Медицинский университет удк 615.28:582.682:616.9–089 фролова аэлита валерьевна антимикробный эффект маклейи мелкоплодной при местном лечении хирургической инфекции (экспериментальное исследование)

«БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»

УДК 615.28:582.682:616.9–089

ФРОЛОВА Аэлита Валерьевна

АНТИМИКРОБНЫЙ ЭФФЕКТ МАКЛЕЙИ

МЕЛКОПЛОДНОЙ ПРИ МЕСТНОМ ЛЕЧЕНИИ

ХИРУРГИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

(экспериментальное исследование)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук по специальности 03.00.07 – микробиология Минск 2007 1 Работа выполнена в УО «Витебский государственный медицинский университет»

Научный руководитель: Косинец Александр Николаевич, Заслу женный деятель науки Республики Бела русь, доктор медицинских наук, профессор Официальные оппоненты: Максимова Наталья Павловна, док тор биологических наук, профес сор, заведующая кафедрой генети ки УО «Белорусский государствен ный университет»

Алексеев Сергей Алексеевич, док тор медицинских наук, профессор кафедры военно-полевой хирургии УО «Белорусский государственный медицинский университет»

Оппонирующая организация: УО «Гомельский государственный меди цинский университет»

Защита состоится 1 июня 2007 г. в 12.00 часов на заседании совета по защите диссертаций Д 03.18.04. при УО «Белорусский государственный медицинский университет» (220116, г. Минск, пр-т Дзержинского, 83, e-mail: [email protected], тел. (017) 272-55-98).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке УО «Белорусский государственный медицинский университет».

Автореферат разослан «» _ 2007 г.

Ученый секретарь совета по защите диссертаций кандидат медицинских наук, доцент А. М. Близнюк ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Связь работы с крупными научными программами, темами Тема диссертации соответствует приоритетным направлениям научно технической деятельности Республики Беларусь по Государственным про граммам «Инфекционные заболевания и медицинские биотехнологии (2000–2005 гг.)», «Развитие сырьевой базы и переработки лекарственных и пряно-ароматических растений на 2005–2010 гг.» («Фитопрепараты»). Дис сертационная работа выполнена в рамках плана научно-исследовательских работ Витебского государственного медицинского университета и являет ся частью научных исследований по программе ГНТП «Комплексная сис тема диагностики, профилактики и лечения гнойно-воспалительных ос ложнений в хирургии» (1.10.98–31.12.2000), № Госрегистрации 19994043.

Цель и задачи исследования Цель исследования: определить антимикробные свойства настоя из нового для Республики Беларусь вида растительного сырья — листьев маклейи мелкоплодной — в отношении возбудителей хирургической ин фекции и разработать рациональный метод его деконтаминации.

В соответствии с поставленной целью исследования были сформули рованы следующие задачи:

1. Исследовать этиологию гнойно-воспалительных заболеваний и ос ложнений и характер чувствительности раневой микрофлоры к традици онным синтетическим антимикробным препаратам.

2. Провести сравнительный анализ антимикробной активности вод ных и спиртовых извлечений из ряда лекарственных растений. Обосновать перспективность маклейи мелкоплодной.

3. Исследовать влияние маклейи мелкоплодной на фагоцитарную и метаболическую активность нейтрофилов больных с гнойно-воспалитель ными осложнениями.

4. Апробировать метод радиационного облучения для деконтамина ции лекарственного сырья маклейи мелкоплодной.

5. Исследовать эффективность настоя из листьев маклейи мелко плодной при лечении экспериментальной хирургической инфекции.

Положения, выносимые на защиту 1. Видовой состав микрофлоры определяет характер и течение про цесса у больных с гнойно-воспалительными заболеваниями и осложнения ми. Превалирующим возбудителем хирургической инфекции выступает грамположительная микрофлора, в частности, S. aureus, проявляющая множественную резистентность к синтетическим антибактериальным пре паратам и чувствительная к растительным средствам.

2. Листья маклейи мелкоплодной — новый перспективный вид сырья для разработки лекарственных средств растительного происхождения для местного лечения хирургической инфекции, отличающийся повышенным содержанием алкалоидов, обеспечивающих выраженный антимикробный эффект в отношении грамположительной микрофлоры.

3. Настой из листьев маклейи мелкоплодной, обладающий выражен ной антимикробной и иммунобиологической активностью, является эф фективным лекарственным средством растительного происхождения для местного лечения хирургической инфекции. В отличие от настоя из травы маклейи и раствора традиционного синтетического антисептика, под его воздействием на 2-е сутки от начала лечения происходит снижение мик робной обсемененности раневой поверхности с 106–107 до 102 на 1 г ткани и интенсивное очищение от патологического содержимого.

4. Впервые полученные данные об отсутствии влияния облучения лучами на качественный состав и содержание алкалоидов сангвинарина и хелеритрина свидетельствуют о том, что радиационная стерилизация явля ется рациональным методом деконтаминации сырья маклейи мелкоплод ной. Доза облучения в 0,25 Мрад достаточна для достижения стерильности и сохранения биологических свойств — антимикробной и иммунобиоло гической активности маклейи мелкоплодной при производстве антимик робных фитосредств для местного лечения хирургической инфекции.

Личный вклад соискателя Научным руководителем определены цель и задачи исследования.

Соискателем лично осуществлены разработка подходов к решению по ставленных задач и выбор методов исследований, самостоятельно выпол нены лабораторные микробиологические и иммунологические исследова ния, проведены эксперименты на животных, фитохимические анализы. Ав тором проведены анализ научных данных и обобщение полученных ре зультатов, осуществлена их статистическая обработка, сформулированы выводы и практические рекомендации.

Апробация результатов диссертации Основные результаты исследований доложены и обсуждены на I Ме ждународном съезде иммунологов «Иммунодиагностика и иммунопрофи лактика» (Витебск, 1996), IV Республиканской научной конференции сту дентов и аспирантов Республики Беларусь (Гродно, 1998), XXII Пленуме хирургов и акушер-гинекологов «Интраабдоминальная инфекция» (Пинск, 1998), Международной научно-практической конференции «Студенческая медицинская наука XXI века» (Витебск, 1999), 55-й научной сессии ВГМУ «Актуальные вопросы теоретической и практической медицины» (Ви тебск, 2000), 4th European Congress of Oto-Rhino-Laryngology Head and Neck Surgery (Berlin, 2000), Международной конференции «Современные во просы аудиологии и ринологии» (Курск, 2000), научно-практической кон ференции «Белые ночи» (Санкт-Петербург, 2000), Международной научно практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы кли нической и экспериментальной медицины – 2000» (Минск, 2000), 56-й на учной сессии ВГМУ «Актуальные вопросы теоретической и практической медицины» (Витебск, 2001), Международной научно-практической конфе ренции «Молодые ученые — медицине XXI века» (Гродно, 2001), научно практической конференции, посвященной 80-летию кафедры общей хи рургии БГМУ, 100-летию со дня рождения профессора Т. Е. Гнилорыбова (Минск, 2002), 54-й итоговой научной конференции студентов и молодых ученых ВГМУ «Актуальные вопросы современной медицины и фармации»

(Витебск, 2002), Международной научно-практической конференции «Ре зистентность микроорганизмов к антимикробным препаратам» (Минск, 2003), VII съезде фармацевтов Республики Беларусь «Фармация XXI века»

(Витебск, 2004), II Республиканском съезде стоматологов-хирургов (Ви тебск, 2007), 62-й итоговой научной сессии ВГМУ «Актуальные вопросы теоретической и практической медицины» (Витебск, 2007).

Опубликованные результаты Основные положения диссертационной работы опубликованы в 16 научных работах, из которых 6 статей — в рецензируемых журналах (из них 1 статья — единолично), 7 — в рецензируемых сборниках, 3 тези сов — в материалах международных конференций и конгресса (из них 2 — за рубежом). Общий объем публикаций составил 68 страниц.

Структура и объем диссертации Диссертация состоит из следующих частей: введение, общая характе ристика работы, обзор литературы, материалы и методы исследования, главы результатов собственных исследований, заключение, библиографи ческий список, включающий 348 использованных источников и 16 публи каций соискателя (24 страницы), приложения. Работа изложена на страницах, содержит 8 таблиц, 37 рисунков (15 страниц).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Объектами исследования являлись: 1) раневое содержимое 464 боль ных, находившихся на лечении в Республиканском научно-практическом центре «Инфекция в хирургии», из которых 79 пациентов были с абсцес сами и флегмонами, 43 — с абсцессами брюшной полости и таза, 25 — с фурункулами и 9 — с распространенным фурункулезом, 63 — с трофиче скими язвами, 75 больных сахарным диабетом с гнойно-некротическими поражениями нижних конечностей, 16 — с бурситом, 43 — с гнойными ранами травматического характера, 79 — с хроническим остеомиелитом, 32 — с послеоперационными гнойно-воспалительными осложнениями;

2) ушное отделяемое 48 больных хроническим гнойным средним отитом, находившихся на лечении в отделении оториноларингологии Витебской областной клинической больницы;

3) раневое отделяемое 140 лаборатор ных животных;

4) музейные штаммы S. aureus АТСС 25923, B. subtillis АТСС 6633, E. coli АТСС 026, E. coli АТСС 25922, P. aeruginosa АТСС 27853, P. vulgaris АТСС 4636;

5) водные и спиртовые извлечения из лекар ственных растений — зверобоя продырявленного, календулы лекарствен ной, чистотела большого, ольхи серой, маклейи мелкоплодной;

6) раство ры алкалоидов и полисахаридов маклейи;

7) кровь больных с гнойно воспалительными осложнениями и здоровых доноров.

Идентификация микроорганизмов проведена с помощью тест-систем на автоматизированном биохимическом анализаторе АТВ Expression фир мы «bioMerieux» с использованием стрипов.

Для определения чувствительности микроорганизмов к антимикроб ным препаратам использованы дискодиффузионный метод с помощью стандартных (фирменных) дисков Becton Dickinson (США) и стрипы фир мы «bioMerieux». Определение чувствительности микроорганизмов к ан тисептическим препаратам, лекарственным растениям и алкалоидам мак лейи мелкоплодной проведено методом диффузии в агар.

Определение микробиологической чистоты лекарственного сырья маклейи мелкоплодной проведено согласно требованиям статьи ГФ XI изд.

и Изменениям к ней от 16.04.02, категория 1.

Фагоцитарную активность нейтрофилов больных с послеоперацион ными осложнениями определяли по фагоцитарному числу и фагоцитарно му индексу. Определение базальной и индуцированной метаболической активности нейтрофилов проводили в НСТ-тесте (в реакции восстановле ния нитросинего тетразолия).

Влияние радиационного облучения на качество и биологическую ак тивность сырья исследовано с помощью микробиологических и фитохи мических методов. Определение количественного содержания сангвинари на и хелеритрина в маклейе мелкоплодной проведено по методике опреде ления четвертичных алкалоидов (Г. Н. Бузук [и др.], 1988). Для определе ния качественного состава алкалоидов в сырье использована тонкослойная хроматография на силуфоле в системах растворителей.

Экспериментальные исследования антимикробной активности мак лейи мелкоплодной проведены на модели гнойной раны у 140 белых бес породных крыс-самцов массой 230–250 г, содержащихся в виварии Витеб ского государственного медицинского университета. Для оценки динамики течения гнойно-воспалительного заболевания у животных использован ме тод количественного определения содержания микроорганизмов в 1 г тка ни (В. Е. Радоман, 1979).

Статистическая обработка полученных данных проведена с помощью прикладного пакета статистических программ STATGRAPHICS PLUS 5.1, MS Excel 2002 с использованием методов описательной статистики, парно го теста Стъюдента, теста Mann-Whitney (Wilcoxon). Определение нор мальности распределения полученных данных проводилось по критерию Колмогорова-Смирнова. Различия считались достоверными при значении p 0,05.

Результаты и их обсуждение Роль грамположительной микрофлоры в возникновении и течении хирургической инфекции Исследования показали, что из 605 штаммов, изолированных из ране вого содержимого 464 пациентов с гнойно-воспалительными заболевания ми и осложнениями, на долю представителей рода Staphylococcus прихо дится 307 штаммов (50,74 %), при этом S. aureus встречается в 248 случаях (40,99 %), а коагулазоотрицательные стафилококки — в 59 наблюдениях (9,75 %). Энтеробактерии, представленные Proteus spp., E. coli, Klebsiella spp., Enterobacter spp., Citrobacter freundii, высеяны в 114 случаях (18,84 %).

81 изолят (13,39 %) приходится на псевдомонады, 33 (5,45 %) — на S. pyo genes, 8 (1,32 %) — на E. avium, 4 (0,66 %) — на Aerococcus viridans, по (0,49 %) — на Gemella haemolysans, Micrococcus lylae, Xanthomonas malto philia, по 5 (по 0,83 %) — на Aeromonas hydrophila и на Candida albicans, 15 (2,48 %) — на Acinetobacter baumannii, 24 (3,97 %) — на Bacillus subtilis.

Следует отметить, что стафилококки, являясь превалирующими воз будителями хирургической инфекции, наиболее часто высевались у паци ентов с гнойными ранами травматического характера (80,65 %), с после операционными осложнениями (72,54 %), при фурункулезе (76 %). У паци ентов с флегмонами и абсцессами отмечалась их достоверно более частая встречаемость (50,53 %) по сравнению с пациентами с бурситом (18,75 %) (p 0,001) и больными сахарным диабетом (44,11 %) (p 0,001). У паци ентов с язвами стафилококки составили 32,91 %, что достоверно превыша ет их количество при абсцессе брюшной полости и таза (11,67 %), но дос товерно ниже, чем при хроническом остеомиелите (58,69 %) (p 0,001).

Характеризуя видовой состав возбудителей гнойного среднего отита, необходимо указать на то, что наиболее часто, как в чистой культуре, так и в микробных ассоциациях, высеян стафилококк — 29,17 %. При этом на долю S. aureus приходится 10,42 %, на КОС — 18,75 % (S. epidermidis — 10,4 %, S. simulans, S. warneri, S. hominis, S. capitis — по по 2,08 %). E. coli выделена в 9 наблюдениях, что составило 18,75 %, P. mirabilis — в 3 (6, %), P. vulgaris — в 2 (4,17 %), Citrobacter diversus — в 1 (2,08 %), Providen cia rettgeri и Providencia stuartii — по 2 раза (по 4,17 %). Псевдомонады представлены P. aeruginosa — в 5 случаях (10,42 %). 14,58 % составили Bacillus subtilis, 6,25 % — Candida albicans.

Приведенные данные позволяют сделать вывод, что при всем много образии видового состава раневой инфекции доминирующую роль в ее возникновении и развитии играет грамположительная микрофлора, пред ставленная в основном стафилококками.

Чувствительность возбудителей хирургической инфекции к ан тимикробным препаратам Установлено, что выделенные штаммы стафилококков проявляют 100 % резистентность к ампициллину, гентамицину, цефтазидиму, цефалек сину, и высоко устойчивы к пенициллину (97,5 %), тетрациклину (66,1 %), оксациллину (53,4 %). Мало эффективными в отношении их являются кана мицин (50,6 % устойчивых штаммов) и ампициллин + сульбактам (46,30 %).

100 % изолятов коагуалозоотрицательных стафилококков оказались устойчивыми к азитромицину и пенициллину, 87,5 % — к эритромицину, 80 % — к оксациллину и тетрациклину, 75 % — к линкомицину, 66,67 % — к амоксициллину + клавунату и ко-тримаксозолу, 50 % — к хлорамфени колу.

Неэффективными в отношении штаммов энтеробактерий оказались канамицин (92 %), тетрациклин (88 %), амоксициллин (87,8 %), амокси циллин + клавунат (82,9 %), цефалотин (79,3 %), левомицетин (78,9 %).

85,7 % изолятов псевдомонад проявили устойчивость к пефлоксацину, 83,87 % — к ко-тримоксазолу, 83,33 % — к цефтазидиму, 80 % — к тикар циллину, 72,73 % — к нетромицину, 69,77 % — к гентамицину, 68 % — к тобрамицину, 59,09 % — к офлоксацину, 56,25 % — к пиперациллину.

Из 8 антисептиков (диоксидин, хлоргексидина биглюконат, гипохло рит натрия, мирамистин, риванол, фурагин, фурацилин, борная кислота) только 2 (диоксидин и мирамистин) проявили высокую ингибирующую активность в отношении S. aureus (100 % и 97,7 %, соответственно).

Наиболее неэффективными в отношении S. aureus оказались фурацилин (95,9 %), борная кислота (81,9 %), фурагин (75 %). Приведенные данные позволяют сделать вывод, что возбудителям хирургической инфекции при суща множественная резистентность к синтетическим антимикробным препаратам.

Характеристика антимикробной активности лекарственных растений После выявления основных возбудителей хирургической инфекции и характера их чувствительности к синтетическим антимикробным препара там нами проведено сравнительное изучение антимикробной активности водных и спиртовых извлечений ряда лекарственных растений. В качестве контролей использованы спирт этиловый — компонент настоек, раствор сангвиритрина — эффективный антимикробный препарат, представляю щий собой сумму алкалоидов сангвинарина и хелеритрина — действую щих веществ маклейи и чистотела, стерильный физиологический раствор (на нем готовились настои зверобоя продырявленного, календулы лекарст венной, маклейи мелкоплодной, чистотела большого, отвар ольхи серой, раствор сангвиритрина).

Методом диффузии в агар установлено, что антимикробный эффект присущ раствору сангвиритрина, спиртовым настойкам зверобоя проды рявленного и календулы лекарственной, настою травы маклейи мелко плодной, настою травы чистотела большого, отвару соплодий ольхи серой.

Настои зверобоя продырявленного и календулы лекарственной в отличие от их спиртовых настоек были неэффективными в отношении возбудите лей, что позволяет сделать вывод об антимикробной активности компонен та настоек — спирта этилового.

При сравнительном анализе активности образцов методом диффузии в агар установлено, что достоверно максимальным антимикробным эффек том в отношении исследуемой грамположительной микрофлоры обладал раствор сангвиритрина (p 0,001): диаметр зоны ингибирования роста S. aureus составил 23,9 ± 0,11 мм, B. subtilis — 24,4 ± 0,31 мм, E. coli — 14,9 ± 0,23 мм, P. aeruginosa — 8,6 ± 0,17 мм, P. vulgaris — 3,8 ± 0,26 мм.

Настою из травы маклейи мелкоплодной также присущ антимикроб ный эффект в отношении грамположительной и грамотрицательной мик рофлоры, при этом, в отношении грамположительной — он более выражен (p 0,01): диаметр зоны ингибирования роста S. aureus составил 18,5 ± 0,17 мм, B. subtilis — 20,2 ± 0,15 мм, E. coli — 12,6 ± 0,21 мм, P. aeruginosa — 6,9 ± 0,16 мм, P. vulgaris — 2,9 ± 0,17 мм.

По мнению некоторых российских авторов, наличие в химическом со ставе алкалоида сангвинарина позволяет использовать траву дикорастуще го чистотела большого вместо культивируемой маклейи мелкоплодной для получения антимикробного препарата «Сангвиритрин». Наши исследова ния показали, что настой из травы чистотела большого проявил значитель но меньший антимикробный эффект в отношении грамположительной и грамотрицательной микрофлоры, чем настой из травы маклейи мелко плодной (p 0,001): диаметр зоны ингибирования роста S. aureus составил 16,5 ± 0,09 мм, B. subtilis — 17 ± 0,28 мм, E. coli — 9,5 ± 0,25 мм, P. aerugi nosa — 4,4 ± 0,15 мм, P. vulgaris — 1,4 ± 0,12 мм.

Наиболее выраженным антимикробным эффектом в отношении изу ченной грамотрицательной микрофлоры обладал отвар соплодий ольхи се рой. Диаметр зоны ингибирования E. сoli составил 18,9 ± 0,17 мм, P. aeru ginosa — 10,7 ± 0,2 мм, P. vulgaris — 5,6 ± 0,38 мм. В отношении грампо ложительной микрофлоры отвар проявил эффект слабее, чем раствор сан гвиритрина и настой из травы маклейи мелкоплодной (p 0,001): диаметр зоны ингибирования роста S. aureus составил 12,4 ± 0,18 мм, B. subtilis — 14,4 ± 0,25 мм.

Приведенные данные позволяют утверждать, что маклейя мелкоплод ная является перспективным растением для разработки антимикробных лекарственных средств, эффективных в отношении превалирующего воз будителя хирургической инфекции — грамположительной микрофлоры.

Превосходство в антимикробной активности над чистотелом большим свидетельствует о необходимости ее введения в культуру на территории Беларуси.

Антимикробная активность различных видов сырья маклейи мелкоплодной С целью выявления вида сырья маклейи мелкоплодной, содержащего максимальное количество сангвинарина и хелеритрина, и обладающего наибольшей антимикробной активностью, и, следовательно, более пер спективного для дальнейшего использования при разработке лекарствен ных средств, проведено сравнительное изучение раствора сангвиритрина и настоев, приготовленных из цельного листа, листовой пластинки, череш ков, травы, стеблей, соцветий растения. Исследование показало, что настои из цельного листа и листовой пластинки обладают антимикробной актив ностью, достоверно более выраженной, чем настои из других видов сырья (p 0,001), что в последующем хорошо согласовалось с данными о содер жании алкалоидов в них.

Диаметр зоны ингибирования роста S. aureus раствором сангвиритри на составил 23,9 ± 0,11 мм, настоем из листьев — 22,5 ± 0,05 мм, настоем из травы — 18,5 ± 0,17 мм, настоем из стеблей — 0 мм, настоем из соцве тий 15,4 ± 0,16 мм, настоем из черешков — 13 ± 0,21 мм. Диаметр зоны ин гибирования роста E. coli раствором сангвиритрина составил 14,9 ± 0,23 мм, настоем из листьев — 14,5 ± 0,8 мм (p 0,05) и настоем из травы маклейи мелкоплодной — 12,6 ± 0,21 мм (p 0,05). Настои из черешков, стеблей, соцветий не проявили антимикробной активности в отношении грамотри цательной микрофлоры.

Проведенные нами за период с 1996 по 2006 гг. наблюдения показали, что в маклейе мелкоплодной, выращиваемой на экспериментальных пло щадях Витебской области, соцветия и стебли составляют 50–60 %. К пе риоду заготовки содержание алкалоидов в растении снижается, и такое сырье (трава) является экономически невыгодным. Однако именно в это время растение имеет большое количество побуревших, буро-желтых и желтых листьев, которые, как правило, не включаются в заготовку сырья.

При исследовании химического состава и антимикробной активности ли стьев маклейи мелкоплодной, сохранивших (серо-зеленые) и утративших естественную окраску (побуревшие, буро-желтые и желтые), нами уста новлено, что содержание алкалоидов в желтых листьях маклейи мелко плодной превосходит их количество в молодых серо-зеленых листьях, что обусловливает их более выраженный антимикробный эффект (таблица 1).

В связи с этим при разработке научно-технической документации на сырье мы учли возможность заготовки побуревших, буро-желтых и желтых ли стьев маклейи мелкоплодной.

Таблица 1 – Антимикробная активность настоев из листьев маклейи мел коплодной Диаметр зоны ингибирования роста возбудителей, мм Вид листьев S. aureus B. subtilis E. coli P. aeruginosa (n = 10) (n = 10) (n = 10) (n = 10) 4 4 2,3, 7,1 ± 0,112,3, Серо-зеленые 22,1 ± 0,1 23,3 ± 0,01 13,1 ± 0, 1,3, 8,0 ± 0,183, Побуревшие 22,5 ± 0,03 23,8 ± 0,02 14,1 ± 0, 14,7 ± 0,131 8,4 ± 0, Буро-желтые 22,9 ± 0,01 24,0 ± 0, 23,4 ± 0,071 24,4 ± 0,011 14,9 ± 0,11 8,6 ± 0, Желтые Примечание – p 0,05, 1 достоверно в сравнении с серо-зелеными листьями, 2 досто верно в сравнении с побуревшими листьями, 3 достоверно в сравнении с буро-желтыми ли стьями, 4 достоверно в сравнении с желтыми листьями.

Приведенные данные позволяют сделать вывод, что листья, в том числе, и утратившие окраску, являются наиболее перспективным из всех видов сырья маклейи мелкоплодной.

Антимикробная активность маклейи мелкоплодной при лечении экспериментальной хирургической инфекции Для экспериментального изучения антимикробной активности мак лейи мелкоплодной на модели гнойной раны были подобраны 5 групп жи вотных. В первую (опытную) группу вошли крысы (n = 30), на раневую поверхность которых накладывали ткань атравматичную, пропитанную раствором сангвиритрина. Во второй (опытной) группе (n = 30) на раневую поверхность накладывали ткань атравматичную, пропитанную настоем из листьев маклейи мелкоплодной, в третьей (опытной) группе (n = 30) — ткань атравматичную, пропитанную настоем из травы маклейи мелко плодной. В четвертой (контрольной) группе (n = 30) на раневую поверх ность накладывали ткань атравматичную, пропитанную раствором фура цилина. В пятой (контрольной) группе (n = 20) на раневую поверхность накладывали ткань атравматичную без носителей. Каждая группа состояла из двух подгрупп по 15 животных в 1, 2, 3, 4 группах и по 10 животных в 5-й контрольной группе. В первую подгруппу входили животные с ранами, инфицированными S. aureus, во вторую — с ранами, инфицированными E. coli.

Антимикробную активность исследуемого образца выявляли в ходе микробиологического исследования раневого содержимого и количествен ного исследования микробной обсемененности раневой поверхности по В. Е. Радоману.

Перед экспериментом животные находились на полноценном стан дартном пищевом рационе и проходили двухнедельный карантин. В день операции микробная обсемененность ран во всех группах животных соста вила 105–106 (lg10 = 5,2 ± 0,04), значение pH среды в них было равно 3,5. На следующий день происходил рост микробной обсемененности до 106– (lg10 = 6,9 ± 0,02). Лечение начинали на вторые сутки после заражения. К этому моменту у всех животных выявлялись признаки гнойного воспале ния: отек и гиперемия краев раны и окружающих тканей, наличие гноя и некротических масс. Животные становились малоподвижными, вялыми;

наблюдалась тахикардия, потеря массы составляла до 10 %. Перевязки проводились 1 раз в сутки ежедневно.

Исследования показали, что в зависимости от вида инфицирующего агента наблюдались различия в течении гнойно-воспалительного процесса в подгруппах животных, однако в первых трех группах, где лечение про водилось раствором сангвиритрина, настоями из листьев и из травы мак лейи мелкоплодной, отмечено быстрое снижение микробной обсемененно сти ран и исчезновение микрофлоры. Через сутки от начала лечения этими средствами ран, инфицированных S. aureus, воспалительная реакция была слабо выраженной, отмечались незначительный отек и гиперемия краев раны. В подгруппах животных, леченных раствором сангвиритрина и на стоем из листьев, отделяемое из раны было скудным, микробная обсеме ненность составляла 104–105 (lg10 = 4,1 ± 0,16). В третьей подгруппе (лече ние настоем из травы маклейи мелкоплодной) микробная обсемененность ран составляла 105–106 (lg10 = 5,2 ± 0,12). В то же время в четвертой под группе, в которой лечение проводили раствором фурацилина, микробная обсемененность равнялась 106–107 (lg10 = 6,6 ± 0,13), а в пятой — наблюда лось бурное развитие гнойно-воспалительного процесса, сопровождавшее ся обильным гнойным отделяемым, микробная обсемененность продолжа ла нарастать и составляла 107–108 (lg10 = 7,5 ± 0,1) (p 0,005).

На 2-е сутки от начала лечения микробная обсемененность в первых двух подгруппах составила 102 (lg10 = 2 ± 0,09), раны очистились от пато логического содержимого, шел активный процесс заживления. В третьей подгруппе бактериологические исследования подтверждали снижение об семененности, но она составляла 104–105 (lg10 = 4,4 ± 0,11). При визуаль ном осмотре установлено, что произошло уменьшение отека и гиперемии краев раны;

гнойное отделяемое значительно уменьшилось, тенденции к распространению некроза не отмечено. В четвертой подгруппе животных увеличилось количество гноя и некротических масс, микробная обсеме ненность составила 107–108 (lg10 = 7,6 ± 0,16), а в пятой — помимо нарас тания микробной обсемененности до 108–109 (lg10 = 8,1 ± 0,11), была отме чена генерализация инфекции. В контрольных подгруппах значение pH среды раневого содержимого равнялось 3,0–3,5, а в опытных — 7,3.

У животных первых двух подгрупп отмечено исчезновение раневого отделяемого к 3-м суткам лечения (5-е сутки после операции), в третьей подгруппе — к 4-м;

на 8-е сутки уменьшилось количество гноя и некроти ческих масс у животных в четвертой подгруппе (рисунок 1).

микробной обсемененности логарифм степени день 1-е сутки 2-е сутки 3-и сутки 4-е сутки 5-е сутки 6-е сутки 8-е сутки операции после после после после после после после операции операции операции операции операции операции операции 1 подгруппа 2 подгруппа 3 подгруппа 4 подгруппа 5 подгруппа Рисунок 1 – Степень микробной обсемененности ран животных, инфицированных S. aureus Приведенные данные позволяют сделать вывод, что настой из листьев маклейи мелкоплодной обладает антимикробной активностью, достоверно более выраженной, чем настой из травы, но не отличающейся от раствора сангвиритрина.

Исследование in vitro влияния маклейи мелкоплодной на фагоци тарную активность нейтрофилов больных с гнойно-воспалительными осложнениями Противомикробная защита организма в значительной степени зависит от состояния нейтрофилов. Изучение показателей фагоцитоза имеет значе ние в комплексном анализе диагностики иммунодефицитных состояний, в том числе, часто рецидивирующих гнойных воспалительных процессов, длительно не заживающих ран, послеоперационных осложнений.

Для изучения влияния извлечений из маклейи мелкоплодной на фаго цитарную активность нейтрофилов in vitro были использованы клетки им мунной системы пациентов с гнойными послеоперационными осложне ниями. Под воздействием всех извлечений (раствора сангвиритрина, на стоя из листьев растения, раствора полисахаридов) установлена тенденция к усилению фагоцитарной, поглотительной активности нейтрофилов. Фа гоцитарный индекс под воздействием настоя увеличился с 40,1 ± 0,1 % до 73,1 ± 0,26 % (p 0,001), под воздействием раствора сангвиритрина — до 73,7 ± 0,23 % (p 0,001), под воздействием полисахаридной фракции — до 71,7 ± 0,22 (p 0,001). Фагоцитарное число под воздействием раствора сангвиритрина достоверно увеличивалось с 3,1 ± 0,35 до 9,2 ± 0, (p 0,001), под воздействием настоя из листьев — до 8,9 ± 0,25 (p 0,001), под воздействием полисахаридной фракции — до 8,5 ± 0,2 (p 0,001).

Приведенные данные свидетельствуют о том, что антимикробная актив ность маклейи мелкоплодной обусловлена и ее способностью стимулиро вать фагоцитоз.

Деконтаминация лекарственного сырья маклейи мелкоплодной Учитывая, что предлагаемое растительное сырье планируется исполь зовать в качестве компонента комплексных фитопрепаратов для лечения ран, встала необходимость в выборе метода его стерилизации. Методом радиационного облучения возможна обработка термолабильных веществ, которые разрушаются под воздействием пара или сухого жара. При иссле довании влияния радиационной стерилизации на химический состав мак лейи мелкоплодной проведен фитохимический анализ восьми образцов ее сырья, семь из которых прошли облучение различными дозами.

Количественное определение суммы алкалоидов сангвинарина и хелеритрина (сангвиритрина) в маклейе мелкоплодной показало, что сте пень облучения не оказывает влияния на их количественное содержание (рисунок 2).

1, Содержание алкалоидов,% 1, 0, 0, 0, 0, 0 Мрад 0.25 Мрад 0.5 Мрад 0.75 Мрад 1.0 Мрад 1.5 Мрад 2.0 Мрад 2.5 Мрад Дозы облучения, Мрад Рисунок 2 – Влияние радиационной стерилизации на количественное содержание алкалоидов в сырье маклейи мелкоплодной Определение сангвинарина и хелеритрина методом последовательной тонкослойной хроматографии на силуфоле в различных системах раство рителей показало, что во всех образцах, прошедших различную степень облучения, состав алкалоидов оставался идентичным.

Проведенные исследования по показателю «Микробиологическая чистота» показали, что все образцы сырья маклейи мелкоплодной, прошедшие стерилизацию -лучами в дозе 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 Мрад, соответствуют требованиям ГФ XI изд. вып. 2, с. 187 и Измене ниям к ней от 16.04.2002 г., категория 1 по показателю «Микробиологиче ская чистота».

Проведенные методом диффузии в агар исследования антимикробной активности лекарственного сырья маклейи мелкоплодной после стерили зации показали, что облучение -лучами не изменяет антимикробный эф фект листьев.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Полученные нами данные подтверждают наличие полирезистентности возбудителей хирургической инфекции к синтетическим антимикробным препаратам и демонстрируют эффективность растительного антимикроб ного средства — настоя из листьев маклейи мелкоплодной.

Основные научные результаты диссертации 1. Микробиологические исследования раневого содержимого больных показали, что видовой состав микрофлоры ран имеет определен ную специфику в зависимости от характера и течения гнойно-воспали тельного процесса. При этом доминирующая роль в развитии хирургиче ской инфекции отводится представителям рода Staphylococcus (50,74 %), в частности, S. aureus, на долю которых приходится 40,99 % от всех изоля тов. Выделенные штаммы стафилококков проявили 100 % резистентность к ампициллину, гентамицину, цефтазидиму, цефалексину, и оказались вы соко устойчивыми к пенициллину (97,5 %), тетрациклину (66,1 %), окса циллину (53,4 %). Из антисептиков (диоксидин, хлоргексидина биглюко нат, гипохлорит натрия, мирамистин, риванол, фурагин, фурацилин, бор ная кислота) наиболее неэффективными в отношении S. aureus оказались фурацилин (95,9 %), борная кислота (81,9 %), фурагин (75 %). Приведен ные данные позволяют сделать вывод о необходимости разработки анти микробных лекарственных средств не только синтетического, но и расти тельного происхождения, эффективных, прежде всего, в отношении грам положительной раневой микрофлоры [9, 13, 16].

2. Микробиологические исследования чувствительности музейных штаммов и клинических изолятов S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aerugi nosa, P. vulgaris к водным и спиртовым извлечениям из ряда лекарствен ных растений показали, что в отношении грамположительной микрофлоры более высоким антимикробным эффектом обладает настой из травы мак лейи мелкоплодной. Бактерицидное воздействие средства на S. aureus дос тигнуто в 95,7 %, на B. subtilis — в 97,3 %, E. coli — 90,45 %, P. vulgaris — 55,35 %, P. aeruginosa — 72,7 % наблюдений. Антимикробный эффект это го растения обусловлен алкалоидами сангвинарином и хелеритрином, со держащимися и в сырье дикорастущего чистотела большого, настой кото рого оказался менее эффективным: диаметры зон ингибирования роста в отношении S. aureus составили 18,5 ± 0,17 мм для маклейи мелкоплодной и 16,5 ± 0,09 мм для чистотела большого (p 0,05). Приведенные данные по зволяют сделать вывод о перспективности и необходимости введения в культуру нового в Беларуси лекарственного растения — маклейи мелко плодной — источника для производства отечественных антимикробных фитосредств [3, 4, 6].

3. Микробиологические исследования антимикробной активности различных видов сырья маклейи мелкоплодной показали, что настой из листьев обладает антимикробной активностью, более выраженной, чем на стои из травы, из стеблей, из соцветий, из черешков: диаметры зон инги бирования роста S. aureus составили 22,5 ± 0,05 мм, 18,5 ± 0,17 мм, 0 мм, 15,4 ± 0,16 мм, 13 ± 0,21 мм, соответственно, (p 0,05), и сопоставимой с раствором сангвиритрина: 23,9 ± 0,11 мм (p 0,05). Диаметр зоны ингиби рования роста E. coli раствором сангвиритрина составил 14,9 ± 0,23 мм, настоем из листьев и настоем из травы маклейи мелкоплодной — 14,5 ± 0,8 мм (p 0,05) и 12,6 ± 0,21 мм, соответственно, (p 0,05). Установлена зависимость антимикробной активности от количественного содержания алкалоидов в сырье: в траве маклейи мелкоплодной, выращенной в север ном районе Беларуси, содержится 0,8 % суммы сангвинарина и хелеритри на, в черешках — 0,6 %, в соцветиях — 0,5 %, в стеблях — 0,4 %, в листь ях — 1,6 %. Причем, содержание алкалоидов в желтых листьях маклейи мелкоплодной превосходит их количество в молодых серо-зеленых листь ях, что обусловливает их более выраженный антимикробный эффект: диа метр зоны ингибирования роста S. aureus настоем из желтых листьев со ставил 23,4 ± 0,07 мм, настоем из серо-зеленых листьев — 22,1 ± 0,1 мм, соответственно, (p 0,05). Приведенные данные позволяют сделать вывод, что наиболее перспективным видом сырья маклейи мелкоплодной являют ся листья растения, в том числе, и утратившие окраску [2, 4, 11].

4. Микробиологические и фитохимические исследования показали, что рациональным методом деконтаминации сырья маклейи мелкоплодной и лекарственных средств на его основе является радиационная стерилиза ция в дозе 0.25 Мрад. Облучение -лучами не оказывает влияния на каче ственный состав и количественное содержание алкалоидов сангвинарина и хелеритрина, а также на биологические свойства — антимикробную и им муномодулирующую активность. Диаметр зоны ингибирования роста S. aureus до стерилизации составил 22,5 ± 0,05 мм, после стерилизации — 23,1 ± 0,07 мм (p 0,05), в отношении E. coli — 14,5 ± 0,8 мм и 14,8 ± 0,1 мм, соответственно, (p 0,05), в отношении P. aeruginosa — 8,3 ± 0,09 мм и 8,4 ± 0,09 мм, соответственно (p 0,05) [5].

5. При исследовании антимикробной активности настоя из листьев маклейи мелкоплодной на модели гнойной стафилококковой раны у крыс установлено, что под воздействием средства на 2-е сутки от начала лече ния происходит снижение микробной обсемененности раневой поверхно сти с 106–107 до 102 на 1 г ткани, раны очищаются от патологического со держимого. Впервые проведенные in vitro исследования влияния маклейи мелкоплодной на фагоцитарную активность нейтрофилов больных с гной но-воспалительными осложнениями показали, что настой из листьев на равне с раствором сангвиритрина и раствором полисахаридов растения стимулирует фагоцитоз. Под влиянием настоя из листьев маклейи мелко плодной происходило увеличение фагоцитарного индекса с 40,1 ± 0,1 % до 73,1 ± 0,26 % (p 0,001), а фагоцитарного числа — с 3,1 ± 0,35 до 8,9 ± 0,25 (p 0,001). Приведенные данные свидетельствуют о том, что на стой из листьев маклейи мелкоплодной является эффективным антимик робным лекарственным средством растительного происхождения для ме стного лечения хирургической инфекции. Применение его в I фазе ранево го процесса способствует интенсивному очищению ран от патологическо го содержимого, уменьшению воспалительной реакции и активации про цесса заживления [2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 15].

Рекомендации по практическому использованию результатов 1. С целью повышения антимикробной активности лекарственных средств на основе маклейи мелкоплодной в качестве сырья рекомендуется использовать листья растения с высоким содержанием алкалоидов сангви нарина и хелеритрина.

2. Настой из листьев маклейи мелкоплодной рекомендуется исполь зовать только в I фазе раневого процесса до появления грануляционной ткани с целью ускоренного очищения раны от патогенной микрофлоры.

3. При заготовке сырья необходимо собирать не только молодые се ро-зеленые, но и побуревшие, буро-желтые и желтые листья маклейи мел коплодной, поскольку они не уступают по содержанию алкалоидов и обес печивают высокую антимикробную активность сырью.

4. Для деконтаминации лекарственного сырья маклейи мелкоплодной рекомендуется использовать метод радиационной стерилизации.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ СОИСКАТЕЛЯ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в журналах 1. Булавкин, В.П. Реабилитация больных сахарным диабетом / В.П. Булавкин, А.В. Фомин, А.В. Фролова // Новости хирургии. – 1998. – № 2. – С. 137.

2. Погоцкая, А.А. Новое лекарственное сырье — Folia Macleayae / А.А. Погоцкая, Г.Н. Бузук, А.В. Фролова // Вестн. фармации. – 2004. – № 5. – С. 33–41.

3. Фролова, А.В. Поиск лекарственных растений для лечения паци ентов с хирургической инфекцией. Маклейя / А.В. Фролова // Вестн.

фармации. – 2005. – № 4 (30). – С. 79–86.

4. Фролова, А.В. Сравнительный анализ антимикробной активности лекарственных растений / А.В. Фролова, А.Н. Косинец, Г.Н. Бузук // Вестн. фармации. – 2006. – № 4. – С. 54–61.

5. Влияние радиационной стерилизации на химический состав и ан тимикробную активность лекарственного средства «ФитоМП» и его ком понента маклейи мелкоплодной / А.В. Фролова, Г.Н. Бузук, В.М. Царен ков, П.Т. Петров, Т.В. Трухачева, Л.Н. Дунец // Вестн. фармации. – 2007.

– № 1. – С. 83–91.

6. Фролова, А.В. Экспериментальное обоснование антимикробного и иммуномодулирующего эффекта нового вида сырья маклейи мелко плодной — Folia Macleayae / А.В. Фролова, А.Н. Косинец, В.П. Булавкин // Вестн. ВГМУ. – 2007. – № 1. – С. 106–115.

Статьи в рецензируемых сборниках 7. Комплексное лечение больных диабетической стопой / А.Н. Коси нец, В.П. Булавкин, Г.Д. Лопоухов, А.П. Лейченко, А.В. Фролова // Вопро сы клинической медицины: сб. науч. тр. ин-та – Витебск, 1997. – С. 132–134.

8. Фролова, А.В. Иммунологическая оценка состояния пациентов, страдающих заболеваниями среднего уха / А.В. Фролова // Фундамент. и клин. аспекты медицины и фармации: матер. Междунар. науч.-практ. конф.

– Витебск, 1999. – С. 92–93.

9. Фролова, А.В. Микробиологическая характеристика болезни «опе рированного уха» / Аль Рахман Набиль, А.В. Фролова // Фундамент. и клин. аспекты медицины и фармации: матер. Междунар. науч.-практ. конф.

– Витебск, 1999. – С. 116–117.

10. Фролова, А.В. Влияние лекарственных растений на розеткообра зующую функцию клеток периферической крови / А.В. Фролова // // Сту денческая медицинская наука XXI века: матер. Междунар. науч.-практ.

конф. – Витебск, 1999. – С. 65–66.

11. Бузук, Г.Н. Новое лекарственное сырье — листья маклейи / Г.Н.

Бузук, А.А. Погоцкая, А.В. Фролова // Матер. VII съезда фармац. Респуб лики Беларусь. – г. Витебск, 22 окт. 2004. – 2004. – С. 225–227.

12. Фролова, А.В. Иммуномодулирующий эффект настоя маклейи мелкоплодной / А.В. Фролова, В.П. Булавкин, З.И. Куликова // Достижения фундамент., клин. медиц. и фармац.: матер. 62-й науч. сессии ун-та. – Ви тебск, 2007. – С. 84–88.

13. Этиологическая структура возбудителей хирургической инфекции / А.В. Фролова, А.Н. Косинец, В.К. Окулич, С.Д. Федянин // Достижения фундамент., клин. медиц. и фармац.: матер. 62-й науч. сессии ун-та. – Ви тебск, 2007. – С. 50–53.

Тезисы докладов 14. Показатели обмена и перекисного окисления липидов в мембране эритроцитов при поздних осложнениях сахарного диабета на фоне гнойно воспалительного процесса / В.В. Зыкова, С.П. Козловская, В.П. Булавкин, А.В. Фролова, Д.В. Шиленок // Фундаментальные и прикладные вопросы медицины и фармации: тез. докл. 54-й науч. сессии ин-та. – Витебск, 1999.– С. 107.

15. Frolova, А.V. Immune status of patients with otitis / A.V. Frolova // 4th European Congress of Oto-Rhino-Laryngology Head and Neck Surgery, 13– May, Berlin, 2000. – 2000. – P. 507.

16. Frolova, A.V. Microbiological charachteristic of patients in otorhi nolaryngology / A.V. Frolova, V.P. Sitnikov // 4th European Congress of Oto Rhino-Laryngology Head and Neck Surgery, 13–18 May, Berlin, 2000. – 2000.

– P. 505.

РЭЗЮМЭ Фралова Аэлiта Валер’еўна Антымiкробны эфект маклеi мелкапладовай при мясцовым лячэннi хiрургiчнай iнфекцыi (эксперыментальнае даследаванне) Ключавыя словы: хiрургiчная iнфекцыя, антымiкробны эфект, фага цытоз, лекавыя раслiны, маклея мелкапладовая.

Аб’ект даследавання: 1) ранявы матэрыял 464 хворых;

2) вушны ма тэрыял 48 хворых;

3) ранявы матэрыял 140 лабараторных жывел;

4) музей ныя штамы;

5) 5 лекавых раслiн;

6) растворы алкалоiдаў i полiцукрыдаў маклеi;

7) кроў хворых i донараў.

Мэта даследавання: выявiць антымiкробныя свойствы настою з но вага для Рэспублiкi Беларусь вiду раслiннай сыравiны — лiсту маклеi мел капладовай — у адносiнах да ўзбуджальнiкаў хiрургiчнай iнфекцыi i рас працаваць рацыянальны метад яго стэрылiзацыi.

Метады даследавання: мiкрабiялагiчныя, iмуналагiчныя, мадэляван не гнойнай раны, фiтахiмiчныя, бiястатыстычныя.

Атрыманыя вынiкi. Прыведзеныя даныя дазваляюць зрабiць высно ву, што пераважаючым узбуджальнiкам хiрургiчнай iнфекцыi з’яўляецца грампазiтыўная мiкрафлора, прадстаўленная в 50,74 % назiранняў стафiла кокамi, якiя праяўляюць полiрэзiстэнтнасць да сiнтэтычных антымiкроб ных прэпаратаў i адчувальныя да раслiнных сродкаў. Выразная антымiк робная актынасць настою з маклеi мелкапладовай у адносiнах да грам пазiтыўнай мiкрафлоры дазваляе сцвярджаць аб неабходнасцi ўвядзення яе ў культуру ў Беларусi ў якасцi крынiцы айчынных антымiкробных фiтас родкаў. Вызначаная залежнасць антымiкробнай актыў-насцi ад утрымання алкалоiдаў i iх устаноўленая максiмальная колькасць у лiстах раслiны, у тым лiку, i ў страцiўшых колер, сведчыць аб перспектыўнасцi гэтага вiду сыравiны. Рацыянальным метадам стэрылiзацыi сыравiны маклеi мелкап ладовай i лекавых сродкаў з яе прызнана радыяцыйная стэрылiзацыя ў дозе 0.25 Мрад. Настой з лiстоў маклеi мелкапладовай з’яўляецца эфектыўным антымiкробным лекавым сродкам, пад удзеяннем якога на 2-я суткi ад па чатку лячэння наступае знiжэнне мiкробнага абсемянення раны з 106– да 102 на 1 г тканкi i ачыщэнне яе ад паталагiчнага матэрыялу. Высокая ан тымiкробная эфектыўнасць сродку абумоўлена i яго магчымасцю стыму ляваць фагацытоз.

Вобласть прымянення: мiкрабiяологiя, фармакалогiя, гнойная хiрургiя, отарыналарынгалогiя.

РЕЗЮМЕ Фролова Аэлита Валерьевна Антимикробный эффект маклейи мелкоплодной при местном лечении хирургической инфекции (экспериментальное исследование) Ключевые слова: хирургическая инфекция, антимикробный эффект, фагоцитоз, лекарственные растения, маклейя мелкоплодная.

Объект исследования: 1) раневое содержимое 464 больных;

2) ушное отделяемое 48 больных;

3) раневое отделяемое 140 лабораторных живот ных;

4) музейные штаммы;

5) 5 лекарственных растений;

6) растворы алкалоидов и полисахаридов маклейи мелкоплодной;

7) кровь больных и доноров.

Цель исследования: определить антимикробные свойства настоя из нового для Республики Беларусь вида растительного сырья — листьев маклейи мелкоплодной — в отношении возбудителей хирургической ин фекции и разработать рациональный метод его деконтаминации.

Методы исследования: микробиологические, иммунологические, моделирование гнойной раны, фитохимические, биостатистические.

Полученные результаты. Приведенные данные позволяют сделать вывод, что превалирующим возбудителем хирургической инфекции явля ется грамположительная микрофлора, представленная в 50,74 % наблюде ний стафилококками, и проявляющая множественную устойчивость к син тетическим антимикробным препаратам и чувствительная к растительным средствам. Выраженная антимикробная активность настоя маклейи мелко плодной в отношении грамположительной микрофлоры позволяет утвер ждать о необходимости введения ее в культуру в Беларуси в качестве ис точника отечественных антимикробных фитосредств. Выявленная зависи мость антимикробной активности от содержания алкалоидов и установ ленное их максимальное количество в листьях растения, в том числе, и в утративших окраску, свидетельствует о перспективности этого вида сырья.

Рациональным методом деконтаминации сырья маклейи мелкоплодной и лекарственных средств на его основе признана радиационная стерилизация в дозе 0.25 Мрад. Настой из листьев маклейи мелкоплодной является эф фективным антимикробным лекарственным средством, под воздействием которого на 2-е сутки от начала лечения происходит снижение микробной обсемененности раневой поверхности с 106–107 до 102 на 1 г ткани и очи щение ран от патологического содержимого. Высокая антимикробная эф фективность средства обусловлена и способностью маклейи стимулиро вать фагоцитоз.

Область применения: микробиология, фармакология, гнойная хирургия, оториноларингология.

ABSTRACT Frolova Aelita Valerievna Antimicrobic effect of Macleaya microcarpa at local treatment of a surgical infection (experimental research) Keywords: a surgical infection, antimicrobic effect, phagocytosis, herbs, Macleaya microcarpa.

Object of research: 1) wound contents from 464 patients;

2) ear separated from 48 patients;

3) wound separated from 140 laboratory animals;

4) museum stammes;

5) 5 herbs;

6) solutions of alkaloids and polysaccharides Macleaya microcarpa;

7) blood of patients and donors.

The aim of research: to define antimicrobic properties of infusion from a kind of herbal raw material new to Belarus — leaves of Macleaya microcarpa — concerning activators of a surgical infection and to develop its rational method of sterilization.

Methods of the research: microbiological, immunological, modelling of a purulent wound, phytochemical, biostatistical.

Results obtained. Cited data allow to draw a conclusion, that the prevail ing activator of a surgical infection is the grampositive microflora presented to 50,74 % of supervision Staphylococcus, and showing plural stability to synthetic antimicrobic preparations and sensitive to herbal remedy. The expressed antim icrobic activity of infusion from Macleaya microcarpa concerning grampositive allows to approve microflorae about necessity of its introduction for culture in Belarus as a source domestic antimicrobic phytopreparations. The revealed de pendence of antimicrobic activity on the contents of alkaloids and their estab lished maximum quantity in leaves of a plant, including, and lost painting, testi fies to perspectivity of this kind of raw material. The rational method of the ster ilization of raw material of Macleaya microcarpa and medical preparations on its basis recognizes radiating sterilization in a doze 0.25 Мrad. The infusion from leaves of Macleaya microcarpa is an effective antimicrobic medical prepa ration under which influence for 2 day from the beginning of treatment there is a decrease of microbic quantity of wound surfaces with 106–107 up to 102 on 1 g of tissue and clarification of wounds from pathological contents. High antim icrobic efficiency of means is caused also by ability of Macleaya microcarpa to stimulate the phagocytosis.

Area of application: microbiology, pharmacology, purulent surgery, otorhinolaryngology.