Гетеротрофный бактериопланктон среднего и северного колен кольского залива и его участие в процессах их естественного очищения от нефтяных углеводородов
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высше-го профессионального образования
«Мурманский государственный технический университет»
На правах рукописи
ЛИТВИНОВА МАРИНА ЮРЬЕВНА
ГЕТЕРОТРОФНЫЙ БАКТЕРИОПЛАНКТОН СРЕДНЕГО И
СЕВЕРНОГО КОЛЕН КОЛЬСКОГО ЗАЛИВА И ЕГО УЧАСТИЕ В
ПРОЦЕССАХ ИХ ЕСТЕСТВЕННОГО ОЧИЩЕНИЯ ОТ НЕФТЯНЫХ
УГЛЕВОДОРОДОВ Специальность 03.02.10 - Гидробиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Москва, 2013
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образователь ном учреждении высшего профессионального образования «Мурманский госу дарственный технический университет» на кафедре микробиологии и биохи мии.
Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор Ильинский Владимир Викторович
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор Садчиков Анатолий Павлович, биотех нологический центр МГУ им. М.В. Ломоносова кандидат биологических наук, старший научный сотрудник Мицкевич Ирина Николаевна, Институт микробиологии им. С.Н. Виноградского РАН
Ведущая организация: Институт биологии внутренних вод им. И.Д. Папанина Российской академии наук
Защита диссертации состоится: 28 марта 2013 г. на заседании диссертаци онного совета Д.501.001.55 при Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Мос ковский государственный университет имени М. В. Ломоносова», по адресу:
119234, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, МГУ им. М.В. Ломоносова, Биологический факультет, ауд.389.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государствен ного университета имени М.В. Ломоносова.
Автореферат разослан «_» февраля 2013 года.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук Н.В. Карташева
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Введение. Актуальность проблемы. В современном мире проблема охраны морских вод от загрязнения стоит особенно остро. Это связано не только с тем, что моря и океаны являются важнейшим источником море продуктов для населения, но и с глобальной ролью Мирового океана в поддержании экологического равновесия на нашей планете. К настоящему времени, однако, уже практически не осталось водоемов, качество воды в которых не изменилось бы в худшую сторону под влиянием антропоген ной деятельности. Кольский залив Баренцева моря в этом плане не состав ляет исключения.
В процессах формирования и регуляции качества воды, естественно го очищения водных экосистем участвуют практически все живые орга низмы. Одним из основных звеньев процесса естественного очищения яв ляются микробные ценозы водоемов, поскольку именно они способны к деструкции не только автохтонных органических веществ, но и большин ства аллохтонных соединений, в том числе и ксенобиотиков. Ведущую роль в этих процессах играет гетеротрофный бактериопланктон.
Проблема нефтяного загрязнения Кольского залива на сегодняшний день является одной из самых актуальных экологических проблем региона.
Несмотря на то, что катастрофических разливов нефти в Баренцевом море до настоящего времени не наблюдалось, Кольский залив по причине ин тенсивного судоходства и многочисленных сбросов сточных вод от при брежных городов относится к числу акваторий с высоким уровнем загряз нения нефтяными углеводородами (НУ) (Кольский залив…, 2009). Прове дение микробиологического мониторинга в таких экологически неблаго получных районах имеет важное значение, как для оценки состояния сре ды, так и для решения задач экологического картирования загрязнения прибрежных зон (Цыбань и др., 1990;
Калитина, 2006 и др.).
Микробиологические исследования акватории Кольского залива и Баренцева моря проводятся с начала ХХ века (Исаченко, 1914;
Буткевич, 1928). К настоящему времени накоплен большой материал по отдельным аспектам экологии бактериопланктона Кольского залива и Ба ренцева моря (Трунова, 1977;
Теплинская, 1985;
Байтаз, 1998;
Мишустина и др., 1997). Однако до сих пор детальное изучение гетеро трофных микробных сообществ проводилось только в водах южного коле на залива, т.е. в его эстуарной области, причем в основном на литорали (Перетрухина, 2002;
Богданова, 2003;
Макаревич, 2004;
Перетрухина, 2006;
Мишустина и др., 2006;
Широколобова, 2009). Открытые воды сред ней и северной (морской) областей Кольского залива оставались в этом плане практически неизученными.
Цель работы заключалась в изучении и анализе сезонной и про странственно-временной изменчивости количественного и качественного состава планктонных гетеротрофных бактериоценозов открытых вод сред него и северного колен Кольского залива Баренцева моря, а также их уча стия в процессах естественного очищения вод данной акватории от НУ.
В соответствии с этим в работе были поставлены следующие задачи:
изучить распределение и общую численность бактерий по прямо му счету, а так же оценить количество евтрофных бактерий (ЕфБ), факультативно олиготрофных бактерий (ФОБ) и углеводородо кисляющих (УВ-окисляющих) бактерий по посеву в открытых во дах среднего и северного колен залива;
исследовать пространственно-временную изменчивость микро биологических показателей и их связи с гидролого гидрохимическими параметрами морской среды;
оценить степень трофности открытых вод средней и северной ча стей Кольского залива по микробиологическим и гидрохимиче ским показателям;
определить потенциальную углеводородокисляющую активность бактериопланктона экосистемы Кольского залива при температу рах in situ, а также сезонную изменчивость этого показателя;
исследовать таксономический состав евтрофных бактерий, выде ленных из вод среднего и северного колен Кольского залива.
Научная новизна работы. В результате проведнных исследований впервые получены комплексные данные о распределении гетеротрофного бактериопланктона, в том числе и отдельных его физиологических групп, в водах среднего и северного колен Кольского залива. Исследована про странственно-временная изменчивость обилия важнейших физиологиче ских групп гетеротрофных бактериоценозов и дана оценка их состояния.
Впервые получены данные о сезонной динамике потенциальной УВ окисляющей активности гетеротрофного бактериопланктона Кольского за лива, а также сведения о таксономическом составе евтрофных бактерий, выделенных из вод среднего и северного колен Кольского залива в разные сезоны года, установлены их доминирующие таксономические группы и проведен сравнительный анализ их пространственно-временного распре деления. Эти данные существенно дополняют имеющиеся сведения о био логическом разнообразии микробных ценозов Кольского залива и Барен цева моря.
Практическая значимость. Результаты, полученные в ходе работы, могут быть использованы в качестве фоновых при проведении комплекс ного экологического мониторинга акватории Кольского залива. На их ос новании может быть также сделана оценка потенциального вклада микро организмов в процессы естественного очищения его вод, которую необхо димо учитывать при расчетах максимально допустимых нагрузок на дан ную экосистему по НУ.
Основные результаты выполненных исследований и использованные в работе методы внедрены в учебный процесс на кафедре микробиологии и биохимии МГТУ, они применяются при чтении лекций и постановке лабо раторных работ по дисциплине «Экология микроорганизмов» для направ ления 020200.62 «Биология» профиль «Микробиология».
Апробация работы. Основные положения диссертации докладыва лись и обсуждались в период с 2006 по 2012 г. на следующих конференци ях и семинарах: научно-технических конференциях «Наука и образова ние», МГТУ (Мурманск, 2006-2012 гг.);
VII региональной научной конфе ренции «Естественнонаучные проблемы Арктического региона» (Мур манск, 2006 г.);
Международной научно-практической конференции «Ак туальные проблемы охраны природы, окружающей природной среды и ра ционального природопользования» (Чебоксары, 2010 г.);
V Международ ной научно-практической конференции «Спецпроект: анализ научных до стижений (Днепропетровск, 2010 г.);
Международной конференция «Акту альные вопросы науки и образования России» (Москва, 2011 г.);
Научно практической конференции «Санитарно-экологическая оценка объектов окружающей среды г. Мурманска и области» (Мурманск, 2012 г.) Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, из них 3 в журналах, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.
Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, трех глав, заключения, выводов, списка литературы и приложений. Общий объ ем - 173 страницы, 18 рисунков, 13 таблиц, 3 приложения. Список литера туры содержит 284 источника, в том числе - 87 иностранных.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Во введении обоснована актуальность работы, сформулированы ее цели, задачи и научная новизна, показана практическая значимость иссле дований.
Первая глава носит обзорный характер. Приводится краткая история микробиологических наблюдений в водах северных морей (Levin, 1899;
Буткевич, 1932;
Исаченко 1937;
Бокова, 1937;
Лимберг, 1941;
Zobell, 1946;
Крисс, 1949;
Рубан, 1955;
Мишустина, 1984 и др.).
Рассматривается роль гетеротрофного бактериопланктона в северных морских экосистемах. Особое внимание уделено экологическому значению гетеротрофных бактерий, как неотъемлемой части микробного населения водных экосистем, их роли в процессах самоочищения морской среды от НУ (ZoBell, 1964;
Roubal, Atlas, 1978;
Цыбань, 1985 и др.). Представлены результаты изучения видового состава водных гетеротрофных бактерий литорали Кольского залива (Перетрухина, 2002;
Богданова, 2003 и др.).
Дано описание наиболее важных абиотических факторов, влияющих на морские бактериальные сообщества, а также некоторых других показате лей, используемых для интерпретации количественных характеристик бак териопланктона (Лях, 1976;
Разумов, 1962;
Романенко, Кузнецов, 1974;
Кожевин, 1989;
Ильинский, 2000;
Jannash,1965;
Cavicchioli, 2006).
Особое внимание уделено сведениям о распространении УВ окисляющих микроорганизмов в северных морях, их вкладе в процессы естественного очищения этих акваторий и участии в разрушении и транс формации НУ (Миронов, 1971;
Нельсон-Смит, 1977;
Квасников, 1981;
Платпира, 1985;
Ильинский, 2000;
Перетрухина, 2006;
Berridge et al.,1968;
Sivadier et al., 1973 и др.).
Анализ данных литературных источников указывает на необходи мость комплексных исследований затронутых в настоящей работе микро биологических показателей. Это позволит дать оценку состояния водной экосистемы Кольского залива и определить возможный потенциальный вклад микроорганизмов в процессы естественного очищения залива от НУ в различные сезоны года.
Во второй главе «Объекты и методы исследований» дано физико географическое описание Баренцева моря и Кольского залива. Приведены гидрологические и динамические характеристики вод среднего и северного колен Кольского залива и Баренцева моря.
Объектом исследования являлся гетеротрофный бактериопланктон Кольского залива. Его изучение про водили в средней и северной частях акватории на трх станциях. Станция (ст.) 1 располагалась на выходе из за лива, на границе северного колена и Баренцева моря, в районе с минималь ной антропогенной нагрузкой, ст. 2 - в середине северного колена Кольского залива, а ст. 3 - в среднем колене зали ва. Две последние станции (рис.1) находились в районах с интенсивным хозяйственно-бытовым и техногенным влиянием (ЗАТО Александровск, г.
Североморск).
Отбор проб воды проводили с борта судна «Клавдия Еланская» еже месячно с декабря 2007 г. по июнь 2008 г. и с декабря 2009 г. по ноябрь 2010 г. с помощью стерильного бато Рис.1. Схема отбора проб метра-бутылки с глубины 30 - 50 см.
Пробы обрабатывали не позднее 3-х - 4-х ч после их отбора. Все микро биологические анализы проводили, как правило, в трх- или четырхкрат ных повторностях. Количество анализов, связанных с определением общей численности бактерий и количеством бактерий разных физиологических групп и их УВ-окисляющей активности, составило не менее 1140.
Учт численности бактерий в пробах воды проводили как прямым счтом клеток, окрашенных акридиновым оранжевым (Практическая гидробиология, 2006), под люминесцентным микроскопом (МИКМЕД-2, 1500х), так и путм высева проб воды на жидкие питательные среды. Учт численности бактерий отдельных физиологических групп - ЕфБ, ФОБ, и УВ-окисляющих - проводили методом предельных разведений на жидких питательных средах (Практическая гидробиология, 2006). Для определения численности ЕфБ использовали рыбопептонный бульон (РПБ). Численность УВ-окисляющих бактерий определяли на жидкой минеральной среде ММС с добавлением в качестве единственного источника углерода и энергии дизельного топлива марки «летнее». Для учета ФОБ применяли среду ММС с дрожжевым экстрактом (50 мг/л) в качестве единственного источника углерода и энергии. Все посевы делали в четырх повторностях и инкубировали их при температуре 10 С. Наиболее вероятное количество бактерий в посевах определяли по таблице Мак-Креди (Руководство…, 1980). Для оценки степени трофности исследованной акватории и текущего состояния ее микробного сообщества определяли коэффициент Ки - отношение численности бактерий по посеву (ЕфБ + ФОБ) к таковой по прямому счту.
Идентификацию выделенных культур ЕфБ проводили по общепринятым методикам на основании морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических свойств (Методы общей бактериологии, 1983;
Руководство…, 1995;
Определитель бактерий Берджи, 1997).
Для оценки потенциальной УВ-окисляющей активности гетеротроф ных бактерий использовали радиоуглеродный метод и меченый углеводо род - 14С-октадекан (Ильинский, Семененко, 1994). Количественные опре деления содержания 14С-углерода проводили на жидкостном сцинтилляци онном счетчике Mark-3 (Голландия). Они были выполнены старшим науч ным сотрудником кафедры радиохимии химического факультета МГУ им.
М.В. Ломоносова Семененко М.Н.
В ходе анализа учитывали количество 14СО2, образованного микро организмами при минерализации меченого субстрата до углекислого газа и воды (показатель естественной минерализации, ПЕМОКТ, мкг·л-1·ч-1) и ко личество 14С, включенного в клетки микроорганизмов (показатель непол ной биодеградации - ПНБОКТ, мкг·л-1·ч-1). Для определения полной величи ны потенциального вклада микроорганизмов в процессы естественного очищения морских вод от НУ (показатель естественной биодеградации ПЕБОКТ, мкг·л-1·ч-1) суммировали значения ПЕМОКТ и ПНБОКТ.
Гидрохимические анализы воды были выполнены в ФГБУ «Мурман ское управление по гидрометеорологии и мониторингу окружающей сре ды» (РД 52.10.243-92, РД 52.18.595-96).
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с применением ПСП Statistica 6.0. При корреляционном анализе использо вали коэффициент ранговой корреляции Спирмена.
В третьей главе «Результаты и обсуждение» проведено обобщение и анализ полученных результатов, их сравнение с данными литературы, на основе чего сделаны заключение и выводы.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1.1. Гидрохимические показатели Для характеристики среды обитания гетеротрофного бактерио планктона Кольского залива в разные сезоны года были исследованы гид ролого-гидрохимические показатели (рис. 2). Концентрации фосфатов на исследованных станциях колебались от 2 до 32 мкг/л. Содержание в воде нитритов находилось в пределах от 1 до 2,1 мкг/л, а нитратов - варьирова ло от 2 до 93 мкг/л.
Рис. 2. Изменения содержания в воде кислорода, биогенных элементов и нефтяных уг леводородов на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива (2007 - 2010 гг.) Наибольшие концентрации в воде нитритов, нитратов и фосфатов всегда отмечались на ст. 3, а наименьшие - на ст. 1. Ст. 2 по содержанию биогенных элементов занимала промежуточное положение.
Содержание кислорода в водах северного колена колебалось в пре делах от 8,36 до 9,83 мг O2/л, для среднего колена этот показатель варьи ровал от 7,74 до 8,81 мг O2/л. Кислородный режим в исследуемых районах в период наблюдений сохранялся вполне удовлетворительным.
НУ присутствовали на всех трех исследованных станциях, за исклю чением одного срока наблюдений (в декабре 2009 г.) на ст.1. Их содержа ние в период наших наблюдений варьировало от аналитического нуля до 51 мкг/л в зависимости от сезона и расположения станции, т.е. практиче ски постоянно было ниже ПДК (50 мкг/л). При этом наибольшие концен трации УВ постоянно наблюдались на ст. 3, а наименьшие - на ст. 1.
Показатели солености на ст. 1 (34 ‰) значительно превышали зна чения этого показателя на ст. 2 и 3 (26 и 22 ‰ соответственно), что свиде тельствует о большей степени опреснения водных масс на станциях 2 и за счет речных стоков (рис. 3а). Расположенная мористее ст. 1 была более подвержена влиянию соленых вод из открытой части Баренцева моря.
Температуры воды на станциях варьировали, в зависимости от сезо на и расположения станций, от 1 до 10 С (рис. 3б).
(б) (а) Рис.3. Изменения солности (а) и температуры воды (б) на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива Таким образом, все три обследованные станции наиболее заметно различались между собой по солености, содержанию биогенных элементов и НУ. При этом наиболее высокие значения концентраций биогенных эле ментов и НУ практически всегда регистрировались на ст. 3, а наиболее низкие - на ст. 1, что подтверждает разную степень антропогенного влия ния на акватории, в которых расположены эти станции.
1.2. Сезонная динамика общей численности бактериопланктона по прямому счету Временная динамика изменений значений ОЧБ на всех трех обследо ванных станциях на протяжении наших наблюдений оказалась сходной (рис. 4). В январе 2010 г. на всех трх станциях были отмечены минималь ные значения ОЧБ (на ст.1 - 3,6106 кл/мл, ст. 2 - 3,9106 кл/мл, а на ст. 3 3,1106 кл/мл), в последующие месяцы они возрастали и к концу лета (ав густ) достигли максимальных величин (на ст. 1 - 1,2107 кл/мл, ст. 2 1,5107 кл/мл, ст. 3 - 2,1107 кл/мл). С сентября и до конца наблюдений в ноябре происходило снижение значений ОЧБ. Для оценки годовой измен чивости этого показателя важно отметить, что годом ранее, с декабря г. по июнь 2008 г. динамика изменений величин ОЧБ оказалась сходной.
Рис.4. Изменения общей численности бактериопланктона (ОЧБ) по прямому счету в воде северного и среднего колен Кольского залива.
В целом, сезонные значения ОЧБ на ст. 3 чаще всего превышали та ковые на двух других станциях, а минимальные значения этого показателя обычно регистрировали на ст. 1 (рис. 4). Между временными изменениями значений ОЧБ на всех трех станциях по данным за весь период наблюдений обнаружены тесные корреляционные связи (R = 0,95 - 0,97, при 0,001).
1.3. Сезонная динамика численности культивируемого бактериопланктона различных групп 1.3.1. Евтрофные бактерии Временная изменчивость численности ЕфБ в 2009 - 2010 гг. на стан циях 2 и 3 оказалась сходной, однако она несколько отличалась от таковой на ст. 1 (рис. 5). Наиболее низкая численность евтрофных бактерий в воде, а именно - сотни клеток в 1 мл воды, на всех станциях наблюдалась в пер вой половине зимнего периода, с декабря по январь. Это, скорее всего, бы ло связано с сезонной перестройкой бактериоценоза в зимнее время. В дальнейшем, в период с февраля по июнь, на ст. 2 и 3 имело место посте пенное увеличение численности евтрофных бактерий в воде - до сотен ты сяч клеток в 1 мл. На ст. 1 численность микроорганизмов этой группы до стигала максимума значительно раньше - уже в апреле, и до июля суще ственно не изменялась. С августа месяца и до конца наблюдений в ноябре 2010 г. происходило постепенное снижение численности евтрофных бак терий на всех трех станциях. Динамика изменений обилия ЕфБ в воде за лива годом ранее, в период с декабря 2007 г. по июнь 2008 г., была сход ной с таковой в аналогичный период 2009 - 2010 г. В целом, численность ЕфБ была постоянно ниже на ст. 1, тогда как наибольшие значения этого показателя чаще всего имели место на ст. 3 (рис.5). Это является косвен ным свидетельством того, что водные массы среднего колена по сравне нию с северной частью залива были в большей степени насыщены лабиль ным органическим веществом, которое и служит субстратом для развития ЕфБ.
Рис.5. Динамика численности евтрофных бактерий (ЕфБ) на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива Увеличение количества бактерий в весенне-летний период, вероятно, объясняется тем, что воды залива пополняются органическими веществами за счет берегового стока, образующегося при таянии снега весной и обиль ных дождей летом. Численность ЕфБ в заливе в весенне-летний период могла возрастать также и за счет лабильного органического вещества, по являющегося в воде залива в результате массового развития и связанных с этим прижизненных выделений фитопланктона.
Между временными изменениями численности ЕфБ на всех трех станциях за весь период наблюдений обнаружена тесная прямая корреля ционная связь (R = 0,78 - 0,94;
при 0,001).
1.3.2. Факультативно олиготрофные бактерии Второй по численности группой в экологической структуре бакте риопланктонного сообщества оказались ФОБ, способные использовать для развития низкие концентрации органического вещества. Пределы годовых колебаний их численности составили от 6,0101 кл/мл в зимний период до 9,5103 кл/мл в летний период (рис.6).
Временные изменения численности ФОБ на всех трех станциях в 2009 - 2010 гг. были сходными, с двумя заметными пиками в феврале и июне-июле 2010 г. Минимальная численность ФОБ обнаружена в декабре 2009 г., в январе и феврале она возрастала, а в марте снижалась. С апреля месяца снова начиналось повышение численности факультативно оли готрофных бактерий, их количество достигало максимума к июлю, а затем до конца наблюдений в ноябре наблюдалось снижение численности ФОБ.
Годом ранее, в период с декабря по июнь, динамика изменений численно сти ФОБ несколько отличалась от таковой в 2009 - 2010 гг.: промежуточ ный пик численности ФОБ в феврале 2008 г. уже не был заметно выражен, как это имело место в феврале 2010 г. (рис.6).
Рис. 6. Динамика численности факультативно олиготрофных бактерий (ФОБ) на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива Между изменениями обилия ФОБ в воде залива на ст. 1, 2 и 3 за весь период наших наблюдений выявлены тесные корреляционные связи (R = 0,88 - 0,94, при 0,001).
1.3.3. Углеводородокисляющие бактерии УВ-окисляющие бактерии, способные к использованию углеводоро дов дизельного топлива в качестве единственных источников углерода и энергии, были обнаружены нами во всех пробах воды, отобранных в раз ные сезоны 2007 - 2010 гг. (рис. 7). Эта группа микроорганизмов оказалась самой малочисленной по сравнению с ЕфБ и ФОБ, как это обычно и имеет место в большинстве других морских и пресноводных акваторий (Ильин ский, 2000).
Пределы колебаний численности УВ-окисляющих бактерий на ст. и 3 составили от нескольких десятков до нескольких тысяч клеток в 1 мл (рис. 7), на ст. 1 максимальная численность бактерий этой группы не пре вышала сотен клеток в 1 мл. В динамике численности УВ-окисляющих бактерий на всех трех станциях прослеживаются два заметных пика - в марте и июле 2010 г. Минимальная численность УВ-окисляющих бактерий отмечалась зимой, в декабре-январе. Наиболее высокая численность УВ окисляющих бактерий (тысячи клеток в 1 мл) чаще всего наблюдалась на ст.3, сходные или несколько меньшие их количества были отмечены на ст.2. На ст. 1 во все сроки наблюдений этот показатель был самым низким.
Динамика численности УВ-окисляющих бактерий в 2007 - 2008 гг. не сколько отличалась от таковой в 2009 - 2010 гг.: с декабря по январь 2007 2009 г. на всех трех станциях этот показатель возрастал, тогда как в 2009 2010 гг. в этот период он либо не изменялся (ст. 1), либо снижался (ст.2 и 3). Пик численности бактерий в марте в 2007 - 2008 гг. был заметно выражен только на ст. 1, тогда как в 2009 - 2010 гг. этот пик был выражен в марте на всех трех станциях (рис. 7).
Рис. 7. Динамика численности углеводородокисляющих бактерий (УОБ) на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива Между изменениями обилия УВ-окисляющих бактерий на всех трех станциях на протяжении всего времени наших наблюдений были обнару жены значимые корреляционные связи (R = 0,86 - 0,97, при 0,001).
Обобщая полученные данные по сезонным изменениям обилия мик роорганизмов всех трх исследованных физиологических групп, можно отметить общую тенденцию - максимальные значения численности бакте рий всех групп наблюдались в весенне-летний период, минимальные - в зимний. Подобная картина ранее была описана также и для станций на ли торали Кольского залива (Богданова, 2003;
Перетрухина, 2006). Интересно отметить, что численность ЕфБ практически во все сроки наблюдений пре вышала таковую для ФОБ за исключением января-февраля 2008 г. и января 2010 г. В эти периоды количество ФОБ превысило количество ЕфБ, при чем также на всех трех станциях в январе были отмечены и минимальные значения ОЧБ. Можно предположить, что именно в эти месяцы количество легкодоступных для гетеротрофных бактерий органических субстратов на обследованных станциях Кольского залива достигало минимума.
В целом, обнаруженные нами в Кольском заливе значения ОЧБ и численности бактерий отдельных физиологических групп достаточно вы соки для морских вод и характерны для районов, испытывающих заметное антропогенное воздействие (Goulder, 1977;
Bianchi, Bianchi,1987). Скорее всего, это также связано со значительной антропогенной нагрузкой на Кольский залив в целом, хотя уровни этой нагрузки на обследованных станциях залива, безусловно, разные, что нашло отражение в полученных нами результатах: все микробиологические показатели на самой мористой ст. 1 чаще всего были ниже, чем на двух других станциях, расположенных в глубине залива. Особенно заметны эти различия были для таких показа телей, как ОЧБ и численность ЕфБ, по которым обычно судят об уровне трофности акваторий (Кузнецов, 1952;
Романенко 1974;
Кожевин,1989).
Можно полагать, что акватория ст. 1 по трофности ближе к олиготрофным водам, тогда как ст. 2 и 3 - к евтрофным.
1.4. Потенциальная углеводородокисляющая активность гетеро трофного бактериопланктона при температурах in situ Величины этого показателя, выраженного через ПЕБ, на всех трех станциях в разные сроки наблюдений были близки, при этом они всегда были минимальны на самой мористой ст. 1 (0,195 - 0,359 мкг·л-1·ч-1) и мак симальны на ст. 3 (0,221 - 0,376 мкг·л-1·ч-1), расположенной в наибольшей близости от кутовой части Кольского залива (рис. 8). Низкие значения ПЕБОКТ (0,195 - 0,232 мкг·л-1·ч-1) наблюдались на всех трх станциях с де кабря по март, когда температура воды была близка к минимальной и ко лебалась от 1 до 3 оС. Высокие же значения УВ-окисляющей активности бактериопланктона (ПЕБОКТ - 0,339 - 0,376 мкг·л-1·ч-1) имели место в июле - августе, летний период времени, при температурах воды, близких к мак симальным (7 - 9 оС) (рис. 8). Таким образом, потенциальная УВ окисляющая активность бактериопланктона открытых вод Кольского зали ва в зимний период снижалась лишь на 1/3 по сравнению с летним. Подоб ная картина была обнаружена ранее И.В. Перетрухиной (2006) на лито ральных станциях в Кольском заливе. Скорее всего, это связано с положи тельными температурами воды, обычно сохраняющимися в водах Коль ского залива даже в зимний сезон.
Рис. 8. Значения показателя естественной биодеградации (ПЕБОКТ) и температуры на станциях Кольского залива в 2009 - 2010 гг.
Сравнение полученных нами для Кольского залива данных по УВ окисляющей активности бактериопланктона с данными для других мор ских акваторий (Ильинский, 2000) показывает, что в Кандалакшском зали ве Белого моря значения этого показателя в аналогичный период года были примерно в 2 раза ниже, а в прибрежных водах Карского моря - в пять раз ниже. Это позволяет считать УВ-окисляющую активность бактериопланк тона Кольского залива сравнительно высокой для северных морей.
В водах среднего колена значения УВ-окисляющей активности бак териопланктона почти всегда были выше (на 1,3 - 12,6 %), чем на ст. 1 в северном колене. Это, скорее всего, связано с большими концентрациями биогенных элементов на станциях в среднем колене по сравнению с север ным коленом.
Согласно нашим расчтам, сделанным на основании измерений по тенциальной УВ-окисляющей активности бактериопланктона, за сутки микроорганизмами в водах более загрязненного среднего колена может быть окислено до 18 %, а в водах более чистого северного колена - до 33 % присутствующих в данных акваториях УВ. Это означает, что в обоих слу чаях большая часть поступающих в Кольский залив нефтяных загрязнений может поступать в открытые воды Баренцева моря, а также накапливаться в донных осадках. Следует отметить, что полученные нами данные отно сительно углеводородокисляющей активности бактериопланктона Коль ского залива являются максимально возможными для данной экосистемы.
Это связано с использованием для определения этого показателя н-октадекана, углеводорода, который относится к н-алканам. Соединения этого класса сравнительно легко используются микроорганизмами. Ско рость микробного окисления входящих в состав нефти и нефтепродуктов УВ других классов, в частности - разветвленных и ароматических УВ, бу дет намного ниже.
1.5. Анализ корреляционных связей между значениями микробиологи ческих и гидролого-гидрохимических параметров Одной из важных задач нашей работы являлся анализ связей между микробиологическими и гидролого-гидрохимическими параметрами сре ды. Нами обнаружены весьма тесные корреляционные связи между изме нениями численности бактерий исследованных групп (табл. 1).
Временные изменения пространственного распределения ФОБ меж ду тремя обследованными нами станциями были сходны с таковыми для ЕфБ. Обнаружение прямых значимых корреляционных связей между чис ленностью бактерий этих групп может свидетельствовать как об эвригете ротрофности бактериопланктона Кольского залива (т.е. о его способности к росту, как на бедных, так и на богатых органических средах), так и о том, что способность к росту на питательных средах, независимо от их состава, определяется состоянием микробного сообщества в конкретной акватории (Ильинский, 2000). Кроме того, мы определяли численность факультатив но олиготрофных, а не облигатно олиготрофных бактерий, в последнем случае их численность могла отличаться от обилия ЕфБ значительно больше.
Табл. Сводная таблица величин коэффициентов корреляции между исследован ными микробиологическими показателями в водах северного и среднего колен Кольского залива за весь период наблюдений Пары микробиоло- Станция 1 Станция 2 Станция 3 Данные по трм станци гических парамет ям ров * R R R R n** = 19 n = 19 n = 19 n = ЕфБ - ФОБ 0,001 0,001 0,01 0, 0,78 0,79 0,66 0, ЕфБ - УВ- 0,001 0,001 0,001 0, 0,75 0,76 0,78 0, окисляющие ФОБ - УВ- 0,001 0, 0,001 0, 0,75 0,68 0,68 0, окисляющие ЕфБ - ОЧБ 0,001 0,001 0,001 0, 0,86 0,93 0,93 0, ФОБ - ОЧБ 0,001 0,001 0,05 0, 0,75 0,71 0,51 0, УВ-окисляющие - 0,001 0,001 0,001 0, 0,68 0,83 0,82 0, ОЧБ n = 12 n = 12 n = 12 n = ЕфБ - ПЕБОКТ 0,01 0,001 0,001 0, 0,72 0,84 0,83 0, ФОБ - ПЕБОКТ 0,01 0, 0,05 0, 0,68 0,59 0,65 0, УВ-окисляющие - 0,01 0,05 0,01 0, 0,76 0,59 0,64 0, ПЕБОКТ ОЧБ - ПЕБОКТ 0,001 0,001 0,001 0, 0,88 0,85 0,88 0, Условные обозначения: * - уровень значимости;
**n - размер выборки.
Между количествами ФОБ и УВ-окисляющих бактерий на всех трех исследованных станциях обнаружена значимая корреляционная связь (R = 0,70, при 0,001). Отмечена также тесная корреляционная связь между количествами ЕфБ и УВ-окисляющих бактерий (R = 0,86, при 0,001) (табл. 1). Это указывает на то, что в состав УВ-окисляющих бак терий могут входить представители, как ФОБ, так и ЕфБ, что ранее уже отмечалось в исследованиях В.В. Ильинского (2000). В настоящем иссле довании корреляционная связь между численностью УВ-окисляющих и ЕфБ оказалась более тесной, чем таковая с ФОБ.
Значимые корреляционные связи были обнаружены между значени ями ПЕБОКТ и численностью как УВ-окисляющих бактерий, так и гетеро трофных бактерий двух других групп.
Проведнный корреляционный анализ связей между количествами бактерий исследованных групп, потенциальной УВ-окисляющей активно стью и значениями гидролого-гидрохимических параметров в воде сред него и северного колен Кольского залива показал, что для всех групп бак терий и ПЕБОКТ значимые прямые связи встречаются только с четырьмя абиотическими параметрами: содержанием в воде нитритов, нитратов, фосфатов и температурой воды (табл. 2). Тесные связи с концентрациями биогенных элементов могут свидетельствовать о важном значении соеди нений азота и фосфора для бактериопланктона Кольского залива. Положи тельные взаимосвязи между численностью ЕфБ и количеством нитритного и нитратного азота могут также свидетельствовать об участии гетеротроф ных бактерий в процессах нитрификации в экосистеме Кольского залива.
Взаимосвязь между сезонными изменениями температуры воды и микро биологическими параметрами подтверждает, что изменения как потенци альной УВ-окисляющей активности бактериопланктона, так и численности гетеротрофных бактерий носят выраженный сезонный характер и суще ственно зависят от этого фактора среды. Одной из главных причин тесных корреляционных связей между большинством обследованных нами микро биологических и гидролого-гидрохимических параметров также могут быть и общие сезонные тренды. Об этом свидетельствуют обнаруженные нами значимые связи всех обследованных микробиологических парамет ров с температурой. Правда, величина коэффициентов корреляции в дан ном случае, несмотря на большой размер выборки (n = 57), оказалась до статочно высокой (более 0,6) только для ОЧБ и ПЕБОКТ.
Табл. Сводная таблица значимых величин коэффициентов корреляции между микробиологическими и гидролого-гидрохимическими параметра ми в водах северного и среднего колен Кольского залива по данным за весь период наблюдений для трх станций вместе Группы Гидролого-гидрохимические параметры Т,С бактерий NO3- PO43- S, ‰ НУ NO2 O n=21 n=21 n=21 n=21 n=21 n=21 n= ЕфБ 0,64*** 0,73*** 0,79*** -0,65** 0,53*** - ФОБ 0,47* 0,58** 0,57** -0,62** 0,35* - УВ- 0,54** 0,73*** 0,63** -0,64** 0,45** - окисляющие ОЧБ 0,70*** 0,73*** 0,83*** -0,58** 0,68*** - ПЕБОКТ 0,79*** 0,59* 0,80*** 0,91*** - - Условные обозначения: «-» - значимые корреляции отсутствуют;
n - размер вы борки;
уровни значимости (): *- =0,05;
**- =0,01;
***- =0,001.
Не выявлено значимых корреляционных связей между концентраци ями в воде НУ и значениями ПЕБОКТ, а также между НУ и количеством в воде УВ-окисляющих бактерий (табл. 2). Это означает, что колебания со держания НУ в воде Кольского залива не оказывали существенного влия ния на численность и активность УВ-окисляющих бактерий.
Для всех микробиологических показателей, кроме ПЕБОКТ, была об наружена обратная корреляционная связь с солностью (табл. 2). С повы шением солности численность бактерий всех обследованных групп уменьшалась. Это можно объяснить непосредственным влиянием на аква тории всех обследованных станций вод Баренцева моря, где численность бактерий всех групп более низкая, что следует как из данных литературы (Mohankumar, 1979;
Bordalo, 1993;
Almeida, Cunha, 2002), так и из резуль татов, полученных нами для ст. 1.
1.6. Оценка пространственно-временной изменчивости физиологи ческого состояния гетеротрофного бактериопланктона с помощью ко эффициента Ки В течение года нами была прослежена сезонная динамика изменений показателя Ки, который рассчитывали путем деления суммарной численно сти сапротрофных микроорганизмов по посеву (ЕфБ+ФОБ) на величину ОЧБ. Данный коэффициент представляет собой модифицированный коэф фициент Разумова, который традиционно используется для оценки степени трофности пресных водоемов. Высокие значения этого показателя свиде тельствуют о высоком уровне трофности акватории и наоборот. Изменения величины коэффициента Ки, как было показано ранее (Ильинский, 2000), могут также указывать на реально происходящие структурно функциональные изменения всего микробного ценоза, обусловленные кон кретной гидролого-гидрохимической ситуацией.
Величина коэффициента Ки в воде исследованных станций варьиро вала от 0,006 до 1,00 %. На ст. 1 значения Ки варьировали от 0,006 до 0,1 %, на ст. 2 - от 0,007 до 0,5 %, на ст. 3 - от 0,008 до 1 %. (рис.9). Таким образом, минимальные значения и наименьшие колебания величины Ки в течение года обнаружены для ст. 1, а максимальные значения и наиболее резкие колебания - для ст. 3. Самые высокие значения показателя Ки заре гистрированы в летний сезон года на ст. 3 (1%) и ст. 2 (0,48%), тогда как на ст. 1 его значения составляли менее 0,1 % и оставались невысокими на протяжении всех сезонов.
Рис. 9. Значения коэффициента Ки на станциях в северном и среднем коленах Кольского залива Относительно слабые сезонные функциональные перестройки бакте риоценоза воды на ст. 1 по сравнению с двумя другими районами исследо вания свидетельствуют о значительном отличии бактериального населения данного района от остальных станций. Это связано со стабильно жесткими условиями существования обитающего здесь микробного сообщества (по сравнению с остальными исследованными районами), что обусловлено наиболее сильно выраженным влиянием на акваторию ст. 1 вод Баренцева моря. Это, скорее всего, и приводит к снижению степени трофности ее вод.
Исходя из имеющихся данных, можно заключить, что наиболее высокий уровень трофности вод имеет место на ст. 3, расположенной в глубине за лива, а наименьший уровень трофности - на ст. 1. В период с мая по июль, судя по микробиологическим показателям, наблюдается значительное по вышении степени трофности акватории среднего колена Кольского залива, тогда как на ст. 1 в северном колене такого же резкого роста степени троф ности даже в летний период не происходит. Как следствие, величины пока зателя Ки, рассчитанные для этой станции, в течение года существенно не изменяются.
1.7. Таксономический состав евтрофных микроорганизмов Из вод северного и среднего колен Кольского залива нами было вы делено 729 чистых культур ЕфБ и проведено определение их таксономиче ской принадлежности на основании культуральных и физиолого биохимических признаков.
В результате, среди выделенных культур были идентифицированы микроорганизмы 12-ти родов: Pseudomonas (24 % от всех выделенных культур), Alcaligenes (11 %), Micrococcus (10 %), Flavobacterium (9 %), Ar throbacter (9 %), Corynebacterium (8 %), Proteus (7 %), Bacillus (6 %), Marinococcus (6 %), Marinobacter (6 %), Halomonas (2 %), Marinomonas ( %) (рис. 10). Из них на всех трх станциях были обнаружены бактерии только девяти родов - среди отсутствующих оказались представители рр.
Halomonas, Marinomonas и Proteus.
Рис.10. Таксономический состав культивируемых евтрофных бактерий, выделенных из вод северного и среднего колен Кольского залива за период 2007 - 2010 гг.
Доминировали на всех трех станциях бактерии р. Pseudomonas, их доля колебалась от 21 до 25 % (рис. 10). Соотношения между остальными родами на станциях оказались различными. Так, только в районе ст. 1 и присутствовали галофильные микроорганизмы рр. Halomonas и Marinomo nas, при этом наибольшее относительное количество бактерий этих двух родов наблюдалось именно на ст. 1, наиболее подверженной влиянию от крытых вод Баренцева моря.
В акватории ст. 3 явно доминировали бактерии рр. Proteus и Bacillus, причем доля протеев, относящихся к потенциально патогенным микроор ганизмам, на этой станции достигала 15 % от общего числа культур. На удаленной от населенных пунктов ст. 1 в северном колене протеев вообще не было обнаружено. В целом можно отметить, что на таксономическом составе выделенных из залива культур евтрофных бактерий в сильной степени сказалось место их выделения, а именно - близость либо к населенным пунктам, либо - к открытым водам Баренцева моря.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ Кольский залив Баренцева моря относится к числу прибрежных ак ваторий, испытывающих большую антропогенную нагрузку. В подобных условиях заметно возрастает роль гетеротрофных бактерий, которые игра ют решающую роль в процессах естественного очищения вод от широкого спектра загрязняющих веществ, в том числе и НУ.
Проведнные нами микробиологические исследования поверхностных вод северного и среднего колена Кольского залива позволяют сделать заключение о высокой степени развития в них гетеротрофного бактериального сообщества в целом и, в частности, таких его важных компонентов, как ЕфБ, ФОБ и УВ-окисляющих бактерий.
Численность всех этих трех групп бактерий, также, как и ОЧБ, оказалась подвержена сезонной изменчивости, для которой характерны низкие зимние и более высокие летние значения. Между изменениями численности обследованных нами групп микроорганизмов обнаружены значимые поло жительные корреляционные связи, что свидетельствует о сходной направ ленности этих изменений, скорее всего обусловленных сезонными измене ниями физиологического состояния микробного сообщества, которое в нашем исследовании характеризует коэффициент Ки. Сезонные изменения этого коэффициента на станциях среднего колена Кольского залива, веро ятно, свидетельствуют о высокой степени трофности водных масс этой ак ватории в летний сезон, тогда как в северном колене подобного не наблю дается.
Изучение корреляционных связей общей численности гетеротрофно го бактериопланктона и его отдельных групп с гидролого гидрохимическими параметрами среды показало, что наиболее значимыми абиотическими факторами оказались: температура, солность, концентра ции в воде соединений азота и фосфора. Таким образом, и общая числен ность микробного ценоза в целом, и его гетеротрофная составляющая, находятся в тесной связи с абиотическими факторами среды и подвержены заметной сезонной изменчивости.
Анализ пространственной изменчивости исследованных микробиологических показателей показал, что наиболее удаленные от открытых вод Баренцева моря ст. 2 и ст. 3 оказались схожи по большинству изученных гидрохимических и микробиологических показателей. Для ст. 1, расположенной значительно мористее, и поэтому находящейся под большим влиянием открытых вод моря, было характерно как более низкое содержание биогенных элементов, так и более низкие величины всех обследованных микробиологических показателей.
Решающую роль в разрушении поступающих в Кольский залив НУ играют УВ-окисляющие микроорганизмы. Благодаря их деятельности, НУ трансформируются до простых соединений, происходит накопление ново го органического вещества и дальнейшее включение его в круговорот уг лерода в водных экосистемах. Нами установлены как постоянное присут ствие в водах среднего и северного колен Кольского залива значительных количеств УВ-окисляющих бактерий, так и сравнительно высокая для вод северных морей их УВ-окисляющая активность. Во многом это обусловле но достаточно высоким уровнем содержания в этих акваториях биогенных элементов. Проведенные нами круглогодичные количественные измерения потенциала естественной биодеградации (ПЕБОКТ) позволили определить его зависимость от температуры воды. Установлено, однако, что даже в зимний период, при наиболее низких температурах морской воды, потен циальная микробная активность в отношении НУ снижается не более чем на 30 %.
Расположение исследованных нами станций в двух коленах Коль ского залива, в разной степени подверженных антропогенному влиянию, заметно сказалось и на таксономическом составе культивируемых пред ставителей ЕфБ, среди которых были обнаружены представители 12 родов.
Галофильные формы ЕфБ в значительных количествах встречались только на морской ст. 1, тогда как микроорганизмы р. Proteus, относящегося к по тенциально патогенным, постоянно и в заметных количествах (1 - 6 % от общего числа выделенных штаммов) присутствовали на ст. 3, находящейся в среднем колене Кольского залива, где наиболее значительно влияние сточных вод от приморских городов и поселков. Впервые в водах Кольско го залива были обнаружены бактерии р. Halomonas.
ВЫВОДЫ 1. Установлена стабильно высокая общая численность бактерий в водах среднего и северного колен Кольского залива, которая колебалась в пределах от трх до двадцати миллионов клеток в 1 мл воды.
2. В сообществе гетеротрофных микроорганизмов, учитываемых по по севу, доминировали евтрофные бактерии. Их численность изменя лась от сотен клеток до сотен тысяч клеток в миллилитре воды. Ко личества факультативно олиготрофных и углеводородокисляющих бактерий были значительно ниже, и изменялись от десятков клеток до нескольких тысяч клеток в 1 мл воды.
3. Обилие гетеротрофного бактериопланктона в обследованной аквато рии Кольского залива тесно связано с гидролого-гидрохимической ситуацией и подвержено сезонной изменчивости. Связей микробио логических параметров с существующим уровнем загрязнения зали ва нефтяными углеводородами не обнаружено.
4. На ближайшей к Баренцеву морю станции 1 гидрохимические и мик робиологические показатели, а также уровень загрязнения нефтяны ми углеводородами и степень трофности вод практически постоянно были ниже, чем на двух других исследованных станциях. В весенне летний период заметное повышение степени трофности вод на осно вании микробиологических показателей можно предполагать только на станциях 2 и 3.
5. Скорость микробной деструкции нефтяных загрязнений в водах Кольского залива находится на уровне, заметно превышающем тако вой в других северных акваториях, что может быть связано с посто янным присутствием в заливе значительных количеств биогенных элементов и нефтяных загрязнений. Наименьшие величины потенци альной углеводородокисляющей активности бактериопланктона наблюдались на всех трх станциях гидрологической зимой, в пери од с декабря по март, при температурах воды, близких к минималь ным. Наибольшие значения отмечены в летний период, в июле - ав густе, при температурах воды, близких к максимальным.
6. Среди евтрофных микроорганизмов, выделенных из вод среднего и северного колен залива, идентифицированы представители 12 родов.
Их количественное соотношение зависело от сезона года и располо жения станций - близости к Баренцеву морю или к источникам ан тропогенного загрязнения. На всех трех станциях доминировали бак терии рода Pseudomonas, составившие 21 - 25 % от числа выделен ных на каждой из станций штаммов, повсеместно и всесезонно встречались также представители еще пяти родов - Alcaligenes (10 13 %), Micrococcus (7 - 13 %), Flavobacterium (7 - 11 %), Arthrobacter (7 - 10 %), Corynebacterium (5 - 12 %).
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Работы, опубликованные в изданиях перечня ВАК 1. Литвинова, М.Ю. Определение скоростей биодеградации нефтяных уг леводородов в воде Кольского залива / И.В. Перетрухина, В.В. Ильин ский, М.Ю. Литвинова // Вестник МГТУ : труды Мурм.гос.тех.ун-та. 2006. –Т. 9, № 5. - С. 830-835.
2. Литвинова, М.Ю. Количественная оценка гетеротрофного бактерио планктона в воде северного и среднего колен Кольского залива / М.Ю.
Литвинова, В.В. Ильинский, И.В. Перетрухина // Фундаментальные ис следования. – 2011. - № 7. – С. 203 – 206.
3. Литвинова, М.Ю. Распространение и потенциальная активность угле водородокисляющих бактерий в воде среднего и северного колен Коль ского залива / М.Ю. Литвинова, В.В. Ильинский, М.Н. Семененко, И.В.
Перетрухина // Вестник МГТУ : труды Мурм.гос.тех.ун-та. - 2012. –Т.
15, № 3. - С. 533-541.
Работы, опубликованные в других изданиях 1. Литвинова, М.Ю. Потенциальная скорость биодеградации нефтяных углеводородов в экосистеме Кольского залива / М.Ю. Литвинова, И.В.
Перетрухина // Естественно-научные проблемы Арктического региона :
сб. тез. науч. конференции. – Мурманск: ПГИ, 2006. - С. 78-79.
2. Литвинова, М.Ю. Определение углеводородокисляющей активности бактериальных сообществ в воде Кольского залива / И.В. Перетрухина, В.В. Ильинский, М.Ю. Литвинова, В.И. Кудасов, Т.В. Балина // Наука и образование - 2006 [Электронный ресурс]: материалы межд.науч. техн.конф., Мурманск / МГТУ. – Электрон.текст дан.(16 Мб). – Мур манск : МГТУ, 2006.- 1 электрон.опт.диск (CD-ROM). - С. 593-596. – Гос.рег.НТЦ "Информрегистр" № 0320501517 от 28.11.05 г.
3. Литвинова, М.Ю. Евтрофные и олиготрофные бактерии, как основные группы гетеротрофного бактериопланктона / И.В. Перетрухина, В.В.
Ильинский, М.Ю. Литвинова // Наука и образование - 2008 [Электрон ный ресурс]: материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. – Электрон.текст дан.(14 Мб). – Мурманск : МГТУ, 2008.- 1 элек трон.опт.диск (CD-ROM). - С. 665-669. – Гос.рег.НТЦ "Информрегистр" № 0320800238 от 04.05.08 г.
4. Литвинова, М.Ю. Гетеротрофный бактериопланктон среднего и север ного колен Кольского залива и его углеводородокисляющая активность / М.Ю. Литвинова, В.В. Ильинский, И.В. Перетрухина // Наука и образо вание - 2009 [Электронный ресурс]: материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. – Электрон.текст дан.(22 Мб). – Мурманск : МГТУ, 2009.- 1 электрон.опт.диск (CD-ROM). - С. 725-729. – Гос.рег.НТЦ "Ин формрегистр" № 0320900170 от 25.05.09 г.
5. Литвинова, М.Ю. Сезонная динамика гетеротрофного бактериопланк тона среднего и северного колен Кольского залива / М.Ю. Литвинова, И.В. Перетрухина // Наука и образование - 2010 [Электронный ресурс]:
материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. – Электрон.текст дан.(139 Мб). – Мурманск : МГТУ, 2010.- 1 электрон.опт.диск (CD ROM). - С. 875 – 878. – Гос.рег.НТЦ "Информрегистр" № 0321000362 от 12.08.10 г.
6. Литвинова, М.Ю. Определение скорости биодеградации нефтяных уг леводородов в воде северного колена Кольского залива / М.Ю. Литвино ва, В.В. Ильинский, И.В. Перетрухина // Спецпроект: анализ научных достижений : сб. материалов V Междунар.науч.-практ.конф. - Днепро петровск: Бiла, 2010. - Т.3 - С. 7-9.
7. Литвинова, М.Ю. Бактериопланктон северного колена Кольского зали ва: численность и распределение / М.Ю. Литвинова, И.В. Перетрухина // Актуальные проблемы охраны природы, окружающей природной среды и рационального природопользования: сб. материалов I межд. науч. практ. конф. / Под ред. А.В. Дмитриева, Е.А. Синичкина. – Чебоксары:
Новое время. – 2010. – С. 168- 8. Литвинова, М.Ю. К вопросу об актуальности изучения количественной оценки гетеротрофных бактерий в воде Кольского залива / М.Ю. Литви нова // Наука и образование - 2011 [Электронный ресурс]: материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. – Электрон.текст дан.( Мб). – Мурманск : МГТУ, 2011.- 1 электрон.опт.диск (CD-ROM). - С.
693-698. – Гос.рег.НТЦ "Информрегистр" № 9. Литвинова, М.Ю. К вопросу изучения углеводородокисляющей актив ности гетеротрофных бактерий в воде Кольского залива в осенне зимний период / М.Ю. Литвинова // Наука и образование - 2011 [Элек тронный ресурс] : материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. - Электрон. текст дан. (31 Мб). - Мурманск : МГТУ, 2011. - электрон. опт. диск (CD-ROM). - С. 686-692. - Гос. рег. НТЦ "Информре гистр" № 0321100504.
10. Литвинова, М.Ю. Евтрофные и олиготрофные бактерии в воде се верного и среднего колен Кольского залива / А.Т. Перетрухина, М.Ю.
Литвинова // Международный журнал экспериментального образования.
– 2011. - № 6. – С. 12 – 13.
11. Литвинова, М.Ю. Оценка состояния гетеротрофного бактерио планктона в воде среднего и северного колен Кольского залива / М.Ю.
Литвинова, В.В. Ильинский // Санитарно-экологическая оценка объектов окружающей среды г. Мурманска и области – 2012 [Электронный ре сурс] : материалы науч.-практ.конф., Мурманск / МГТУ. - Электрон.
текст дан. (982 Кб). - Мурманск: МГТУ, 2012. - 1 электрон. опт. диск (CD-ROM). - С. 18-29. - Гос. рег. НТЦ "Информрегистр" № 0321201104.
12. Литвинова, М.Ю. Оценка потенциальной активности углеводоро докисляющих бактерий в воде северного колена Кольского залива / М.Ю. Литвинова // Наука и образование - 2012 [Электронный ресурс] :
материалы межд.науч.-техн.конф., Мурманск / МГТУ. - Электрон. текст дан. (Мб). - Мурманск : МГТУ, 2012. - 1 электрон. опт. диск (CD ROM). - С.456-460 - Гос. рег. НТЦ "Информрегистр" № 0321201101.