Влияние нефтяного загрязнения на растительный покров и свойства почв (на примере степной зоны предуралья)
На правах рукописи
ЕРМАКОВА Ольга Юрьевна ВЛИЯНИЕ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА РАСТИТЕЛЬНЫЙ ПОКРОВ И СВОЙСТВА ПОЧВ (НА ПРИМЕРЕ СТЕПНОЙ ЗОНЫ ПРЕДУРАЛЬЯ) Специальность: 03.02.01 – Ботаника, 03.02.08 – Экология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Оренбург – 2011
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургский государственный педагогический университет» Научные руководители: РУСАНОВ Александр Михайлович доктор биологических наук, профессор РЯБИНИНА Зинаида Николаевна доктор биологических наук, профессор
Официальные оппоненты: Соловых Галина Николаевна доктор биологических наук, профессор Демкин Виталий Александрович доктор биологических наук, профессор
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Мордовский государствен ный университет им. Н.П. Огарёва»
Защита диссертации состоится «27» декабря 2011 г. в 12:00 на засе дании диссертационного совета Д 212.180.02 при Федеральном государ ственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессио нального образования «Оренбургский государственный педагогический университет» по адресу: 460014, г. Оренбург, ул. Советская, 19.
Тел.(факс): 8 (3532) 77-24-52. Е-mail: [email protected].
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный педагогический университет».
Автореферат разослан «26» ноября 2011 г. и размещен на офици альном сайте ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный педагоги ческий университет» www.ospu.ru
Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент Н.И. Мушинская
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы исследования. Загрязнение окружающей среды нефтью и нефтепродуктами в последнее время составляет одну из наиболее актуальных проблем экологии. Важным аспектом этой про блемы является влияние углеводородного загрязнения на почвы и расти тельность. Изучение влияния загрязнения почвы нефтью и изменения в этой связи экологии растений имеет важное теоретическое и практиче ское значение. Это связано, прежде всего, с масштабами загрязнения уг леводородами нефти окружающей среды. В пределах Оренбургской об ласти находится 162 крупных месторождения нефти, 25 месторождений нефти и газа и 16 месторождений нефти и газового конденсата.
Многочисленные исследования показывают крайне негативное влияние нефтяного загрязнения почвы на рост и развитие растений. При этом основными факторами являются токсическое действие углеводоро дов нефти и изменение физико-химических свойств почвы. Рост гидро фобности и другие изменения физических свойств почвы обусловлены тяжелыми фракциями углеводородов, а прямой токсический эффект оп ределяется легкими фракциями углеводородов нефти. Кроме того, обво лакивание нефтью почвенных частиц препятствует миграции подвиж ных форм фосфора, азота, калия и других незаменимых элементов в рас твор и тем самым может вызвать угнетение растений за счет недостатка элементов питания. Растения в процессе своей жизнедеятельности вхо дят в сложные взаимоотношения с микроорганизмами, населяющими почву. Нефтяное загрязнение вызывает изменения в растительно микробных комплексах, в первую очередь в границах ризосферы, где происходит адаптация микробиоты к условиям окружающей среды.
Имеющиеся данные в отношении действия углеводородов нефти на растения весьма противоречивы. Недостаточно изучено видовое раз нообразие растений, способных произрастать на нефтезагрязненных почвах. Знание степени устойчивости растений к углеводородному за грязнению необходимо для решения вопросов, связанных, с одной сто роны, с возможностью их возделывания на загрязненной почве, а с дру гой – с использованием для восстановления нарушенного почвенного плодородия (фиторемедиация).
В связи с выше изложенным большой научный и практический интерес представляет изучение влияния различных доз нефти на изме нение растительного покрова, свойства почв и оценка их фитотоксично сти, что в совокупности определяет актуальность заявленной темы.
Цель работы – исследование динамики растительного покрова и основных свойств чернозема южного Оренбургского Предуралья под влиянием различных доз нефтяного загрязнения.
Для достижения цели исследования были поставлены и решены следующие основные задачи:
изучить динамику растительного покрова на черноземах юж ных в условиях разных доз нефтяного загрязнения;
оценить фитотоксичность исследуемых почв при различных концентрациях нефтяного загрязнения;
определить степень влияния различных доз нефтяного загряз нения на основные свойства чернозема южного;
выявить способность исследуемых почв к самовосстановлению.
Объекты исследования. Объектами исследования послужили участки чернозема южного степной зоны Предуралья.
Научная новизна работы заключается в следующем:
впервые выявлена степень устойчивости растительного покрова в условиях типичной степи Предуралья при нефтяном загрязнении почв;
впервые выполнен комплексный анализ экологического состоя ния чернозема южного в условиях нефтяного загрязнения;
впервые в почвенно-климатических условиях региона опреде лены уровни концентрации нефти, при которых возможно восстановле ние основных свойств чернозема южного и видового состава раститель ности без применения методов рекультивации.
Практическая значимость работы:
Результаты исследования могут использоваться при решении во проса обустройства дополнительных скважин Восточного участка Орен бургского нефтегазоконденсатного месторождения (НГКМ) и приме няться при решении вопросов диагностики и нормирования содержания нефти в почвах в рамках регионального экологического мониторинга земель.
Положения, выносимые на защиту:
1. Загрязнение чернозема южного разными концентрациями нефти проявляется через уменьшение общего проективного покрытия фитоце ноза, доли видов семейств мятликовых, розоцветных и астровых. Высо кий уровень загрязнения почвы нефтью (более 5000 мг/кг) влечет за со бой возрастание их фитотоксичности по отношению к индикаторным тест-культурам.
2. Концентрации нефти 12 и 18 % отрицательно влияют на физиче ские, химические и биологические свойства чернозема южного, снижают видовое разнообразие растений и ухудшают их экологическое состояние.
3. При невысоких концентрациях нефти (до 3%) в течение трех лет черноземы южные способны практически полностью восстановить свои свойства и, как следствие, произрастающую на них растительность.
Апробация работы. Основные положения диссертационной рабо ты представлялись и докладывались: на Всероссийской научно практической конференции с международным участием «Водохозяйст венные проблемы и рациональное природопользование», г.Оренбург – Пермь, 2008 год;
на Всероссийской научной конференции «Охрана ок ружающей среды на объектах нефтегазового комплекса», г. Туапсе, 2006 год;
на VII Всероссийской научной конференции с международным участием студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы иннова ционного развития агропромышленного комплекса. Будущее АПК», г. Астрахань, 2011 год;
на V Всероссийской научно-практической кон ференции «Проблемы экологии Южного Урала», г. Оренбург, 2011 год.
Публикации. По теме исследования опубликовано 10 научных работ, в том числе 6 статей в изданиях, входящих в Перечень россий ских рецензируемых научных журналов, в которых должны быть опуб ликованы основные научные результаты диссертаций на соискание уче ных степеней доктора и кандидата наук.
Структура и объем работы.
Диссертационная работа изложена на 140 страницах машинопис ного текста и состоит из введения, литературного обзора, описания объ ектов и методов исследования, двух глав собственных исследований, выводов и списка использованных источников. Диссертация содержит 15 рисунков, 11 таблиц, список использованных источников из 226 на именований, в том числе 23 на иностранных языках, 9 приложений.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ РАБОТЫ Во введении обоснована актуальность темы, цель и задачи работы.
1 Влияние разработки нефтегазоконденсатного месторожде ния на естественную растительность и почвы В главе анализируются имеющиеся литературные данные, касаю щиеся проблемы изменения растительного покрова и экологического со стояния почвенного покрова под влиянием нефтяного загрязнения.
Описано влияние нефтяного загрязнения на устойчивость естественных фитоценозов и фитотоксичность почв, физические и химические свойст ва почв, на изменение их микробиологической и ферментативной актив ности. Рассмотрены вопросы биомониторинга, фиторемедиации и про блемы нормирования загрязненных нефтью почв.
2 Объекты и методы исследования Объектами исследования послужили квазинатуральные расти тельные сообщества Оренбургского Предуралья, представленные типча ково-ковыльным сообществом (Stipa lessingiana Trin. еt Rupr. + Festuca valesiaca Gaudin) на черноземе южном карбонатном среднемощном (гу мус 2,7%, pH=7,80, Nобщ – 0,26%). Стационарный опыт был заложен на выровненных экспериментальных площадках размером 1м2 в трехкрат ной повторности для геоботанических, ботанических и почвенных ис следований. Всего было заложено 12 нефтезагрязненных площадок (концентрация нефтяного загрязнения – 3, 6, 12, 18% от массы почвы) и 3 контрольных площадки (незагрязненная почва). Для загрязнения ис пользовали товарную нефть Оренбургского нефтегазоконденсатного ме сторождения (содержание парафинов – 2,4%, серы – 2,5%, плотность 883 – 893 кг/м3). Почвенные образцы отбирались из верхнего слоя почвы – 0-30 см. Опыт проводился в течение трех лет – 2008, 2009 и 2010 год.
Длительность нефтяного загрязнения рассчитана от 2008 года.
Методы исследования включали традиционные лабораторные ана лизы и полевые наблюдения. Выявление флористического состава осуще ствлялось с помощью современных литературных источников (Флора нижнего Поволжья, т.т. 1,2, 2006;
Рябинина, Князев, 2009). Геоботаниче ские описания растительности проводились общепринятыми методами (Полевая геоботаника (1959-1976);
Раменский, 1956;
Шенников, 1961;
Ипатов, 2000;
Ипатов, Мирин, 2008). Фитотоксичность загрязненной поч вы определяли по ГОСТ РИСО 22030-2009, 2010. Численность микроор ганизмов в почве определяли с помощью посева почвенной суспензии на твердые питательные среды. Продуцирование углекислого газа почвой определяли по Макарову Б.Н. в модификации Галстяна А.Ш. (1986). Ак тивность каталазы исследовалась по газометрическому методу Галстяна А.Ш. (1986). Целлюлозолитическую активность почв – по Звягинцеву Д.Г. (1991). Содержание органического вещества в почве и фракционно групповой состав гумуса – по методу Тюрина И.В. (1993, 1968). Анализ проб на содержание нефтепродуктов был проверен согласно ПНДФ 16.1:2.2.22-98. Определение плотности почвы осуществлялось буровым методом (1986). Определение водопроницаемости проводилось методом трубок по Вадюдиной А.Ф., Корчагиной З.А. (1986). Агрегатный анализ выполнялся методом сухого и мокрого просеивания по Саввинову Н.И.
(1977).
3 Динамика растительного покрова и фитотоксичность загрязненных нефтью почв 3.1 Влияние нефтяного загрязнения на растительный покров и фитотоксичность чернозема южного в условиях полевого эксперимента Систематический список высших растений района исследований включает 204 вида, 153 рода, относящихся к 55 семействам. Наиболее многочисленны в родовом отношении следующие семейства: Asteraceae, Poaceae, Fabaceae, Rosaceae, Lamiaceae. Наибольшим количеством видов представлены семейства: Asteraceae, Poaceae, Fabaceae, Rosaceae, Lamiaceae. Самые многовидовые роды Artemisia, Astragalus, Potentilla, Stipa (табл. 1).
Флористический состав экспериментальных участков (не загряз ненных нефтью) представлен такими семействами как Asteraceae, Fabaceae и Poaceae (табл. 1). В их состав входят 10, 7 и 8 видов растений, что составило 21,7 %, 15,2 %, 17,4 % от общего количества видового со става соответственно. Участки на начальном периоде исследования (2008 г.) были представлены типчаково-ковыльным сообществом (Stipa lessingiana Trin. еt Rupr. + Festuca valesiaca Gaudin). Общее проективное покрытие составляло 60 – 75 %, высота травостоя 40 – 50 см. На долю мятликовых и бобовых приходится 8 и 7 видов, на долю разнотравья – 31 вид. Единично в травостое присутствовали Chenopodiaceae L., Ranun culus acris L. и т.д.
Таблица 1 – Ведущие семейства растений контрольных участков исследования на черноземах южных № Название Число видов % от общего Число родов семейства числа видов в семействе 1 Asteraceae 10 21,7 2 Poaceae 8 17,4 3 Fabaceae 7 15,2 4 Scrophulariaceae 4 8,7 5 Rosaceae 3 6,5 6 Apiaceae 2 4,3 7 Polygonaceae 2 4,3 8 Rubiaceae 2 4,3 9 Chenopodiaceae 1 2,2 10 Ranunculaceae 1 2,2 В результате эксперимента было выявлено, что нефтяное загряз нение отразилось на формировании побегов и, в дальнейшем, на прохо ждении фазы цветения. При дозах загрязнения 6, 12 и 18 % фаза бутони зации наступила в более поздние сроки. Наблюдения показали, что зна чительные дозы нефти в почве приводили к высыханию листовой пла стины и, как следствие, к гибели растений. Из содержания таблицы следует, что наиболее чувствительными видами к нефтяному загрязне нию являются представители семейства Мятликовых (Poaceae Barnhart.) на первых сроках загрязнения. Виды семейств Астровые (Asteraceae Dumort.) и Розоцветные (Rosaceae Juss.) также оказались не устойчивы ми к минимальным дозам углеводородного загрязнения, особенно при его длительных сроках. Наиболее устойчивые виды встречаются среди семейства Бобовых (Fabaceae Lindl.).
Таблица 2 – Доминирующие семейства растений участков иссле дования, загрязненных различными концентрациями нефти Число видов № Семейство Содержание п/п 0 3 6 12 нефти в почве, % 1 Poaceae 8 7 6 2 2 Polygonaceae 2 2 2 2 3 Rosaceae 3 2 2 0 4 Fabaceae 7 7 7 7 5 Asteraceae 10 8 6 1 6 Ranunculaceae 1 1 1 0 1 Poaceae 8 8 8 6 2 Polygonaceae 2 2 2 2 3 Rosaceae 3 3 3 2 4 Fabaceae 7 7 7 7 5 Asteraceae 10 10 8 3 6 Ranunculaceae 1 1 1 1 Участки, загрязненные нефтью в первый год наблюдений, отлича лись снижением общего проективного покрытия, которое составляло 55% при 3-х %-ом загрязнении и всего 15% при 18%-ой дозе нефти.
Средняя высота травостоя снижалась от 30-35 до 9-12 см. Уже при не высоких дозах загрязнения (3, 6%) из травостоя исчезла кровохлебка ле карственная (Sanguisorba officinalis L.) и лабазник вязолистный (Filipendula ulmaria L.), которые встречаются только на контрольном участке. Эти растения наиболее требовательны к влаге, количество ко торой снижается на участках загрязненных нефтью.
При 6, 12 и 18%-ой дозе нефти из травостоя исчезают тимофеевка степная (Phleum phleoides (L.) Karst.) и мятлик луговой (Poa pratensis L.).
Значительно сократилась доля козлобородника большого (Tragopogon major Jacq.), одуванчика лекарственного (Taraxacum officinale Wigg.), тысячелистника обыкновенного (Achillea millefolium L.), мятлика узко листного (Poa angustifolia L.), ковыля Лессинга (Stipa lessingiana Trin. & Rupr.). Большинство из вышеперечисленных видов имеют мочковатую корневую систему и остро реагируют на увеличение плотности нефте загрязненных почв. Полное исчезновение одних видов и сокращение других может быть связано не столько с физиологическими особенно стями растений, сколько с неравномерным распределением нефти по по верхности и профилю почвы. Вязкая природа нефти и полидисперсность почвы не позволяют смоделировать идеально равномерное распределе ние загрязнителя на опытном участке.
В 2009 году на участке с 3-х %-ой дозой нефти такие показатели угнетения естественной растительности как фитомасса, высота травостоя и общее проективное покрытие недостоверно отличаются от контрольно го участка. На участках с более высокой концентрацией нефти явления угнетения растительности подтверждаются результатами математической обработки (Microsoft Office Excel 2003, Statistica StatSoft 6.0).
На завершающем этапе исследований (2010 г.) практически пол ностью восстанавливаются участки с 3-х %-ой дозой нефти. Лишь неко торые виды представлены единично в отличие от незагрязненной почвы.
Среди них – Poa angustifolia L., Festuca valesiaca Gaudin., Stipa lessingiana Trin. & Rupr. (семейство Poaceae). При 6%-ом загрязнении присутствие видов ниже на 25-30%, чем на контрольном участке, но нет исчезающих.
Процесс их дальнейшего выпадения прекращается. При более высоких концентрациях нефти некоторые виды, отмеченные на контроле, отсут ствуют и на последнем году эксперимента.
Таким образом, к индикационным признакам степени загрязнения чернозема южного нефтью следует отнести уменьшение общего проек тивного покрытия фитоценоза, снижение в видовом составе доли мятли ковых, розоцветных и астровых, выпадающих из травостоя начиная с небольших доз загрязнения.
Среди изученных видов растений наиболее устойчивыми к нефтя ному загрязнению оказались Клевер ползучий (Amoria repens (L.) C. Presl.), Люцерна серповидная (Medicago falcata L.), Клевер луговой (Trifolium pratense L.), Эспарцет песчаный (Onobrychis arenaria (Kit.) DC.), Горошек мышиный (Vicia cracca L.). При снижении концентрации нефтяного загрязнения к осени 2009-весне 2010 года первыми на восста навливающейся почве появляются виды семейства злаковых, исчезнув шие на ранних сроках загрязнения – Кострец безостый (Bromopsis inermis (Leyss.) Holub.), Пырей ползучий (Elytrigia repens (L.) Nevski.), Овсяница волжская (Festuca valesiaca Gaudin.), Лисохвост луговой (Alopecurus pratensis L.) Динамика геоботанических показателей участков, загрязненных различными дозами нефти за 2008, 2010 года представлена в таблице 3.
Таблица 3 – Динамика геоботанических показателей участков, загрязненных различными дозами нефти Геоботанические показатели жание нефти, мг/кг Остаточное содер Концентрация за грязнителя, % Общее проектив ное покрытие, % земной фитомас Отношение под Средняя высота сы к надземной Общие запасы фитомассы, фитомасса, фитомасса, Подземная Надземная травостоя, ц/га ц/га ц/га см 2008 год Контроль 3±0,7 75-65 50-45 198,0 86,4 284,4 2, (0%) 2 563± 3% 60-55 35-30 190,2 82,5 272,7 2, 640, 4 892± 6% 50-35 18-15 98,3 75,4 173,7 1, 1 223, 11 255± 12% 25-20 16-12 74,1 58,7 132,8 1, 2 813, 16 989± 18% 20-15 12-9 30,2 25,6 55,8 1, 4 247, 2010 год Контроль 2,0±0,5 70-60 45-35 179,5 79,6 259,1 2, (0%) 394,3± 3% 65-60 40-35 171,4 73,9 245,3 2, 63, 1 347,5± 6% 60-55 30-20 115,6 69,3 184,9 1, 336, 5 567,0± 12% 30-25 18-15 91,3 65,8 157,1 1, 1 391, 11 076,0± 18% 20-15 15-10 36,7 29,4 66,1 1, 2 769, Исследования 2008 года показали, что с ростом дозы нефтяного загрязнения биопродуктивность растительных сообществ уменьшается.
Объем подземной фитомассы также снижается, что связано с изменени ем видового состава фитоценозов, его обилием и с анатомическим строением корневых систем растений, получивших распространение в новых экологических условиях: мочковатая у мятликовых заменяется стержневой большинства видов степного разнотравья. На момент за вершения исследования (2010 г.) растительность контрольного участка осталась без изменений. Общее проективное покрытие составило 70 – 60 %. Высота надземных побегов в сообществах уменьшилась до 45 – см, что, видимо, связано с погодными (засушливыми) условиями года исследования. Флористическое богатство на площадке описания пред ставлено 46 видами. Доминирующее положение, так же как и в 2008 го ду, продолжают занимать Stipa lessingiana Trin. et Rupr и Festuca valesiaca Gaudin. Величина подземной фитомассы оказалась в 2,3 раза больше надземной и составила 179,5 ц/га. Общие запасы фитомассы со ставили - 259,1 ц/га. На участках с 3 % загрязнением остаточное содер жание нефти к 2010 году достигает допустимого уровня (~ 394,3 мг/кг).
Геоботанические показатели исследуемых участков с этим уровнем за грязнения приближаются к таковым на контрольном участке.
Участки с 6, 12 и 18% дозой нефти по-прежнему демонстрируют снижение общего проективного покрытия до 15%, средней высоты тра востоя до 10 см, надземной и подземной биомассы до 29,4 ц/га и 36,7 ц/га соответственно и снижение запасов гумуса до 66,1 ц/га.
Исходя из полученных результатов можно сделать вывод, что рас тениями, наиболее устойчивыми к нефтяному загрязнению почв, явля ются представители семейства Fabaceae. По данным многих авторов (Илларионов С.А., 2003;
Салахова Г.М., 2007;
Киреева Н.А., 2005) именно бобовые и некоторые виды мятликовых используются в качестве фитомелиорантов нефтезагрязненных почв.
3.2 Оценка фитотоксичности загрязненного нефтью чернозема южного в лабораторных условиях Для определения фитотоксичности почв в лабораторных условиях принято использовать быстрорастущие однолетние однодольные и дву дольные растения. В данной работе использовались четыре индикатор ные тест-культуры: Phaseolus vulgaris L., Raphanus sativus L., Lepidium sativum L., Spinacia oleracea L.
Исследования всхожести семян тест-культур на чернозёме южном, загрязнённом различными дозами нефти, показали, что наиболее пагуб ное влияние нефть оказала на семена Spinacia oleracea L. (рисунок 1).
Выявлено, что всхожесть семян (y) тест-культур в течение трех лет уменьшается с возрастанием концентрации нефтяного загрязнения (x) и описывается уравнениями следующего вида: y = 87,7 – 4,5•x (Spinacia oleracea L.);
y = 98,2 – 1,3•x (Lepidium sativum L.);
y =102,6 – 1,9•x (Raphanus sativus L.);
y = 99,2 – 3,9•x (Phaseolus vulgaris L.).
В контрольном образце наиболее высокий процент всхожести во всех вариантах опыта оказался у Lepidium sativum L.
В образцах с дозой нефти 3, 6 и 12 % всхожесть семян Lepidium sativum L. достоверно не отличается от контрольного образца и уменьшается при 18 %-ом загрязнении. Подобная тенденция обна руживается и при исследовании всхожести семян Phaseolus vulgaris L. и Raphanus sativus L. (рис.1).
90 80 всхожесть семян, % всхожесть семян, % 70 60 50 40 30 20 10 0 01 234 567 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 01 23 456 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 концентрация нефти, % концентрация нефти, % Фасоль Редис Кресс-салат Шпинат Фасоль Редис Кресс-салат Шпинат а б всхожесть семян, % 01 23 45 67 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 концентрация нефти, % Фасоль Редис Кресс-салат Шпинат в Рисунок 1 – Всхожесть семян тест-культур в нефтезагрязненной почве: а – 2008 г.;
б – 2009 г.;
в – 2010 г.
При изучении влияния нефтяного загрязнения на энергию прорастания семян тест-культур выявилась общая закономерность. У всех растений процент нормально проросших семян максимален в кон трольном образце. В 2008 году доза нефти 6, 12 и 18% вызывает сниже ние энергии прорастания семян всех тест-культур более чем на 20%, что свидетельствует о проявлении фитотоксического эффекта. В 2009 году такая ситуация наблюдается при 12%-ом загрязнении, а в 2010 году – при 18%-ой дозе нефти. Семена Spinacia oleracea L. во всех вариантах опыта демонстрируют самые низкие значения энергии прорастания.
При исследовании воздействия нефтяного загрязнения на длину проростков Phaseolus vulgaris L. обнаружено, что в 2008 году при 3 %-ой дозе загрязнителя длина надземной части растения Phaseolus vulgaris L., по сравнению с контрольным образцом, уменьшилась на 50 %, а длина корней сократилась почти в 4 раза. При 6%-ом загрязнении почвы неф тью длина надземной части растений Phaseolus vulgaris L. уменьшается образцах с концентрацией нефтяного загрязнения 12 и 18% данная тест культура не проросла. В 2009 году растения не проросли лишь при 18%-ой дозе нефти. В 2010 году при максимальной дозе нефти растения Phaseolus vulgaris L. проросли, но имели минимальную длину как над земной части, так и корней. Доза нефти в почве в 3 и 6% не вызывали фитотоксического эффекта по отношению к данной тест-культуре на третий год после загрязнения.
Исследования длины проростков Raphanus sativus L. показали, что в первый год загрязнения уже 3%-ая доза нефти вызывает слабый фито токсический эффект, который не был выявлен в 2009 и 2010 годах. Через три года после загрязнения (2010 год) растения Raphanus sativus L. слабо прорастают при максимальной концентрации нефти. На этом сроке ин кубации фитотоксический эффект не проявляется при 3%-ой дозе нефти, а 6%-ая доза нефти вызывает слабую фитотоксичность.
Аналогичная ситуация наблюдалась с проростками Lepidium sativum L. Длина и надземной и подземной части растений Lepidium sativum L. максимальна в контрольном образце почвы. В 2008 году при 3 %-ом загрязнении длина надземной части уменьшается в 4,5 раза, по сравнению с контрольным образцом, а длина корней – в 4 раза. Но рас тения Lepidium sativum L. оказались более чувствительны к нефтяному загрязнению, чем предыдущие тест-культуры. Семена этого растения не проросли уже при 6%-ом загрязнении почвы нефтью, а 3%-ое загрязне ние оказало высокий фитотоксический эффект. На второй год после за грязнения образцы чернозема южного так же демонстрировали высокие (при 6%) и средние (при 3%) значения фитотоксичности. Подобная тен денция наблюдается и в 2010 году, но растения Lepidium sativum L.
проросли при 12%-ом загрязнении. Максимальная доза нефти (18%) на всех сроках инкубации оказывала токсический эффект полностью угне тающий рост растений Lepidium sativum L.
Растения четвёртой тест-культуры (Spinacia oleracea L.) в 2008 го ду проросли только в контрольном образце почвы, что свидетельствует о высокой чувствительности растения к нефтяному загрязнению. В 2009 году растения Spinacia oleracea L. проросли при 3 %-ом загрязне нии, но фитотоксичность почвы была высокой для этой тест-культуры.
В 2010 году высокая фитотоксичность наблюдается при 6 %-ой дозе нефти. На участках с дозой нефти 12 и 18 % растения Spinacia oleracea L.
не проросли на всех сроках инкубации.
Данные, полученные при исследовании фитомассы тест-культур, позволили выявить закономерности, аналогичные описанным выше.
Следовательно, Lepidium sativum L. и Spinacia oleracea L. демон стрируют высокую чувствительность к нефтяному загрязнению. Одна ко наиболее чувствительной к загрязнению культурой оказался Spinacia oleracea L., что может свидетельствовать о высокой индикационной способности этого растения к углеводородному загрязнению почв. Од нако результаты исследования показали, что Spinacia oleracea L. изна чально демонстрировал самую низкую всхожесть и энергию прораста ния семян. На этом фоне целесообразным решением стало применение двухфакторного дисперсионного и корреляционного анализа с целью выявления силы влияния нефтяного загрязнения на токсичность иссле дуемых образцов. Кроме того, учитывались биологические особенно сти произрастания самих культур (фон), а также вклад посторонних (остаточных) факторов.
Проведенный дисперсионный анализ показал, что в определении итогового уровня фитотоксичности значимый вклад вносит как нефть, так и биологические особенности произрастания тест-культур. Однако вклад значения особенностей произрастания наиболее велик при выращивании Spinacia oleracea L. Наибольший вклад такого фактора, как нефть, наблю дается у Lepidium sativum L. Данные корреляционного анализа так же де монстрируют самые высокие показатели коэффициента корреляции меж ду фитотоксическим эффектом и концентрацией нефтяного загрязнения чернозема южного по отношению к Lepidium sativum L.
Таким образом, по результатам исследований тест-культурой, которая одновременно может быть индикатором нефтяного загрязнения и не сильно зависеть от внешних условий среды, можно считать Lepidium sativum L.
3.3 Предложения и рекомендации по снижению неблагоприят ного влияния нефти на растительный покров Важным условием снижения, контроля и прогноза неблагоприят ного влияния нефти на растительный покров является система организо ванного фитомониторинга. Программа фитомониторинговых исследова ний в целом может включать следующие блоки: мониторинговые иссле дования флоры, которые должны осуществляться в 3 направлениях: от слеживание состояния и динамики популяций редких растений, занесен ных в Красные книги различных рангов, реликтов, эндемиков;
монито ринг состояния растительности, что предполагает заложение сети мони торинговых геоботанических площадей в различных типах раститель ных сообществ изучаемой территории;
геохимический мониторинг рас тительного покрова, который позволит оценить содержание и наличие (или отсутствие) биогенной аккумуляции химических элементов в веге тативных органах растений.
4 Влияние различных концентраций нефтяного загрязнения на основные свойства почвенной экосистемы Рассуждения о влиянии нефтяного загрязнения черноземов на видо вой состав естественной растительности и на растительный покров не мо гут быть полными без данных о влиянии нефти на свойства самих почв.
4.1 Физические свойства чернозема южного при нефтяном загрязнении Оценка структурно-агрегатного состояния контрольного участка по результатам сухого просеивания показала снижение коэффициента структурности вниз по почвенному профилю, что определяет ее устой чивое сложение и хорошую оструктуренность верхней части профиля с последующем снижением ее до удовлетворительной. В 2008 г. дозы нефти 3, 6 и 12% способствуют увеличению коэффициента структурно сти (Кстр) по сравнению с контролем. На участках, загрязненных 18%-ой концентрацией нефти наблюдается снижение структурности до неудовлетворительной.
В 2010 году увеличение Кстр по сравнению с контролем наблюда ется в слое 10-30 см при 6%-ом загрязнении и в слое 0-30 см при 12%-ой дозе нефти. Участок с 3%-ым загрязнением практически полностью вос станавливает свои структурные свойства до уровня незагрязненных почв. На участке с 18%-ым загрязнением сохраняется тенденция сниже ния коэффициента структурности до удовлетворительных значений.
В первый год исследований (2008 г.) содержание агрономически ценных агрегатов увеличивается по сравнению с контролем при 3, 6 и 12%-ой дозе нефти. Исключением является почвы с концентрацией неф ти 18 %. Её высокое содержание способствует образованию глыбистых фракций и сопровождается ухудшением показателей структурного со стояния почвы. Нефть способствует слипанию микроагрегатов (отдель ности диаметром менее 0,25 мм) в агрономически ценные агрегаты (0,25-10,0 мм). Выявлено увеличение содержания агрономически цен ных фракций 0,25-0,5 мм при 3%-ом загрязнении, 1-3 мм – при 3, 6 и 12 %-ом и фракций 3-7 мм – при 12 и 18%-ом загрязнении почвы неф тью, то есть с увеличением концентрации загрязнителя увеличивается относительное содержание более крупных структурных отдельностей.
Исследования 2010 года показали снижение доли глыбистых агре гатов при 6 и 12%-ом загрязнении в среднем до 20-35 % в слое 10-30 см.
Содержание агрономически ценных «псевдоагрегатов» на участке с 3%-ой дозой нефти снижается по сравнению с 2008 годом и приближает ся к контрольному образцу, главным образом за счет трансформации час ти агрономически ценной «псевдоструктуры» в собственно микроагрега ты в результате частичного разложения нефти. При 18%-ом загрязнении, так же как и в 2008 году, сохраняется высокое содержание глыбистых от дельностей и незначительная доля агрономически ценных агрегатов.
Влияние нефтяного загрязнения проявляется в гидрофобизации почвенных частиц, что определяет их чрезвычайно высокую водопрочность. В первый год исследований содержание водопрочных агрегатов размером 0,25 мм составляет от 45,2 до 50,3%, что определя ет ее устойчивое сложение и хорошую водопрочность структуры. В со ставе водопрочных агрегатов нефтезагрязненной почвы преобладают мелко-комковатые структурные единицы размером 0,5-2,0 мм. На заклю чительном этапе эксперимента (2010 г.) содержание водопрочных агрега тов по всему почвенному профилю продолжало оставаться повышенным (в сравнении с контрольным участком) при 12 и 18%-ом загрязнении.
Водопрочность почвенных агрегатов положительно коррелирует (r = 0,74, p = 0,002 в 2008 г и r = 0,56, p = 0,012 в 2010 г.) с плотностью почв, являющейся одним из основных ее агрофизических показателей от которой во многом зависит развитие корневой системы растений.
Плотность почвы контрольного участка в пределах корнеобитаемого горизонта составляет от 1,11 г/см3 в слое 0-10 см до 1,14 г/см3 в слое 20-30 см. Плотность черноземов южных возрастает под влиянием неф тяного загрязнения в первый год эксперимента, достигая границы пере уплотнения в слое 10-30 см при 6, 12 и 18%-ом загрязнении. Столь вы сокое уплотнение (от 1,65 до 1,85 г/см3) почвы ведет к созданию в кор необитаемом слое условий, близких к анаэробным, изменению структу ры почвенных горизонтов. При таких обстоятельствах в значительной мере затрудняет рост корней травянистых растений, в первую очередь с мочковатой коневой системой, и нарушает процесс естественного во зобновления растительности. В 2010 году переуплотнение почв выявле но лишь при 18%-ом их загрязнении.
С плотностью почв напрямую связана ее водопроницаемость, снижение которой напрямую зависит от концентрации нефти. Она сни зилась с 175 мм/час на контроле до 155 мм/час при 3% загрязнении и, продолжая уменьшаться, достигла 29 мм/час при 18% дозе нефти.
Данные корреляционного анализа показали тесную связь геобота нических показателей нефтезагрязненных участков с физическими свой ствами этих почв (табл. 4).
Таблица 4 – Корреляционная зависимость геоботанических показателей от физических свойств нефтезагрязненных почв Геоботанические Физические свойства почв Остаточное показатели содержание Плотность Водопроницаемость нефти в почве почв почв 2008 год Общее проектив- r = 0,76, r = 0,79, r = -0,72, ное покрытие p = 0,001 p = 0,003 p = 0, Средняя высота r = 0,82, r = 0,78, r = -0,75, травостоя p = 0,013 p = 0,007 p = 0, Общие запасы r = 0,84, r = 0,83, r = -0,81, фитомассы p = 0,004 p = 0,011 p = 0, 2010 год Общее проектив- r = 0,71, – – ное покрытие p = 0, Средняя высота r = 0,75, – – травостоя p = 0, Общие запасы r = 0,73, r = 0,80, r = -0,74, фитомассы p = 0,004 p = 0,004 p = 0, Таким образом, физические свойства чернозема южного изменя ются сразу после загрязнения нефтью. При свежем нефтяном загрязне нии увеличивается содержание агрономически ценных «псевдоагрега тов» за счет трансформации микроагрегатов в результате склеивающей способности нефти в агрономически ценную структуру почв. В этой свя зи возрастает коэффициент структурности почвы, снижение которого происходит лишь при 18%-ом загрязнении за счет роста доли глыбистой фракции почвы. Так же с возрастанием концентрации нефти наблюдает ся тенденция увеличения водопрочности почвенных агрегатов и уплот нение почв в среднем на 45-60%. Одновременно происходит снижение водопроницаемости почв с отличной и хорошей до неудовлетворитель ной. Перечисленные обстоятельства в своей совокупности отрицательно сказываются на условиях произрастания степной растительности.
4.2 Биологическая активность чернозема в условиях углеводо родного загрязнения В процессе своей жизнедеятельности растения входят в сложные взаимоотношения с микроорганизмами, населяющими почву. Изучение микробиологических свойств исследуемого подтипа чернозема показа ло, что происходит смена микробиологического состава как в зависимо сти от концентрации нефти, так и вниз по почвенному профилю.
На начальных этапах загрязнения (2008 год) наблюдается увели чение численности гетеротрофных организмов в слое 0-10 см с 12,6 млн/г на контрольном участке до 19,3 млн/г на участке почвы с концентрацией нефти 3%. При 6%-ом загрязнении за счет поступления дополнительного источника углерода и не выраженного токсического эффекта выявлено увеличение численности углеводородокисляющих микроорганизмов в слое 10-20 см. На участках с более высокой концен трацией загрязнителя наблюдается снижение численности основных групп микроорганизмов. Результаты исследований показали, что поло жительная ответная реакция почвы на увеличение нефтепродуктов про исходит до определенной, критической дозы. Появление отрицательных эффектов свидетельствует о предельно допустимом содержании нефте продуктов в почве применительно к ее биологическим свойствам.
На завершающей стадии эксперимента наблюдается стабилизация численности микроорганизмов исследуемых функциональных групп при 3%-ом загрязнении до уровня контроля. Продолжающийся рост численности углеводородокисляющих микроорганизмов при более вы соких концентрациях загрязнения свидетельствует о продолжении про цессов детоксикации нефти в почве.
Следовательно, нефтяное загрязнение неоднозначно влияет на раз личные функциональные группы микроорганизмов. В ответ на антропо генное воздействие наблюдается рост численности углеводородокис ляющих микроорганизмов, специализирующихся на разложении углево дородов нефти.
С численностью микроорганизмов и их составом тесно коррелиру ет ферментативная активность почв, поскольку ферменты являются про дуктом жизнедеятельности почвенной микрофлоры.
Исследование каталазной активности нефтезагрязненной почвы показало, что на протяжении всего периода инкубации низкие дозы неф ти активизируют активность данного фермента. На начальных этапах за грязнения (2008 год) наблюдается увеличение каталазной активности при 6%-ом загрязнении в слое 10-20 см, что можно объяснить большей численностью микроорганизмов, обитающих в ризосфере корневых сис тем растений, повышенным содержанием гумуса и большей влажностью по сравнению с верхними горизонтами. При более значимых уровнях за грязнителя активность фермента снижается.
В 2009 году пороговая концентрация нефти сдвигается с 12% до 18%. Максимальные значения ферментативной активности наблюдаются в слое почвы 10-20 см, так же возрастает каталазная активность в слое почвы 20-30 см по сравнению с прошлым годом. Такая тенденция свиде тельствует о перемещении нефти вниз по почвенному профилю и сни жению ее токсического действия за счет частичного разложения микро организмами. В подтверждении сказанному выявлена тесная корреляци онная связь между активностью каталазы и численностью углеводоро докисляющих микроорганизмов (r = 0,83, при p = 0,036).
На последнем этапе опыта в 2010 году отмечено относительное снижение каталазной активности по сравнению со всем предыдущем периодом исследований, что может быть связано с погодными усло виями. На участке, загрязненном 3-х %-ой дозой нефти, не наблюдается достоверных изменений каталазной активности в отличие от контроля (t=0,16-1,29 при n=6). На остальных экспериментальных участках от мечается увеличение активности фермента (кроме слоя 10-30 см при 18%-ом загрязнении), что свидетельствует о продолжении процессов детоксикации нефти.
Полученные данные подтверждаются результатами определения интенсивности выделения СО2 почвой или «дыхания» почвы, где были выявлены сходные закономерности.
4.3 Гумусное состояние чернозема южного в условиях нефтя ного загрязнения Органическая природа нефти определяет специфику гумусного состояния загрязненных почв. Результаты исследований гумусного со стояния нефтезагрязненного чернозема показали, что общее содержа ние гумуса возрастает в 1,5-3,0 раза с увеличением концентрации неф ти. Такое увеличение связано с тем, что основным элементом, входя щим в состав нефти, является углерод, за счет которого содержание ор ганического вещества в загрязненных почвах возрастает. По результа там первого года исследований обнаруживается прямая зависимость между концентрацией нефти и содержанием органического углерода.
Отмечено снижение количества органического углерода вниз по поч венному профилю, как в контрольном образце, так и в образцах загряз ненных нефтью. Это объясняется ухудшением условий гумусообразо вания (биологическая активность, физические свойства почв) вниз по почвенному профилю и затрудненной фильтрацией нефти в связи с ее высокой вязкостью.
В 2010 году наблюдается несколько иная картина, связанная с перераспределением нефти по слоям почвы за счет ее вымывания почвенным раствором после осеннего и весеннего периодов вниз по профилю, что проявляется в увеличении содержания органического углерода в слое почвы 20-30 см и снижение его уровня в самом верх нем слое почвы (0-10 см.). Эта тенденция подтверждается получен ными данными по остаточному содержанию нефти в горизонтах поч венного профиля.
Не менее важным показателем является изменение соотношения групп и фракций гумусовых веществ в ответ на антропогенное воздейст вие. Контрольный участок чернозема южного характеризуется гуматным типом гумуса. При загрязнении почвы нефтью в первый год исследова ний наблюдается уменьшение подвижной фракции гуминовых кислот ГК1 в среднем на 45% и возрастание доли фракций гуминовых кислот, связанных с Са – ГК2, отвечающей за структурообразование, в среднем на 13%. Исключением является участок с 18%-ым загрязнением нефтью, где доля фракций ГК2 ниже, чем на контрольном участке. Возрастание доли фракции фульвокислот происходит преимущественно за счет фракций свободных и связанных с подвижными полуторными оксидами (ФК1а и ФК1). Высокие дозы нефти (18%) способствуют увеличению негидролизуемого остатка. Повышение содержания некоторых фракций гуминовых веществ, по мнению ряда исследователей (Новоселова, 2007;
Solnseva, 1995), свидетельствует о включении легких фракций нефти в состав гумусовых молекул.
В 2010 году выявлена несколько другая ситуация. Сумма фракций гуминовых кислот снижается с возрастанием концентрации загрязнителя, что происходит преимущественно за счет уменьшения доли фракций ГК и ГК2. Наблюдается тенденция увеличения негидролизуемого остатка по мере возрастания концентрации нефти. На нефтезагрязненных участках соотношение углерода гуминовых кислот к углероду фульвокислот, т.е.
Сгк/Сфк, снижается по сравнению с контрольным участком и в слое 10 30 см при 12 и 18%-ом загрязнении достигает 0,9-0,8, что соответствует гуматно-фульватному типу гумуса. Следовательно, по этому важному ге нетическому показателю почвы перестали соответствовать черноземно му типу почвообразования. Причиной трансформации типа гумуса в нефтезагрязненной почве является изменение содержания его основных фракций. Отмечается увеличение доли фракций фульвокислот по отно шению к сумме фракций гуминовых кислот. Она возрастает с увеличени ем концентрации нефти в среднем на 15 – 30 %, что, возможно, связано с изменением физико-химических свойств нефти в течение года за счет протекающих в почве биохимических процессов. В результате компонен ты нефти, образовавшиеся в процессе биологического окисления, могут включаться в состав фракций ФК. Если рассматривать фульвокислоты как предшественники гуминовых кислот или продукты их распада, то есть основание предполагать, что увеличение доли фракций ФК связано с разложением гуминовых кислот за счет активизации биохимических про цессов, направленных на детоксикацию нефти, состав которой в опреде ленной степени аналогичен составу гумусовых веществ.
Таким образом, нефть действует на различные фракции гумусо вых веществ неоднозначно. Увеличение содержания общего углерода и увеличение доли некоторых фракций гуминовых кислот с возрастанием концентрации нефти в первый год исследований не является основани ем для утверждения об улучшении гумусного состояния почв и связан ного с ним плодородия, поскольку такая тенденция вызвана искусст венным внесением в почвы углерода нефти, а не с естественными про цессами гумификации. На третий год исследований наблюдается уве личение доли фульвокислот при высоких дозах загрязнителя и транс формация типа гумуса, что можно расценить как свидетельство о про текающих в почве процессах детоксикации (минерализации) нефти.
При 3%-ом загрязнении показатели гумусного состояния почв прибли жаются к контрольным.
ВЫВОДЫ 1. В условиях степной зоны Предуралья нефтяное загрязнение черноземов южных проявляется в снижении общего проективного по крытия фитоценоза, в уменьшении доли видов семейств мятликовых, розоцветных и астровых. Наиболее устойчивыми растительными фор мами являются представители семейства Fabaceae.
2. По результатам лабораторных исследований фитотоксического эффекта нефтезагрязненного чернозема южного, наиболее информатив ной тест-культурой является Lepidium sativum L.
3. Выявлено, что высокие концентрации нефти (12 и 18%) отрица тельно влияют на физические свойства черноземов южных, их микро биологическую и ферментативную активности, способствуют снижению качества гумуса почв. Все изменения в экологии почв, связанные с неф тезагрязнением, проявляются в экологическом состоянии фитоценозов (уменьшение общего проективного покрытия, сокращение числа видов, снижение продуктивности и запасов фитомассы).
4. Установлено, что 3 – 6% концентрации нефти способствуют об разованию агрономически ценных «псевдоагрегатов». Повышение фер ментативной и микробиологической активности черноземов южных при данных концентрациях загрязнителя свидетельствует о запуске меха низмов детоксикации нефти.
5. Показано, что восстановление естественной растительности и основных свойств черноземов южных происходит при 3 % загрязнении и, частично, при 6% дозе нефти в течение трех лет.
ОСНОВНЫЕ ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:
1. Корнева, О.Ю. Проблемы экологического сопровождения инве стиционных проектов / В.Г. Исмалкин, Л.Ф. Добрынина, Н.Я. Капрало ва, О.Ю. Корнева // Защита окружающей среды в нефтегазовом ком плексе. – 2004. – № 9. – С. 14-16.
2. Корнева, О.Ю. Опыт оценки воздействия на окружающую среду предприятий нефтегазовой отрасли: материалы конференции «Охрана окружающей среды на объектах нефтегазового комплекса» / О.Ю. Кор нева. – Туапсе, 2006. – С. 49-50.
3. Корнева, О.Ю. Современные аспекты оценки воздействия вы бросов предприятий на воздушный бассейн при экологическом сопро вождении инвестиционных проектов на примере проекта «Обустройство Восточного участка ОНГКМ ЗАО «Стимул» на объем добычи нефти 1,5 млн. тонн в год» / О.Ю. Корнева, Л.Б. Борисова // Промышленная безопасность. – 2006. – № 9. – С. 26-27.
4. Корнева, О.Ю. Мероприятия по экологической безопасности в проектах обустройства нефтегазовых месторождений / Л.Ф. Добрынина, О.Ю. Корнева, О.Н. Подковырова, В.С. Полищук // Нефтепромысловое дело. – 2007. – № 12. – С. 74-76.
5. Корнева, О.Ю. Мероприятия по предупреждению чрезвычайных экологических ситуаций при разработке проектной документации: мате риалы всероссийской научно-практической конференции с международ ным участием «Водохозяйственные проблемы и рациональное природо пользование». Ч.2: Рациональное природопользование / В.С. Полищук, О.Ю. Корнева. – Оренбург-Пермь, 2008. – С. 332-335.
6. Корнева, О.Ю. Охрана поверхностных вод в проектах обустрой ства и реконструкции нефтегазовых месторождений / Л.Ф. Добрынина, О.Ю. Корнева, О.Н. Подковырова // Защита окружающей среды в нефте газовом комплексе. – 2008. – № 9. – С. 70-72.
7. Ермакова, О.Ю. Разработка мероприятий по снижению возмож ного негативного воздействия на окружающую среду процесса открыто го блочного хранения серы в проектах на строительство / О.Ю.Ермакова, В.С. Полищук // Нефтепромысловое дело. – 2009. – № 12. – С. 53-55.
8. Ермакова, О.Ю. Эколого-геохимические особенности почвенно го покрова парков г. Оренбурга: Материалы V11 Всероссийской науч ной конференции студентов и молодых ученых «Актуальные проблемы инновационного развития агропромышленного комплекса. Будущее АПК» / Л.В. Анилова, О.В. Примак, О.Ю. Ермакова. – Астрахань, 2011.
– С. 109-111.
9. Ермакова, О.Ю. Оценка фитотоксичности чернозема южного Оренбургской области в условиях разных доз нефтяного загрязнения / Т.С. Шорина, И.А. Мисетов, И.А. Новоженин, О.Ю. Ермакова // Вестник Оренбургского государственного университета. – 2011. – № 12. – С. 399-403.
10. Ермакова, О.Ю. Оценка влияния различных доз нефти на ди намику естественной растительности чернозема южного Оренбургского Предуралья / Т.С. Шорина, Ермакова // Вестник Оренбургского госу дарственного университета. – 2011. – № 12. – С. 261-264.
ЕРМАКОВА Ольга Юрьевна ВЛИЯНИЕ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА РАСТИТЕЛЬНЫЙ ПОКРОВ И СВОЙСТВА ПОЧВ (НА ПРИМЕРЕ СТЕПНОЙ ЗОНЫ ПРЕДУРАЛЬЯ) Специальность: 03.02.01 – Ботаника, 03.02.08 – Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Подписано в печать 25.11.2011 г.
Гарнитура «Times New Roman». Усл. печ. л. 1, Тираж 100 экз. Заказ Типография ГБУ РЦРО 460000, г. Оренбург, ул. Краснознаменная, д.