Лаборатории лекарственного мониторинга филиала клиническая фармакология гунц биомедицинских технологий рамн, г. москва игнатьев илья владимирович научный консультант: доктор медицинских наук, доцент с
на правах рукописи
Работа выполнена в лаборатории лекарственного мониторинга филиала «Клиническая фармакология» ГУНЦ Биомедицинских технологий РАМН, г. Москва ИГНАТЬЕВ ИЛЬЯ ВЛАДИМИРОВИЧ
Научный консультант:
Доктор медицинских наук
, доцент Сычев Д.А.
Официальные оппоненты:
Доктор биологических наук Поляков А.В.
Кандидат биологических наук Аксенова М.Г.
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА MDR1: ПОПУЛЯЦИОННЫЕ И ФАРМАКОГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
Ведущая организация: кафедра Фармакогенетики Медико биологического факультета Российского Государственного Медицинского Университета (РГМУ)
Защита диссертации состоится « » мая 2007 г. в на заседании 03.00.15. – ГЕНЕТИКА Диссертационного совета Д 217.013.01 при Государственном научно исследовательском институте генетики и селекции промышленных
АВТОРЕФЕРАТ
микроорганизмов по адресу: 117545, г. Москва, 1-й Дорожный ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ проезд, д.1.
КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУП «ГосНИИ генетика».
Автореферат разослан « » апреля 2007 г.
Ученый секретарь Диссертационного совета, - МОСКВА 2007 кандидат биологических наук Заиграева Г.Г.
Исходя из этого, влияние генетического полиморфизма гликопротеина Р на фармакокинетику дигоксина должно приводить к важным
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
клиническим последствиям [Hoffmeyer et al., 2000;
Marsolini, Kim, 2002, Актуальность проблемы. Прогресс в медицине ведет к 2004]. В настоящее время изучено много полиморфных маркеров в гене непрерывному усложнению и детализации методологии. По мере MDR1 [Woodahl et al., 2004], но предпочтения по исследованию увеличения количества лекарственных средств (ЛС), усложняются ассоциаций отдаются трем из них (C1236T, G2677T/A и C3435T).
подходы к их применению. Современная стратегия разработки ЛС Остальные, как правило, встречаются с низкой частотой, которая не сводится к поиску первопричины заболевания и воздействия на неё, позволяет объяснить широко распространенные нарушения «работы» препараты становятся более узконаправленными, специфичными. гликопротеина Р. Предполагают, что полиморфные маркеры C3435T и Фармакокинетические процессы находятся под генетическим С1236Т приводят к снижению экспрессии гена MDR1, а «кажущееся» контролем. Большинство ЛС воспринимаются организмом как влияние полиморфного маркера G2677T/A объясняют эффектом ксенобиотики. В геноме человека с биотрансформацией ксенобиотиков сцепления [Sai et al., 2003].
связано от 500 до 1200 различных генов [Sakaeda et al., 2004]. Поэтому Субстрат гликопротеина Р, дигоксин, широко применяется в индивидуальные генетические различия между людьми являются клинической практике в течение более чем 200 лет. В настоящее время серьезным фактором, который становится причиной многих дигоксин назначается пациентам с хронической сердечной нежелательных лекарственных реакций (НЛР), в том числе приводящих недостаточностью (ХСН), с постоянной формой мерцательной аритмии к гибели или инвалидизации пациентов (кровотечения, поражения (ПФМА), эффективность его доказана в мультицентровом печени, почек, костного мозга и т.д.). Изучение индивидуальных исследовании DIG. Являясь ЛС с узкой терапевтической широтой, генетических различий, лежащих в основе вариабельности ответа дигоксин вызывает НЛР в виде гликозидной интоксикации в 10-30% организма на тот или иной препарат, приобретает первостепенное случаев [Bertilsson, Kalow, 1993]. Таким образом, по прежнему значение для оптимизации фармакотерапии. существует реальная потребность в оптимизации фармакотерапии Индивидуализация фармакотерапии, которой занимается дигоксином, которую можно осуществить путем индивидуализации фармакогенетика, состоит из выявления полиморфных маркеров, выбора его режима дозирования на основании генотипирования.
ассоциированных с изменением реакции организма на ЛС, разработки Известно, что представители различных этнических групп могут методов генотипирования больных (выявлению аллельных вариантов различаться по характеру ответа на лекарственное воздействие полиморфных маркеров) и внедрения этого подхода в практическую [Wielandt et al., 2004]. Поскольку существенная роль в развитии НЛР медицину. принадлежит генетическим факторам [Kewal, 2002], многие авторы Транспортный белок, гликопротеин Р, кодируемый геном MDR1, полагают главной причиной возникновения вариаций при ответе на играет ключевую роль в выведении целого ряда ЛС, включая дигоксин. фармакотерапию генетические межпопуляционные различия. Начиная с 3 первой работы, в которой изучались межэтнические различия в В ходе работы были решены следующие задачи:
частотах аллелей и генотипов полиморфных маркеров гена MDR1 1. Оценена ассоциация полиморфных маркеров С1236Т и [Ameyaw et al., 2000], начались исследования полиморфизма данного С3435Т гена MDR1 с развитием гликозидной интоксикации у больных с гена сначала среди европеоидов [Gascorbi et al., 2001], а потом и среди постоянной формой мерцательной аритмии, длительно принимающих представителей других рас [Chelule et al., 2003;
Li et al., 2006]. дигоксин.
В России этот вопрос практически не разработан. Изучены частоты 2. Сопоставлена равновесная концентрация дигоксина в аллелей и генотипов ряда полиморфных маркеров гена MDR1 только у плазме крови больных с носительством аллелей или генотипов русских [Goreva et al., 2004], причем авторы сосредоточили свое полиморфного маркера С3435Т гена MDR1.
внимание на вопросах, в первую очередь, канцерогенеза. Для внедрения 3. Изучено распределение аллелей и генотипов полиморфных результатов изучения зависимости возникновения НЛР от генотипа маркеров С1236Т и С3435Т гена MDR1 в случайных выборках пациента необходимо дальнейшее исследование частот аллелей и коренного и некоренного населения Чукотского Автономного Округа и генотипов гена MDR1 в различных этносах нашей страны. этнических казахов, сопоставлены межэтнические различия.
Изучение ассоциации полиморфных маркеров с нарушениями фармакокинетических процессов, сопряженное с выявлением Научная новизна работы. В данной работе впервые в России межэтнических различий в распределении аллелей и генотипов данных изучается полиморфизм гена MDR1, кодирующего гликопротеин Р, как маркеров, позволит оптимизировать фармакотерапию, что будет фактор, влияющий на безопасность фармакотерапии дигоксином.
способствовать повышению эффективности и безопасности таковой. Выявлена ассоциация полиморфного маркера С3435Т и отсутствие таковой для полиморфного маркера С1236Т с развитием симптомов Цели и задачи работы. Целью данной работы являлось изучение гликозидной интоксикации. Обнаружена ассоциация полиморфного ассоциации полиморфных маркеров С1236Т и С3435Т гена MDR1, маркера С3435Т с изменением равновесной концентрации дигоксина в кодирующего гликопротеин Р, с развитием дигиталисной интоксикации плазме крови у больных ХСН с ПФМА, проживающих в Москве.
и повышением равновесной концентрации дигоксина в крови у больных Впервые в России изучены межэтнические различия в распределении мерцательной аритмией при терапии дигоксином, а также выявление аллелей и генотипов двух полиморфных маркеров данного гена.
межэтнических различий в частотах аллелей и генотипов данных полиморфных маркеров в четырех различных этнических группах. Практическая ценность работы. Проведение генотипирования больных по полиморфному маркеру С3435Т гена MDR1 рекомендуется проводить всем больным, которым планируется назначение или уже назначается дигоксин. Разработан алгоритм выбора начальной дозы дигоксина в зависимости от результатов генотипирования по 5 полиморфному маркеру С3435Т гена MDR1 для повышения СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
безопасности фармакотерапии. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Результаты данной работы в области изучения межэтнических Описание клинической группы. В исследование были включены различий в частотах аллелей и генотипов гена MDR1 могут послужить 103 больных ХСН с ПФМА. Критерии включения: давность основой для региональных рекомендаций по применению дигоксина. мерцательной аритмии не менее 1 года, прием дигоксина (0, мг/сутки) более 1 месяца, наличие ХСН функционального класса I-III, Апробация работы. Основные результаты доложены и стабильность состояния не менее месяца, фракция выброса левого обсуждены на совместной научно практической конференции филиала желудочка ниже 40% (по данным эхокардиографии), подписанное «Клиническая фармакология» ГУ НЦ БМТ РАМН и кафедры информированное согласие об участии в исследовании. Критерии клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней ММА исключения: нарушения функции печени, почек, гипокалиемия, ХСН им. И.М. Сеченова (сентябрь 2006 г.), V Международной конференции IV функционального класса, пороки сердца (кроме относительной «Клинические исследования лекарственных средств» (ноябрь 2005 г.), митральной и/или трикуспидальной недостаточности, но не более VII Ежегодной конференции Общества специалистов по сердечной степени), острые коронарные синдромы в предшествующие 3 месяца, недостаточности «Сердечная недостаточность» (Москва, декабрь тяжелые сопутствующие заболевания, сахарный диабет, наличие 2005 г.), IV Съезде Российских ревматологов (Казань, май 2005 г.), II противопоказаний к назначению дигоксина.
Всероссийском съезде фармацевтических работников (Сочи, июнь 2005 г.), I Съезде клинических фармакологов Сибирского округа Описание популяционных групп. Популяционные группы (Барнаул, май 2006 г.), Конференции «Проблемы клинической набирали из подростков, содержащихся в школах-интернатах фармакологии и моделирования в фармакологии и биомедицине» Чукотского Автономного Округа во время планового медицинского (Ростов-на-Дону, сентябрь 2006 г.). осмотра в 2004 году, а также из студентов Карагандинской Публикации. По материалам работы опубликовано 10 печатных медицинской академии в 2005 году на добровольной основе.
работ в журнала и сборниках материалов конференций. Национальность устанавливали со слов обследованных. Группа чукчей включала в себя 77 человек, группа эвенов – 48 человек, группа русских Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из – 124 человека и группа казахов – 100 человек. Все включенные в следующих разделов: введение, обзор литературы, описание исследование индивиды не имели на момент обследования каких-либо использованных материалов и методов, результаты и их обсуждение, серьезных заболеваний или отклонений в развитии.
заключение, выводы и список литературы. Материал диссертации изложен на 107 страницах машинописного текста и содержит 22 Выделение ДНК. ДНК выделяли стандартным фенольным таблицы и 8 рисунков. методом с протеиназой К [Budowle, Baechtel, 1990].
7 Определение равновесной концентрации дигоксина. Венозная фореза гели окрашивали раствором бромистого этидия (50 нг/мл) и кровь для определения концентрации дигоксина отбиралась в анализировали в ультрафиолетовом свете (312 нм).
количестве 10 мл в сухие пробирки с гепарином, утром натощак, перед Таблица 1.
плановым приемом очередной дозы дигоксина. Концентрацию Праймеры и рестриктазы для идентификации полиморфных маркеров дигоксина в плазме крови определяли методом поляризационного гена MDR флуоресцентного иммунологического анализа на приборе и с помощью Замена Последовательность праймеров Рестрик- Размеры реактивов фирмы Abbot Inc. (США). таза продуктов рестрикции Генотипирование. Генотипирование проводили методом ПЦР- С1236Т M1236-1 (прямой) 5’-CCACCGTCTGCCCACTCTGC-3’ HaeIII 426 п.н.
ПДРФ (полимеразная цепная реакция и полиморфизм длин M1236-2 (обратный) + рестрикционных фрагментов). На первой стадии выбранные фрагменты 5’-GGCCATCTATCCACCTATCTAA-3’ 35 п.н.
гена, содержащие полиморфные участки, амплифицировали путем ПЦР C3435T MDR1for (прямой) MboI 147 п.н.
на программируемом термостате «Терцик МС2», производства НПФ 5’-GATGGCAAAGAAATAAAGCGACTG- + ДНК-Технология (Россия). Затем продукты ПЦР подвергали обработке 3’ 133 п.н.
эндонуклеазами рестрикции II типа (рестриктазами). Специфичные MDR1rev (обратный) 5’-ACCAGCCCCTTATAAATCAAACTA-3’ праймеры и рестриктазы для каждого полиморфного маркера приведены в таблице 1. Праймеры для ПЦР подобраны с помощью Статистическая обработка результатов. Статистический анализ программы PrimerSelect 4.05©1993-2000 DNASTAR Inc. и проводился с использованием статистической программы Past, version синтезированы в ЗАО «Синтол» (Россия). Рестриктазы закуплены у 1.34 (http://folk.uio.no/ohammer/past). Для определения статистической ЗАО «Хеликон» (Россия). Промежуточные (контроль прохождения значимости различий частот аллелей и генотипов в группах больных ПЦР) и окончательные (длины продуктов расщепления рестриктазами) применялся критерий 2, для аллелей применялась поправка Йейтса на результаты выявляли с помощью электрофореза в вертикальных непрерывность (вводилась вручную, поскольку компьютерной акриламидных гелях (5% гель длиной 5 см для продуктов программой не предусмотрена). Относительные риски рассчитывались амплификации и 10% гель длиной 15 см для продуктов расщепления с помощью стандартной программы-калькулятора [Bland, Douglas, рестриктазами, напряженность электрического поля 10 В/см). Время, 2000]. Статистическую значимость различий в концентрации дигоксина необходимое для разделения фрагментов ДНК подбирали в плазме крови в группах больных определяли с помощью экспериментально. Длины фрагментов анализировали путем сравнения непараметрического метода Манна-Уитни. Значения чувствительности, с маркерной ДНК (ДНК плазмиды pUC19, расщепленная рестриктазой специфичности, предсказательной ценности положительного (PPV) и MspI, или стандартный маркер 100 b.p.™SibEnzyme). После окончания 9 отрицательного (NPV) результатов теста рассчитывались по Таблица 2.
Частоты аллелей и генотипов полиморфного маркера С1236Т гена MDR общепринятым формулам [Флетчер Р., 1998].
в группах больных с симптомами гликозидной интоксикации (СГИ+) и без таковых (СГИ-) Проведение исследования одобрено этическим комитетом Аллель / СГИ+ СГИ- р ГКБ № 23 им. «Медсантруд» г. Москвы, комитетом по этике генотип n = 20 n = Департамента здравоохранения и социального развития ЧАО и 21 С признано легитимным Комитетом по этике Ассоциации медицинских и 0,401 0, 19 Т фармацевтических вузов. 4 СС 1,860 0, 13 СТ 3 ТТ РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 1. Взаимосвязь полиморфизма гена MDR1 с возникновением НЛР при приеме дигоксина у больных с постоянной формой Таблица 3.
мерцательной аритмии.
Частоты аллелей и генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR Мы изучали группу больных с ПФМА, которым была показана в группах больных с симптомами гликозидной интоксикации (СГИ+) и без терапия дигоксином. Симптомы гликозидной интоксикации (снижение таковых (СГИ-) аппетита, тошнота, рвота, желудочковая экстрасистолия) были Аллель / СГИ+ СГИ- р выявлены у 26 пациентов (25%). генотип n = 26 n = Частоты аллелей и генотипов по полиморфному маркеру С1236Т в 12 С 13,643 0, группах больных с симптомами гликозидной интоксикации и без 40 Т 2 СС таковых приведены в таблице 2. Частоты аллелей и генотипов 20,897 0, 8 СТ полиморфного маркера С1236Т достоверно не различались между 16 ТТ группами больных с гликозидной интоксикацией и без таковой.
Иная картина наблюдалась при анализе частот аллелей и генотипов Мы определили равновесную концентрацию дигоксина в плазме полиморфного маркера С3435Т (Таблица 3). Из таблицы 3 видно, что крови у 29 случайно выбранных больных. Из них генотип СС имели имеется четкая ассоциация генотипа ТТ и аллеля Т полиморфного пациентов, СТ – 18 пациентов, ТТ – 5 пациентов. Наиболее высокая маркера С3435Т с развитием гликозидной интоксикации.
концентрация дигоксина наблюдалась у пациентов с генотипом ТТ по сравнению с пациентами, имеющими генотипы СС и СТ (2,03 ± 0,14 vs 1,09 ± 0,15, р = 0,008 и 2,03 ± 0,14 vs 1,54 ± 0,23, р = 0, 11 соответственно), при этом пациенты с генотипом СТ занимали Нами была изучена возможность использования выявления промежуточное положение и достоверно отличались от пациентов с носительства генотипа ТТ для прогнозирования развития симптомов генотипом СС (1,54 ± 0,23 vs 1,09 ± 0,15, р = 0,001) [рисунок 1]. Можно гликозидной интоксикации. Чувствительность выявления генотипа ТТ предположить, что повышение концентрации дигоксина в крови для прогнозирования развития симптомов гликозидной интоксикации пациентов было главной причиной, приводящей к развитию составила 30%, специфичность – 94%. Прогностическая ценность (PPV) гликозидной интоксикации. положительного результата в случае выявления генотипа ТТ составила Генотип ТТ достоверно чаще встречался в группе пациентов, у 42%. Прогностическая ценность отрицательного результата (NPV) в которых развивалась гликозидная интоксикация, по сравнению с случае выявления генотипов СС и CТ составила 80%.
группой без таковой (61% vs. 16%, р0,05). Это позволяет нам Таким образом, в нашем исследовании, у больных с генотипом ТТ говорить об ассоциации между полиморфным маркером С3435Т и чаще возникали симптомы гликозидной интоксикации, кроме того развитием гликозидной интоксикации, т.е. генотип ТТ и аллель Т именно у этой группы пациентов регистрировались более высокие являются генетическими факторами риска (OR равен 8,67 и 3,90 при концентрации дигоксина в плазме крови, по сравнению с пациентами с доверительных интервалах 3,18-23,60 и 1,90-8,00, соответственно), генотипами СС и СТ.
предрасполагающими к развитию гликозидной интоксикации при Связь между концентрацией дигоксина в плазме крови и приеме дигоксина у больных с ПФМА. возникновением симптомов гликозидной интоксикации очевидна и доказана в мультицентровом исследовании DIG. Полученные нами Рисунок 1. результаты можно объяснить снижением у пациентов с генотипом ТТ Зависимость средней равновесной концентрации дигоксина в плазме количества гликопротеина Р в клеточных мембранах, что является крови от генотипа пациента по полиморфному маркеру С3435Т гена MDR следствием снижения стабильности и, как следствие, срока жизни мРНК. А это, в свою очередь, приводит к тому, что дигоксин плохо выводится почками и накапливается в кровотоке. Результаты нашего исследования хорошо согласуются с данными ряда авторов [Hoffmeyer et al., 2000;
Kurata et al., 2002;
Verstuyft et al., 2003], которые, анализируя фармакокинетику дигоксина после его однократного приема в исследованиях у здоровых добровольцев, показали, что максимальная концентрация дигоксина в плазме крови лиц с генотипом ТТ достоверно выше по сравнению с индивидуумами, имеющим генотип СС. В отличие от перечисленных исследований, в нашей работе участвовали пациенты, длительно применяющие дигоксин.
13 Объем нашей клинической выборки позволил включить довольно Таблица 4.
Различия в частотах аллелей и генотипов полиморфного маркера С1236Т гена небольшое число пациентов с выявленными симптомами гликозидной MDR1 между изученными выборками интоксикации, мы не изучали другие широко распространенные Русские Чукчи Эвены полиморфные маркеры гена MDR1, кроме того, концентрация 2 2 р р р дигоксина в плазме крови определялась не всем пациентам. Тем не Чукчи генотипы 4,261 0, менее, наши данные позволяют выдвинуть предположение о аллели 5,802 0, необходимости назначать дигоксин пациентам с генотипом ТТ в более Эвены генотипы 0,826 0,345 0,402 0, низкой дозе (0,125 мг/сутки) и корректировать ее под контролем аллели 1,100 0,577 2,093 0, данных терапевтического лекарственного мониторинга. Для Казахи генотипы 4,962 0,029 0,008 0,915 0,440 0, аллели 5,384 0,068 0,351 0,839 1,197 0, подтверждения этого предположения необходимо проведение клинических исследований, в которых сравнивались бы эффективность и безопасность дигоксина при его назначении в средней терапевтической дозе (0,25 мг/сутки) с учетом генотипа по полиморфному маркеру С3435Т гена MDR1.
2. Межэтнические различия в частотах аллелей и генотипов полиморфного маркера С1236Т гена MDR1.
Мы изучили частоты аллелей и генотипов полиморфного маркера С1236Т гена MDR1 в случайных выборках из четырех этнических групп: чукчей, эвенов, русских и казахов. Данные по частотам аллелей и генотипов полиморфного маркера С1236Т гена MDR1, приведены на рисунках 2 и 3, а также в таблице 4.
Рисунок Частоты генотипов данного полиморфного маркера не различались Частоты аллелей полиморфного маркера С1236Т гена MDR1 в во всех изученных группах. Частоты аллелей различались между изученных выборках коренным (чукчи) и некоренным (русские) населением Чукотского АО, а также между русскими и казахами, причем эти различия были на грани статистической достоверности.
15 полиморфного маркера С1236Т. Данные приведены в таблице 5 и Рисунок Частоты генотипов полиморфного маркера С1236Т гена MDR1 в изученных рисунках 4 и 5.
выборках Наблюдаемые распределения частот аллелей носят практические зеркальный характер. Значительные различия наблюдаются у коренных жителей Чукотки по сравнению с русскими и с казахами.
Соответственно, различий между русскими и казахами не наблюдается.
Частота аллеля Т практически в полтора раза выше у коренных жителей Чукотки (63,6%) по сравнению с русскими (49,6%) и с казахами (44,0%).
Также и генотип ТТ встречается у них почти в два раза чаще (42,4%), чем у русских (26,6%) и у казахов (25,0%).
Таблица 5.
Различия в частотах аллелей и генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR1 между изученными выборками Русские Чукчи Эвены Полученные результаты можно объяснить следующим. Поскольку 2 2 р р р полиморфный маркер С1236Т, согласно нашим результатам, не влияет Чукчи генотипы 4,609 0, на эффективность «работы» гликопротеина Р, можно предположить, аллели 5,048 0, что носительство того или иного генотипа никак не отражается на Эвены генотипы 8,438 0,004 0,866 0, приспособительных способностях индивида. аллели 8,971 0,011 3,010 0, Чукчи с эвенами принадлежат к монголоидной расе. Русские же Казахи генотипы 1,178 0,281 9,435 0,002 13,670 0, являются европеоидами. Казахи представляют собой смешанный аллели 2,487 0,288 8,259 0,016 14,063 0, монголоидно-европеоидный этнос. Именно этим фактом можно объяснить различия в частотах аллелей данного полиморфного маркера.
3. Межэтнические различия частот аллелей и генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR1.
Сравнение частот аллелей и генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR1 дало несколько иные результаты, чем в случае 17 необходимо учитывать при составлении региональных рекомендаций по использованию данного ЛС.
Рисунок Частоты генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR1 в изученных выборках Рисунок Частоты аллелей полиморфного маркера С3435Т гена MDR1 в изученных выборках С популяционной точки зрения этот феномен можно объяснить, по всей видимости, тем, что условия жизни (распространенные инфекции, климат, водный режим, температурный режим, инсоляция и пр.) на территориях проживания русских и казахов схожи в большей степени, чем на Чукотке. Вероятно условия, в которых на протяжении многих поколений выживали коренные народы Крайнего Севера, настолько экстремальны, что происходил отбор по иным признакам, чем в более мягком климате.
ВЫВОДЫ Для более детального объяснения данного феномена необходимо 1) Обнаружена ассоциация полиморфного маркера С3435Т гена дальнейшее изучение частот аллелей и генотипов полиморфного MDR1 с возникновением симптомов гликозидной интоксикации маркера С3435Т гена MDR1 в различных этнических группах.
при приеме дигоксина у больных с ПФМА;
генотип ТТ и аллель Почти двукратное преобладание генотипа ТТ по полиморфному Т являются генетическими факторами риска (OR равен 8,67 и маркеру С3435Т гена MDR1 среди коренного населения Чукотского АО 3,90 при доверительных интервалах 3,18-23,60 и 1,90-8,00, по сравнению с русскими и казахами позволяет предположить, что риск соответственно).
развития симптомов гликозидной интоксикации при приеме дигоксина 2) Прогностическая ценность генотипирования по полиморфному у чукчей и эвенов значительно выше, чем у русских с казахами, что маркеру С3435Т гена MDR1 для прогнозирования гликозидной 19 интоксикации составила 42% для положительного результата в дигиталисной интоксикации и повышением концентрации дигоксина в случае выявления генотипа ТТ и 80% для отрицательного плазме крови пациентов с постоянной формой мерцательной аритмии. // результата в случае выявления генотипов СС или CТ. Медицинская генетика. – 2005. – т.4. №12. – с.568-572.
3) Полиморфный маркер С3435Т гена MDR1 ассоциирован с 3. Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Андреев Д.А., Пошукаева Л.Г., повышением уровня равновесной концентрации дигоксина в Колхир П.В., Жукова Э.Э., Кукес В.Г. Значение фармакогенетических крови;
концентрация дигоксина достоверно выше у пациентов с исследований гликопротеина-Р для индивидуализации фармакотерапии генотипом ТТ по сравнению с пациентами, имеющими дигоксином: новый подход к старой проблеме. // Российский генотипы СС и СТ. кардиологический журнал. -2006. №4 (60).- с. 64- 68.
4) Межэтнические различия в частотах аллелей полиморфного 4. Сычев Д.А., Андреев Д.А., Игнатьев И.В., Жукова Э.Э., маркера С1236Т гена MDR1 наблюдались между казахами и Суслов Л.С., Семенов А.В., Кукес В.Г. Влияние генетического русскими и между русскими и чукчами;
различий в частотах полиморфизма гликопротеина-Р (MDR1) на уровень дигоксина в плазме генотипов по данному полиморфному маркеру в изученных крови больных хронической сердечной недостаточности и постоянной группах не наблюдалось. формой мерцательной аритмии. // V ежегодная конференция общества 5) Частоты аллелей и генотипов полиморфного маркера С3435Т специалистов по сердечной недостаточности «Сердечная гена MDR1 не различались между русскими и казахами, но недостаточность 2004». Материалы докладов. – 2004. – с.33.
существенно различались между русскими и коренным 5. Сычев Д.А., Андреев Д.А., Игнатьев И.В., Жукова Э.Э., населением Чукотского АО, а также между казахами и Суслов Л.С., Семенов А.В., Кукес В.Г. Уровень дигоксина в плазме коренным населением Чукотского АО. крови у больных постоянной формой мерцательной аритмии в зависимости от носительства полиморфного аллеля гена гликопротеина-Р (MDR1) C3435T: результаты фармакогенетического исследования. // XII российский национальный конгресс «Человек и СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ лекарство». Материалы докладов. – 2005. – с.256.
ДИССЕРТАЦИИ.
1. Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Раменская Г.В., Колхир С.В., 6. Кукес В.Г., Сычев Д.А., Раменская Г.В., Игнатьев И.В., Кукес В.Г. Значение полиморфизма гена MDR1, кодирующего Казаков Р.Е. Показания для использования генотипирования пациентов гликопротеин-Р, для индивидуализации фармакотерапии. // по ферментам биотрансформации и транспортерам при проведении Клиническая фармакология и терапия. –2005. -т.14. №1. –с.92-96. клинических исследований новых лекарственных средств. // Материалы 2. Игнатьев И.В., Сычев Д.А., Андреев Д.А., Жукова Э.Э., II Всероссийского съезда фармацевтических работников (Сочи, 5- Колхир С.В., Кукес В.Г. Ассоциация полиморфного маркера С3435Т июня 2005). – Сочи, 2005. – с. 93.
гена MDR1, кодирующего гликопротеин-Р, с развитием симптомов 21 7. Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Андреев Д.А., Жукова Э.Э., Список сокращений Пошукаева Л.Г., Кукес В.Г. Роль полиморфного маркера С3435Т гена ХСН – хроническая сердечная недостаточность MDR1 в прогнозировании развития гликозидной интоксикации у ПФМА – постоянная форма мерцательной аритмии больных постоянной формой мерцательной аритмии, длительно ЛС – лекарственное средство принимающих дигоксин. // IV международный конгресс. Доказательная НЛР – нежелательные лекарственные реакции медицина – основа современного здравоохранения. Материалы СГИ – симптомы гликозидной интоксикации («+» – наличие, «-» – докладов. – 2005. – с.250-251. отсутствие) 8. Игнатьев И.В., Коман И.Э., Сычев Д.А., Казаков Р.Е., ПЦР – полимеразная цепная реакция Фалынскова И.Н., Кукес В.Г. Сравнительный анализ распределения ПДРФ – полиморфизм длин рестриктазных фрагментов частот генотипов полиморфного маркера С3435Т гена MDR1, п.н. – пара нуклеотидов – мера длины фрагмента двунитевой ДНК кодирующего транспортер лекарственных средств гликопротеин-Р, в трех этнических группах чукотского АО. // V международная конференция «Клинические исследования лекарственных средств».
Материалы конференции. – 2005. – с.82-83.
9. Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Андреев Д.А., Жукова Э.Э., Пошукаева Л.Г., Кукес В.Г. Носительство полиморфного маркера С3435Т гена MDR1 как фактор риска развития гликозидной интоксикации у больных хронической недостаточностью, длительно принимающих дигоксин. // VI ежегодная конференция общества специалистов по сердечной недостаточности «Сердечная недостаточность 2005» Материалы докладов. – 2005. – с.9-10.
10. Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Кукес В.Г. Значение генетических исследований для повышения эффективности и безопасности фармакотерапии кардиотропными лекарственными средствами. // Материалы научной программы XII Международной специализированной выставки «Аптека 2005» (Москва, 25-28 октября 2005). – 2005. – с. 4.
23