Эпизоотическая ситуация, совершенствование методов лечения и профилактики балантидиоза свиней в условиях ставропольского края
На правах рукописи
Силин Юрий Сергеевич ЭПИЗООТИЧЕСКАЯ СИТУАЦИЯ, СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ БАЛАНТИДИОЗА СВИНЕЙ В УСЛОВИЯХ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ 03.02.11– паразитология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Ставрополь – 2011
Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет»
Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор Луцук Светлана Николаевна
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Оробец Владимир Александрович кандидат биологических наук, Кошкина Наталья Анатольевна
Ведущая организация: ГНУ «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук»
Защита диссертации состоится «_»_2012 г. в _ часов на заседании диссертационного совета Д 220.062.02 при ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет» по адресу: 355017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Став ропольский государственный аграрный университет», а с авторефератом – на официальных сайтах ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет»: http://www.stgau.ru и ВАК РФ: http: vak2.ed.gov.ru
Автореферат разослан «_»2011 г.
Ученый секретарь диссертационного совета кандидат ветеринарных наук Ю. В. Дьяченко 1.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Значительное место в обеспечении потребности насе ления в мясе отводится свиноводству, как одной из самых производительных от раслей животноводства. Ставропольский край является одним из ведущих про изводителей свинины в Северо-Кавказском федеральном округе. Свиноводством занимаются как крупные производители, так и фермеры. Для многих людей вы ращивание свиней в частном секторе является важнейшим источником мяса и до полнительного дохода в бюджете семьи. Продуктивность свиней зависит от со стояния их здоровья. Падеж даже одного поросенка является серьезным убытком в рамках домашнего подворья. Заразные заболевания свиней являются основным сдерживающим фактором развития свиноводства. Существенную долю среди всех заразных болезней занимают гастроэнтериты разной этиологии (сальмонел лез, пастереллез, гельминтозы, балантидиоз и др.). Балантидиоз часто протекает совместно с пастереллезом и сальмонеллезом, что приводит к ущербу, так как со провождается падежом и снижением продуктивности животных.
Неоценимый вклад в дело борьбы с балантидиозом внесли отечественные уче ные: И. А. Ранчевский (1880), Л. А. Лавровская (1890), Ф. А. Ржаницин (1924), Р. Н. Апанасов (1958), К. М. Восканян (1970), А. Ф. Манжос, Р. Т. Сафиуллин, Е. В. Бобрук (1996), В. Н. Бочкарев (1993), С. К. Гончаров (1993), Д. Н. Малов (2004) и многие другие. Однако в последние годы внимание ученых к этой болез ни уменьшилось, особенно в Северо-Кавказском федеральном округе. Поэтому изучение вопросов эпизоотологии и разработка средств борьбы с балантидиозом свиней, особенно при ассоциативном течении, является актуальным.
Цели и задачи исследований. Целью наших исследований являлось изучение распространения балантидиоза и разработка препаратов для профилактики и лече ния больных балантидиозом свиней при ассоциативном течении с пастереллезом.
Для реализации данной цели были поставлены задачи:
• Изучить эпизоотическую ситуацию по балантидиозу свиней и сопутствую щим заболеваниям в Петровском районе Ставропольского края.
• Изучить эффективность биологически активного лиофилизированного препарата из преимагинальных фаз трутней (ЛПФТ) при балантидиозе свиней.
• Разработать и оценить эффективность порошка из личинок трутней для свиней с ассоциативным течением балантидиоза и пастереллеза.
Научная новизна. Изучена эпизоотическая ситуация по балантидиозу свиней в условиях изменившегося соотношения свиней в частном и общественном сек торах в Петровском районе Ставропольского края. Отмечено, что балантидиоз у свиней регистрируется ежегодно – 5,4 %. Выявлена прямая корреляционная за висимость между заболеванием свиней балантидиозом, пастереллезом и сальмо неллезом. Установлено совместное их течение (балантидиоз с пастереллезом до 0,42 %). Использование лиофилизированного препарата из личинок трутней, раз веденного водой 1 : 10, в течение 30 дней в дозе 1 мл/кг массы тела является эф фективным средством для профилактики балантидиоза свиней, а применение его вместе с метронид-50 эффективно для лечения поросят, больных балантидиозом.
Разработан новый эффективный комплексный порошок (личинки трутней, тило зин и диметридазол) для лечения свиней, больных балантидиозом, при ассоциа тивном течении с пастереллезом.
Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты исследова ний эпизоотической ситуации по балантидиозу и сопутствующим заболеваниям послужат основой для планирования, правильной организации и успешного про ведения мероприятий по борьбе с балантидиозом свиней.
Материалы исследований вошли в рекомендации «Биология, диагностика и профилактика балантидиоза свиней» (2009 г.), используются в лекционных и лабораторно-практических занятиях по курсу «Паразитология и инвазионные бо лезни животных» в СтГАУ. Внедрены в филиале ООО Агропромышленная корпо рация «Ставрополь – Кавказский».
На способ получения порошка из личинок трутней (ПЛТ) для повышения ре зистентности у животных и порошка на его основе (ПЛТА) для лечения балан тидиоза и сальмонеллеза получено положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке № 2010153647 приоритет 27.12.2010 г.
Основные положения, выносимые на защиту:
Эпизоотическая ситуация по балантидиозу свиней в Петровском районе Ставропольского края. Прямая корреляционная зависимость заболевания свиней балантидиозом и пастереллезом в ассоциации.
Эффективность лиофилизированного препарата из преимагинальных фаз трутней (ЛПФТ) при профилактике балантидиоза у свиней.
Способ получения порошка из личинок трутней и антибиотиков (тилозин, диметридазол), испытание его на лабораторных крысах и эффективность по рошка при ассоциативном течении балантидиоза и пастереллеза у свиней.
Апробация работы. Результаты работы доложены и обсуждены на научных конференциях СтГАУ (2008–2011 гг.), на Международной научно-практической Интернет-конференции (Ставрополь, 2008 г.).
По материалам исследований опубликовано 5 печатных работ, в которых от ражены основные положения диссертации, в том числе 2 в изданиях, рекомендо ванных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Личный вклад. Представленная диссертационная работа является результатом 3-летних научных исследований автора по испытанию ЛПФТ для профилактики балантидиоза;
распространению балантидиоза свиней в Петровском районе Став ропольского края;
разработке порошка из личинок трутней (ПЛТ) и порошка на его основе (ПЛТА) и испытанию их на лабораторных животных и свиньях, больных балантидиозом в ассоциации с пастереллезом. Исследования проводились само стоятельно под руководством доктора ветеринарных наук, профессора С. Н. Луцук, которая оказывала научно-методическую помощь в проведении работы, анализе и обобщении полученных результатов. Статьи, написанные в соавторстве, включают 70 % материалов исследований соискателя. Соавторы не возражают против исполь зования материалов совместных исследований Ю. С. Силиным.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 106 страницах ком пьютерного текста, содержит 19 таблиц, 6 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований, выводов, практи ческих предложений, списка литературы, который включает 188 источников, в том числе 17 иностранных.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследований Работа выполнена в 2008–2011 гг. на кафедре паразитологии, ветсанэкспер тизы, анатомии и патанатомии им. профессора С. Н. Никольского ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет».
Эпизоотическую ситуацию по балантидиозу свиней изучали путем анализа собственных результатов, эпизоотологических, клинических, паразитологических исследований, данных ветеринарной отчетности Управления ветеринарии Став ропольского края, учреждений госветслужбы Петровского района Ставропольско го края, статистических обзоров. Объем исследований представлен в таблице 1.
Таблица Объем проведенных исследований Вид исследования, работа Объем исследований Разработано оригинальных препаратов:
порошок из личинок трутней (1) порошок из личинок трутней, тилозин и диметридазол (1) Исследования химического состава:
порошок из личинок трутней (1) личинки трутней (1) Проведено опытов:
с лабораторными животными (4) на поросятах (4) Использовано животных в опытах:
крысы (12) поросята (39) Проведено исследований (проб):
гематологических (60) биохимических (48) копрологических (48) микробиологических (16) токсикологических (1) Положительное решение о выдаче патента (заявка № 2010153647, приоритет 27.12.2010 г.) Выпущено в печать:
статей в сборниках (2) статей в сборниках, одобренных ВАК (2) рекомендаций производству (1) Испытания ЛПФТ (лиофилизированный препарат из преимагинальных личи нок трутней) проводили на 10 поросятах 2-месячного возраста, больных баланти диозом, и 19 поросятах – с целью профилактики болезни.
Испытания ПЛТ и ПЛТА проводили на 12 лабораторных крысах в возрасте 17 недель.
Испытания ПЛТА проводили на свиньях крупной белой породы, больных балантидиозам в ассоциативном течении с пастереллезом. В опыте использо вали 10 поросят 45-дневного возраста, заболевших спонтанно балантидиозом в ассоциации с пастереллезом, отбор животных проводили по принципу ана логов. Диагноз на балантидиоз ставили, используя «Извлечение из временной инструкции о мероприятиях по борьбе с заболеванием свиней балантидиозом», утвержденные ГУВ МСХ СССР от 25 января 1984 г. Нативные фекалии иссле довали под малым увеличением микроскопа 7 х 8. На пастереллез диагноз ста вили на основании обнаруженных антител в сыворотке крови и клинических симптомов.
Кровь у поросят брали в стерильные пробирки из краевой вены уха. Биохими ческие исследования проводились на автоматическом биохимическом анализато ре ARCHITECT (С-8000) фирмы ABBOT (США, ЯПОНИЯ) с помощью биотестов системы AEROSET. В крови исследовали следующие показатели: общий белок, липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), кальций, фосфор.
Для определения аминокислот в ПЛТ и сырье для него использовали амино кислотный анализатор ААА-400 (Чехия), сырого протеина – анализатор SER-148, общую влажность определяли на анализаторе АД-4714А.
Статистический анализ полученных данных на достоверность проводили ме тодом вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента.
Математическую обработку результатов, построение графиков и таблиц прово дили на компьютере с использованием программ Microsoft Excel и Microsoft Word.
2.2. Эпизоотическая ситуация по балантидиозу свиней в Петровском районе Ставропольского края Основываясь на данных ветеринарной отчетности, нами было установлено, что в Петровском районе Ставропольского края балантидиоз свиней встреча ется чаще, чем в других районах. Поэтому мы проводили свои исследования в этом районе.
С 2005 по 2011 гг. в Петровском районе Ставропольского края изменилось соот ношение свиней в частном и общественном секторах: уменьшилось в обществен ном секторе с 39,9 до 23,2 % и увеличилось в частном с 60,1 до 76,8 %. В 2010 г.
резко сократилось поголовье как в общественном, так и в частном секторах. Это произошло из-за мероприятий, проводимых в связи с возникновением африкан ской чумы свиней в Ставропольском крае.
Изменения в ведении свиноводства привели к изменению эпизоотической си туации по заразным заболеваниям свиней. При изучении особенностей эпизооти ческого процесса при заразных заболеваниях свиней 2005–2009 гг. в Петровском районе установлено, что в популяции свинопоголовья регистрировалось 16 болез ней, в том числе: пастереллез – 0,99 %, сальмонеллез – 0,42 %, стрептококкоз – 1,15 %, рожа – 0,02 %, дизентерия – 2,17 %, отечная болезнь – 0,05 %, колибакте риоз – 2,91 %, псевдомоноз – 0,36 %, стафилококкоз – 1,36 %, балантидиоз – 5,4 %, эймериоз – 0,34 %, аскаридоз – 71,88 %, трихоцефалез – 1,7 %, эхинококкоз – 9,18 %, саркоптоз – 0,15 % и метастронгилез – 1,83 %.
Анализ полученных данных по паразитарным заболеваниям показал, что чаще всего у свиней встречаются гельминтозы, они составляют – 93,48 %, затем прото зоозы – 6,35 % и меньше всего арахно-энтомозы – 0,17 %. Среди протозоозов ба лантидиоз встречается намного чаще – 94,06 %, чем эймериоз – 5,94 % (табл. 2).
Балантидиоз у свиней стабильно регистрировался во все годы (рис. 1), но ко личество заболевших колебалось от 95 в 2006 г. до 11 случаев в 2008 г.
Рис. 1. Динамика регистрации случаев заболевания свиней балантидиозом в 2005–2009 гг.
Смертность при балантидиозе свиней также была различной: в 2006 г. – 0,38 %, в 2008 г. – 0,03 % (табл. 3).
При выявлении причины заболевания поросят балантидиозом на неблагопо лучных свинофермах было отмечено, что это заболевание чаще всего протекает вместе с пастереллезом или сальмонеллезом. Сравнивая количество заболевших животных, выявили прямую корреляционную зависимость между этими заболе ваниями (рис. 2).
Рис. 2. Динамика заболеваемости свиней балантидиозом, пастереллезом и сальмонеллезом в 2006–2008 гг.
Таким образом, балантидиоз имеет распространение среди свиней Петровско го района и встречается из года в год, обычно вместе с пастереллезом или саль монеллезом.
Таблица Количество выявленных случаев заболевания свиней протозоозами 2005 2006 2007 2008 2009 Всего Заболевание голов % голов % голов % голов % голов % голов % Балантидиоз 48 87,27 95 94,06 34 100 11 100 18 100 206 94, Эймериоз 7 12,73 6 5,94 – – – – – – 13 5, Итого 55 100 101 100 34 100 11 100 18 100 219 Таблица Смертность свиней при балантидиозе 2005 2006 2007 2008 всего пало % всего пало % всего пало % всего пало % всего пало % 19822 48 0,24 24856 95 0,38 27700 34 0,12 30272 11 0,03 31201 18 0, 2.3. Изучение эффективности биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней при балантидиозе свиней Как показали исследования последних десятилетий (А. Ф. Манжос, 1982, 1983, 1984;
Р. Т. Сафиуллин, 2002), балантидиоз возникает, как правило, при нарушении режимов кормления и содержания, при кишечных инфекциях, что приводит к сни жению резистентности организма и развитию иммунодефицита (В. Н. Бочкарев, 1993;
С. К. Гончаров, 1993).
Для лечения свиней, больных балантидиозом, используются метронидазол, фуразолидон и сульфаниламиды, однако они не всегда эффективны, так как в ор ганизме животных при данном заболевании происходят изменения, требующие патогенетической терапии.
Учитывая высокую эффективность кормовой добавки из личинок трутней и подмора при профилактике балантидиоза (О. А. Гевлич, 2009), мы испытали раз работанный в 2006 г. С. Н. Луцук и др. лиофилизированный препарат из преима гинальных фаз трутней (ЛПФТ) при балантидиозе свиней.
В первом опыте использовали 10 поросят 2-месячного возраста живой массой 14–15 кг, у которых наблюдали клинические признаки балантидиоза: понос, циа ноз видимых слизистых оболочек и кожи, угнетение, отсутствие аппетита, исхуда ние. При исследовании нативных мазков из теплых фекалий от больных поросят в поле зрения микроскопа обнаруживали от двух до пяти движущихся балантидий.
Больных поросят разделили на 2 группы по 5 голов.
Пяти животным первой группы после внутримышечного введения метронида 50 (1 мл/10 кг массы тела, двукратно, с интервалом 48 часов) в течение 30 дней, один раз в сутки с кормом групповым методом, добавляли ЛПФТ, разведенный дистил лированной водой 1 : 10 в дозе 1 мл/кг массы тела. Поросятам второй (контрольной) группы вводили только метронид-50 в тех же дозах, что и в первой группе.
Во время опыта животные находились в одном помещении, в одинаковых усло виях содержания, но в разных станках;
корма животные получали одинаковые.
Учёт результатов проводили до лечения и на 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27 дни по сле начала лечения. Исследовали нативные мазки из фекалий, определяли живую массу и клиническое состояние поросят обеих групп.
Во второй опыт по изучению профилактической эффективности ЛПФТ было взято 12 здоровых поросят 15-дневного возраста живой массой 5–5,5 кг, которым с 15 по 45 день жизни один раз в сутки добавляли в корм испытуемый препарат, как и в первом опыте. Контролем служили 7 поросят 15-дневного возраста живой массой 5,1–5,8 кг, которым препарат не давали;
они находи лись в соседнем станке.
Эффективность препарата определяли на 35, 40, 45, 50, 55, 60 день жизни по росят путём наблюдения за клиническим состоянием, исследования фекалий на наличие балантидий и взвешивания поросят с целью определения средней массы и среднесуточного прироста.
В третьем опыте по изучению биохимических показателей крови исполь зовали 19 животных. В опытную группу вошли 12 поросят, содержащихся вместе со свиноматкой, которым начиная с 15-дневного возраста скармливали ЛПФТ, как и предыдущих (первом и втором) опытах. В контрольную группу вошли 7 поросят, также содержавшихся со свиноматкой, но не получавших препарата.
Исследовали: общий белок, уровень липопротеидов низкой плотности (ЛПНП), фосфора и кальция. Пробы крови брали у поросят на 14, 30 и 55 дни жизни.
В первом опыте у больных поросят опытной группы с 15 дня применения ЛПФТ и до окончания опыта (т. е. через 30 дней) балантидий в исследуемых на тивных мазках свежих фекалий не обнаруживали (единичные цисты). У животных контрольной группы балантидий обнаруживали на протяжении всего времени опыта;
на 15 день в группе пало 2 поросёнка (табл. 4).
Средняя масса поросят первой группы к окончанию опыта увеличилась в сред нем на 3,2 кг, а у поросят второй группы – снизилась на 1,5 кг.
Во втором опыте у поросят опытной группы вегетативных форм балан тидий в исследуемых мазках не обнаруживали на протяжении всего опыта. У поросят контрольной группы балантидии были обнаружены на 35 день жизни, а на 45 и 50 дни у 5 поросят появились явные клинические признаки баланти диоза. В контрольной группе пало 2 поросёнка на 50 дне жизни (табл. 5). Сред няя живая масса поросят опытной группы с 35 по 60 день жизни увеличилась на 6,2 кг. В контрольной группе заболело балантидиозом 5 животных из 7, 2 из них пало;
у выживших поросят за период опыта (30 дней) средняя живая масса увеличилась лишь на 0,6 кг, то есть в 3 раза меньше, чем у животных опытной группы.
В третьем опыте у поросят опытной группы содержание общего белка увели чилось на 30 день жизни на 9,9 %, на 55 день – на 6,7 % по сравнению с исходным уровнем;
у поросят контрольной группы этот показатель снижался на протяжении всего периода наблюдения.
Уровень ЛПНП у поросят опытной группы увеличивался на протяжении всего периода исследования, на 55 день был вдвое больше по сравнению с исходными данными. У поросят контрольной группы содержание ЛПНП увеличилось на день – на 11,7 %, на 55 день – на 70,5 %.
Содержание кальция в опытной группе на протяжении всего времени наблю дения увеличивалось, и на 55 день его было на 33 % больше по сравнению с исходными данными, в то время как в контрольной – уровень кальция снижался (табл. 6).
Содержание фосфора в опытной группе увеличивалось на протяжении всего времени наблюдения, и на 55 день его было на 9 % больше по сравнению с ис ходными данными. В то время как в контрольной группе содержание фосфора снижалось.
Таблица Лечебная эффективность ЛПФТ в комплексе с метронидом-50 при балантидиозе поросят Результаты исследований через..., дней Показатель До опыта 3 6 9 12 15 18 21 24 Первая группа (n = 5) Кол-во балантидий 5 3 3 2 2 0 0 0 0 в фекалиях Пало, гол. 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Средняя масса, кг 14,5±0,3 14,5±0,3 14,5±0,3 15±0,1 15,5±0,4 15,7±0,2 16,3±0,3 16,7±0,5 17,2±0,4 17,7±0, Контрольная группа (n = 5) Кол-во балантидий 2 1 1 3 3 4 4 4 5 в фекалиях Пало, гол. 0 0 0 0 0 2 0 0 0 Средняя масса, кг 15,5±0,2 15,5±0,2 15,5±0,2 15±0,4 15±0,4 14,7±0,3 14,5±0,1 14,3 ±0,5 14,1±0,5 14±0, Примечание: Р0,05.
Таблица Профилактическая эффективность ЛПФТ при балантидиозе свиней Результаты исследований на... день жизни Показатель 15 35 40 45 50 55 Опытная группа (n = 12) Кол-во балантидий в фекалиях (цисты) 2 1 1 1 1 1 Заболело, гол. 0 0 0 0 0 0 Пало, гол. 0 0 0 0 0 0 Средняя живая масса, кг 5,2±0,10 15,2±0,34 16,4±0,45 17,7±0,38 18,9±0,41 20,0±0,42 21,5±0, Среднесуточный прирост, г 335±19,2 500±17,8 240±14,8 260±12,6 240±15,1 220±14,4 300±13, Контрольная группа (n = 7) Обнаружено балантидий (ве-гет.), кол-во 0 2 5 5 3 4 Заболело, гол. 0 0 0 5 5 4 Пало, гол. 0 0 0 0 2 0 Средняя живая масса, кг 5,45±0,12 12,5±0,24 12,7±0,35 12,9±0,27 13,0±0,33 13,0±0,33 13,1±0, Среднесуточный прирост, г 340±18,8 350±16,4 40±2,8 40±3,2 20±1,2 0 20±1, Примечание: Р0,05.
Таблица Некоторые биохимические показатели сыворотки крови поросят при использовании ЛПФТ Опытная группа (n = 12) Контрольная группа (n = 7) Результаты исследований на … день жизни Результаты исследовании на … день жизни Показатель 30 (на 15 день 55 (через 10 дней 14 (до приме применения после последней 14 30 нения ЛПФТ) ЛПФТ) дачи препарата) Общий белок, г % 5,05±0,0810 5,55±0,0771 5,39±0,0879 6,29±0,0230 5,94±0,0770 5,45±0, ЛПНП, г/л 0,38±0,0407 0,40±0,0421 1,20±0,0556 1,70±0,0513 1,90±0,0644 2,90±0, Кальций, моль/л 2,919±0,0710 3,218±0,0970 3,907±0,0960 2,719±0,0453 2,370±0,0330 2,295±0, Фосфор, моль/л 2,131±0,0420 2,228±0,0590 2,324±0,0875 1,447±0,0739 1,291±0,0196 1,130±0, Примечание: Р0,05.
2.4. Разработка и оценка эффективности порошков из личинок трутней для лечения свиней с ассоциативным течением балантидиоза Учитывая тот факт, что балантидиоз у свиней чаще протекает в ассоциации с пастереллезом, а при лечении поросят ЛПФТ балантидии остаются в фекалиях, которые могут послужить источником заражения, мы разработали комплексный препарат из личинок трутней и антимикробных препаратов (тилозин и диме тридазол) для повышения резистентности организма животных и лечения сви ней, больных балантидиозом в ассоциации с пастереллезом или сальмонеллезом (получено положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке № 2010153647 приоритет 27.12.2010 г.).
2.4.1. Разработка порошка из личинок трутней Нами был разработан препарат на основе преимагинальных фаз личинок трутней (ПЛТ) по следующей оригинальной методике: на пасеке проводили сбор личинок трутней 10–12-дневного возраста вместе с трутневым молочком, кото рых замораживали при –5 °С, и выдерживали в течение 14 часов, и затем раз мораживали в течение 3–5 часов при комнатной температуре (+18–20 °С), после чего вторично замораживали в течение 60 часов (–18 °С) и вновь размораживали в течение 4,0–5,0 часов, затем проводили сушку под потоком теплого воздуха при температуре 55–60 °С до полного исчезновения жидкости с поверхности личинок и досушивали в термостате при температуре 80 °С в течение 3,5–4,0 часов;
сухой материал гомогенизировали в течение 30–60 с. Получили однородный порошок красно-коричневого цвета, с приятным специфическим запахом, хорошо смачи вающийся водой.
2.4.2. Биохимический состав ПЛТ Чтобы определить биологическую ценность изготовленного препарата, мы ис следовали его аминокислотный состав. Чтобы выяснить, какие вещества теряются при предлагаемом способе изготовления, мы провели исследования состава сырья и готового порошка.
Для испытания брали сырьё (10–12-дневные сырые личинки трутней) и готовый порошок из личинок трутней, полученный по оригинальному способу, описанному в разделе 2.4.1. В таблице 7 приводится состав сырья и готового порошка.
Установлено, что порошок содержит сырого протеина – 33,98 %, сырого жира – 19,36 %, биологических экстрактивных веществ (БЭВ) – 35,71 %, аспаргиновой кислоты – 2,98 %, треонина – 1,27 %, серина – 1,34 %, глютаминовой кислоты – 4,70 %, пролина – 2,32 %, глицина – 1,41 %, аланина – 1,71 %, валина – 1,72 %, изолейцина – 1,67 %, тирозина – 1,61 %, фенилаланина – 1,40 %, гистидина – 1 %, лизина – 1,16 %, аргинина – 1,71 %, цистина – 0,58 %, метионина – 1,11 %;
после приготовления потерь аминокислот и БЭВ в готовом порошке не отмечено, а кон центрация их возросла в 4,37 раза.
Таблица Биохимический состав сырья и готового препарата, % Показатель Личинки трутней сырые Готовый препарат Влага 78,9 7, Сырой протеин 7,78 33, Сырой жир 4,43 19, БЭВ 8,15 35, Аспаргиновая к-та 0,682 2, Треонин 0,291 1, Серин 0,308 1, Глютаминовая к-та 1,076 4, Пролин 0,532 2, Глицин 0,323 1, Аминокислоты Аланин 0,392 1, Валин 0,395 1, Изолейцин 0,383 1, Лейцин 0,592 2, Тирозин 0,369 1, Фенилаланин 0,322 1, Гистидин 0,229 1, Лизин 0,266 1, Аргинин 0,393 1, Цистин 0,135 0, Метионин 0,255 1, Таким образом, в процессе приготовления в порошке возросло количество сырого протеина, сырого жира и всех аминокислот более чем в 4 раза. Порошок оказался ценным компонентом для скармливания животным, так как содержит за менимые (аспаргиновая кислота, серин, глютаминовая кислота, пролин, глицин, аланин, тирозин, цистин) и незаменимые (лизин, метионин, аргинин, треонин, ва лин, лейцин, изолейцин, гистидин, фенилаланин) аминокислоты.
2.4.3. Разработка препарата на основе порошка из личинок трутней для лечения свиней с ассоциативным течением балантидиоза С целью получения препарата для лечения свиней, больных балантидиозом и пастереллезом, на основании ПЛТ, описанного в разделе 2.4.1, изготовили новый препарат путем механического смешивания порошка из личинок трутней, тилози на и диметридазола (ПЛТА).
Нами были выбраны следующие соотношения компонентов:
порошок тилозина 0, порошок диметридазола 0, порошок из личинок трутней остальное до 1 грамма.
Получили однородный красно-коричневого цвета порошок, который исполь зовали для лечения больных балантидиозом в ассоциации с пастереллезом жи вотных.
2.4.4. Микробиологические исследования биологического материала из личинок трутней и ПЛТ. Оценка общей токсичности порошка из личинок трутней Для микробиологического исследования были отобраны пробы сырья (10–12 дневные личинки трутней) и пробы ПЛТ. Они исследованы на наличие: сальмо нелл, патогенной кишечной палочки, протей, энтерококков, анаэробов, патоген ных грибов, Рseudomonas aeruginosa и общую бактериальную обсемененность.
Для определения общего количества микробных тел, энтеропатогенной кишеч ной палочки, сальмонелл, токсинообразующих анаэробов исследования проводили согласно «Правилам бактериологического исследования кормов», утвержденным ГУВ МСХ СССР от 10.06.75 г. Для посевов использованы следующие среды: Среда № 1, МПА, Кода, Китта – Тароцци, Вильсона – Блера, пептонная вода, Киллиана, Левина, XLT4, ЩПС (щелочно-полимиксиновая среда). Для определения патоген ных грибов использовали МУ по санитарно-микологической оценке и улучшению качества кормов, утв. ГУВ МСХ СССР 25.02.1985;
для определения Рseudomonas aeruginosa – МУ по лабораторным исследованиям на псевдомоноз животных и птиц, утв. ГУВ МСХ СССР № 432-3 от 1988 г. Результаты представлены в таблице 8.
Таблица Микробиологические исследования гомогената и ПЛТ Результаты исследования Исследуемый Допустимые НД на методы испытаний гомогенат порошок показатель уровни из личинок из личинок трутней трутней Патогенные Правила бактериологи микроорганизмы, ческого исследования в том числе саль- Не допускается Не обнаружены кормов. Утв. ГУВ МСХ монеллы, в 50 г СССР 10.06. продукта Правила бактериологи Патогенная ческого исследования кишечная Не допускается Не обнаружены кормов. Утв. ГУВ МСХ палочка СССР 10.06. Методика индикации бактерий рода «Проте- Протей Не допускается Не обнаружены ус» от 21.05. Правила бактериологи ческого исследования Энтерококки Не допускается Не обнаружены кормов. Утв. ГУВ МСХ СССР 10.06. Продолжение Результаты исследования Исследуемый Допустимые НД на методы испытаний гомогенат порошок показатель уровни из личинок из личинок трутней трутней Правила бактериологи ческого исследования Анаэробы Не допускается Не обнаружены кормов. Утв. ГУВ МСХ СССР 10.06. Правила бактериологи Общая бактери- Не более 450000 ческого исследования альная обсеме- 500000 микроб- микроб- микроб кормов. Утв. ГУВ МСХ ненность ных тел в 1 г ных тел ных тел СССР 10.06. МУ по санитарно микологической оценке Патогенные и улучшению качества Не допускается Не обнаружены грибы кормов утв. ГУВ МСХ СССР 25.02. МУ по лабораторным исследованиям на псев Рseudomonas домоноз животных Не допускается Не обнаружены aeruginosa и птиц утв. ГУВ МСХ СССР № 432-3 от Результаты проведенных исследований показали, что общая бактериальная обсемененность нативного материала и порошка (ПЛТ) из него меньше допу стимых норм.
К числу наиболее объективных методов определения токсичности относят биотестирование при помощи чувствительных тест-организмов. Для определения токсичности ПЛТ применили методику, где в качестве тест-объекта выступали ин фузории Paramecian caudatum (табл. 9).
Таблица Результаты определения общей токсичности порошка из преимагинальных фаз трутней № пробы Тип пробы Средний показатель Токсичность 1 Контроль 89,25 Не токсична 2 С водным экстрактом 87,5 Не токсична Пробы содержат безопасные для инфузорий вещества, значит, они могут быть использованы животным.
2.4.5. Испытание ПЛТ на лабораторных крысах Порошок из личинок трутней, описанный в разделе 2.4.1, был испытан на ла бораторных крысах 17-недельного возраста, подобранных по принципу аналогов, в дозе 0,75 г/кг массы тела. Препарат давали с кормом 2 раза в день в течение 12 суток. Животных взвешивали до и после опыта. Исследовали гематологические показатели крови крыс на 14 день с начала опыта. В качестве контроля использо вали группу животных, не получавших препарат. В крови определяли количество эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов, лейкоцитов, средний объем эритроцита.
Результаты представлены в таблицах 10 и 11.
Таблица Масса тела крыс при испытании ПЛТ Средние показатели массы Количество животных тела животных, г № группы Препарат Дозы, мг/кг в группе до опыта после опыта 1 (опыт) 3 ПЛТ 750 266,7±5,774 300± 2 (контроль) 3 – – 273,3±5,773 276,7±5, Таблица Гематологические показатели у крыс при испытании ПЛТ Группы Гематологические показатели Опыт Контроль Гемоглобин, g/l 139,3±3,055 85,33±30, Эритроциты, m/ul 7,19±0,5092 4,973±1, Гематокрит, % 41,77±2,098 38,45±0, Лейкоциты, k/ul 3,723±1,104 6,707±2, Среднее содержание гемоглобина в эритроците, pg 19,4±1,217 17,07±0, Средний объем эритроцита, 58,2±3,451 55,2±1, Тромбоциты 961±235,9 691,7±117, Анализируя результаты исследований, следует отметить, что в опытной группе крыс масса тела увеличилась на 13,7 %, а в контрольной – лишь на 2,5 %. В опыт ной группе по сравнению с контрольной возросло: количество гемоглобина – на 37,5 %, количество эритроцитов – на 30,9 %, гематокрит – на 9 %, среднее содер жание гемоглобина в эритроците – на 9,6 %, средний объем эритроцита – на 5,2 %, количество тромбоцитов – на 28,1 %.
Таким образом, порошок, полученный по разработанному нами способу, спо собствует увеличению живой массы и увеличению количества эритроцитов и уровня гемоглобина в крови крыс.
2.4.6. Испытание ПЛТА на лабораторных крысах Порошок из личинок трутней, тилозина и диметридазола был испытан на ла бораторных крысах 17-недельного возраста, подобранных по принципу аналогов, в дозе 1 г/кг массы тела. Препарат давали с кормом 2 раза в день в течение 12 су ток. Животных взвешивали до и после опыта (табл. 12).
Таблица Масса тела крыс при испытании ПЛТА Средние показатели массы Количество Дозы, тела животных, г № группы животных Препарат мг/кг в группе до опыта после опыта Препарат из личинок 1 (опыт) 3 трутней, тилозина 1000 297,7±10,02 300±9, и диметридазола Тилозин 2 (контроль) 3 90 и 200 350±16,37 313±13, и диметридазол Исследовали гематологические показатели крови крыс на 14 день с начала опыта. В качестве контроля использовали группу животных, получавших только тилозин и диметридазол в дозе 0,09 и 0,2 г соответственно. В крови определяли количество эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов, лейкоцитов, средний объем эритроцита (табл. 13). Анализируя полученные результаты исследований, следует отметить, что масса тела у животных опытной группы осталась в тех же пределах, а в контроле снизилась на 10 %.
У животных опытной группы количество гемоглобина увеличилось на 3,3 % по сравнению с контролем, остальные параметры изменились незначительно.
Таблица Гематологические показатели у крыс при испытании ПЛТА Группы Гематологические показатели Контроль Опыт Гемоглобин, g/l 149,3±20,23 154± Эритроциты, m/ul 4,927±1,605 Гематокрит, % 38,1±0,954 37,93±0, Лейкоциты, k/ul 4,68±0,3304 4,373±2, Среднее содержание гемоглобина в эритроците, pg 33,03±12,5 38,5±1, Средний объем эритроцита, 54,63±2,743 55,3±1, Руководствуясь этими данными, мы предположили, что препарат из личинок трутней снижает негативное действие антибиотиков, что не приводит к снижению массы тела животных.
2.5. Изучение эффективности ПЛТА при балантидиозе свиней в ассоциации с пастереллезом Опыты проводили на свиньях крупной белой породы, заболевших спонтанно балантидиозом при смешанном течении с пастереллезом. Использовали 10 поро сят 1,5-месячного возраста живой массой 15–18 кг, у которых наблюдали клини ческие признаки: понос, кровоизлияния и цианоз видимых слизистых оболочек и посинение кожи, угнетение, отсутствие аппетита и исхудание. При исследовании нативных мазков из теплых фекалий от больных поросят в поле зрения микро скопа были обнаружены от двух до пяти движущихся балантидий. В сыворотке крови больных животных обнаружены антитела к пастереллам и сальмонеллам.
Больных поросят разделили на две группы по 5 голов.
Животным первой группы ПЛТА скармливали внутрь 2 раза в день в течение 12 суток в дозе 1 г/кг массы тела групповым методом в смеси с кормом. Поросятам второй (контрольной) группы скармливали только тилозин и диметридазол в дозе 0,09 и 0,2 г/кг соответственно в течение 12 дней. В течение опыта все животные находились в одном помещении, содержались в одинаковых условиях, но в разных станках, получали один и тот же рацион кормления.
Учет результатов проводили до постановки опыта и на 3, 6, 9, 12 дни после дачи препаратов. Определяли живую массу поросят, исследовали нативные мазки фекалий и клиническое состояние животных обеих групп. Результаты опыта пред ставлены в таблице 14.
Таблица Терапевтическая эффективность ПЛТА при ассоциированном балантидиозе свиней Результаты исследований через … дней Показатель До опыта 3 6 9 Первая группа (n = 5) Кол-во балантидий 5,4±1,817 3,2±1,483 1,4±1,14 1,4±1,342 0,2±0, в фекалиях Пало, гол. 0 0 0 0 Средняя масса, кг 16,6±0,3391 16,6±0,3362 17±0,3161 17,4±0,3675 17,9±0, Контрольная группа (n = 5) Кол-во балантидий 4,4±1,817 3,25±1,258 2,75±0,9574 1,5±0,7071 1±1, в фекалиях Пало, гол. 0 1 0 2 Средняя масса, кг 17,1±0,3741 16,98±0,4349 16,68±0,1707 16,5±0,2829 16,2±0, У поросят первой группы после 12 дня применения ПЛТА – балантидий в мазках фекалий не обнаруживали. У животных контрольной группы вегетатив ные формы балантидий обнаруживали на протяжении всего опыта. Пало 3 по росенка: 1 – на 3 и 2 – на 9 дни опыта. Средняя масса поросят первой группы увеличилась к окончанию опыта в среднем на 1,3 кг, а в контрольной группе снизилась на 0,9 кг. Все поросята опытной группы выздоровели, а в контрольной группе 3 поросенка пали.
Применение ПЛТА способствовало излечению поросят и приросту их живой массы тела на 7,8 %.
2.6. Экономическая эффективность использования предлагаемого препарата На основании опыта по изучению эффективности ПЛТА при балантидиозе свиней в ассоциации с пастереллезом мы провели расчет экономической эффек тивности предлагаемого нами препарата из преимагинальных фаз трутней и анти микробных компонентов. Данные представлены в таблице 15.
Таблица Экономическая эффективность лечения препаратом из преимагинальных фаз трутней при балантидиозе свиней Группа Показатель Опыт Контроль 1. Количество животных, гол.:
на начало опыта 5 на конец опыта 5 2. Продолжительность опыта, дней 12 3. Живая масса, кг:
на начало опыта 16,6 17, на конец опыта 17,9 16, 4. Абсолютный прирост живой массы 1 гол., кг 1,3 –0, 5. Сохранность поросят, % 100 6. Затраты на лечение, курс 750 7. Цена реализации 1 кг свинины (ж. м.) 110 8. Экономич. эф. прибыль (+), убыток (–), руб. +985 – 9. Экономич. эффективность на руб. затрат +1,4 –7, За 12 дней у животных опытной группы был получен прирост живой массы 1,3 кг, у животных контрольной группы потеря массы составила –0,9 кг. В опытной группе сохранность поросят составила 100 %, а в контрольной – всего лишь 40 %.
Несмотря на то что на лечение животных контрольной группы было затрачено меньше средств (644 руб.), чем в опытной (750 руб.), расчеты показали, что эконо мическая эффективность в опытной группе составила +985 руб., а в контрольной группе она составила –3283 руб. Экономическая эффективность на 1 рубль затрат в опытной группе составила +1,4 руб/затрат, а в контрольной –7,09 руб/затрат.
Таким образом, применение препарата из личинок трутней и антимикробных ком понентов при лечении балантидиоза свиней является экономически целесообразным.
3. ВЫВОДЫ 1. В Петровском районе Ставропольского края балантидиоз свиней с 2005 по 2009 гг. регистрируется ежегодно до 5,4 %;
в том числе в ассоциации с па стереллезом до 0,99 % в частном секторе чаще, чем в общественном.
2. Применение лиофилизированного препарата из преимагинальных фаз трутней, разведенного 1 : 10 дистиллированной водой, в дозе 1 мл/кг жи вой массы в течение 20 дней в комплексе с метронидом-50 в дозе 1 мл/10 кг живой массы для лечения больных балантидиозом поросят способствует их излечению.
3. Лиофилизированный препарат из преимагинальных фаз трутней, разведен ный 1 : 10 дистиллированной водой, примененный в дозе 1 мл/кг массы тела в течение 30 дней (с 15 по 45 сутки) один раз в сутки, является высоко эффективным средством для профилактики балантидиоза свиней и способ ствует нормализации биохимических показателей крови свиней.
4. Разработаны порошки из личинок трутней и препарат на его основе с со держанием тилозина и диметридазола, который содержит незаменимые и заменимые аминокислоты.
5. Скармливание порошка из личинок трутней крысам (0,75 г/кг) дважды в день в течение 12 суток способствовало увеличению живой массы тела – на 13,7 %, гемоглобина – на 37,5 %, эритроцитов – на 30,9 %, тромбоцитов – на 28,1 %.
6. Скармливание препарата на основе порошка из личинок трутней и анти биотиков (тилозин и диметридазол) поросятам 1,5–2-месячного возраста в дозе 1 г/кг живой массы тела в течение 12 дней эффективно при ассоциа тивном течении балантидиоза и пастереллеза и способствует увеличению живой массы на 2,2 кг по сравнению с контролем.
4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ Для профилактики балантидиоза у поросят использовать лиофилизированный препарат из преимагинальных фаз трутней с кормом, разведенный 1 : 10 дистил лированной водой, в дозе 1 мл/кг массы тела в течение 30 дней (с 15 по 45 сутки) один раз в сутки.
Для лечения поросят, больных балантидиозом в ассоциации с пастереллезом и сальмонеллезом, скармливать порошок из личинок трутней, тилозина и диметри дазола в дозе 1 г/кг живой массы тела в течение 12 дней.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Силин, Ю. С. Балантидиоз свиней / Ю. С. Силин // Паразитарные, инфек ционные и неинфекционные заболевания животных : сб. науч. тр. по ма териалам Междунар. науч.-практ. Интернет-конференции (1–15 декабря 2008 г.) / Ставропольский государственный университет. – Ставрополь :
АГРУС, 2009. – С. 99–102.
2. Силин, Ю. С. Биология, диагностика и профилактика балантидиоза свиней :
рекомендации / О. А. Гевлич, С. Н. Луцук, Ю. С. Силин ;
Ставропольский го сударственный аграрный университет. – Ставрополь : АГРУС, 2009. – 20 с.
3. Силин, Ю. С. Краткая характеристика балантидиоза свиней и его распро страненность / Ю. С. Силин // Диагностика, лечение и профилактика забо леваний сельскохозяйственных животных : сб. науч. тр. по материалам 73-й науч.-практ. конф. (23–25 февраля 2009 г.). – Ставрополь : АГРУС, 2009. – С. 90–92.
4. Силин, Ю. С. Лечебная и профилактическая эффективность биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней при балантидиозе свиней / С. Н. Луцук, Ю. В. Дьяченко, Ю. С. Силин // Ветеринария Куба ни. – 2011. – № 2. – С. 10–12.
5. Силин, Ю. С. Эффективность препарата из личинок трутней и антибиотиков для лечения свиней, больных балантидиозом / Ю. С. Силин, С. Н. Луцук, Ю. В. Дьяченко // Вестник ветеринарии. – 2011. – № 4 (59). – С. 80–82.
Подписано в печать 21.12.2011. Формат 60х84 1/16.
Гарнитура «Таймс». Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,2.
Тираж 120. Заказ № 412.
Отпечатано в типографии издательско-полиграфического комплекса СтГАУ «АГРУС», г. Ставрополь, ул. Мира, 302.