-3,00 2,00-4,00 1,00-2, сывороточная Min-Max 3,00-5,00 1,00-5,00 1,00-5,00 0,00-3, активность, баллы 25%...75% 4,00-5,00 2,00-3,00 2,00-4,50 1,00-2, Медиана 4,00 3,00 3,00 1, Гиалуронидазная 95%ДИ 4,00-4,00 3,00-3,00 2,84-4,00 0,52-2, сывороточная Min-Max 2,00-5,00 1,00-4,00 1,00-5,00 0,00-4, активность, баллы 25%...75% 4,00-5,00 2,00-3,00 2,00-4,00 0,00-2, Обнаружено превышение (p0,01) частот встречаемости ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови у пациентов с ранними артритами по сравнению с контрольными величинами в группе здоровых лиц.

Выявлены взаимосвязи (p0,05) между ДНКазной сывороточной активностью и числом болезненных суставов из 28 (r=0,30), уровнем СОЭ (r=0,53) при рРА;

активностью заболевания (r=0,37), индексом Ричи (r=0,65), числом припухших суставов из 44 (r=0,71), DAS4 (r=0,68) при оРеА;

длительностью заболевания (r=0,40), количеством В-лимфоцитов (r=-0,44), фагоцитарным индексом (r=-0,49),фагоцитарным числом (r=0,50) при НА.

Результаты определения ферментативной активности поликлональных иммуноглобулинов Уровни ДНКазной и СОД активности IgG у пациентов с рРА, оРеА и НА оказались выше (p0,01) контрольных величин в группе здоровых лиц. Не установлено различий (p0,05) между уровнями БАПНА-амидазной активности у пациентов с ранними артритами и здоровых лиц. Установлено превышение уровней каталазной активности IgG у пациентов с рРА по сравнению с контрольными величинами. Уровни ДНКазной активности IgG у пациентов с рРА превышали (p0,01) величины данного показателя у пациентов с оРеА и НА (таблица 2).

Таблица 2 – Уровни ферментативной активности поликлональных иммуноглобулинов у обследованных лиц Группы обследованных лиц Показатели Здоровые рРА, n=64 оРеА, n=55 НА, n= лица, n= Медиана 3,50 0, 4,00 2, ДНКазная 95%ДИ 3,50-4,50 2,00-3,00 2,50-4,00 0,00-0, активность IgG, Min-Max 3,00-5,00 0,50-4,50 0,50-5,00 0,00-2, баллы 25%...75% 3,50-4,50 1,50-3,00 2,00-4,00 0,00-1, Медиана 16,00 21,50 15,50 0, СОД 95%ДИ 12,83-18,09 11,83-27,97 10,54-22,83 0,00-5, активность IgG, Min-Max 0,00-132,00 0,00-43,10 0,00-41,00 0,00-31, ОЕА 25%...75% 11,00-23,50 9,05-33,15 9,00-25,50 0,00-10, Медиана 11,75 4,80 9,30 7, Каталазная 95%ДИ 8,88-21,77 1,14-7,60 5,76-12,00 3,00-9, активность IgG, Min-Max 0,00-155,00 0,00-26,40 0,00-62,00 0,00-36, ОЕА 25%...75% 4,37-19,00 0,00-9,28 5,15-13,50 1,28-9, БАПНА- Медиана 0,014 0,008 0,013 0, амидазная 95%ДИ 0,01-0,03 0,002-0,015 0,001-0,05 0,01-0, активность IgG, Min-Max 0,00-0,10 0,02-0,20 0,00-0,31 0,01-0, ОЕА 25%...75% 0,002-0,05 0,00-0,02 0,003-0,06 0,01-0, Обнаружено превышение (p0,01) частот встречаемости ДНКазной и СОД активности поликлональных IgG у пациентов с ранними артритами по сравнению с контрольными величинами в группе здоровых лиц.

Выявлены взаимосвязи (p0,05) между ДНКазной активностью поликлональных IgG и оценкой активности заболевания по шкале Ликкерт (r=0,30), уровнем СОЭ (r=0,42) при рРА;

уровнем ЦИК (r=0,42), количеством Т-лимфоцитов (r=0,40) при оРеА;

оценкой активности заболевания врачом (r=0,42), уровнем СРБ (r=0,37), количеством СD4+ лимфоцитов (r=-0,49), CD8+ лимфоцитов (r=0,50) при НА.

При исследовании патогенетического значения антител, обладающих ДНКазной активностью, при ранних артритах нами обнаружено проникновение поликлональных IgG, обладающих ДНКазной активностью, через цитоплазматическую мембрану живой эукариотической клетки (лейкоцитов человека). Выявлено более быстрое наступление клеточной смерти лейкоцитов при воздействии IgG с высокой ДНКазной активностью (42-я минута наблюдения) по сравнению с IgG, не обладающими ДНКазной активностью (120-я минута), что свидетельствует о цитотоксическом характере действия поликлональных иммуноглобулинов, обладающих ДНКазной активностью, и подтверждает их провоспалительные свойства.

Выявлены взаимосвязи (p0,05) между БАПНА-амидазной активностью поликлональных IgG и уровнем СОЭ (r=0,30), СРБ (r=0,30) при рРА;

числом активных Т-лимфоцитов (r=0,50), уровнем АЦЦП (r=0,40) при НА.

Установлены зависимости между СОД активностью поликлональных IgG и числом болезненных суставов из 28 (r=-0,30) при рРА;

наличием энтезита (r=0,36), гонартрита (r=-0,48), функциональной недостаточностью (r=-0,34) при оРеА. Каталазная активность поликлональных IgG коррелировала с DAS28 (r=0,41), рентгенологической стадией (r=-0,29), уровнем РФ (r=0,30), числом СD4+ лимфоцитов (r=0,41) при рРА;

наличием ахиллобурсита (r= 0,32), уровнем СРБ (r=-0,43) при оРеА;

количеством CD8+ лимфоцитов (r= 0,49) при НА.

Результаты расчета аналитических показателей тестов дифференциальной диагностики ранних артритов на основе оценки ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной активности поликлональных иммуноглобулинов Тест дифференциальной диагностики рРА и оРеА (отношение правдоподобия положительного результата (ОП+) 6,75, отношение правдоподобия отрицательного результата (ОП-) 0,16) на основе определения гиалуронидазной сывороточной активности соответствует критериям наиболее полезных диагностических тестов в ревматологии (A.F. Kavanaugh et al., 2002).

Тесты дифференциальной диагностики рРА и оРеА (ОП+ 8,77, ОП 0,22), а также рРА и других ранних артритов (ОП+ 4,03, ОП- 0,25) на основе определения ДНКазной сывороточной активности соответствуют критериям полезных тестов (A.F. Kavanaugh et al., 2002). Тесты дифференциальной диагностики рРА и оРеА (ОП+ 6,51, ОП- 0,20), а также рРА и других ранних артритов (ОП+ 2,90, ОП- 0,24) на основе определения ДНКазной активности IgG также соответствуют критериям полезных диагностических тестов в ревматологии.

На обследованной нами когорте пациентов проведено сопоставление результатов расчета аналитических характеристик разработанных тестов для дифференциальной диагностики ранних артритов с учетом ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови, ДНКазной активности поликлональных IgG, а также АЦЦП, РФ IgM и РФ IgG (таблица 3).

Таблица 3 – Чувствительность и специфичность тестов дифференциальной диагностики раннего ревматоидного артрита и других ранних артритов Тест Чувствительность, % Специфичность, % ДНКазная сывороточная 79,69 80, активность 95%ДИ: 67,80-88,70 95%ДИ: 70,60-87, Гиалуронидазная 85,94 79, сывороточная активность 95%ДИ: 75,00-93,30 95%ДИ: 69,30-86, ДНКазная активность 82,81 71, поликлональных IgG 95%ДИ: 71,30-91,10 95%ДИ: 61,00-80, 72,13 81, АЦЦП 95%ДИ: 59,20-82,80 95%ДИ: 70,00-90, 48,94 92, РФ IgM 95%ДИ: 34,10-63,90 95%ДИ: 80,10-98, 63,79 86, РФ IgG 95%ДИ: 50,10-76,00 95%ДИ: 77,60-92, Результаты проспективного наблюдения за группой пациентов с недифференцированным артритом Пациенты с НА обследовались через 6 и 12 месяцев после первичного обращения. При выполнении критериев EULAR/ACR 2010 (D. Aletaha et al., 2010) определялся исход – РА. В случае соответствия клинической картины и данных лабораторно-инструментального обследования критериям какого либо заболевания, кроме РА, выставлялся соответствующий диагноз и определялся исход – не РА. При сохранении симптомов, но несоответствии критериям какого-либо заболевания определялся исход – НА. При отсутствии клинических проявлений и лабораторно-инструментальных признаков воспаления определялся исход – выздоровление (таблица 4).

Таблица 4 – Исходы недифференцированного артрита через 12 месяцев наблюдения Доля пациентов в 95% доверительный Исход первоначальной группе НА, % интервал, % Ревматоидный артрит 30,56 22,77-38, Не ревматоидный артрит 11,11 5,80-16, Недифференцированный артрит 30,56 22,77-38, Выздоровление 27,78 20,21-35, Результаты оценки прогностической значимости ферментативной активности сыворотки крови и IgG при недифференцированном артрите В качестве зависимой переменной для логистической регрессии был определен бинарный признак – исход НА: 1 – РА, 0 – другой исход. В качестве независимых переменных использовали признаки, которые различались (р0,05) у пациентов с развившимся и неразвившимся в течение 12 месяцев РА. Различия были получены по трем переменным: ДНКазная и гиалуронидазная сывороточная активность, АЦЦП. Прогностическая модель, включающая все три переменные, имеет наиболее высокие показатели чувствительности (90,00%), специфичности (92,31%) и площади под ROC кривой (0,96) и соответствует критериям отличного качества по экспертной шкале. Уравнение логистической регрессии представлено формулой:

p=1/1+ez Z = 4,275х1 + 0,104х2 + 0,998х3 – 5, где х1 – наличие АЦЦП в сыворотке крови (1-есть, 0-нет);

х2 – уровень ДНКазной сывороточной активности;

х3 – уровень гиалуронидазной сывороточной активности.

При значении р0,5 модель предсказывает развитие РА, при р0, вероятность развития РА моделью отрицается.

Модель была апробирована на контрольной выборке пациентов с НА в количестве 18 человек (ретроспективный анализ), совпадение результатов прогнозированного и состоявшегося исходов было отмечено у 89% пациентов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Основные научные результаты исследования 1. При ранних артритах (раннем ревматоидном артрите, остром реактивном артрите и недифференцированном артрите) установлено наличие ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, уровни которой в 3 5 раз превышают значения у здоровых лиц, что свидетельствует об участии ферментативной деполимеризующей активности сыворотки крови в иммунопатогенезе ранних артритов [7, 9, 11, 24, 28, 29, 31, 34, 37, 39, 40].

2. У пациентов с ранними артритами доказано присутствие в сыворотке крови поликлональных IgG, обладающих ДНКазной, протеолитической (БАПНА-амидазной), оксидоредуктазной (каталазной и СОД) активностью. Уровни и частоты встречаемости ДНКазной, каталазной и СОД активности IgG у пациентов превышают контрольные величины у здоровых лиц, что указывает на наличие при ранних артритах особенностей иммунопатогенеза, связанных с ферментативной активностью поликлональных IgG [1, 2, 3, 4, 8, 9, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 27, 30, 31, 32, 33, 35, 36, 38, 40].

3. При раннем ревматоидном артрите уровни ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности в 1,3 раза выше, чем при остром реактивном и недифференцированном артритах. ДНКазная активность поликлональных IgG у пациентов с ранним ревматоидным артритом превышает значения данного вида активности при остром реактивном и недифференцированном артритах, что является основой для разработки способов дифференциальной диагностики ранних артритов [5, 6, 7, 11, 22, 24, 25, 27, 29, 33, 35, 36].

4. Провоспалительные свойства деполимеризирующей ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной и протеолитической (БАПНА-амидазной) активности поликлональных иммуноглобулинов при ранних артритах подтверждают выявленные прямые взаимосвязи между указанными видами активностей и клиническими признаками воспаления (числом болезненных и припухших суставов);

длительностью болезни;

индексами активности (DAS28, DAS4, Ричи, активностью по шкале Ликкерт);

лабораторными маркерами воспаления (уровнем СОЭ и СРБ), серопозитивностью (ревматоидным фактором и уровнем АЦЦП), показателями иммунограммы (числом CD8+ и CD4+ Т-лимфоцитов, В лимфоцитов, фагоцитарным числом);

а также обнаруженный цитотоксический эффект иммуноглобулинов, обладающих ДНКазной активностью, на лейкоциты человека.

О протективном характере оксидоредуктазной (каталазной и СОД) активности поликлональных иммуноглобулинов при ранних артритах свидетельствуют обнаруженные отрицательные зависимости между данными видами активности и клиническими признаками (числом болезненных суставов), серопозитивностью (ревматоидным фактором), маркерами активности (уровнем СРБ), показателями иммунограммы (числом CD8+ Т лимфоцитов) [3, 4, 6, 9, 26].

5. Разработанные новые способы дифференциальной диагностики раннего ревматоидного, острого реактивного и недифференцированного артритов на основе определения ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной активности поликлональных IgG по своим аналитическим характеристикам соответствуют критериям полезных и наиболее полезных тестов в ревматологии и позволяют усовершенствовать диагностический процесс при ранних артритах [7, 11, 35, 36, 41, 42].

6. Разработанный способ прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит на основе определения АЦЦП, ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности позволяет предсказать вероятность трансформации недифференцированного артрита в ревматоидный артрит и соответствует критериям отличного качества (чувствительность 90,00%, специфичность 92,31%, площадь под кривой 0,96) [10].

Рекомендации по практическому использованию результатов При обследовании пациентов с ранними артритами в качестве дополнительного лабораторного способа дифференциальной диагностики может быть использовано определение ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности. Уровень ДНКазной активности сыворотки крови, равный 3 баллам и более, позволяет дифференцировать ранний ревматоидный артрит от острого реактивного артрита (чувствительность 79,69%, специфичность 90,91%) и других ранних артритов (острого реактивного и недифференцированного) (чувствительность 79,69%, специфичность 80,22%).

Уровень гиалуронидазной активности сыворотки крови, равный 3 баллам и более, позволяет дифференцировать ранний ревматоидный артрит от острого реактивного артрита (чувствительность 85,94%, специфичность 87,27%) и других ранних артритов (острого реактивного и недифференцированного) (чувствительность 85,94%, специфичность 79,12%) (инструкция по применению «Метод лабораторной дифференциальной диагностики раннего ревматоидного артрита и острого реактивного артрита» (утверждена МЗ РБ 30.09.2011 г.;

регистрационный номер 041-0411)) [42].

Для прогнозирования исхода недифференцированного артрита в ревматоидный артрит целесообразно использовать результаты определения АЦЦП, ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови. Это позволяет обосновать назначение базисной терапии пациентам с недифференцированным артритом, имеющим высокую вероятность исхода в ревматоидный артрит (инструкция по применению «Метод прогнозирования исхода недифференцированного артрита в ревматоидный артрит» (утверждена МЗ РБ 28.11.2012 г.;

регистрационный номер 131-1012)).

Разработанные способы дифференциальной диагностики ранних артритов, а также прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит применяются в УЗ «Витебская областная клиническая больница», УЗ «Гродненская областная клиническая больница», УЗ «Могилевская областная больница», УЗ «1-я городская клиническая больница г. Минска», УЗ «Витебский областной диагностический центр», дальнейшее внедрение возможно в практическую деятельность учреждений здравоохранения ревматологического или терапевтического профилей республиканского, областного, городского и районного уровней.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ СОИСКАТЕЛЯ Статьи в научных журналах 1. Методические подходы к определению окислительно восстановительной активности антител / И.И. Генералов, Е.В. Кундер, Т.Н.

Борисевич, М.В. Волкова // Вестник ВГМУ. – 2005. – № 3. – С. 16–21.

2. ДНКазная и оксидоредуктазная активность иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартропатиях / Е.В. Кундер, И.И. Генералов, А.М.

Литвяков, М.В. Волкова // Вестник ВГМУ. – 2006. – № 1. – С. 26–32.

3. Волкова, М.В. Каталитическая активность поликлональных IgG у пациентов с острым реактивным артритом / М.В. Волкова // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. – 2011. – № 1. – С. 32–35.

4. Волкова, М.В. Характеристика абзимной активности IgG у пациентов с ранним ревматоидным артритом / М.В. Волкова, О.Г. Величинская // Вестник ВГМУ. – 2011. – № 2. – С. 63–68.

5. Волкова, М.В. Сравнительная характеристика абзимной активности у пациентов с ранним ревматоидным и острым реактивным артритом / М.В.

Волкова, Е.В. Кундер // Медицинская панорама. – 2011. – № 3. – С. 44–48.

6. Волкова, М.В. Абзимная активность поликлональных IgG у пациентов с ранними артритами / М.В. Волкова // Иммунопатология Иммунология Аллергология. – 2011. – № 3. – С.11–17.

7. Волкова, М.В. Дезоксирибонуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов и сыворотки крови у пациентов с ранними артритами / М.В. Волкова, Е.В. Кундер // Медицина. – 2011. – № 4. – С. 17–21.

8. Волкова, М.В. Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом / М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов // Иммунопатология.

Иммунология. Аллергология. – 2012. – № 1. – С. 12–18.

9. Клинико-патогенетическая и диагностическая значимость дезоксирибонуклеазной активности поликлональных IgG и сыворотки крови при спондилоартритах / М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов, Г.А.

Невинский // Медицинская иммунология. – 2012. – Т. 14, № 4/5. – С. 337 –346.

10. Волкова, М.В. Недифференцированный артрит: возможности прогнозирования исходов на основе оценки сывороточной дезоксирибонуклеазной и гиалуронидазной активности / М.В. Волкова // Вестник ВГМУ. – 2012. – № 3. – С. 63–68.

11. Волкова, М.В. Критерии дифференциальной диагностики ранних артритов на основе оценки сывороточной гиалуронидазной и дезоксирибонуклеазной активности / М.В. Волкова, Е.В. Кундер // Клиническая лабораторная диагностика – 2012. – № 10. – С. 22–26.

12. IgGs containing - and -type light chains and of all subclasses (IgG1 IgG4) from the sera of patients with autoimmune diseases and viral and bacterial infections hydrolyze DNA / T.A. Parkhomenko, V.N. Buneva, B.M. Doronin, M.V.

Volkova, S.A. Senkovich, I.I. Generalov, G.A. Nevinsky // J. Mol. Recognit. – 2012. – Vol. 25, № 7. – P. 383–392.

Материалы конференций 13.Особенности абзимной активности иммуноглобулинов при различных патологических состояниях / И.В. Семенова, М.В. Волкова, М.С.

Дуняшина, В.В. Дубовский, А.А. Гордиевич // Актуальные вопросы современной медицины и фармации : материалы 57 итоговой науч.-практ.

конф., Витебск, 21–22 апр. 2005 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол.: А.П.

Солодков [и др.]. – Витебск, 2005. – С. 144–145.

14.Волкова, М.В. ДНКазная активность поликлональных иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартропатиях / М.В. Волкова // Студенческая медицинская наука XXI века : материалы V междунар. науч. практ. конф., Витебск, 17–18 ноября 2005 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол.: А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2005. – С. 129–131.

15.Волкова, М.В. Оксидоредуктазная активность поликлональных иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартропатиях / М.В. Волкова Студенческая медицинская наука XXI века : материалы V междунар. науч. практ. конф., Витебск, 17–18 ноября 2005 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол.: А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2005. – С. 131–133.

16.Кундер, Е.В. Каталитическая активность иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартритах / Е.В. Кундер, М.В. Волкова, А.М.

Литвяков // Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации : материалы 61-й науч. сессии ВГМУ, Витебск, 21–22 марта 2006 г.

/ Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол. : А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2006. – С. 466–469.

17.Сравнительная характеристика различных видов каталитической активности иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартритах / М.В.

Волкова // Актуальные вопросы современной медицины и фармации :

материалы 58 итоговой науч.-практ. конф., Витебск, 26–27 апр. 2006 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол. : А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2006. – С.

105-107.

18.Волкова, М.В. Изучение каталитической активности поликлональных иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартропатиях / М.В. Волкова // Студенческая медицинская наука XXI века : материалы VI междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 9–10 ноября г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол.: А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2006. – С. 190-192.

19. Сиротко, О.В. Ферментативная активность IgG у больных реактивными артритами / О.В. Сиротко, М.В. Волкова // Студенческая медицинская наука XXI века : материалы VII междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 1–2 ноября 2007 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол.: А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2007. – С. 189–191.

20.Волкова, М.В. Дифференциальная диагностика псориатического артрита и реактивных артритов / М.В. Волкова // Актуальные вопросы современной медицины и фармации : материалы 60 науч.-практ. конф., Витебск, 24–25 апр. 2008 г. / Витебск. гос. мед. ун-т. ;

редкол. : А.П. Солодков [и др.]. – Витебск, 2008. – С.175–177.

21.Волкова, М.В. Каталитическая активность иммуноглобулинов при ранних артритах / М.В. Волкова // Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации: материалы 66-й науч. сессии ВГМУ, Витебск, 27-28 янв. 2011 г. / Витебск. гос. мед. ун-т.;

редкол.: В.П. Дейкало [и др.]. – Витебск, 2011. – С. 228–229.

22.Волкова, М.В. Каталитическая активность иммуноглобулинов при ранних артритах / М.В. Волкова // Актуальные вопросы современной науки :

сборник научных работ студентов и молодых ученых Всероссийской научно практической конференции с международным участием, посвященной 65 летию СНО ЯГМА, Ярославль, 21–22 апр. 2011 г. / Ярославл. гос. мед.

академия. – Ярославль, 2011. – С. 120–121.

23.Волкова, М.В. Окислительно-восстановительная активность иммуноглобулинов при ранних артритах / М.В. Волкова // Актуальные вопросы современной медицины и фармации : материалы 63-й итоговой науч.-практ. конф., Витебск, 21–22 апр. 2011 г. / Витебск. гос. мед. ун-т.;

редкол.: С.А. Сушков [и др.]. – Витебск, 2011. – С. 123–124.

24.Волкова, М.В. Ферментативная активность сыворотки крови при ранних артритах / М.В. Волкова, Е.А. Груммо // Студенческая медицинская наука XXI века : материалы XI междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 3– ноября 2011 г. / Витебск. гос. мед. ун-т.;

редкол.: С.А. Сушков [и др.]. – Витебск, 2011. – С. 86–88.

25.Волкова, М.В. Сравнительная характеристика абзимной активности у пациентов с ранними артритами / М.В. Волкова, Е.А. Груммо // Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации : материалы 67-й науч.

сессии ВГМУ, Витебск, 2–3 февр. 2012 г. / Витебск. гос. мед. ун-т.;

редкол.:

В.П. Дейкало [и др.]. – Витебск, 2012. – С. 204–205.

26. Волкова, М.В. Cпособность иммуноглобулинов G проникать в живую эукариотическую клетку/ М.В. Волкова, Е.А. Груммо, М.В. Степурко // Актуальные вопросы современной медицины и фармации : материалы 64-й итоговой науч.-практ. конф., Витебск, 17–18 апр. 2012 г. / Витебск. гос. мед.

ун-т.;

редкол.: С.А. Сушков [и др.]. – Витебск, 2012. – С. 338–339.

27. Волкова, М.В. Сравнительная характеристика абзимной активности у пациентов с ранним ревматоидным артритом и острым реактивным артритом / М.В. Волкова, Е.В. Кундер // Актуальные вопросы внутренних болезней : материалы XII съезда терапевтов Республики Беларусь, Гродно, 17-18 мая 2012 г. / Гродн. гос. мед. ун-т.;

редкол.: Н.Ф. Сорока [и др.]. – Гродно, 2012. – С. 131–134.

28. Кундер, Е.В. Критерии дифференциальной диагностики спондилоартропатий на основе определения каталитической активности сыворотки крови / Кундер Е.В., Волкова М.В. // Актуальные вопросы внутренних болезней : материалы XII съезда терапевтов Республики Беларусь, Гродно, 17-18 мая 2012 г. / Гродн. гос. мед. ун-т.;

редкол.: Н.Ф.

Сорока [и др.]. – Гродно, 2012. – С. 140–143.

29. Волкова, М.В. Дифференциальная диагностика ранних артритов на основе оценки сывороточной гиалуронидазной активности / М.В. Волкова, Е.А. Груммо // Студенческая медицинская наука XXI века : материалы XII междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 1–2 ноября 2012 г. / Витебск. гос. мед.

ун-т.;

редкол.: С.А. Сушков [и др.]. – Витебск, 2012. – С. 99–100.

Тезисы докладов 30.Волкова, М.В. Абзимная активность иммуноглобулинов при серонегативных спондилоартритах / М.В. Волкова // Сборник тезисов докладов X республиканской научной конференции студентов и аспирантов высших учебных заведений Республики Беларусь «НИРС-2005», часть 3. – Минск, 2005. – С. 17.

31.Catalytic activity of polyclonal immunoglobulins and sera in patients with various spondyloarthropathies / E.V. Kundzer, I.I. Generalov, A.M. Litvyakov, M.V. Volkova // Ann. Rheum. Dis. – 2007. – Vol. 66 (Suppl. II). – P. 614.

32.Волкова, М.В. Абзимная активность иммуноглобулинов как критерий для диагностики спондилоартропатий / М.В. Волкова // Тезисы докладов конференции студентов и молодых ученых, посвященной памяти профессора В.Ч. Бржеского, Гродно, 10-11 апр. 2008 г. / Гродн. гос. мед. ун-т.;

редкол.: П.В. Гарелик [и др.]. – Гродно, 2008. – С. 98–99.

33.Волкова, М.В. Дезоксирибонуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов при ранних артритах / М.В. Волкова, Е.В. Кундер // Сборник материалов II всероссийского конгресса ревматологов, Ярославль, 26–29 апр. 2011 г. / РАМН;

редкол.:Е.Л. Насонов [и др.]. – Ярославль, 2011 – С. 18.

34. Kunder, E.V. DNAase serum and catalytic IgG activity in patients with spondyloarthropathies / E.V. Kunder, I.I. Generalov, M.V. Volkava // Ann. Rheum.

Dis. – 2011. – Vol. 70 (Suppl. 13). – P. 336.

35.Volkava, M.V. Catalytic IgG activity in patients with early arthritis / M.V. Volkava // Ann. Rheum. Dis. – 2011. – Vol. 70 (Suppl. 13). – P. 717.

36.Volkava, M.V. DNAse IgG activity in patients with early arthritis / M.V.

Volkava, E.V. Kundzer, I.I. Generalov // Oxford Journal of Rheumatology – 2012.

– Vol. 51 (Suppl.1). – P. i36.

37. Волкова, М.В. Дезоксирибонуклеазная активность сыворотки крови у пациентов с ранними артритами / М.В. Волкова, Е.В. Кундер // VII Всероссийская конференция Ревматология в реальной клинической практике : сборник материалов конференции (тезисы), Владимир, 23–26 мая 2012 г./ научн. коммисия: Е.Л. Насонов [и др.]. – Владимир, 2012. – С. 14.

38.Нуклеазная активность иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом / М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И.

Генералов, Д. Роггенбук // VII Всероссийская конференция Ревматология в реальной клинической практике : сборник материалов конференции (тезисы), Владимир, 23–26 мая 2012 г./ научн. коммисия: Е.Л. Насонов [и др.]. – Владимир, 2012. – С. 14.

39.Kundzer, A.V. DNAse serum and IgG activity in patients with axial and peripheral spondyloarthritides / A.V. Kundzer, M.V. Volkava // Ann. Rheum. Dis.

– 2012. – Vol. 71 (Suppl. 13). – P. 557.

40.Volkava, M.V. Nuclease serum and IgG activity in patients with early rheumatoid arthritis / M.V. Volkava, E.V. Kundzer, I.I. Generalov // Ann. Rheum.

Dis. – 2012. – Vol. 71 (Suppl. 13). – P. 711.

Патенты 41. Уведомление о положительном результате предварительной экспертизы и установленной дате подачи заявки на выдачу патента Республики Беларусь на изобретение № а 20101651 «Способ лабораторной дифференциальной диагностики раннего ревматоидного артрита и реактивного артрита» от 27.01.2011. Авторы: М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И.

Генералов.

Инструкции по применению 42.Метод лабораторной дифференциальной диагностики раннего ревматоидного артрита и острого реактивного артрита: инструкция по применению № 041-0411 : утв. М-вом здравоохранения Респ. Беларусь 30.09.2011 / М.В. Волкова, Е.В. Кундер;

разработчик Витебск. гос. мед. ун-т.

– Витебск: ВГМУ, 2011. – 8 с.

РЭЗЮМЭ Волкава Маргарыта Васільеўна Асаблівасці імунапатагенезу і дыягностыкі ранніх артрытаў з улікам ферментатыўнай актыўнасці сывараткі крыві і палікланальных імунаглабулінаў Ключавыя словы: ранні артрыт, сываратка крыві, палікланальныя імунаглабуліны, ферментатыўная актыўнасць.

Мэта даследавання: распрацаваць новыя спосабы дыферэнцыяльнай дыягностыкі ранніх артрытаў і прагназавання пераходу недыферэнцаванага артрыту ў рэўматоідны артрыт з улікам ферментатыўных уласцівасцей сывараткі крыві і палікланальных імунаглабулінаў.

Метады даследавання: клінічныя, імуналагічныя, спектрафотаметрычныя, статыстычныя.

Вынікі даследавання і іх навуковая навізна: упершыню пры раннім рэўматоідным артрыце, вострым рэактыўным артрыце, а таксама пры недыферэнцаваным артрыце выяўлена наяўнасць ДНКазнай, БАПНА амідазнай, каталазнай і супераксіддысмутазнай актыўнасці IgG. Устаноўлена, што ў пацыентаў з раннім рэўматоідным артрытам узроўні ДНКазнай і гіалуранідазнай актыўнасці сывараткі крыві, а таксама ДНКазнай актыўнасці IgG вышэй, чым у пацыентаў з вострым рэактыўным артрытам і недыферэнцаваным артрытам. Выяўлены ўзаемасувязі паміж узроўнямі ферментатыўнай актыўнасці сывараткі крыві, IgG і клінічнымі прыкметамі вывучаных захворванняў, а таксама лабараторнымі дадзенымі. Упершыню распрацаваны тэсты дыферэнцыйнай дыягностыкі ранняга рэўматоіднага артрыту і вострага рэактыўнага артрыту, а таксама ранняга рэўматоіднага артрыту і іншых артрытаў на аснове вызначэння ДНКазнай і гіалуранідазнай актыўнасці сывараткі крыві, а таксама ДНКазнай актыўнасці IgG. Шляхам канструявання прагнастычный мадэлі ўстаноўлены ўплыў ДНКазнай і гіалуранідазнай актыўнасці сывараткі крыві на зыход недыферанцаванага артрыту.

Рэкамендацыі па выкарыстанні: дыферэнцыйная дыягностыка ранняга рэўматоіднага артрыту і вострага рэактыўнага артрыту, а таксама ранняга рэўматоіднага артрыту і іншых артрытаў, прагназаванне пераходу недыферэнцаванага артрыту ў рэўматоідны артрыт.

Галіна выкарыстання: рэўматалогія, клінічная медыцына.

РЕЗЮМЕ Волкова Маргарита Васильевна Особенности иммунопатогенеза и диагностики ранних артритов с учетом ферментативной активности сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов Ключевые слова: ранний артрит, сыворотка крови, поликлональные иммуноглобулины, ферментативная активность.

Цель исследования: разработать новые способы дифференциальной диагностики ранних артритов и прогнозирования исходов недифференцированного артрита в ревматоидный артрит с учетом ферментативных свойств сыворотки крови и поликлональных иммуноглобулинов.

Методы исследования: клинические, иммунологические, молекулярно-биологические, спектрофотометрические, статистические.

Результаты исследования и их научная новизна: впервые при раннем ревматоидном артрите, остром реактивном артрите и недифференцированном артрите обнаружено наличие ДНКазной, БАПНА амидазной, каталазной и супероксиддисмутазной активности IgG.

Установлено, что у пациентов с ранним ревматоидным артритом уровни ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной активности IgG выше, чем у пациентов с острым реактивным артритом и недифференцированным артритом. Выявлены взаимосвязи между уровнями ферментативной активности сыворотки крови, а также IgG и клиническими признаками изученных заболеваний, лабораторными данными. Впервые разработаны тесты дифференциальной диагностики раннего ревматоидного артрита и острого реактивного артрита, раннего ревматоидного артрита и других ранних артритов на основе определения ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности, ДНКазной активности IgG. Путем построения прогностической модели установлено влияние ДНКазной и гиалуронидазной сывороточной активности на исход недифференцированного артрита.

Рекомендации по использованию: дифференциальная диагностика раннего ревматоидного артрита и острого реактивного артрита, раннего ревматоидного артрита и других ранних артритов, прогнозирование исхода недифференцированного артрита в ревматоидный артрит.

Область применения: ревматология, клиническая медицина.

SUMMARY Volkava Marharyta Immunopathogenetic and pathogenetic features of early arthritis considering enzymatic activity of blood serum and polyclonal IgG Keywords: early arthritis, blood serum, polyclonal IgG, enzymatic activity.

The aim of study: to develop new methods of differential diagnostics of early arthritis and prediction of undifferentiated arthritis outcomes using enzymatic properties of blood serum and polyclonal IgG.

Research methods: clinical, immunologic, molecular-biological, spectrophotometry, statistical.

Results of research and their scientific novelty: for the first time we revealed the presence of IgG DNAse, BAPNA-amidase, catalase and superoxydismutase activities in patients with early rheumatoid arthritis, acute reactive arthritis and undifferentiated arthritis. We discovered that the levels of serum DNAse and hyaluronidase activities, DNAse activity of IgG in patients with early rheumatoid arthritis are higher than in patients with acute reactive arthritis and undifferentiated arthritis. The multiple interconnections between the levels of enzymatic serum and IgG activities, the clinical signs of studied diseases and laboratory findings were detected. For the first time we worked out original tests for differentiation of early rheumatoid arthritis and acute reactive arthritis, early rheumatoid arthritis and other early arthritis on the basis of assessment of serum DNAse and hyaluronidase activities, DNAse activity of IgG. Developing the prognostic model we revealed influence of serum DNAse and hyaluronidase activities on outcome of undifferentiated arthritis.

Recommendations for usage: differential diagnosis of early rheumatoid arthritis and acute reactive arthritis, early rheumatoid arthritis and other early arthritis, outcome prognosis of undifferentiated arthritis.

Field of application: rheumatology, clinical medicine.

Подписано в печать 26.12.2012 Формат бумаги 64x84 1/16.

Бумага типографская №2. Гарнитура «Times New Roman» Усл. печ. л. 1, Тираж 60 экз. Заказ № Издатель и полиграфическое исполнение УО «Витебский государственный медицинский университет» ЛИ № 02330/0549444 от 08.04.2009.

пр. Фрунзе, 27, 210023, г. Витебск,

 

Похожие работы:


 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.