Разработка и использование новой пробиотической кормовой добавки на основе функциональной микрофлоры в рецептуре комбикормов для перепелов
На правах рукописи
ЛЫСЕНКО ЮРИЙ АНДРЕЕВИЧ РАЗРАБОТКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НОВОЙ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ В РЕЦЕПТУРЕ КОМБИКОРМОВ ДЛЯ ПЕРЕПЕЛОВ 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии)
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Ульяновск – 2013 1
Работа выполнена на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный аграрный университет»
Научный консультант: ПЕТЕНКО АЛЕКСАНДР ИВАНОВИЧ доктор сельскохозяйственных наук, профессор
Официальные оппоненты: ЛЕБЕДЕВА ИРИНА АНАТОЛЬЕВНА доктор биологических наук, доцент ГНУ «Уральский научно-исследовательский ветери нарный институт» Россельхозакадемии, отдел эко логии и иммунопатологии, старший научный со трудник ЕЖКОВА ГАЛИНА ОЛЕГОВНА доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО «Казанский национальный исследователь ский технологический университет», кафедра технологии пищевых производств, института пищевых производств и биотехнологии
Ведущая организация: Государственное научное учреждение «Северо кавказский научно-исследовательский инсти тут животноводства» Россельхозакадемии
Защита состоится «24» мая 2013 года в «13» часов на заседании диссертаци онного совета Д 220.065.01 при ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сель скохозяйственная академия имени П.А. Столыпина» по адресу: 432017, г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1, тел. 8 (8422) 44-30-58;
e-mail:
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина», а с авто рефератом в сети Интернет на официальном сайте Министерства образования и науки РФ www.vak.ed.gov.ru
Автореферат разослан « 22 » апреля 2013 года
Ученый секретарь диссертационного совета Пыхтина Лидия Андреевна 1.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Промышленное птицеводство – одна из ведущих отрас лей сельского хозяйства. Важный фактор, обуславливающий индустриализацию от расли – скороспелость птицы и быстрая окупаемость вложений (И. Голубов, 2011).
Одним из направлений в птицеводстве является перепеловодство, главная зада ча которого обеспечение населения качественным и экологически безопасным мя сом и яйцом, обладающим высокими диетическими свойствами. При нарушении ба ланса микрофлоры пищеварительного тракта в пользу условно-патогенной, несба лансированном кормлении, неправильном содержании, применении кормовых анти биотиков происходит снижение биоресурсного потенциала птиц, в частности, полу чаемой от них продукции (Н. Данилевская, В. Субботин и др., 2005;
А. Гайдук, Ф. Хазиахметов, 2011).
Развитие биотехнологии привело к появлению кормовых продуктов и биологи чески активных добавок с новыми свойствами. К их числу относятся пробиотики. По следние при введении в организм ведут себя как своеобразный «биореактор», осуще ствляющий синтез биологически активных веществ с последующей их «доставкой» к сайтам-мишеням макроорганизма. При их приеме начинают выделяться биологиче ски активные вещества и функционировать системы микробных клеток, оказываю щие как прямое действие на патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, так и опосредованное – путем активации специфических и неспецифических систем за щиты организма. В этот же период бактериальные клетки пробиотика активно проду цируют ферменты, аминокислоты, антибиотические вещества и другие физиологиче ски активные субстанции, дополняющие комплексное лечебно-профилактическое действие рационов. Результатом является повышение переваримости и использования питательных веществ кормов, а, следовательно, и увеличение прироста живой массы (А. Н. Панин и др., 1996, 2000, 2002, 2007;
Б. Бессарабов, 1996, 2006, 2009;
Н. И. Малик и др., 2001, 2002;
И. Егоров и др., 2002, 2003, 2004, 2005, 2007;
А. И. Петенко, 2003;
А. Кощаев, А. Петенко, А. Калашников, 2006;
А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, 2007;
И. А. Лебедева, 2011;
Н. Пышманцева и др., 2011).
До конца не изученными остаются вопросы определения наиболее эффективных штаммов микроорганизмов или их ассоциаций, рациональных доз и схем применения пробиотиков в промышленном птицеводстве, в частности перепеловодстве, что позво ляет более полно раскрыть биоресурсный потенциал птиц. В связи с этим ученым со ветом ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» утвержден тематический план научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ на 2011-2015 гг. от 20 декабря 2010 г, протокол № 10. Диссертационная работа является разделом научных исследований, в соответствии с темой № 12: «Разработка и научное обоснование способов получения и использования экологически безопасных функцио нальных кормовых и пищевых концентратов и добавок на основе ресурсосберегающих биотехнологий: высококалорийные концентраты и добавки;
микробиологические до бавки и биопрепараты» (№ госрегистрации 01201153631).
Цели и задачи исследований. Цель работы – изучение возможности повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы за счет но вой пробиотической кормовой добавки в сравнении с рыночным аналогом, как прие мов оптимизации процессов пищеварения, морфо-биохимического статуса крови и об мена веществ, обуславливающих высокий уровень сохранности поголовья, проявления мясной и яичной продуктивности, биологической ценности мяса и яиц птицы.
В соответствии с целью были поставлены задачи:
разработать технологию получения высокоэффективной пробиотической кормовой добавки «Промомикс» на основе сочетанного использования молочно кислых и пропионовокислых микроорганизмов для формирования новых функ циональных свойств, обеспечивающих оптимальный уровень реализации биоре сурсного потенциала перепелов японской породы;
оценка реализации биоресурсного потенциала перепелов при использова нии разработанной пробиотической добавки «Промомикс» в сравнении с рыноч ным аналогом «Пробиолакт»;
изучить влияние используемых пробиотических кормовых добавок на пере варимость питательных веществ комбикормов, а также физиологические, биохими ческие и морфологические показатели перепелов японской породы;
определить влияние пробиотических кормовых добавок на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов японской породы;
установить влияние исследуемых пробиотических кормовых добавок на ка чество получаемой продукции;
предложить производству схему использования и дать рекомендации по применению изучаемых пробиотических кормовых добавок при разведении перепе лов японской породы.
Научная новизна. Разработана новая пробиотическая кормовая добавка «Про момикс» (СТО 9291-008-00493209-13) на основе молочнокислых и пропионовокис лых микроорганизмов. Государственным управлением ветеринарии по Краснодар скому краю утверждены «Методические рекомендации по применению пробиотиче ской кормовой добавки «Промомикс» в хозяйствах по выращиванию перепелов», протокол № 3 от 29 октября 2012 года.
Впервые оценена возможность использования ассоциации молочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов в качестве продуцентов биологически актив ных субстанций в составе рационов для перепелов. Проведены сравнительные ис пытания влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на качественный и количественный состав микрофлоры кишечника перепелов япон ской породы. За счет использования пробиотических кормовых добавок «Пробио лакт» и «Промомикс», впервые показана возможность повышения уровня реализа ции биоресурсного потенциала перепелов по живой массе и яйценоскости на сред нюю несушку. Предложена экономически эффективная схема применения пробио тических кормовых добавок «Промомикс» и «Пробиолакт» на перепелах японской породы на основе комплексной оценки мясной и яичной продуктивности, качества получаемой продукции и физиолого-биохимического статуса птицы.
Практическая значимость работы. Результаты изучения эффективности приме нения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» раскрывают возможности повышения уровня реализации потенциала продуктивности перепелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых качеств яиц:
1. Применение в рационах перепелов до 42-х дней пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» обуславливает повышение прироста живой массы птицы на 5,02-6,32 и 5,24-5,67 %;
сохранности поголовья на 2,7-4,0 и 2,0 3,4 %;
снижение расхода кормов на килограмм прироста живой массы на 2,2-3,4 и 3,4-3,7 %. Повышается выход потрошенной тушки птицы на 11,35-14,78 и 10,48 14,16 %, а также содержание аминокислот в мясе перепелов по изолейцину на 19, и 16,74 %, метионину 28,69 и 25,88 % и фенилаланину 15,54 и 14,60 %.
2. Использование пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промо микс» в рационах перепелок-несушек способствуют сокращению срока начало яй цекладки на 4 и 3 дня;
повышению сохранности, в среднем, на 9,0 % и яйценоскости на среднюю несушку на 18,39 и 12,24 %. Птица реализует не только биологические ре сурсы яичной продуктивности, но и производит яйца с лучшими товарными и биохи мическими показателями, так масса яиц больше на 5,35 и 7,48 %, количество витами на В2 в желтке на 10,33 и 9,24 %, уровень каротиноидов на 11,43 и 9,01 %.
3. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промо микс» при выращивании перепелов японской породы позволяет повысить прибыль на 13,51 и 20,54 %.
Результаты исследования эффективности применения пробиотических кормо вых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» могут быть использованы в хозяйствах по разведению данной птицы для повышения её сохранности, продуктивности и по лучения высококачественной мясной и яичной продукции.
Основные положения выносимые на защиту:
новые элементы технологии получения пробиотической кормовой добавки «Промомикс» для повышения уровня реализации потенциала продуктивности пере пелов японской породы, их сохранности, улучшения состава мяса и пищевых ка честв яиц позволяют получить кормовой продукт, дающий хороший биологический и экономический эффект в составе стандартных рационов для перепелов;
применение в составе комбикормов для перепелов новой пробиотической кормовой добавки «Промомикс» способствует повышению живой массы птицы, яй ценоскости на среднюю несушку, сохранности поголовья, снижению расхода кормов на килограмм прироста живой массы и 10 яиц;
использование в рационе перепелов разработанной пробиотической кормо вой добавки «Промомикс» способствует активизации обменных процессов за счет позитивного влияния на динамику морфологических и биохимических показателей крови птиц;
добавление в комбикорм перепелов изучаемых пробиотических добавок по вышает в желудочно-кишечном тракте птиц содержание полезной микрофлоры и снижает условно-патогенной;
в результате использования пробиотиков повышается биологическая пол ноценность мяса перепелов, а также улучшаются товарные и биохимические по казатели яиц птиц.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы докладывались на:
Ежегодных научных конференциях (Краснодар, КубГАУ, 2010-2012) Мiжнародноi научково-практичноi конференцii «Зоотехнiчна наука: iсторiя, проблеми, перспек тиви» (Камянець-Подiльський, 2011);
Юбилейной научно-практической конферен ции, посвященная 50-ти летию факультета ветеринарной медицины АГАУ, 100 летию со дня рождения д.б.н., профессора И.С. Ржанициной (Барнаул, 2012);
Меж дународной студенческой конференции «Знание молодых для развития ветеринар ной медицины и АПК страны» (Санкт-Петербург, 2012).
Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано 7 научных статей, в том числе 4 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ (Журналы: «Птицеводство» – 1, «Ветеринария Кубани» – 2, «Труды КубГАУ» – 1).
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора лите ратуры, материалов и методов исследований, результатов исследований, выводов, предложений производству, списка литературы и приложения. Содержание рабо ты изложено на 124 страницах машинописного текста, включая 5 приложении, содержит 27 таблиц и 5 рисунков. Библиографический список состоит из 237 ис точников, в том числе 29 иностранных авторов.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Работа проводилась с 2009 по 2012 год на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики факультета перерабатывающих технологий, в виварии факультета вете ринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета, в Кро поткинской краевой ветеринарной лаборатории, в фермерском хозяйстве республи ки Адыгея.
Объектом исследований являлись две пробиотические кормовые добавки:
1. «Пробиолакт» (ТУ 9291-001-64038840-2010) – сухая пробиотическая кормо вая добавка, представляющая собой смесь молочнокислых и симбиотических бифи добактерий. Количество КОЕ/г – 2,5 109. Производитель ООО НПО «Биотехноло гии Кавказа», Краснодарский край. В перепеловодстве до наших исследований дан ная добавка не применялась.
2. Новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-008 00493209-13) – представляет собой жидкую смесь молочнокислых и пропионово кислых микроорганизмов, выращенных на молочно-растительной среде. Препарат является разработкой кафедры биотехнологии, биохимии и биофизики КубГАУ и производится в содружестве с ОНО «Экспериментальная биофабрика» г. Углич. По дана заявка на изобретение.
Исследования проводились на перепелах японской породы (Coturnix japonica) яичного направления. Всего в опытах было использовано 1500 перепелов.
В ходе исследований было проведено 2 научных эксперимента и производст венное испытание.
За основу нами была взята технология содержания перепелов, представленная в работах С. Зиброва (С. Зиброва, 2010, 2011). С первых суток до 42-х дней самок и самцов содержали вместе, а в 42-х дневном возрасте нами формировались производ ственные группы и переводились в клетки по 40 голов (из них 34 самки) для полу чения яиц. Выбракованных перепелов отправляли на убой для получения тушек и дальнейшей реализации.
Целью первого научного опыта было определение влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на рост, развитие и мясную про дуктивность перепелов японской породы до формирования производственных групп самок на яйцекладку. Продолжительность опыта составила 42 дня. Опыт проводили в виварии факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграр ного университета.
Для проведения опыта нами было сформировано по принципу групп-аналогов три группы перепелов по 50 голов: I группа – контрольная, которую кормили стан дартным комбикормом, рекомендованным ВНИТИП;
II опытная группа – с кормом задавали пробиотическую кормовую добавку «Пробиолакт» в дозе 0,2 % на массу корма;
III опытная группа – в комбикорм добавляли новую пробиотическую кормо вую добавку «Промомикс» в дозе 0,2 % на массу корма (таблице 1).
1. Схема первого научного опыта Количество Группы Условия кормления голов ОР – основной рацион (полнорационный комбикорм – ПК) I-контроль ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) II-опытная ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК) III-опытная Перепелов содержали в деревянных пятиярусных клетках собственной конст рукции. Технологические параметры содержания – температура, влажность воздуха, освещенность – выдерживались в соответствии с нормами ВНИТИП.
Кормление перепелов в опытные периоды осуществлялось комбикормом, сба лансированным по основным питательным и биологически активным веществам в соответствии с возрастными нормами ВНИТИП. Другие условия кормления и со держания в контрольной и опытных группах были одинаковыми.
В ходе проведения первого научного эксперимента учитывались следующие по казатели: динамика живой массы, сохранность, прирост живой массы, потребление кормов, переваримость и баланс питательных веществ, показатели мясной продуктив ности в 42-х дневном возрасте, морфологические и биохимические показатели крови, микробиологические показатели кишечника.
Второй научный опыт проведен в хозяйстве республики Адыгея и состоял из двух этапов: 1-й этап – подтверждение результатов влияния пробиотических кормо вых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на рост, развитие и мясную продуктив ность перепелов японской породы до 42-х дней и 2-ой этап – определение влияния исследуемых пробиотических кормовых добавок на яичную продуктивность пере пелов японской породы после формирования производственных групп.
Перепела содержались в специально сконструированных производственных шестиярусных клетках. Поение осуществлялось из ниппельных поилок, к кото рым птица имела постоянный доступ. Раздачу кормов производили вручную.
Технологические параметры – температура, влажность воздуха, освещенность – выдерживались в соответствии с нормами ВНИТИП. Кормление осуществляли по общей схеме. Условия содержания перепелов контрольной и опытных групп были одинаковыми.
Опыт проводили методом групп-аналогов по 150 голов в каждой (таблица 2).
Схема первого этапа соответствовала схеме первого научного эксперимента.
В 42-х дневном возрасте для учета яичной продуктивности, формировали про изводственные группы по 40 голов в каждой (34 самки и 6 самцов). Выбракованную птицу отправляли на убой для получения тушек.
2. Схема второго научного опыта Количество Группы Условия кормления голов до 42-х дневного возраста ОР – основной рацион (полнорационный комбикорм – ПК) I-контроль ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) II-опытная ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК) III-опытная после 42-х дневного возраста ОР – основной рацион (полнорационный комбикорм – ПК) I-контроль ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) II-опытная ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК) III-опытная В ходе второго научного опыта учитывали следующие показатели: динамику живой массы, сохранность, прирост живой массы, потребление кормов, показатели мясной продуктивности выбракованной птицы в 42-х дневном возрасте, возраст птицы на начало яйцекладки, интенсивность яйцекладки, качественные характери стики яйца, затраты кормов в период интенсивной яйцекладки, морфологические и биохимические показатели крови перепелок-несушек.
Производственную апробацию пробиотических кормовых добавок «Пробио лакт» и «Промомикс» проводили на 900 перепелах японской породы в хозяйстве республики Адыгея.
Схема производственных испытаний исследуемых пробиотических кормовых добавок представлена в таблице 3.
3. Схема производственных испытаний пробиотических кормовых добавок Количество Группы Условия кормления голов до 42-х дневного возраста ОР – основной рацион (полнорационный комбикорм – ПК) I-контроль ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) II-опытная ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК) III-опытная после 42-х дневного возраста ОР – основной рацион (полнорационный комбикорм – ПК) I-контроль ОР + «Пробиолакт» (0,2 % к массе ПК) II-опытная ОР + «Промомикс» (0,2 % к массе ПК) III-опытная В процессе проведения производственных испытаний учитывали следующие показатели: динамику живой массы, сохранность, потребление кормов, прирост живой массы до 42-х дневного возраста, возраст птицы на начало яйцекладки, ин тенсивность яйцекладки, затраты кормов в период интенсивной яйцекладки, эко номическую эффективность применяемых пробиотических кормовых добавок в условиях производства.
Определение учитываемых показателей в научных опытах и производственном испытании проводили согласно действующим методикам и нормативным документам.
Для определения морфологических и биохимических показателей крови и ее сыворотки от 10 голов в каждой группе в возрасте 42-х и 154-х дней при контроль ном убое брали кровь в специальные пробирки с антикоагулянтом.
Определение морфологических показателей крови перепелов проводили на анализаторе Medonic CA 620. Лейкоформулу подсчитывали в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (А. А. Кудрявцев, Л. А. Кудрявцева, 1973).
Определение биохимических показателей сыворотки крови проводили на по луавтоматическом анализаторе Stat fax 1904 Plus и спектрофотометре Unico UK/VIS.
Для оценки качества яиц изучали содержание в них витаминов (А, В2) и кароти ноидов (Ю. З. Буртов, 1990). Отбор проб осуществляли 3 раза в период интенсивной яйцекладки птицы, через каждые четыре недели, по 10 яиц (Ш.А. Имангулов, 2004).
Исследование витамина А проводили на жидкостном хромотографе Wathers HPLC, витамина В2 на флюорате 02-2 М (фирмы Люмекс), каротиноидов на фотометре КФК 3-01-«ЗОМЗ».
Качественные показатели мяса определяли общепринятыми методами: отбор проб мяса осуществляли по ГОСТ 9792-73, определение влаги ГОСТ 9793-74, жи ра ГОСТ 23042-78, белка ГОСТ 25011-81. Энергетическую ценность мышц оп ределяли по методике, рекомендованной ВНИТИП.
Содержание аминокислот белка мышц перепелов определяли методом капил лярного электрофореза на приборе Капель – 103 РТ.
Для определения переваримости питательных веществ комбикорма был прове дён физиологический (балансовый) опыт на перепелах в период с 37 по 42 сутки (Ш. А. Имангулов, 2004).
Химический анализ кормов и выделений проводили по ГОСТ и согласно «Ме тоды исследования кормов, органов и тканей животных» (П. Т. Лебедев, А. Т. Усович, 1965).
Определение количественного и качественного состава микрофлоры кишечни ка перепелов сравниваемых групп проведены сразу после контрольного убоя пере пелов в возрасте 42-х дней. При отборе проб, посеве и определении состава микро флоры кишечника пользовались методическими рекомендациями по выделению и идентификации бактерий желудочно-кишечного тракта животных (Методические рекомендации, 2004).
В ходе опытов по определению зоотехнических и хозяйственных показателей руководствовались методическими рекомендациями ВНИТИП «Проведение на учных и производственных исследований по кормлению сельскохозяйственной птицы» (Ш.А. Имангулов, 2004) и справочным пособием «Инкубация яиц» (Ю.З.
Буртов, 1990).
Расчет экономической эффективности использования пробиотических кормо вых добавок в рационах перепелов японской породы проводили с учетом стоимости расхода кормов и добавок на 1 кг прироста живой массы и на 10 яиц.
Все результаты исследований обрабатывали биометрическими методами мате матической статистики (Б.А. Доспехов, 1980). Статистически достоверными считали различия при Р 0,05.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1 ОСНОВНЫЕ АСПЕКТЫ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ И ОЦЕНКИ СОСТАВА ИЗУЧАЕМЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК Как указывалось выше, объектом исследований являлись две пробиотические кормовые добавки:
1. «Пробиолакт» (ТУ 9291-001-64038840-2010) – сухая пробиотическая кормовая до бавка, производится ООО НПО «Биотехнологии Кавказа», Краснодарский край. Пред ставляет собой концентрат четырех штаммов молочнокислых бактерий и трех штаммов симбиотических бифидобактерий: Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactoba cillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei и симбиотические бифидоактерии Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium adolescentis. Концентрация КОЕ/г – 2,5109.
По внешнему виду ПК «Пробиолакт» представляет собой сухой порошок от светло-кремового до кремового цвета с чистым кисломолочным вкусом и запахом, полученный методом глубинного культивирования в биоферментаторах с после дующей сублимационной сушкой нативной формы препарата в защитной среде.
2. Новая пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» (СТО 9291-008 00493209-13) является разработкой кафедры биотехнологии, биохимии и биофизики КубГАУ и производится в содружестве с ОНО «Экспериментальная биофабрика» г. Углич. Включает в себя ассоциацию следующих видов бактерии: в качестве Lac tobacillus acidophilus используют штаммы Lactobacillus acidophilus РКМБ – 6А и РКМБ – 9А, в качестве Lactobacillus plantarum - штаммы Lactobacillus plantarum РКМБ – 2ПЛ и РКМБ – 1ПЛ, в качестве бактерий вида Propionibacterium shermanii используют штаммы Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii РКМБ – 8П и РКМБ – 6П, в качестве Lactococcus lactis - штаммы Lactococcus lactis subsp. lactis РКМБ – М199 и РКМБ – 90С.
Пробиотическая кормовая добавка «Промомикс» включает в себя микроорга низмы, способные развиваться в желудочно-кишечном тракте птицы, оказывая по ложительное влияние на организм хозяина. Так, молочнокислые микроорганизмы Lactococcus lactis, Lactobacillus plantarum и бактерии вида Lactobacillus acidophilus, попадая в организм хозяина, нормализуют микрофлору желудочно-кишечного трак та, выделяют биогенные органические кислоты (и в первую очередь молочную), ин гибируя рост и развитие патогенной микрофлоры. Propionibacterium применяются в качестве продуцента пропионовой кислоты, которая подавляет рост условно патогенных микроорганизмов, а также являются активными продуцентами витами нов группы B (B12, B2, пантотеновая и никотиновые кислоты).
Все указанные в добавке штаммовые культуры входят в Российскую коллекцию молочнокислых микроорганизмов ГНУ «Всероссийский НИИ маслоделия и сыроде лия», включенной Постановлением Правительства РФ от 24.06.1996 г. № 725-47 в «Перечень коллекций, депонирующих для государственных нужд микроорганизмы, культивируемые клетки растений и соматические клетки позвоночных». Культуры выделены из естественных или производственных источников без применения ген ных модификаций, идентифицированы и паспортизованы в установленном порядке.
Входящие в состав микрофлоры культуры традиционно применяются при про изводстве ферментированных молочных продуктов в России и за рубежом и вклю чены в перечень микроорганизмов с документально подтвержденной историей безопасного использования в пищевых продуктах (Бюллетень Международной Мо лочной Федерации № 377/2002) и согласно классификации микроорганизмов, при веденной в Санитарных правилах СП 1.2.731-99, относятся к микроорганизмам не патогенным для человека.
Готовая добавка имеет титр не менее 1 млрд. КОЕ/мл и представляет собой жидкую светло-зеленого цвета смесь с кисломолочным запахом.
Для получения жидкой пробиотической добавки «Промомикс» использовали лиофилизированный бактериальный концентрат с содержанием лактобацилл не ме нее 50 млрд. КОЕ/г, пропионовокислых бактерий не менее 10 млрд. КОЕ/г и лакто кокков не менее 100 млрд. КОЕ/г, производимый ОНО «Экспериментальная био фабрика» г. Углич. Для культивирования микроорганизмов использовали питатель ные среды на основе сыворотки из цельного молока, а также варианты сред с обо гащением экстрактом томатного сока, в качестве стимулятора роста молочнокислой и пропионовокислой флоры.
Технологический процесс получения пробиотической добавки «Промомикс» включает три этапа:
– получение лабораторной культуры. В стерильных условиях образец лиофи лизированного бактериального концентрата вносили в питательную среду объёмом 1 л на основе молочной сыворотки, обогащённой экстрактом томатного сока. Куль тивирование осуществляли в течении 18 ч при температуре 34 °С в термостате;
– получение маточной (засевной) культуры. 5 % лабораторной закваски (куль туры) в стерильных боксах засевали в питательную среду того же состава. Культи вирование осуществляли в течении 18 ч при температуре 34 °С в термостате;
– далее маточную культуру в количестве 5 % к рабочему объему ферментера переносили в аппарат. Культивирование осуществляли в питательной среде на осно ве молочной сыворотки в течении 24 ч при периодическом перемешивании (20 30 об/мин), при температуре 34 °С, рН = 7,0-7,2, которую поддерживали в течении всего времени культивирования, путем подщелачивания 10-% раствором КОН. Про цесс проводили без аэрации. Каждые 6 часов отбирали пробу на биохимические и микробиологические анализы. После достижения через сутки титра 109 КОЕ/мл, асептически биомассу переносили в предварительно простерилизованные ёмкости.
3.2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК В КОРМОСМЕСЯХ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ МЕТАБОЛИЗМА И ПОВЫШЕНИЯ МЯСНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ ПЕРЕПЕЛОВ Согласно методике исследований, представленной в разделе 2, при определе нии влияния пробиотических кормовых добавок на рост, развитие и мясную продук тивность перепелов японской породы, был проведён первый научный опыт, а под тверждением ему по некоторым хозяйственным показателям стал первый этап вто рого научного эксперимента.
3.2.1 РОСТ И РАЗВИТИЕ ПЕРЕПЕЛОВ Результаты первого научного опыта по основным зоотехническим показате лям перепелов представлены в таблице 4.
4. Сохранность, динамика живой массы и расход комбикормов перепелами в первом научном опыте, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Сохранность за период выращивания, % 92 96 Динамика живой массы, г Суточные 7,32±0,10 7,34±0,10 7,35±0, 7 дней 23,40±0,58 22,39±0,69 23,91±0, 14 дней 40,74±1,42 45,37±1,91 43,62±1, 21 день 73,93±1,15 83,50±1,33* 83,30±1,55* 28 дней 100,06±0,32 108,77±1,13* 107,20±0,59* 35 дней 130,32±3,04 138,71±3,41 135,64±2, 42 день 147,31±2,22 156,18±3,04 155,28±3, Прирост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня) Одной головы в среднем, г 139,99 148,84 147, Среднесуточный, г 3,33 3,54 3, Расход комбикорма за период выращивания (0-42 дня) На 1 голову, г 598,56 615,54 608, На 1 кг прироста, кг 4,28 4,13 4, Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Данные таблицы 4 показывают, что в первую неделю жизни интенсивность прироста живой массы перепелов была высокой и увеличилась за данный период почти в 3 раза. Однако, в разрезе групп этот показатель не имел существенных различий. К четырнадцатому дню живая масса перепелов в опытных группах пре высила этот показатель к контрольной на 11,36 и 7,07 %. В 21-м дневном возрасте живая масса перепелов во II и III группах составила 83,50 и 83,30 г, что больше, чем в контрольной на 12,94 и 12,67 % (P 0,05).Затем интенсивность роста у пе репелов опытных групп стала незначительно снижаться, но разница по сравнению к контрольной сохранилась. Так, в 28-ми дневном возрасте живая масса перепе лов во II и III группах составила 108,77 и 107,20 г, что больше, чем в I группе на 8,70 и 7,13 % (P 0,05). В 35-ти дневном возрасте живая масса перепелов II груп пы составила 138,71 г, III – 135,64 г, что больше по сравнению с контролем на 6,44 и 4,08 %. К 42-х дневному возрасту живая масса перепелов во II и III группах достигла 156,18 и 155,28 г, что больше, чем в I группе на 6,02 и 5,35 %.
Следует отметить, несмотря на то, что потребление кормов перепелами II и III групп было больше, чем в контрольной, их затраты на прирост живой массы были меньше на 3,5 и 3,7 %.
В целом зa период выращивания перепелов японской породы (0-42 дня) в пер вом научном опыте прирост живой массы птицы II и III групп составил 148,84 и 147,93 г, что больше по сравнению с I группой на 6,32 и 5,67 %.
Сохранность перепелов II и III групп составила 96 и 94 %, против 92 % в I группе.
Данные второго научного опыта до 42-х дней по основным зоотехническим по казателям перепелов представлены в таблице 5.
5. Сохранность, динамика живой массы и расход комбикормов перепелами до 42-х дневного возраста во втором научном опыте, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Сохранность за период выращивания, % 94,6 97,3 98, Динамика живой массы, г Суточные 7,49±0,14 7,63±0,15 7,46±0, 7 дней 23,62±0,42 24,90±0,57 25,95±0, 14 дней 49,97±1,67 53,75±1,33 51,17±1, 21 день 81,32±1,77 85,03±1,51 83,95±1, 28 дней 106,17±2,01 118,47±1,77* 117,46±1,51* 35 дней 130,78±2,09 142,86±1,72* 141,75±1,53* 42 день 152,79±3,01 160,23±3,13 160,38±2, Прирост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня) Одной головы в среднем, г 145,30 152,60 152, Среднесуточный, г 3,46 3,63 3, Затраты комбикорма за период выращивания(0-42 дня) На 1 голову, г 603,45 620,33 614, На 1 кг прироста, кг 4,15 4,06 4, Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Из данных таблицы 5 видно, что во втором научном опыте, как и в первом, при рост живой массы перепелов за период выращивания (0-42 дня) в опытных группах был больше по сравнению к контрольной. Так у перепелов II группы прирост живой массы составил 152,60 г (среднесуточный – 3,63 г), в III – 152,92 г (среднесуточный – 3,64 г) против 145,30 г (среднесуточный – 3,46 г) в контрольной группе.
Затраты комбикормов на 1 кг прироста у перепелов II и III групп составили 4, и 4,01 кг, что меньше по сравнению с контрольной на 2,17 и 3,37 %. Сохранность за период выращивания (0-42 дня) составила у перепелов II группы 97,3 %, III – 98,0 % против 94,6 % в контрольной.
3.2.2 МЯСНАЯ ПРОДУКТИВНОСТЬ, РАЗВИТИЕ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ И КАЧЕСТВО МЯСА ПЕРЕПЕЛОВ Результаты контрольного убоя птицы первого научного опыта, представ ленные в таблице 6, убеждают, что средняя масса потрошеной тушки перепелов II и III групп больше по сравнению с контрольной на 11,35 и 10,48 % (P 0,05).
В целом, средняя масса всех мышц у перепелов II и III групп составила 61,41 и 61,76 г, что на 22,38 и 23,08 % больше по сравнению к контрольной (P 0,05).
Достоверных различий по массе внутренних органов у перепелов в группах не выявлено.
Аналогичная тенденция наблюдалась по изучаемым показателям при анато мической разделке тушек перепелов во втором научном опыте, результаты кон трольного убоя которого представлены в таблице 7.
6. Мясная продуктивность и развитие внутренних органов перепелов в первом научном опыте, n = Группы Показатели I-контроль III-опытная III-опытная Живая масса птицы перед убоем, г 150,62±3,27 160,12±3,55 157,27±3, Масса потрошеной тушки, г 104,30±1,64 116,14±1,81* 115,23±1,69* Масса бедренных мышц, г 10,62±0,31 13,97±0,45* 14,22±0,61* Мышцы голени, г 7,12±0,12 8,51±0,29* 8,21±0,23* Масса грудных мышц, г 27,44±0,52 32,25±0,51* 32,93±0,63* Остальные мышцы, г 5,00±0,14 6,68±0,20* 6,40±0,22* Всего мышц, г 50,18±1,15 61,41±1,30* 61,76±1,16* Печень, г 3,73±0,09 3,76±0,11 3,75±0, Сердце, г 1,91±0,08 1,94±0,07 1,92±0, Мышечный желудок, г 2,99±0,10 3,22±0,09 3,10±0, Кишечник, г 5,32±0,16 5,69±0,17 5,42±0, Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) 7. Мясная продуктивность и развитие внутренних органов перепелов на 42-е сутки во втором научном опыте, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Живая масса птицы перед убоем, г 152,93±3,41 163,54±3,15 163,32±3, Масса потрошеной тушки, г 110,32±2,11 125,10±2,43* 124,48±2,09* Масса бедренных мышц, г 11,33±0,29 13,02±0,33 12,54±0, Мышцы голени, г 7,32±0,11 8,85±0,22* 8,74±0,31* Масса грудных мышц, г 28,75±0,57 33,27±0,84* 34,15±0,92* Остальные мышцы, г 5,73±0,13 7,22±0,16* 7,47±0,09* Всего мышц, г 53,13±1,11 62,36±1,03* 62,90±1,18* Печень, г 3,42±0,14 3,51±0,12 3,44±0, Сердце, г 1,45±0,05 1,44±0,05 1,49±0, Мышечный желудок, г 2,59±0,09 3,01±0,10 2,99±0, Кишечник, г 5,30±0,11 5,46±0,15 5,52±0, Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Из данных таблицы 7 видно, что средняя масса потрошеной тушки перепелов II и III групп составила 125,10 и 124,48 г, что больше этого показателя в I группе на 14,78 и 14,16 г (P 0,05). Масса всех мышц у перепелов II и III групп составила, 62,36 и 62,90 г, что на 9,23 и 9,77 г больше по сравнению с контрольной (P 0,05).
Достоверных различий по массе внутренних органов у перепелов не выявлено.
Результаты исследований основных показателей химического и аминокислот ного состава мяса перепелов представлены в таблице 8 и 9.
Из таблицы 8 видно, что наблюдается тенденция к возрастанию количества белка в мясе перепелов II и III групп в первом научном опыте на 0,24 и 0,21 %, а во втором опыте – 0,32 и 0,56 % и уменьшению количества жира в мышцах перепелов в первом научном опыте на 0,01 и 0,05 %, а во втором опыте – 0,10 и 0,07 %.
8. Химический состав мышц перепелов, % Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Первый научный опыт Влага 76,13±2,23 75,89±2,01 75,93±2, Белок 20,25±0,73 20,49±0,71 20,46±0, Жир 3,13±0,11 3,12±0,10 3,08±0, Зола 0,48±0,02 0,50±0,02 0,53±0, Энергии в 1 кг мышц, кДж 6074,88 6128,17 6105, Второй научный опыт Влага 75,52±2,45 75,68±2,27 75,19±2, Белок 20,37±0,71 20,69±0,65 20,93±0, Жир 3,32±0,13 3,22±0,09 3,25±0, Зола 0,79±0,03 0,41±0,01 0,63±0, Энергии в 1 кг мышц, кДж 6178,98 6215,61 6284, 9. Аминокислотный состав мяса перепелов, мг/г Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Валин 60,45±2,17 62,13±2,01 61,79±2, Изолейцин 40,62±1,12 48,53±1,01* 47,42±0,92* Лейцин 85,57±2,43 86,17±2,31 87,37±2, Лизин 67,76±2,75 68,21±2,56 68,83±2, Метионин + цистин 32,28±0,83 41,54±1,14* 40,63±1,03* Треонин 42,68±1,34 43,18±1,61 42,82±1, Фенилаланин + тирозин 56,90±1,25 65,74±1,13* 65,19±1,09* Триптофан 20,18±0,61 22,13±0,72 21,54±0, Сумма незаменимых аминокислот 406,44 434,63 432, Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Данные таблицы 9 показывают, что в мясе перепелов II и III групп достоверно повышается по сравнению с I группой содержание изолейцина на 19,47 и 16,74 %, метионина 28,69 и 25,88 % и фенилаланина 15,54 и 14,60 % (P 0,05). Общее со держание незаменимых аминокислот в мясе перепелов опытных групп больше, чем в контроле в среднем на 6,7 %.
Дегустационная оценка грудных, бедренных мышц перепелов и бульона из них в опытных группах была высокой. Во всех изучаемых группах мясо имело приятный аромат и вкус, характеризовалось средней жесткостью, и было достаточно сочным.
Посторонних запахов или привкусов, которые могли бы придать мясу и бульону изучаемые пробиотические кормовые добавки, не установлено.
3.2.3 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПЕРЕПЕЛОВ Для определения влияния пробиотических кормовых добавок на морфологи ческие и биохимические показатели была взята кровь перепелов в возрасте 42-х дней. Результаты её исследований, представленные в таблице 10 и 11, убеждают что достоверных различий между группами перепелов по морфологическим пока зателям не наблюдалось. Однако, содержание гемоглобина у перепелов во II группе на 4,70 %, а в III на 6,23 % больше по сравнению с контрольной. Количе ство тромбоцитов было больше у перепелов опытных групп, чем в контрольной на 4,07 и 3,37 %.
10. Морфологические показатели крови перепелов, n = Норма Группы (Кудрявцев А.А., 1977) Показатели Колебания Среднее I-контроль II-опытная III-опытная Эритроциты, 10 /л 3,39±0,07 3,49±0,08 3,51±0,10 3,2-4,4 3, Гемоглобин, г/л 129,13±4,68 135,19±3,17 137,18±4,32 128-157 Тромбоциты, 109/л 123,18±3,51 128,20±3,64 127,34±4,01 – Лейкоциты, 109/л 23,30±0,72 22,40±0,6 23,03±0,70 16,0-29,9 23, Лейкоцитарная формула, % Базофилы 0,25±0,01 0,22±0,01 0,28±0,01 0-0,4 0, Эозинофилы 3,73±0,09 3,91±0,07 3,94±0,11 3,5-5,1 4, Псевдоэозинофилы 18,30±0,52 18,71±0,64 18,45±0,61 18,1-24,6 21, Лимфоциты 75,70±1,84 75,23±1,61 75,15±1,74 65,0-94,6 71, Моноциты 2,02±0,07 1,93±0,06 2,18±0,08 1,8-2,5 2, Следует отметить, что количество эритроцитов у перепелов II и III групп боль ше этого показателя в I группе на 2,95 и 3,53 %, а лейкоцитов меньше на 3,87 и 1,29 %. Это свидетельствует о благоприятном протекании обменных процессов и от сутствии воспалительных реакций в организме. Анализ лейкоцитарной формулы показывает, что существенных различий между группами по относительному ко личеству базофилов, эозинофилов, псевдоэозинофилов, лимфоцитов и моноцитов не выявлено. Они находились в пределах физиологических норм.
Как видно из данных таблицы 11, уровень холестерина в сыворотке перепе лов II и III групп меньше, чем у контрольных на 7,84 и 7,11 % (P 0,05). У них наблюдалось и достоверное повышение (P 0,05) количества фосфора на 0,20 и 0,67 ммоль/л и кальция на 0,72 и 0,62 ммоль/л.
11. Биохимические показатели сыворотки крови перепелов, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Общий белок, г/л 31,10±1,03 35,10±1,35 32,70±1, Альбумины, г/л 13,43±0,33 15,87±0,78 14,63±0, Глобулины, г/л 17,67±0,27 19,23±0,39 18,07±0, –, г/л 2,82±0,03 2,94±0,01 2,64±0, –, г/л 5,73±0,13 6,01±0,14 6,02±0, –, г/л 9,12±0,31 10,28±0,37 9,41±0, А/Г коэффициент 0,76±0,03 0,83±0,01* 0,81±0,01* Холестерин, ммоль/л 4,08±0,05 3,76±0,05* 3,79±0,04* Мочевая кислота, ммоль/л 175,21±3,76 163,31±4,50 163,24±4, АСТ, Ед/л 376,71±7,91 451,53±8,63* 438,04±6,72* АЛТ, Ед/л 28,13±1,04 32,21±1,17* 33,72±1,13* Фосфор, ммоль/л 2,20±0,04 2,50±0,03* 2,87±0,05* Кальций, ммоль/л 2,56±0,03 3,28±0,05* 3,18±0,04* Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Уровень ферментов АСТ у перепелов II и III групп больше, чем в контрольной на 74,82 и 61,33 Ед/л, а АЛТ на 4,10 и 5,59 Ед/л (P 0,05). Белковый индекс в сыво ротке крови перепелов II и III групп был достоверно больше по сравнению с контро лем на 9,21 и 6,58 % (P 0,05). Это говорит о более интенсивном протекании процес сов биосинтеза белка и белкового обмена. Достоверной разницы по содержанию мо чевой кислоты, общего белка и белковых фракций в группах не наблюдалось.
3.2.4 ПЕРЕВАРИМОСТЬ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ПЕРЕПЕЛАМИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК Данные о влиянии пробиотиков «Пробиолакт» и «Промомикс» на перевари мость перепелами питательных веществ комбикорма представлены в таблице 12.
12. Переваримость питательных веществ комбикорма, % Группы Питательные вещества I-контроль II-опытная III-опытная Сухое вещество 57,72±1,81 60,71±1,74 62,62±1, Органическое вещество 58,29±1,75 61,24±1,99 63,41±2, Сырой протеин 51,62±1,95 55,30±1,93 56,84±1, Сырой жир 80,31±3,65 82,71±3,61 82,10±3, Сырая клетчатка 42,30±2,01* 42,70±2,04* 35,13±1, БЭВ 39,64±0,98 54,20±1,56* 60,20±1,82* Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Перепела II и III групп переваривали питательные вещества комбикорма лучше, чем контрольные – сухое вещество на 2,99 и 4,9 %, органическое вещество на 2,95 и 5,12 %, протеин на 3,68 и 5,22 %, жир на 2,40 и 1,79 %, клетчатку на 7,17 и 7,57 % и без азотистые экстрактивные вещества (БЭВ) на 14,56 и 20,56 % (P 0,05). Это обусловлено тем, что включение в рацион перепелов пробиотических кормовых добавок способство вало подкислению среды пищеварительного тракта за счет образующихся органических кислот (молочной, пропионовой), а синтезирующийся пропионокислыми бактериями «Промомикса» витамин В12 способствует усилению обмена серосодержащих аминокис лот, что обеспечивало более интенсивное переваривание компонентов корма.
Обмен кальция и фосфора.
Влияние исследуемых пробиотических кормовых добавок на баланс и исполь зование минеральных веществ перепелами представлены в таблице 13.
13. Среднесуточный баланс и использование макроэлементов перепелами Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Кальций Принято с кормом, г 0,0990±0,0034 0,1041±0,0031 0,1030±0, Выделено в помёте, г 0,0608±0,0021 0,0550±0,0023 0,0532±0, Удержано в теле, г 0,0382±0,0018 0,0491±0,0023* 0,0498±0,0023* % от принятого 38,60±1,01 47,20±1,87* 48,40±1,96* Фосфор Принято с кормом, г 0,1030±0,0029 0,1042±0,0037 0,1060±0, Выделено в помёте, г 0,0760±0,0035 0,0668±0,0031 0,0665±0, Удержано в теле, г 0,0270±0,0012 0,0374±0,0017* 0,0395±0,0018* % от принятого 26,20±1,01 35,90±1,24* 37,30±1,31* Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Из данных таблицы 13 видно, что коэффициент использования минеральных ве ществ перепелами опытных групп был достоверно больше, чем в контрольной. Так, для кальция он составил у перепелов II группы 47,20 %, а в III – 48,40 % против 38,60 % к контрольной. Использование фосфора перепелами II и III групп – 35,90 и 37,30 %, в то время как в контроле 26,20 % (P 0,05).
3.2.5 МИКРОБИОЦЕНОЗ КИШЕЧНИКА У ПЕРЕПЕЛОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК Во время контрольного убоя в возрасте 42-х дней, было проведено микробио логическое исследование химуса кишечника перепелов контрольной и опытных групп, данные которого представлены в таблице 14. У перепелов II и III групп коли чество бифидобактерий достоверно больше по сравнению с контрольной в 26,66 и 6, раз, а молочнокислых бактерий в 8,33 и 1,66 раз (P 0,05).
14. Микробиологический анализ химуса кишечника перепелов, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Бифидобактерии, 1010 КОЕ/г 0,3±0,01 8,0±0,21* 2,0±0,07* Молочнокислые бактерии, 107 КОЕ/г 0,6±0,02 5,0±0,30* 1,0±0,03* Эшерихии, 103 КОЕ/г 5,0±0,17 0,3±0,01* 3,0±0,07* Энтерококки, 102 КОЕ/г 3,0±0,05 – – Стафилококки, 102 КОЕ/г 1,0±0,03 0,3±0,01* 0,4±0,01* Стрептококки, 102 КОЕ/г 5,0±0,21 0,4±0,01* 0,9±0,03* Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) Благодаря развитию полезных микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте перепелов опытных групп, наблюдалось статистически достоверное (P 0,05) вытес нение ими условно-патогенной микрофлоры. Так, титр эшерихий у перепелов II группы составил 3,0 102 КОЕ/г, в III – 3,0 103 КОЕ/г против 5,0 103 КОЕ/г в кон трольной. Количество энтерококков у перепелов опытных групп отсутствовало, в то время как в контрольной составило 3,0 102 КОЕ/г. Титр стафилококков в кишечнике перепелов II группы составил 3,0 101 КОЕ/г, а в III 4,0 101 КОЕ/г (P 0,05) про тив 1,0 102 КОЕ/г в контроле. У перепелов опытных групп в 1 г химуса обнаружено стрептококков 4,0 101 и 9,0 101 КОЕ/г, а в I группе 5,0 102 КОЕ/г.
Следовательно, под влиянием данных пробиотических кормовых добавок более активно происходило размножение лакто- и бифидобактерий, они оказывали инги бирующее действие на размножение в желудочно-кишечном тракте перепелов ус ловно-патогенных микроорганизмов. За счет этого наблюдается повышение жизне способности, улучшение переваримости и в итоге возрастание прироста живой мас сы птицы (табл. 4 и 5), а следовательно повышается уровень реализации биоресурс ного потенциала породы.
3.3 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК ДЛЯ КОРРЕК ЦИИ МЕТАБОЛИЗМА И ПОВЫШЕНИЯ ЯИЧНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ ПЕРЕПЕЛОК-НЕСУШЕК Для определения влияния пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» на яичную продуктивность перепелов японской породы во втором на учном опыте в 42-х дневном возрасте были сформированы из контрольной и опыт ных групп одноименные группы по 40 голов (34 самки и 6 самцов), которых про должали кормить, как и до 42-х дней.
3.3.1 ЯИЧНАЯ ПРОДУКТИВНОСТЬ ПЕРЕПЕЛОВ Учет яичной продуктивности перепелок-несушек начали в 42-х дневном воз расте, что определено стандартом технологии.
Данные основных хозяйственных показателей перепелок-несушек представле ны в таблице 15.
15. Хозяйственные показатели перепелок-несушек Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Количество несушек на 42-й день опыта, гол. 34 34 Количество несушек на конец опыта, гол. 30 33 Сохранность несушек, % 88,23 97,05 97, Количество несушек в среднем за опыт, гол. 32,76 33,62 33, Возраст при снесении первого яйца, дни 43 39 Период яйцекладки, дни 111 112 Валовый сбор яиц, шт. 2423 2944 Конверсия на 10 яиц, кг 0,50 0,44 0, Яйценоскость на среднюю несушку, шт. 73,96 87,56 83, Интенсивность яйценоскости, % 66,63 78,18 74, Из данных таблицы 15 видно, что количество несушек на конец эксперимента во II и III группах составило 33 головы, что больше по сравнению с контрольной на 8,82 %. Возраст при снесении первого яйца перепелами II и III групп отмечен в 39 и день, что раньше, чем в контрольной на 4 и 3 дня. Валовый сбор яиц за весь период учета яйцекладки (112 дней) у перепелов II группы составил 2944 шт., а в III – 2776 шт., что больше, чем в I группе на 521 и 353 яйца или 21,50 и 14,57 %. В целом, яйценоскость на среднюю несушку у перепелов II и III групп больше, чем в контроле на 18,39 и 12,24 %.
3.3.2 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА МОРФОЛОГИЧЕ СКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПЕРЕПЕЛОВ В ПЕРИОД ИНТЕНСИВНОЙ ЯЙЦЕКЛАДКИ Во втором научном опыте в 154-х дневном возрасте, проводили контрольный убой перепелок-несушек и взятие крови для исследований её морфологических и биохимических показателей. Исследования крови показали, что достоверной разни цы в морфологических показателях не наблюдалось. Все они находились в пределах физиологических норм. Результаты биохимических исследований крови перепелок несушек, представленные в таблице 16, убеждают, что добавка пробиотиков в их рацион положительно повлияла на биохимический состав крови.
Так, уровень холестерина у перепелов II и III групп меньше, чем в контроле на 7,75 и 6,78 % (P 0,05). У перепелов II и III групп наблюдалось достоверное пони жение (P 0,05) количества фосфора на 0,21 и 0,24 ммоль/л, кальция на 0,19 и 0,13 ммоль/л, глобулинов на 3,19 и 2,99 г/л. Уровень ферментов АСТ у перепелов II и III групп больше, чем в контрольной на 91,00 и 72,69 Ед/л, а АЛТ на 5,79 и 3,88 Ед/л (P 0,05).Это свидетельствует о высоком расходе резервов электролитов и амино кислот сыворотки крови, идущих на построение структур яйца перепелок-несушек в период интенсивной яйцекладки. Количество мочевой кислоты в крови перепелов II и III групп меньше, чем в контрольной на 12,15 и 10,98 % (P 0,05). Достоверной разницы по содержанию в сыворотке крови общего белка и альбуминов в группах не наблюдалось.
16. Биохимические показатели сыворотки крови перепелок-несушек, n = Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Общий белок, г/л 32,30±0,98 30,10±1,01 29,70±1, Альбумины, г/л 13,18±0,43 14,17±0,41 13,57±0, Глобулины, г/л 19,12±0,51 15,93±0,41* 16,13±0,57* А/Г коэффициент 0,69±0,03 0,89±0,04* 0,84±0,03* Холестерин, ммоль/л 4,13±0,05 3,81±0,04* 3,85±0,04* Мочевая кислота, ммоль/л 182,54±4,12 159,32±4,04* 162,63±4,05* АСТ, Ед/л 323,18±8,93 414,18±9,53* 395,87±9,87* АЛТ, Ед/л 33,42±1,12 39,21±1,03* 37,30±1,14* Фосфор, ммоль/л 2,22±0,09 2,01±0,06* 1,98±0,07* Кальций, ммоль/л 2,63±0,04 2,44±0,06* 2,50±0,04* Примечание: * – разница с контролем достоверна (P 0,05) 3.3.3 ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА КАЧЕСТВО ЯИЦ ПЕРЕПЕЛОК-НЕСУШЕК Для определения влияния пробиотических кормовых добавок на качественные показатели яиц перепелок-несушек были изучены их морфологические и биохими ческие показатели, данные которых представлены в таблице 17.
Таблица 17. Качественные показатели яиц перепелок-несушек Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Масса яйца, г 9,89±0,31 10,42±0,30 10,63±0, Толщина скорлупы, мм 0,108±0,003 0,119±0,004 0,125±0, В желтке Витамин А, мкг/г 11,53±0,39 12,13±0,38 13,21±0, Витамин В2, мкг/г 5,52±0,19 6,09±0,21 6,03±0, Каротиноиды, мкг/г 12,77±0,43 14,23±0,70 13,92±0, В белке Витамин В2, мкг/г 2,06±0,09 2,21±0,08 2,20±0, Достоверных различий по изучаемым показателям не выявлено, однако, на блюдалась тенденция к их возрастанию. Так, у перепелов II и III групп масса яиц больше по сравнению с контролем на 5,35 и 7,48 %, а толщина скорлупы на 11,11 и 16,66 %. Количество витамина В2 в желтке яиц перепелов II и III групп больше по сравнению с контролем и составило 6,09 и 6,03 мкг/г против 5,52 мкг/г. Уровень ка ротиноидов у перепелов опытных групп достиг 14,23 и 13,92 мкг/г против 12,77 мкг/г в контроле. В белке яиц количество витамина В2 у перепелов II и III групп больше, чем в контрольной на 0,15 и 0,14 мкг/г или 7,28 и 6,80 %.
3.4 ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ИСПЫТАНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ ДОБАВОК НА ПЕРЕПЕЛАХ В УСЛОВИЯХ ФЕРМЕРСКОГО ХОЗЯЙСТВА Апробация эффективности использования в рационах перепелов пробиотиче ских кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» была проведена в том же хо зяйстве на 900 перепелах японской породы (таблице 18).
18. Эффективность выращивания перепелов на мясную и яичную продуктивность при использовании пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» в производственных условиях Группы Показатели I-контроль II-опытная III-опытная Выращивание перепелов до 42-х дневного возраста Поголовье на начало опыта, гол. 300 300 Сохранность, % 95,0 97,3 97, Выбракованное количество голов на 42-е сутки, гол 165 172 Прирост живой массы перепелов всего, кг 24,89 27,49 27, Затраты корма всего, кг 99,43 105,93 104, Конверсия корма на 1 кг прироста, кг 3,99 3,85 3, Экономическая эффективность Стоимость израсходованного корма всего, руб. 1690,31 1800,81 1782, Стоимость потраченной добавки всего, руб. – 105,00 18, Стоимость израсходованного корма и добавки на 1690,31 1905,81 1801, прирост, руб.
Выручка от реализации мяса перепелов, руб. 4978,00 5498,00 5424, Прибыль от реализации мяса перепелов, руб. 3287,69 3592,19 3622, % к контролю 100,00 109,26 110, Выращивание перепелок-несушек после 42-х дневного возраста Поголовье несушек, гол. 102 102 Сохранность несушек, % 90,19 96,07 95, Валовый сбор яиц, шт. 13 347 15 677 15 Яйценоскость на среднюю несушку, шт. 140,34 156,84 160, Затраты корма за период яйцекладки (42-252 дня), кг 634,32 715,64 704, Затраты корма на 10 штук яиц, кг 0,48 0,46 0, Экономическая эффективность Стоимость израсходованного корма, руб. 9514,76 10734,63 10572, Стоимость израсходованной добавки, руб. – 715,00 126, Стоимость израсходованного корма и добавки за 9514,76 11449,63 10699, период яйцекладки всего, руб.
Выручка от реализации яиц, руб. 20 020,50 23 515,50 23 704, Прибыль от реализации яиц, руб. 10 505,74 12 065,87 13 004, % к контролю 100 114,85 123, Экономическая эффективность применения пробиотических кормовых добавок «Пробилакт» и «Промомикс» за весь период выращивания перепелов Прибыль от реализации мяса перепелов, руб. 3287,69 3592,19 3622, Прибыль от реализации яйца, руб. 10 505,74 12 065,87 13 004, Прибыль всего, руб. 13 793,43 15 658,06 16 627, % к контролю 100,00 113,51 120, Расчёты экономической эффективности применения пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промомикс» до 42-х дневного возраста показали, что при быль от реализации мяса перепелов во II и III группах составила 3592,19 и 3622,82 руб. против 3287,69 руб. в контрольной группе.
Анализ экономической эффективности применяемых пробиотических кормо вых добавок после формирования производственных групп перепелок на яйценос кость показал, что прибыль от реализации яиц перепелов II и III групп составила 12 065,87и 13 004,69 руб. против 10 505,74 руб. в контроле.
В итоге, прибыль от реализации мяса и яйца перепелов за весь период выращи вания птицы во II и III группах больше, чем в контрольной на 1864,63 и 2834,08 руб.
или 13,51 и 20,54 %.
4. ВЫВОДЫ 1. Мониторинг и результаты проведенных экспериментов с использованием ис следуемых пробиотических кормовых добавок показали, что уровень биоресурсного потенциала перепелов японской породы в фермерских хозяйствах реализуется не полностью. Разработанная пробиотическая добавка, сочетающая ассоциацию мо лочнокислых и пропионовокислых микроорганизмов позволяет повысить реализа цию биоресурсного потенциала птицы. Введение в состав новой пробиотической добавки «Промомикс» кроме молочнокислых кокков и бацилл, как представителей факультативной анаэробной микрофлоры еще и пропионовокислого штамма, как жесткого анаэроба синтезирующего другие функционально активные вещества (пропионовая кислота, витамины группы В) позволило получить кормовой продукт успешно решающий задачи повышения эффективности традиционных кормовых смесей при увеличении количества и качества продукции перепеловодства.
2. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промо микс» положительно влияет на уровень проявления хозяйственных показателей пе репелов в период их развития и интенсивной яйцекладки. Это подтверждается:
– превосходством сохранности перепелов в период их развития при использо вании «Пробиолакта» на 2,7-4,0 % и «Промомикса» на 2,0-3,4 %, а в период интен сивной яйцекладки, в среднем, на 9,0 %;
– большими приростами живой массы птицы при даче «Пробиолакта» на 5,02-6,32 % и «Промомикса» на 5,24-5,67 %, на фоне улучшения конверсии корма на 1 кг прироста живой массы у перепелов получавшие пробиотик «Пробиолакт» на 2,17-3,5 % и «Промомикс» – 3,37-3,70 %. При этом, средняя масса потрошеной туш ки перепелов, употреблявшие «Пробиолакт» на 12,36 % и «Промомикс» на 11,66 % больше, чем в контрольной группе;
– высокой интенсивностью яйценоскости перепелов при использовании «Про биолакта» на 11,55 % и «Промомикса» на 7,48 %, на фоне улучшения конверсии корма на десяток яиц у перепелов получавших пробиотик «Пробиолакт» на 12,0 % и «Промомикс» – 8,0 %.
3. Под влиянием «Пробиолакта» и «Промомикса» в крови перепелов, на уровне фи зиологических норм, увеличивается концентрация эритроцитов, гемоглобина, тромбо цитов, снижается уровень лейкоцитов, а также повышается содержание общего белка, его фракций и альбумино-глобулиновый коэффициент, но снижается мочевая кислота и холестерин, что свидетельствует об отсутствии негативных влияний на организм пере пелов со стороны используемых пробиотических добавок и более интенсивно проте кающих окислительно-восстановительных процессов, обмена веществ и энергии.
4. Переваримость питательных веществ и коэффициент использования мине ральных веществ комбикорма перепелами, которые получали пробиотические кор мовые добавки «Пробиолакт» и «Промомикс» были лучше, чем получавшие только основной рацион без добавок: по сухому веществу на 2,99 и 4,9 %, органическому веществу – 2,95 и 5,12 %, протеину – 3,68 и 5,22 %, жиру – 2,40 и 1,79 %, клетчатке – 7,17 и 7,57 %, безазотистым экстрактивным веществам (БЭВ) –14,56 и 20,56 %, по кальцию на 8,60 и 9,80 %, фосфору – 9,70 и 11,1 %, что обусловлено подкисле нием среды пищеварительного тракта органическими кислотами и другими биоло гически активными продуктами жизнедеятельности микроорганизмов.
5. Результаты микробиологических исследований показали, что ввод в рацион перепелов японской породы исследуемых пробиотических кормовых добавок обу словило усиление размножения полезных микроорганизмов и снижение количества условно-патогенных. Так, у перепелов, которые получали «Пробиолакт» количество бифидо- и лактобактерий было больше по сравнению с контрольной в 26,66 и 8,33 раза, а у перепелов, которые получали «Промомикс» больше в 6,66 и 1,66 раз.
6. Использование пробиотиков «Пробиолакт» и «Промомикс» положительно влияет на биохимические показатели мяса и яиц перепелов, что проявляется в:
– снижении в мясе перепелов количества жира, при одновременном повыше нии содержания белка, а также достоверном повышении по сравнению с контролем содержания таких незаменимых аминокислот, как изолейцина на 19,47 и 16,74 %, метионина 28,69 и 25,88 % и фенилаланина 15,54 и 14,60 %;
– увеличении у перепелов массы яиц на 5,35 и 7,48 %, количества витамина В2 в желтке на 10,33 и 9,24 %, каротиноидов на 11,43 и 9,01 % и витамина В2 в белке яиц на 7,28 и 6,80 %.
7. Применение пробиотических кормовых добавок «Пробиолакт» и «Промо микс» при выращивании перепелов японской породы экономически целесообразно и позволяет повысить прибыль на 13,51 и 20,54 %.
8. По всем изученным хозяйственно полезным признакам, физиолого биохимическим параметрам обмена веществ, разработанная пробиотическая кормо вая добавка «Промомикс» не уступает рыночному аналогу «Пробиолакт», но суще ственно превосходит его по экономическим параметром, что является его главным конкурентным преимуществом.
5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ С целью повышения уровня реализации биоресурсного потенциала перепелов японской породы по мясной и яичной продуктивности, сохранности поголовья и уве личения прибыли от получаемой продукции, нами рекомендуется применение про биотической кормовой добавки «Промомикс» в дозе 0,2 % к массе корма с первых суток и на протяжении всего периода выращивания, как экономически более выгод ной. Пробиотик «Пробиолакт», учитывая его эффективность использования, реко мендуется в случаях отсутствия наличия «Промомикса» и более высоких экономиче ских результатов в сравнении с ним на конкретных перепелиных фермах. Введение добавок в кормосмесь необходимо осуществлять при ступенчатом смешивании.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Лысенко, Ю. А. Значение пробиотиков в птицеводстве / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Матерiали мiнародноi науково-практичноi конференцii / Подiльський державний аграрно-технiчний университет. Камянець-Подiльський. – 2011. – С. 101-103.
2. Лысенко, Ю. А. Особенность формирования микробиоценозов ЖКТ и эффективность обменных процессов у перепелов при использовании пробиоти ческих кормовых добавок / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Ветеринария Куба ни. – 2012. – № 4. – С. 24-26.
3. Лысенко, Ю. А. Повышение биологического потенциала перепелок несушек при использовании пробиотических кормовых добавок / Ю. А. Лысенко, А. И. Петенко // Ветеринария Кубани. – 2012. – № 5. – С. 5-7.
4. Лысенко, Ю. А. Кормовые добавки в рационах перепелов / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Птицеводство. – 2012. № 9. С. 36-38.
5. Лысенко, Ю. А. Влияние пробиотиков на мясную и яичную продуктив ность перепелов / Ю. А. Лысенко // Труды КубГАУ. – 2012. № 5 (38). С. 145-148.
6. Лысенко, Ю. А. Влияние пробиотиков на перепелов / А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко // Юбилейная научно-практическая конференция / ФГБОУ ВПО Ал тайский государственный аграрный университет. Барнаул. – 2012. – С. 40-44.
7. Лысенко, Ю. А. Использование пробиотических кормовых добавок в пере пеловодстве / Ю. А. Лысенко, А. И. Петенко // Материалы международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Знания молодых для разви тия ветеринарной медицины и АПК страны». – СПб.: ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ». – 2012. – С. 122-125.
Лысенко Юрий Андреевич Разработка и использование новой пробиотической кормовой добавки на основе функциональной микрофлоры в рецептуре комбикормов для перепелов Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Подписано в печать 20.04.2013 г. Усл. печ. Л. 1,0.
Тираж 100. Заказ № Типография ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» 350044, г. Краснодар, ул. Калинина,