Наталия игоревна состояние обмена простагландинов, циклических нуклеотидов и процессов перекисного окисления липидов при пародонтите и его коррекции в эксперименте

БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО

ЗНАМЕНИ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ

На правах рукописи

УДК 616.314.17-008.1-008.9:577.1

ДМИТРИЕВА Наталия Игоревна

СОСТОЯНИЕ ОБМЕНА ПРОСТАГЛАНДИНОВ, ЦИКЛИЧЕСКИХ НУКЛЕОТИДОВ

И ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ПРИ ПАРОДОНТИТЕ И ЕГО КОРРЕКЦИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 14.00.21 - "Стоматология" 03.00.04 - "Биохимия"

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Минск - 1989

Работа выполнена в Минском государственном Ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Соснин Г.П.

кандидат биологических наук, доцент Балаклеевский А.И.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Мельниченко Э.М.

доктор медицинских наук, профессор Лившиц И.Б.

Ведущее учреждение — Московский государственный стоматологический институт имени Н.А.Семашко.

Защита состоится "» 19_ г.

часов на заседании специализированного 19 года в совета К 074.24.03 по присуждению ученой степени кандидата наук при Белорусском государственном институте усовершенствования врачей /220714, г. Минск, ул. П.Бровки, 3/

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского государственного институ та усовершенствования врачей.

Автореферат разослан «» 19 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доцент Булай П.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Пародонтит является тяжелой и широко распространенной формой патологии пародонта у человека (Т.В.Никитина,.1982;

Е.В.Боровский, 1987;

В.С.Иванов, 1988).

Предложено большое количество фармакологических средств для лечения этого заболевания (Т.В.Никитина, 1982;

В.U.Иванов, 1988;

Л.А.Хоменко, 1988). Однако лекарственная терапия пародонтита часто оказывается недостаточно эффективной (Т.В.Никитина, 1979;

В.С.Иванов, 1985). Это связано в зна чительной мере с отсутствием достаточной информации о механизме развития воспаления в паро донте, являющегося одним из наиболее постоянных клинико-морфологических проявлений забо левания (Г.П.Соснин, 1979;

В.С.Иванов, 1985).

Поэтому более глубокое изучение патогенеза пародонтита, в частности особенностей развития воспаления в пародонте, а также изыскание эффективных средств патогенетической терапии заболевания продолжают оставаться актуальными.

Исследованиями последних лет установлено, что простагландины /ПГ/ являются актив ными медиаторами воспалительной реакции (A.M.Чернух, 1979;

Л.Мусил, 1985). Реализация их дей ствия осуществляется путем изменения состояния клеточных мембран и через посредство уни версальных регуляторов внутриклеточных процессов — циклических нуклеотидов /ЦН/ и прежде всего — циклического З',5-аденозинмонофосфата /цГМФ/ и З', 5-гуанозинмонофосфата /цГМФ/ (А.М.Чернух, 1979;

С.Д.Варфоломеев, 1985).

Индикатором состояния клеточных мембран и их проницаемости являются процессы пере кисного окисления липидов /ПОЛ/ в мембранах (Ж.И.Абрамова, Г.И.Оксегендлер, 1987), Активация этих процессов приводит к резкому возрастанию проницаемости биомембран и нарушению актив ности мембраносвязанных рецепторных и ферментных систем, что может способствовать разви тию воспаления, а также глубокому нарушению внутриклеточного метаболизма (Ю.

А.Владимиров, А.И.Арчаков, 1972;

Е.Б.Бурлакова, 1986).

Однако, в отношении развития патологического процесса в тканях пародонта значение нарушения состояния этих гуморальных регуляторных систем и процессов ПОЛ остается мало изученным. Практически отсутствуют комплексные исследования, посвященные изучению роли указанных выше систем при воспалении тканей пародонта и в механизме действия применяемых лечебных средств.

Исходя из изложенного, целью исследования явилось выяснение характера из менений в содержании и обмене ПГ, ЦН и процессов ПОЛ в десне при пародонтите, роли изменений состояния этих регуляторных систем в патогенезе заболевания и изыскание на этой основе новых фармакологических средств направленной, патоге нетически обоснованной терапии воспаления в пародонте.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

Изучить содержание ИГЕ, цАМФ, цГМФ и состояние процессов ПОЛ в десне больных пародонтитом и у животных в динамике развития экспериментального воспалитель ного процесса в тканях пародонта. Провести сопоставление выявленных биохимиче ских изменений в тканях пародонта человека и животных при воспалении.

1. Установить информативность исследованных биохимических показателей для определения тяжести пародонтита, стадии заболевания и контроля за эффективно стью проводимого лечения.

2. Сопоставить в эксперименте влияние на ПОП в тканях пародонта и эффек тивность в коррекции воспалительного процесса в десне различных классов фарма кологических соединений: а/ ингибиторов биосинтеза ПГ, б/ блокаторов процессов ПОЛ и стабилизаторов биомембран — антиоксидантов /АО/ различной природы // токоферол, адреналин/;

в/ комбинированного применения наиболее эффективных ингибиторов синтеза ПГ и АО.

3. Изучить эффективность нового препарата — иммобилизованного адреналина /МКЦ-адреналина/, обладающего пролонгированным действием, в коррекции воспа лительных явлений и метаболизма ПГ, ЦН и процессов ПОЛ при экспериментальном пародонтите у крыс.

4. Обосновать рекомендации по применению некоторых регуляторов обмена ПГ и АО для коррекции воспаления в десне при пародонтито.

Научная новизна I. Впервые проведено комплексное изучение содержания ПГ, ЦН, продуктов и про цессов ПОЛ в десне человека и крыс в динамике развития воспалительного процес са. Установлены значительные и сопряженные изменения состояния этих регуля торных систем. Показана вероятная патогенетическая роль обнаруженных биохими ческих изменений в развитии воспалительного процесса в десне.

2. Впервые обнаружена значительная активация процессов ПОЛ и возрастание содержания ПГЕ и цГМФ в первые часы развития воспалительного, процесса в дес не. При дальнейшем развитии воспаления /1 8 -8 8 сутки/ наблюдаются фазные и со пряженные изменения в содержании ПГЕ, ПГФ2, ЦН и скорости образования про дуктов ПОЛ, характеризующиеся временным частичным уменьшением /кроме ПГЕ/ и последующим устойчивым и значительным повышением уровня ПГ, ВД и скорости ПОЛ.

3. При ослаблении клинических проявлений воспаления /128 сутки/ в десне от мечена полная нормализация уровней ПГЕ, ПГФ 2, цГМФ, частичная нормализация скорости образования продуктов ПОЛ альдегидной и котонной природы /ПОЛ-АК/, уровня цАМФ.

4. Показана патогенетическая роль активации процессов ПОЛ и ПГ-генеза в развитии экспериментального пародонтита у крыс.

5. Проанализирована сравнительная эффективность действия различных ингиби торов синтеза ПГ /индометацина, мефенаминовой кислоты, бутадиона/. Показана наибольшая эффективность индометацина в коррекции воспалительных явлений в тканях пародонта, сопряженная с частичной нормализацией в них уровня ПГ.

6. Выявлена противовоспалительная активность у АО -токоферола и адрена лина при их локальном введении в десну при воспалении, сопряженная с частичной нормализацией повышенной при воспалении скорости образования малонового ди альдегида /МДА/ в тканях пародонта.

7. Впервые показана высокая эффективность локального /в десну/ и паренте рального /подкожно/ введения препарата МКЦ-адреналипа, а также его сочетанного введения с индометацином /перорально/, снижающих степень воспаления и актива цию процессов ПОЛ в десне при экспериментальном пародонтите. Нормализующее действие МКЦ-адреналина значительно выше и продолжительнее /до 3-х суток по сле однократного введения/, чем у адреналина гидрохлорида. Действие МКЦ адреналина характеризуется, в отличие от индометааина, полней нормализацией в десне процессов ПОЛ, активированных при воспалении.

Научно-практическая значимость 1. Изменение содержания ПГ, ВД и продуктов ПОЛ в десне может служить дополнительным критерием оценки активности воспалительного процесса и эффективности проводимой терапии.

2. Наиболее доступными и простыми тестами оценки активности воспалительно го процесса и эффективности проводимого лечения являются определение степени повышения содержания МДА и индуцированной скорости образования МДА и ПОЛ АК в биоптатах десны. Эти тесты могут быть использованы в клинической практи ке.

3. Дано биохимическое и клиническое обоснование применения ряда АО и несте роидных противовоспалительных препаратов для ликвидации воспаления в десне при пародонтите. Наиболее высокой эффективностью и способностью к коррекции био химических нарушений в десне обладает препарат МКЦ-адреналин и особенно его сочетанное применение с индометацином. Указанные соединения и их комбинация рекомендуются для клинических испытаний.

4. В эксперименте на животных разработана методика патогенетически обосно ванной и устойчивой коррекции воспаления пародонта с использованием различных способов введения МКЦ-адреналина. Препарат МКЦ-адреналин может применяться как локально в виде аппликаций в зону воспаления, так и системно /подкожно/, и про являет продолжительную /в течение нескольких суток/ противовоспалительную и антиоксидантную активность.

Внедрение в практику подученных результатов 1. Материалы о патогенетическом значении нарушения процессов ПОЛ и ПТ генеза включены в курс лекций по разделу "Заболевания пародонта" для студентов стоматологического факультета Минского государственного медицинского института (МГМИ).

2. Результаты экспериментальных исследований МКЦ-адреналина направлены в Фармкомитет МЗ СССР для получения разрешения на проведение клинических испы таний препарата при пародонтите.

8. Подана заявка на изобретение № 44I3I48/14 "Способ лечения заболеваний пародон та с приоритетом от 23.02.1988 г.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на научной сес сии МГМИ /Минск, 1986/, информационной конференции кафедры терапевтической сто матологии МГМИ /Минск, 1987/, заседаниях Минского городского стоматологического общества /Минск, 1987, 1989/, II съезде стоматологов БССР /Витебск, 1987/.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 3 работы.

Положения, выносимые на защиту.

1. Воспалительные явления в пародонте крыс /модель пародонтита/ характери зуются ранним и значительным возрастанием содержания ПГЕ и ПГФ2, резкой ак тивацией процессов неферментативного ПОЛ в десне, последующими фазными изме нениями этих процессов. При этом в десне наблюдаются сопряженные фазные измене ния содержания цАМФ и цГМФ.

2. При хроническом пародонтите в десне человека отмечено возрастание содер жания ПГЕ и ПГФ2, а также активация процессов ПОЛ. Обострение заболевания со провождается снижением уровня цАМФ и повышением содержания цГМФ в десне.

3. Блокатор синтеза ПГ - индометацин, а также МКЦ-адреналин, обладающий про лонгированной антиоксидантной и гормональной активностью, способны значитель но и устойчиво снижать клинических проявления воспаления и нормализовать акти вированные процессы ПГ-генеза и ПОЛ в тканях воспаленного пародонта, соответ ственно. Сочетанное введение МКЦ-адреналина с индометацином наиболее полно нормализует метаболические нарушения в пародонте /изменение уровня ЦН, ПГ, ПОЛ/ и является высокоэффективной противовоспалительной комбинацией лекарст венных средств.

4. Ингибиторы ПГ-генеза бутадион и мефенаминат натрия, АО альфа-токоферол и адреналина гидрохлорид, также способны в различной степени ослаблять воспале ние в десне.

5. Обосновывается патогенетическая значимость активации процессов ПОЛ и ПГ-генеза в десне в развитии воспалительного процесса и перспективность исполь зования АО и ингибиторов синтеза ПГ для лечения пародонтита.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 160 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4-х глав собственных исследова ний, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и при ложения, Библиографический указатель включает 239 литературных источников, из них 139 отече ственных и 100 иностранных. Работа иллюстрирована 9 рисунками и 26 таблицами, в т.ч. 18 таблицами в "Приложении".

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование содержания ПГ, ЦН и скорости образования МДА проведено в биоптатах десны 42 человек, из них 22 страдали хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тя жести, у 20 человек явлений воспаления в тканях пародонта не было.

Аналогичные исследования проведены у 320 белых крыс-самцов массой 250-300 г в динамике разви тия воспаления в тканях пародонта.

Для получения модели воспаления в пародонте крыс использовали методики Н.Ф.Данилевского и др.(1973) и А.И.Борисенко (1973).

Корригирующее действие лекарственных препаратов на течение воспалительного процесса в пародонте крыс изучали у 240 животных. Все инъекции крысам проводили под кратковременным эфирным наркозом.

В опытах in vitro изучалось влияние различных концентраций препаратов на скорость ПОЛ в присутствии железоаскорбатной смеси в гомогенате биоптатов десны. МКЦ-адреналин (полу чен в проблемной лаборатории биохимии нейрогормонов МГМИ) первоначально растворяли на воде и дальше в конечной концентрации, соответствующей 10-4, 10-5, 10-6 М, т.е. молей на литр адреналина.

В контрольных для МВД-адреналина пробах использовались соответствующие по массе концен трации свободной монокарбоксицеллюлозы (3·10-4, 3·10-5, 3·10-6 г/мл). Препарат индометацина первона чально растворялся на диметил-сульфоксиде /ДМCО/ до концентрации 10 -2 м, после чего разводил ся на воде до конечной концентрации в пробах 10-4, 10-5, 10-6, 10-7 м. В контрольных к индометацину пробах использовали соответствующие концентрации водного раствора ДМСО (10-3, 10-4, 10-5, I0- г/мл).

Клинический статус животных оценивали по методике А.И.Борисенко /1973/ и по разработан ной нами 6-балльной системе и в %% от контроля.

Для определения содержания ПГ и ЦН использовали наборы реагентов для радиоиммунного анализа " Clinical Assays" /США/ и "Amersham " /Англия/ соответственно. Подсчет радиоактивности осуще ствляли на сцинтилляционном счетчике фирмы "Beokmaa ", модель ЛС-5801 /США/.

Для определения содержания ТБК-активных продуктов /МДА/ был использован вариант мето да, предложенного T.Asakava /I980/. Скорость индуцированного образования ПОЛ-АК в гомогенате десны определяли методом, разработанным в лаборатории биохимии нейрогормонов ЦНИЛ ШЛИ (А.И.Балаклеевский и др., 1988). Прирост содержания МДА и ПОЛ-АК в пробах определяли при ин кубации 0,2 мл 10% гомогената ткани в 2,0 мл 0.IM раствора фосфатного буфера с рН 7,4 в течение 40 ми нут при 37°С в присутствии Fe2+10-6 М и аскорбата 10-4 М.

Результаты исследований были подвергнуты статистическому анализу (П.Ф.Рокицкий, 1973).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Проведенный анализ биохимических изменений в биоптатах десны больных пародонтитом и крыс с экспериментальным воспалительным процессом поката наличие значительных откло нений в содержании ПГЕ и ПГФ2, цГМФ и цГМФ, МДА и скорости образования МДА и ПОЛ-АК по сравнению со здоровой десной человека и животных, причем направленность и выражен ность этих изменений зависят от стадии развития воспалительного процесса.

Установлено, что уже через I час от начала моделирования воспаления в пародонте, содержание ПГЕ в десне возрастает в 2,1 раза, содержание ПГФ 2. Увеличивается менее значительно. Нарастание воспаления в десне (через I сутки после введения раствора скипидара) сопровождается еще большим уве личением в ней содержания ПГЕ (в 5 раз) и ПГФ 2 (в 3,2 раза) (Табл. I.A).

Полученные данные свидетельствуют о возможной роли раннего возрастания содержания ПГ в десне крыс (особенно ПГЕ) в патогенезе острого воспаления в пародонте, что было в дальней шем подтверждено в опытах с введением крысам биокаторов синтеза ПГ.

Учитывая данные литературы (L.M.Raisz, I979) о том, что ПГЕ /Е1 + Е2/ вызывают резорбцию кост ной ткани в концентрации выше 10-6, что обнаружено в наших опытах в десне больных пародонтитом при хроническом течении заболевания (Табл.1,Б) и В десне крыс (острый период заболевания), можно считать, что повышение содержания ПГЕ и ПГФ2 в десне является одним из вероятных патогенетических механизмов развития основных проявлений пародонтита - воспале ния и деструкции костной ткани.

Анализ полученных данных по изменению содержания цАМФ в десне крыс в ди намике развития воспалительного процесса в пародонте показал, что увеличение уровня ПГЕ в десне крыс предшествует последующему возрастанию в ней содержа ния цАМФ как в острой, так и в подострой стадиях воспаления (Табл. 1,А). Эти данные свидетельствуют о том, что увеличение уровня цАМФ в десне является, ве роятно, компенсаторно-защитной реакцией, направленной на ограничение и ликвида цию воспаления в пародонте.

Наблюдаемое сразу после введения скипидара (через I час) значительное (на 56$) воз растание уровня цГМФ в десне крыс свидетельствует о возможной его роли в развитии воспалительного процесса. Отмечается определенный параллелизм уровней цГМФ и ПГЕ в десне в ранние сроки развития воспаления. Возможно, что уровень цГМФ в воспаленной десне отражает активацию процесса ПОЛ в тканях пародонта, как это отмечено в литературе для некоторых других тканей (В.D.Hall, 1982).

Сходные данные получены нами при изучении содержания ЦН в биоптатах десны больных пародонтитом (Табл.1,Б). Вне обострения воспалительного процесса содер жание цАМФ повышено на 43%, в то время как уровень цГМФ достоверно не изменя ется. При обострении заболевания содержание цГМФ в десне возрастает на 39$ на фоне снижения содержания цАМФ (на 25%).

Результаты исследования биоптатов воспаленной десны человека и крыс показа ли, что наряду с активацией ПГ-генеза наблюдается значительное возрастание ско рости индуцированного образования начальных /ПОЛ-АК/ и конечных ДНА/ продук тов неферментативного ПОЛ. Так скорость образования П01-АК в гомогенате десны крыс через I час и через I сутки после введения скипидара увеличивается в 5-7 раз (Рис.

I.A), что значительно превышает степень увеличения уровней ПГЕ и цГМФ в этот пери од.

Также значительно возрастает и скорость образования МДА в десне - через I час после введения в нее раствора скипидара в 2,7 раза и через 2-6 суток - до 7 раз (Рис. 1.Б).

При этом обнаружено кратковременное возрастание эндогенного уровня МПА в воспа ленной десне через 1 час (в 2,7 раза) и затем последующее устойчивое усиление обра зования МДА в гомогенате десны через 2-6 суток (до 4 раз) от начала эксперимента.

Усиление скорости индукции МДА (в 5,4 раза) отмечено и в гомогенате десны челове ка с хроническим течением пародонтита.

Таким образом, уже в наиболее ранние сроки развития экспериментального пародонти та наблюдается значительное возрастание содержания продуктов ПОЛ и скорости их обра зования, особенно начальных продуктов ПОЛ. Эти данные свидетельствуют о возможной па тогенетической значимости активации процессов ПОЛ в развитии воспаления в пародонте, что подтверждается обнаруженной лечебной (противовоспалительной) активностью у ряда примененных нами АО (адреналина гидрохлорид, МКЦ-адреналин, -токоферола ацетат).

Полученные данные, свидетельствующие о глубоких нарушениях состояния мембран и биохимических изменениях в десне при пародонтите, явились основанием для применения с лечебной целью препаратов, обладающих антиоксидантным действием, способных ингибиро вать синтез ПГ и увеличивать содержание цАМФ в десне.

Нами обнаружено, что пероральное ( п/о ) введение крысам индометацина (10 мг на кг массы, дважды через I сутки) в остром периоде заболевания в 2 раза уменьшает в десне повышенное содержание ПГЕ и на 42$ - уровень ПГФ2. Выраженное противовоспали тельное действие индометацина в острой стадии заболевания (Рис.4,А) связано, очевидно, с его способностью ингибировать синтез ПГ (М.Д.Машковский, 1987), уровень которых резко возрастает при воспалении. Однако индометацин одновременно обладает способностью активировать процессы неферментативного ПОЛ в тканях пародонта (Рис.3,А). В опытах in vitro индометацин также активирует скорость образования УДА в гомогенате десны крыс:

10-5 - в 1,4 раза, 10-4 - в 2,7 раза. Эти результаты свидетельствуют о наличии у индометаци на нежелательного побочного действия, что, очевидно, ослабляет его лечебный эффект при пародонтите. Полученные данные указывают на целесообразность сочетанного применения индометацина с АО, одним из которых является МКЦ-адреналин. Так в концентрации 10 М МКЦ-адреналин ингибирует скорость образования МДА в гомогенате воспаленной десны крысы в 1,4 раза, а в концентрации 10-5 в 2,5 раза.

PИС. I. Скорость индуцированного образования (в присутствии Fe2+10-6 и аскорбата 10 М) ПОД-АКт /I/ и ВДА /П/ в гомогенате десны крысы в динамике развития воспалительно го процесса.

I - контроль;

2 - опыт (введение 0,1 мл 50$ раствора скипидара в десну).

Рис. 2. Влияние in vitro МКЦ-адреналина /I/, индометацина /II/ и их сочетанного дей ствия /III/ на скорость индуцированного образования МДА в гомогенате воспаленной десны крысы в присутствии Fe2+10-6 и аскорбата 10-4 в острой стадии воспаления пародонта.

Обозначения: 0 - влияние препаратов в концентрации, соответствующей 10-5 М/ литр адреналина / I, III / или индометацина / II, III /;

К -влияние МКЦ в концентрации 3·10-4 г на мл / I, III / и ДМСО в концентрации 10-4 г на мл / II, III /.

Рис. 3. Влияние введения индометацина, МКЦ-адреналина и их комбинации /A/,, токоферола ацетата и мефенамината натрия /Б/ на скорость индуцированного (в присутст вии Fe2+10-6 М и аскорбата 10-4) образования МДА в гомогенате воспаленной десны.

Условия опыта - 3 суток после введения скипидара в десну (0,1 мл 50$ раствора) и суток после введения препаратов.

Обозначения: К - контроль (введение растворителя);

0 - опыт (введение препаратов) А: I - индометацин п/о 10 мг/кг;

2 - МКЦ-адреналин п/к 0,043 мг/кг по адреналину;

3 - ин дометацин п/о и п/к МКЦ-адреналин в тех же дозах. Б: I- -токоферол в/д 10 мг/кг;

2 - ме фенаминат натрия в/д 5 мг/кг.

Рис. 4. Влияние однократного введения нестероидных противовоспалительных препа ратов /А/ и введение в десну препаратов адреналина и л-токоферола ацетата /Б/ на дина мику воспалительного процесса в тканях пародонта крыс (в баллах).

Обозначения: А: I - в/д 0,1 мл 50$ раствора скипидара /контроль/;

2 - мефенаминат на трия 6 мг на кг в/д;

3 - мефенаминат натрия 50 мг на кг в/д;

4 - бутадион 5 мг на кг в/д;

5 бутадион 25 мг на кг в/д;

6 - индометацин 10 мг на кг п/о;

7 - сочетанное введение п/о ин дометацина (10 мг на кг) и п/к МКЦ-адреналина (0,043 мг на кг по адреналину) Б: I - кон троль;

2 - адреналина -НИ 0,043 мг/кг;

3 - адреналина · HCI 0,43 мг/кг;

4 - МКЦ-адреналин 0,043 мг/кг по адреналину;

6 - МКЦ-адреналин 0,43 мг/кг по адреналину;

6 - -токоферол 10 мг/кг.

Рис. 1,2,3,4 Р0,05 по отношению к контролю.

Клиническое изучение влияния МКЦ-адреналина на течение воспалительного процесса в пародонте крыс показало высокую и устойчивую эффективность лечебного действия пре парата при внутридесневом, в/д, и при подкожном, п/к, его введении. МКЦ-адреналин ока зывал противовоспалительное действие при использовании как большой (0,43 мг на кг по адреналину основанию), так и малой (0,043 мг на кг по адреналину основанию) доз препа рата (Рис. 4,Б), что соответствует дозам адреналина, применяемым в клинике по другим назначениям. Особенно эффективным было двукратное введение в/д малой дозы МКЦ адреналина с интервалом 2-3 суток. Такой способ лечения позволил ликвидировать воспа ление в десне крыс к 12 суткам от момента инъекции раствора скипидара, тогда как у жи вотных контрольной группы процесс угасал к 18-19 дню от начала эксперимента.

Изучение механизма действия МКЦ-адреналина показало, что препарат кроме АО дей ствия in vitro оказывает выраженное ингибирующее влияние как на образование ПГ, так и на скорость образования МДА в десне крыс. Введение в/д МКЦ-адреналина в остром и подо стром периодах заболевания в дозе 0,43 мг на кг массы по адреналину снижает содержа ние ПГЕ и ПГФ2, в десне в 2-3 раза, скорость образования МДА уменьшается в 14-15 раз.

При этом содержание цАМФ в десне достоверно увеличивается. Введение МКЦ-адреналина в/д в малой дозе также достоверно уменьшает скорость образования МДА в воспаленной дес не и обладает клинической эффективностью (Рис. 4,Б). П/к введение МКЦ-адреналина в обеих дозах также заметно улучшало состояние крыс и снижало воспаление в десне через I сутки на 21$ и на 53/5 соответственно, через 4 суток - на 29$ и на 51$, через 7 суток - на 45$ и на 61$ по сравнению с показателями контрольной группы.

Столь комплексное благоприятное воздействие МКЦ-адреналина на нарушенные при воспалении метаболические процессы в десне, а также постепенное и длительное (до 3 су ток) высвобождение из него активированной формы адреналина, что продолжительное время поддерживает терапевтический уровень гормона в тканях (А.И.Балаклеевский и др., 1985), очевидно, обусловливает его высокую терапевтическую эффективность при патологии па родонта воспалительной природы.

Препараты адреналина гидрохлорид (адреналин · HCI) и -токоферол оказывают лишь слабое и кратковременное противовоспалительное действие (Рис. 4,Б), что, очевидно, связа но с их быстрым метаболизмом в тканях (М.Д.Машковский, 1987) Учитывая неблагоприятное побочное действие индометацина (активация процесса неферментативного ПОЛ), было исследовано сочетанное применение индометацина с МКЦ-адреналином, являющимся мощным и длительнодействующим АО. В опытах in vi tro совместное добавление индометацина с МКЦ-адреналином в пробы с гомогенатом воспаленной десны полностью устраняет прооксидантное действие индометацина (Рис. 2). Совместное введение крысам индометацина п/о и МКЦ-адреналина п/к оказы вает выраженное терапевтическое влияние на течение воспаления в пародонте (Рис. 4,А) и значительно ослабляет скорость образования МДА в гомогенате воспаленной десны (Рис. 3,А). Полученные данные свидетельствуют о перспективности совместного введе ния индометацина с МКЦ-адреналином для наиболее полной коррекции нарушенных метаболических процессов (активированных процессов ПОЛ и ПГ-генеза) при воспа лении в тканях пародонта и для повышения лечебной эффективности препарата.

Менее выраженной противовоспалительной активностью в наших экспериментах обладал мефенаминат натрия (5 и 50 мг на кг) и бутадион (5 и 25 мг/кг) (Рис. 4,А), что, очевидно, связано как с кратковременностью их действия, так и менее выраженной способностью ингибиревать ПГ-генез (Ф.П.Тринус, Б.М.Клебанов, 1987).

Кратковременностью действия можно объяснить, вероятно, и слабую противо воспалительную активность у АО -токоферола при введении в десну в дозе 10 мг на кг (Рис.4,Б). Представляется перспективным дальнейшее изыскание эффективных противо воспалительных препаратов среди различных классов антиоксидантов и возможность сочетанного применения их с ингибиторами ПГ-генеза.

Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют о пер спективности включения в комплексную терапию пародонтита препаратов, нормали зующих в десне активированные процессы ферментативного ПОЛ (ПГ-генез) и нефер ментативного ПОЛ (МДА и ПОЛ-АЮ, а также повышающих содержание цАМФ в воспа ленной десне. С этой целью, очевидно, может быть использован новый препарат МКЦ-адреналин, а также индометацин в комбинации с МКЦ-адреналином.

ВЫВОДЫ 1. При хроническом пародонтите в десне человека отмечено значительное воз растание содержания ПГЕ и ПГФ2 резкое увеличение скорости образования МДА и по вышение содержания цАМФ. Обострение заболевания сопровождается снижением уровня цАМФ и увеличением содержания цГМФ.

2. В ранние сроки развития воспаления в пародонте крыс значительно возраста ет содержание ПГЕ, ПГФ2, повышается уровень МДА и скорость образования продук тов ПОЛ. В остром периоде воспаления в десне возрастает уровень цГМФ и уменьша ется содержание цАМФ. Ослабление воспаления в десне в подостром периоде сопро вождается постепенной нормализацией уровня ПГ, ЦН, процессов ПОЛ.

3. Анализ динамики изменения содержания ПГЕ, ПГФ2, цАМФ, цГМФ, продуктов и процессов ПОЛ в десне при развитии модельной воспалительной реакции у крыс и при пародонтите у человека свидетельствует о патофизиологической значимости вы явленных нарушений в состоянии этих биохимических и гормональных систем в раз витии воспалительного процесса.

4. Блокатор синтеза ПГ - индометацин значительно и устойчиво уменьшает клини ческие проявления воспаления в пародонте крыс, снижая при этом содержание ПГ в десне, но еще более повышает активированные при воспалении процессы ПОЛ в дес не. Бутадиен, мефенаминат натрия, -токоферол и адреналина гидрохлорид оказы вают менее значительное и устойчивое нормализующее влияние на процессы ПОЛ в воспаленной десне, обладают менее выраженным противовоспалительным дейст вием.

5. Введение МКЦ-адреналина как в большой (0,43 мг на кг), так и в малой (0,043 мг на кг по адреналину) дозах в десну и подкожно значительно и устойчиво уменьшает клинические проявления воспаления, что сопровождается снижением повышенного содержания ПГЕ и ПГФ2 в десне и скорости образования МДА с одновременным воз растанием уровня цАМФ в десне.

6. Комбинированное введение индометацина и МКЦ-адреналина устраняет способ ность индометацина активировать процессы неферментативного ПОЛ, что приводит к значительному ослаблению клинических проявлений воспаления и процессов ПОЛ в десне.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 1. Полученные результаты об изменении содержания ПГ, ЦН, продуктов и процессов ПОЛ в десне при пародонтите создают предпосылки для включения в комплексную терапию пародонтита ингибиторов синтеза ПГ и антиоксидантов.

2. Изменение содержания ПГ, ЦН и скорости образования продуктов ПОЛ ДЦА и ПОЛ-АК/ в десне может служить дополнительным и высокоинформативным критерием оценки активности воспалительного процесса, его течения и эффективности проводимой терапии.

3. Данные о сравнительной эффективности нестероидных противовоспалительных препаратов и АО могут быть использованы при выборе средств лекарственной терапии пародонтита в учреж дениях МЗ СССР.

4. Препараты индометацин и МКЦ-адреналин, обладающие наибольшей эффективностью в коррекции воспаления десны и повышенного ПГ-генеза и процессов ПОЛ в тканях воспаленного пародонта, могут быть рекомендованы для клинических испытаний при лечении пародонтита.

5. Материалы диссертации могут быть внедрены в учебный процесс стоматологических фа культетов мединститутов и институтов усовершенствования врачей при изучении раздела "За болевания пародонта".

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Простагландины и их роль в развитии пародонтита /Организация, профилактика и реа билитация в стоматологии: Тез. докл. П-го съезда стоматологов БССР. - Витебск, 1987. - С. 71-73. /Соавт.: Н.Н.Гомолко/.

2. Роль перксисного окисления липидов в патогенезе пародонтита / Там же. - С. 76-77.

3. Роль простагландинов Е и Ф 2 в механизме развития пародонтита //3дравоохранение Бело руссии. - 1988. - № 8. С. 32-35. - /Соавт.: Н.Н.Гомолко, А.И.Балаклеевский, Г.П.Соснин/.