Морфофункциональные реакции иммунокомпетентных органов серебристой чайки при экспериментальном заражении цестодой diphyllobothrium dendriticum
На правах рукописи
Фомина Анастасия Сергеевна
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ
ОРГАНОВ СЕРЕБРИСТОЙ ЧАЙКИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ
ЗАРАЖЕНИИ ЦЕСТОДОЙ DIPHYLLOBOTHRIUM DENDRITICUM
03.02.11– паразитология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Москва - 2011
Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН и в Бурятском государственном университете
Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Пронин Николай Мартемьянович
Официальные оппоненты: доктор биологических наук Теренина Надежда Борисовна кандидат биологических наук Одоевская Ирина Михайловна
Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук Институт биологии внутренних вод им. И.Д.Папанина РАН
Защита диссертации состоится «_» марта 2011 г. в часов на заседании диссертационного совета Д.002.213.03 при учреждении Российской Академии наук в Институте проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова, по адресу: 119071, Москва, Ленинский проспект, д.33;
факс: (495) 952-31-46.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения РАН Института проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН по адресу: 119071, Москва, Ленинский проспект, д.33;
факс: (495) 952-31-46, e-mail.ru: [email protected]
Автореферат разослан «_» февраля 2011 года.
Размещен на сайте: www.sevin.ru
Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, Кандидат биологических наук Т.А. Малютина ВВЕДЕНИЕ Актуальность. Цестоды рода Diphyllobothrium - широко распространенная группа гельминтов, зарегистрированная в арктической, бореальной, нотальной и антарктической зонах земного шара (Фрезе, 1977;
Сердюков, 1979;
Делямуре, Скрябин, Сердюков, 1985). В бассейне оз. Байкал из трех известных в настоящее время ленточных червей рода Diphyllobothrium (лентец широкий - Diphyllobothrium latum (Linnaeus, 1758), лентец чаечный - Diphyllobothrium dendriticum (Nitzsch, 1824), Diphyllobothrium ditremum (Creplin, 1825)) возбудителями дифиллоботриоза человека являются два вида: Diphyllobothrium latum лентец широкий и Diphyllobothrium dendriticum лентец чаечный (Пронин, 2000). Наибольшее эпидемиологическое значение имеет лентец чаечный D. dendriticum. На фазе плероцеркоида этот лентец паразитирует у лососевидных рыб - байкальского омуля, байкальского хариуса (подвиды черный и белый хариус), байкальского сига (подвиды озерный и озерно-речной), ленка, и у рогатковых рыб (Пронин и др., 1988;
Пронин, Пронина, Зубин, 1990). В качестве дефинитивных хозяев лентеца чаечного в Байкальском регионе зарегистрировано десять видов птиц (Пронин и др., 1982;
Некрасов и др., 1988). Доминирующая роль в циркуляции гельминта принадлежит чайковым птицам (Пронин и др., 1991). 95,2% - 97,3% имагинальной гемипопуляции лентеца чаечного по озеру Байкал приходится на серебристую чайку, и лишь 1,1-2,2% - озерную и 1,6-2,0% - сизую (Некрасов и др., 1988).
К настоящему времени накоплен обширный материал по таксономии, морфологии, биологии, экологии дифиллоботриумов. Однако литературные сведения, освещающие вопросы влияния цестод на механизмы развития защитно адаптационных реакций дефинитивных хозяев, весьма скудны, и не находят широкого применения в практическом здравоохранении. Имеющиеся данные по патологии, эпизоотологии и эпидемиологии дифиллоботриоза у животных и человека преимущественно относятся к форме болезни, вызываемой лентецом широким – D. latum (Пронин, 2000), а влияние D. dendriticum на организм дефинитивных хозяев до последнего времени оставалось практически неизученным. В результате немногочисленных исследований воздействия лентеца чаечного на дефинитивного хозяина было установлено, что паразит может вызывать анемию у человека (Плотников, 1955;
Майборода и др., 1987). У хомяков (в эксперименте) при высокой интенсивности инвазии лентец чаечный вызывает атрофию в органах пищеварительной системы (Пронина, Тимошенко, 1991), у чайки (облигатного хозяина) – воспалительные и дегенеративные процессы в пищеварительном тракте (Герасимова и др., 1969). Иммунный процесс при гельминтозах представляет собой цепь дифференцировок иммунокомпетентных клеток хозяина под воздействием антигенов, выделяемых паразитом (Лейкина, 1976). При этом состояние и активность иммунокомпетентных органов (тимуса, бурсы и селезенки) во многом определяют выраженность защитных реакций всего организма, а, следовательно, и устойчивость системы «паразит-хозяин». В связи с этим представляется весьма актуальным исследование структуры и клеточного состава органов иммунной системы серебристой чайки при заражении ее специфичным паразитом D. dendriticum.
Цель исследования: установить особенности морфофункциональных реакций лимфоидных органов (тимус, бурса, селезенка) серебристой чайки Larus argentatus mongolicus (Suskin, 1925) при экспериментальном заражении лентецом чаечным D. dendriticum (Nitzsch, 1824).
В соответствии с целью работы поставлены следующие задачи:
- Выявить особенности структурной организации и клеточного состава центральных (тимус, бурса) и периферического (селезенка) органов иммунной защиты незараженных птенцов серебристой чайки;
- Определить параметры клеточного состава и функциональных зон тимуса серебристой чайки в зависимости от интенсивности и продолжительности инвазии лентецом чаечным в экспериментальных условиях;
- Выявить изменения клеточного состава функциональных зон бурсы и селезенки в зависимости от интенсивности инвазии лентецом чаечным в экспериментальных условиях;
- По характеру количественных изменений лимфоидных клеток органов иммунной защиты оценить их роль в иммунном процессе против лентеца чаечного.
Научная новизна.
Впервые проведено сравнительное исследование топографии, клеточного состава и его количественных изменений в функциональных зонах тимуса, бурсы и селезенки у незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов при инвазии лентецом чаечным D. Установлено, что топография, общая dendriticum.
организация морфофункциональных структур и клеточного состава иммунокомпетентных органов птенцов серебристой чайки сходны с таковыми других видов птиц, но имеют видовые особенности.
Установлено наличие в тимусе и селезенке псевдоэозинофилов и эозинофилов на разных стадиях зрелости (миелоцитов, метамиелоциты, сегментоядерные);
в тимусе обнаружены меланомакрофаги, описан состав и этапы формирования телец Гассаля. Морфофункциональные изменения в тимусе серебристой чайки при разной интенсивности и продолжительности инвазии указывают на ускорение инволюции органа зараженных птиц.
Получены новые сведения о клеточном составе и структурной организации функциональных зон бурсы и селезенки серебристой чайки L. a. mongolicus при экспериментальном дифиллоботриозе, которые зависят от интенсивности инвазии.
Наиболее выраженные изменения клеточного состава при инвазии D. dendriticum наблюдаются в корковой зоне фолликулов бурсы. Определены цитологические и цитохимические показатели эозинофилов тимуса и бурсы незараженных птенцов и птенцов при заражении D. dendriticum.
Впервые проведен сравнительный анализ клеточных реакций тимуса и селезенки облигатного (серебристая чайка) и не облигатного (сирийский хомяк) хозяев при экспериментальном заражении D. dendriticum.
Теоретическая и практическая значимость. Результаты проведенных исследований об изменениях клеточного состава иммунокомпетентных органов серебристой чайки при заражении лентецом чаечным D. dendriticum расширяют представления о сложных механизмах взаимоотношений в системе «паразит хозяин».
Полученные данные могут быть использованы при оценке морфофункционального состояния иммунной системы хозяев при дифиллоботриозе, а также являться теоретической базой для выбора иммуномодуляторов при комплексной терапии дифиллоботриоза.
Материалы исследований используются в учебных процессах при изучении дисциплины «Биология с экологией» (Медицинский факультет Бурятского государственного университета) и паразитология»
«Общая (кафедра гидробиологии и зоологии беспозвоночных Иркутского государственного университета).
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Органы иммунной системы (тимус, бурса, селезенка) серебристой чайки реагируют на заражение специфичным паразитом D. dendriticum качественным и количественным изменением клеточного состава различных функциональных зон.
2. Количественные изменения клеточного состава тимуса, бурсы, и селезенки органоспецифичны и зависят от интенсивности и продолжительности инвазии и направлены на перераспределение Т- и В-лимфоцитов в организме хозяина и сохранение системы «паразит - хозяин».
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:
Всероссийской конференции с международным участием «Биоразнообразие экосистем внутренней Азии» (г.Улан-Удэ, 2006);
Всероссийской конференции молодых ученых «Экология в современном мире: взгляд научной молодежи»
(г.Улан-Удэ, 2007);
IV съезде Паразитологического общества при РАН (г. Санкт Петербург, 2008);
на конференции «Молодежь и наука Забайкалья» (г.Чита, 2008);
III межрегиональной научной конференции «Паразитологические исследования в Сибири и на Дальнем Востоке», посвященной 80-летию проф. К.П. Федорова (г.
Новосибирск, 2009);
Международной научной конференции и международной школы молодых ученых «Проблемы экологии. Чтения памяти проф. М.М. Кожова»
(г. Иркутск, 2010);
Всероссийской конференции молодых ученых «Биоразнообразие: глобальные и региональные процессы», (г.Улан-Удэ, 2010);
ежегодных научно-практических конференциях аспирантов и преподавателей Бурятского Государственного Университета (г. Улан-Удэ, 2006-2010) и заседании Бурятского Отделения Паразитологического общества при РАН (г. Улан-Удэ, 2008 2010).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, в том числе статей рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 160 страницах компьютерного текста и включает: введение, 6 глав, выводы, список литературы.
Работа содержит 33 таблицы, 44 рисунка (42 микрофотографии и 1 схема и диаграмма). Список литературы включает 229 названий, в том числе иностранных источников.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ В главе 1 описана экология серебристой чайки как доминантного дефинитивного хозяина лентеца чаечного в Байкальском природном очаге дифиллоботриоза (Тупицын, 1997;
Пыжьянов, 1998;
Пронин, 2000;
Птицы дельты Селенги..., 2001). Приведены основные данные по истории исследований дифиллоботриумов в Байкальском регионе (Талызин, 1930;
Чижова 1947, 1951, 1958;
Чижова, Гофман-Кадошников, 1959, 1960;
Тимошенко, Русинек, 1988;
Пронин и др., 1991;
Санжиева, 2000). Дано краткое описание влияния лентеца чаечного на организм дефинитивных хозяев (Мазур, Пронин, Толочко, 2007;
Пронина, Пронин 2010 и др.).
Последний раздел главы посвящен обзору литературных данных о строении и развитии иммуннокомпетентных органов птиц (Romanoff, 1960;
Kendall, 1980;
Olah, Glick, 1982, 1984;
Горышина, Чага, 1990;
Jeurissen et. al., 1994;
Сапин, Этинген, 1996;
Селезнев, 1999;
Галактионов, 2004;
В кн.: Avian immunology, 2009 и др.).
Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В главе 2 представлены экспериментальные данные, полученные на лабораторной модели «Лентец чаечный Diphyllobothrium dendriticum – серебристая чайка Larus argentatus mongolicus».
Материал для исследований взят от птенцов серебристой чайки в ходе экспериментов, которые проводились в три этапа (июнь-июль 2006, 2008, 2009) на биостанции «Монахово» ИОЭБ СО РАН в Чивыркуйском заливе оз. Байкал. Для сравнения воздействия лентеца чаечного на облигатного и факультативного хозяев анализирован дополнительный материал из экспериментальной модели «D.
dendriticum – сирийский хомяк» (Кутырев, 2009;
Пронина и др., 2009, 2010).
В эксперименте использовались птенцы серебристой чайки, взятые из колонии на о-ве Малый Калтыгей Чивыркуйского залива оз. Байкал в возрасте 1- дней. Птенцы адаптированы к условиям эксперимента на биостанции "Монахово" в течение 6 суток. Заражение птенцов лентецом чаечным проводили скармливанием плероцеркоидов, выделенных от байкальского омуля, в дозе по 10, 20 и 30 экз. на одну птицу. Для сравнительного анализа изменений в органах в зависимости от интенсивности инвазии птенцы были разделены на три группы: 1) птенцы со средней интенсивностью инвазии (1-6 экз.), 2) птенцы с высокой интенсивностью инвазии (7-28 экз.), 3) незараженные птенцы. Для исследования влияния продолжительности инвазии паразита на хозяина был проанализирован материал от трех групп птенцов по 6 особей в каждой: первая – незараженные птицы, вторая – с продолжительностью инвазии 5 суток, третья – с продолжительностью инвазии 10 суток. Птиц умерщвляли методом декапитации (Кудряшов, 2004). После этого отбирали и фиксировали органы иммунной системы для морфологических исследований и проводили полное гельминтологическое вскрытие птенцов.
Всего исследовано 73 птенца серебристой чайки L. a. mongolicus, средней массой 378,2±21,7. Кусочки лимфоидных органов (тимус, бурса, селезенка) размером 0,5х0,5 см, фиксировали 10% нейтральным формалином, жидкостью Карнуа. Фиксированные кусочки органов промывали в проточной воде в течение 24 ч. (после формалина), либо сразу (после Карнуа) обезвоживали в этиловом спирте восходящей концентрации и помещали в парафин по схеме (Меркулов, 1969;
Микроскопическая техника, 1996). Из парафиновых блоков готовили гистологические срезы толщиной 3-6 мкм на роторном микротоме (Accu-Cut SRM, фирма Sakura). Срезы окрашивали общими морфологическими методами (гематоксилином Эрлиха-эозином, по методу Маллори, азур II–эозином), гликоген выявляли постановкой PAS-реакции, для выявления нуклеиновых кислот срезы окрашивали смесью пиронина и метилового зеленого по Браше, отпечатки окрашивали азур-эозином по Романовскому-Гимза (Меркулов, 1969;
Пирс, 1962).
Катионный белок эозинофилов выявляли на отпечатках постановкой реакции с бромфеноловым синим;
на основании полученных данных рассчитан средний цитохимический коэффициент для одной клетки (Лабораторные методы…, 1987).
Исследование проводили на 5 случайно выбранных срезах от каждой особи.
Подсчет клеток и определение относительных площадей отдельных структур, описание микроморфологических изменений в органах и их фотографирование осуществлено под микроскопом МС 300А (фирма «Micros», Austria) и микроскопом Motic Digital Microscope DMB - 1223 (Spanish) с цифровой фотокамерой, при увеличении объектива – 10 и 100 с использованием 100-узловой морфометрической сетки, разделенной на квадраты (Автандилов, 1973).
Идентификацию клеток и определение их размеров проводили по отпечаткам исследуемых органов. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета анализа данных в программе Excel и Statistica. Различия считали достоверными при р0,05.
Результаты исследований и их обсуждение представлены в главах 3-6.
Глава 3. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ ТИМУСА ПТЕНЦОВ СЕРЕБРИСТОЙ ЧАЙКИ ПРИ ЗАРАЖЕНИИ ЛЕНТЕЦОМ ЧАЕЧНЫМ Характеристика макро - и микроморфологического строения тимуса серебристой чайки. У птенцов серебристой чайки тимус удлиненной формы, располагается от угла челюсти до грудной впадины. Форма долек не отличается от формы долек тимуса других птиц. Количество долек в тимусе птенцов серебристой чайки в одной цепочке содержится 14±0,6 долей, максимальный размер долек может достигать 17,5 мм.
В тимусе птенцов L. a. mongolicus морфологически различимы четыре зоны:
подкапсулярная, корковая, кортико-медуллярная и медуллярная.
Изучение клеточного состава проводили по отпечаткам органов. Показано что размеры средних и малых лимфоцитов и макрофагов в тимусе птенцов не отличаются от таковых других птиц, но размеры эозинофилов и псевдоэозинофилов больше, чем у других птиц. В тимусе серебристой чайки встречаются клетки, которые по морфологическим признакам соответствуют меланомакрофагам.
Клеточный состав гемопоэтической ткани и распределение клеток по функциональным зонам тимуса у птенцов серебристой чайки аналогичны таковым у домашних птиц и млекопитающих. Количественные данные клеточного состава функциональных зон тимуса птенцов серебристой чайки, указывают на высокий уровень лимфоцитпоэза в этом органе, а присутствие незрелых эозинофилов - об эозинофилопоэзе. В подкапсулярной зоне тимуса преобладают бластные клетки и большие лимфоциты, в корковой и кортико-медуллярной зоне – малые лимфоциты, в медуллярной - средние лимфоциты. В соединительной ткани коркового вещества, сопровождающей сосуды, встречаются плазматические клетки. В медуллярной зоне эпителиальные клетки многочисленны, эозинофилы единичны в поле зрения, митотическая активность клеток низкая. В медуллярной зоне долек присутствуют тельца Гассаля. На их долю приходится 1,03±0,37% от общей площади дольки. По морфологическим критериям в органе выделено шесть типов эпителиоцитов, которые ранее описаны для тимуса домашних птиц.
Структурно-функциональные изменения в тимусе птенцов серебристой чайки при инвазии D. dendriticum. При инвазии лентецом чаечным наблюдается очаговая отечность в периваскулярных зонах и междольковых перегородках, вены расширены и полнокровны;
происходит увеличение относительной площади мозгового вещества, телец Гассаля и соединительной ткани (табл. 1). Увеличение относительных площадей этих компонентов в тимусе животных и человека соответствует процессам инволюции. Известно, что при инволюции отмечается увеличение количества и площади телец Гассаля, стирание границы между корковым и мозговым веществом, снижение содержания тимоцитов.
Таблица Относительная площадь структур долек тимуса незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов и с разной интенсивностью инвазии лентецом чаечным (в % от общей площади) Незараженные Средняя Высокая Структура тимуса инт. инвазии инт. инвазии Зона коркового 67,9±3,24 39,9±2,77* 31,5±2,10* вещества Зона мозгового 28,3±1,35 48,3±3,35* 53,8±3,44* вещества Тельца Гассаля 1,0±0,37 5,6±0,64 7,8±2,88* Соединительная ткань 2,7±0,90 5,0±0,80* 6,6±1,63* Корково-мозговой 2,4±1,67 0,8±0,10 0,6±0, индекс Примечание: * p0.05;
инт. - интенсивность Основные морфологические изменения тимуса серебристой чайки происходят на 10-е сутки инвазии в виде прогрессирующего обеднения коры лимфоцитами и плотного их скопления вокруг кровеносных сосудов коркового вещества.
Описаны изменения клеточного состава функциональных зон тимуса при экспериментальном дифиллоботриозе (табл.2). У зараженных птиц по сравнению с незараженными меняется соотношение различных форм клеток и их распределение по функциональным зонам долек тимуса. Относительное содержание бластных клеток и средних лимфоцитов при средней интенсивности инвазии в тимусе птенцов серебристой чайки достоверно увеличивается в корковой зоне (табл.2), а в подкапсулярной эти клетки значительно преобладают над другими видами клеток.
Таблица Клеточный состав корковой зоны тимуса незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов с разной интенсивностью и продолжительностью инвазии (в % от общей численности клеток) Продолжительность Интенсивность инвазии инвазии Типы клеток Незараженные Средняя Высокая 5-е сутки 10-е сутки Ретикулоэпителиальные 2,5±0,67 4,4±0,42* 3,6±0,40* 8±0,23* 6,5±0,54* клетки Бластные клетки 6,5±0,56 17,6±0,32** 10,5±0,35** 17,8±1,72** 12,9±0,65* Большие лимфоциты 2,4±0,46 4,6±0,64* 2,0±0,36 1,2±0,28* 2,7±0, Средние лимфоциты 21,6±1,81 36,8±1,55** 50,7±3,44** 43,5±1,17* 27,9±1,54* Малые лимфоциты 61,7±1,08 35,0±1,06** 28,9±1,16** 22,6±0,86** 42,3±1,58* Плазматические клетки 0 0,30±0,14* 0,14±0,09 0,14±0,08 0,3±0, Эозинофилы 0 0 0 0 Макрофаги 0,3±0,14 0,5±0,14* 0,4±0,18* 0,4±0,15 0,3±0, Делящиеся клетки 1,4±0,51 1,2±0,36 1,9±0,38 1,0±0,24* 2,6±0,38* Деструктивно 1,5±0,53 2,0±0,49 2,4±0,44 1,6±0,38 3,5±0,48* измененные клетки Примечания: * - p0.05;
** p0. Продолжительность инвазии так же влияет на относительное содержание бластных клеток и больших лимфоцитов. Оно увеличивается в сравнении с контролем на 5-е и 10-е сутки инвазии. Наибольшее увеличение содержания бластных клеток и больших лимфоцитов наблюдается в подкапсулярной, корковой и кортико-медуллярной зонах на 5-е сутки инвазии.
Увеличение доли бластных клеток свидетельствует о стимуляции лентецом чаечным поступления предшественников лимфоцитов из красного костного мозга в тимус, а увеличение доли делящихся клеток в подкапсулярной и кортико медуллярной зонах долек тимуса зараженных особей указывает на активизацию пролиферативных процессов в органе. Доля средних лимфоцитов увеличивается в корковой и кортико-медуллярной зоне тимуса, а в подкапсулярной, наоборот снижается, что вероятно связано с перераспределением этих клеток по зонам тимуса в ходе их дифференцировки. Снижение относительного содержания макрофагов, отмеченное у зараженных птиц при разной интенсивности и продолжительности инвазии, свидетельствует о развитии вторичного иммунодефицита.
При инвазии лентецом чаечным повышается и функциональная активность эозинофилов. Относительное содержание эозинофилов при средней интенсивности инвазии увеличивается в 3,8 раз, а при высокой - более чем в 4 раза. В тимусе содержание среднедегранулированных клеток при средней интенсивности инвазии увеличивается в 3 раза, при высокой – в 7 раз;
сильнодегранулированных клеток при средней интенсивности инвазии – в 2,7 раза, при высокой – в 8 раз.
Концентрация эозинофильных лейкоцитов вблизи и внутри телец Гассаля дает основание рассматривать клетки во взаимосвязи с функцией этих структур. Ряд авторов отмечают, что при инфекционных процессах наблюдается увеличение количества и площади телец Гассаля (Bodey, Siegel, Kaiser, 2004). Известно, что тельца Гассаля экспрессируют лимфопоэтин (TSLP), который активирует CD-11+ дендритные клетки. Активированные дендритные клетки способствуют пролиферации и дифференцировке CD4+CD25+FOX3+- регулирующих клеток (Watanabe, et.al., 2005). Добавление Il-4 (интерлейкин-4) увеличивало функциональную активность регулирующих клеток (Thornton, Piccirillo, Shevach, 2004). Il-4 синтезируют эозинофилы (Akuthota, Wang, Spencer, Weller, 2008).
Возможно, этим и объясняется повышение их количества и функциональной активности вблизи и внутри телец Гассаля в дольках тимуса серебристой чайки при инвазии лентецом чаечным.
Существенное снижение относительного содержания малых лимфоцитов в тимусе зараженных птенцов (табл.2) по сравнению с незараженными птицами вызвано, возможно, усилением миграции Т-лимфоцитов в органы локализации лентеца чаечного (тонкий кишечник), где содержание интраэпителиальных лимфоцитов при дифиллоботриозе у птенцов серебристой чайки и сирийских хомяков увеличивается в 1,2-1,5 раза (Пронина и др., 2009).
Глава 4. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ БУРСЫ ПТЕНЦОВ СЕРЕБРИСТОЙ ЧАЙКИ ПРИ ЗАРАЖЕНИИ ЛЕНТЕЦОМ ЧАЕЧНЫМ Характеристика макро - и микроморфологического строения бурсы серебристой чайки. Бурса (клоакальная сумка или фабрициева сумка) серебристой чайки, как и у домашних птиц, расположена между позвоночным столбом и клоакой. Она представляет собой полостной мешкообразный орган серо-розового цвета мягкой текстуры. Главным компонентом слизистой оболочки являются лимфатические фолликулы (узелки). У птенцов чайки в возрасте трех недель фолликулы, находятся на разной стадии формирования, что свидетельствует о незавершенности морфогенеза бурсы в этом возрасте. Гистологическое строение фолликулов бурсы этих птенцов серебристой чайки соответствует морфологической картине фолликулов бурсы домашних птиц в возрасте 1 месяца.
В фолликулах относительная площадь медуллярной зоны больше, чем корковой, соединительная ткань межфолликулярной области выражена незначительно.
Корковое вещество представлено в основном средними лимфоцитами, здесь многочисленны бластные клетки и большие лимфоциты. В медуллярной зоне преобладают малые лимфоциты. На отпечатках бурсы нами выявлены лимфоциты (большие, средние и малые), бластные клетки, макрофаги, плазмоциты, эозинофилы и псевдоэозинофилы. Средние размеры лимфоцитов бурсы серебристой чайки значительно превосходят размеры клеток тимуса.
Особенностью бурсы чайки является высокое содержание больших лимфоцитов и бластных клеток, распределение плазмоцитов преимущественно в корковой зоне.
Структурно-функциональные изменения в бурсе серебристой чайки при инвазии D. dendriticum. У зараженных птенцов чайки увеличивается диаметр лимфатических узелков;
площадь коркового вещества в них возрастает, а мозгового уменьшается (табл.3).
Таблица Относительная доля площадей функциональных зон фолликулов (в %), диаметры и количество фолликулов в бурсе незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов с разной интенсивностью инвазии Интенсивность инвазии Параметр Незараженные Средняя Высокая Корковое вещество 27,0±2,33 29,0±1,78* 47,8±2,72* Мозговое вещество 51,7±2,66 44,7±2,56* 41,1±2,68* Межфолликулярное 21,3±2,06 16,3±3,09* 11,05±2, пространство Длины фолликула: Большой 304,2±4,33 328,0±6,64 367,8±6, Малый 311,2±2,48 223,1±3,84* 275,3±7,01* Количество фолликулов 21,08±1,87 16,76±0,94* 19,2±1,02* Примечание: * - p0. Наибольшее изменение клеточного состава в отпечатках бурсы серебристой чайки при заражении лентецом чаечным зарегистрировано в лимфоидном ряду.
При средней интенсивности инвазии достоверно увеличивается доля бластных клеток (в 3 раза) и больших лимфоцитов (в 1,5 раза) по сравнению с незараженными. Снижение доли средних лимфоцитов и тенденция увеличения содержания малых лимфоцитов у зараженных птенцов, говорит о стимуляции D.
dendriticum процессов клеточной дифференцировки в бурсе. При средней интенсивности инвазии отмечается достоверное снижение плазмоцитов.
Содержание эозинофилов, псевдоэозинофилов и делящихся клеток в бурсе зараженных птенцов практически не отличается от незараженных.
При высокой интенсивности инвазии по сравнению с незараженными птенцами достоверно увеличивается доля бластных клеток (в 3 раза) и малых лимфоцитов (в 1,6 раза), но снижается содержание плазмоцитов и псевдоэозинофилов. Зарегистрирована тенденция снижения содержания макрофагов, эозинофилов и делящихся клеток. Патологические процессы при высокой интенсивности инвазии выражались в основном в деструкции лимфоцитов, что подтверждается высоким содержанием деструктивно измененных клеток по сравнению с незараженными птенцами.
Исследование гистологических срезов бурсы показало, что у зараженных птенцов серебристой чайки в корковой и медуллярной (или мозговой) зонах увеличивается доля больших лимфоцитов и митотически делящихся клеток (табл.4).
Эти данные указывают на то, что инвазия лентецом чаечным стимулирует поступление предшественников лимфоцитов из красного костного мозга в бурсу.
Снижение содержания средних и малых лимфоцитов в бурсе серебристой чайки при инвазии вызвано, возможно, усилением миграции лимфоцитов в орган локализации лентеца чаечного (тонкий кишечник). При инвазии лентецом в корковой и медуллярной зонах фолликулов бурсы снижается содержание макрофагов.
При высокой интенсивности инвазии выражена гиперплазия эпителиальных клеток в медуллярной зоне, где содержание этих клеток увеличивается относительно незараженных в 1,7 раза (табл.4). При средней интенсивности инвазии увеличивается содержание эозинофилов в межфолликулярном пространстве и корковой зоне. Известно, что при воспалительных процессах, а также при паразитозах, происходит активация эозинофильных лейкоцитов (Фрейдлин, Тотолян, 2001). Выявленное в наших исследованиях снижение содержания катионного белка эозинофилов в бурсе зараженных птенцов чайки, возможно, связано с тем, что часть эозинофилов этого органа является иммигрантами из очага воспаления (тонкого кишечника), где они его выделили, поскольку катионный белок обладает токсичностью для бактерий и гельминтов (Лабораторные методы…, 1988).
При инвазии лентецом чаечным достоверно увеличивается абсолютное число тучных клеток в поле зрения. У незараженных птенцов число клеток в поле зрения составляет 0,7±0,11, при средней интенсивности инвазии – 1,6±0,17, а при высокой интенсивности инвазии – 1,9±0,14. С увеличением интенсивности инвазии возрастает и дегрануляция тучных клеток.
Таблица Клеточный состав функциональных зон фолликулов бурсы незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов с разной интенсивностью инвазии (в % от общей численности клеток) Корковая зона Мозговая зона Типы клеток Средняя Высокая Средняя Высокая Незараженные Незараженные и.и. и.и. и.и. и.и.
Бластные клетки 7,8±0,34 20,5±1,15* 18,4±0,99* 8,5±0,68 9,7±0,92 9,3±0, Большие 2,2±0,51 5,2±0,81* 4,5±0,56* 2,2±0,34 1,9±0,44 2,6±0, лимфоциты Средние 52,2±0,64 30,5±1,17* 37,2±1,55* 30,6±0,70 28,3±1,25 28,6±0, лимфоциты Малые лимфоциты 19,5±1,24 15,6±1,08* 18,3±0,64 45,0±0,94 43,2±0,82 38,7±0, Макрофаги 1,0±0,33 0,7±0,34 0,7±0,17 0,6±0,19 0,2±0,11 0,2±0, Клетки стромы 9,7±0,83 17,2±0,86* 14,1±0,62* 10,9±0,70 13,8±0,81 18,1±0,91* Фиброциты 1,2±0,23 1,1±0,19 1,0±0,18 0 0 Плазмоциты 2,7±0,42 0,8±0,18 0,7±0,15* 0,3±0,08 0,5±0,11 0,3±0, Эозинофилы 0 0,9±0,29* 0,3±0,01 0 0 Псевдоэозинофилы 0 0,7±0,61* 0 0 0 Клетки на стадии 0,8±0,30 1,1±0,38 0,7±0,24 0,7±0,11 0,5±0,20 0,4±0, митоза Клетки с деструктивными 2,7±0,64 3,0±0,72 3,9±0,54* 0,9±0,19 1,9±0,50* 1,6±0,35* изменениями Примечание: *- p0.05, и.и.- интенсивность инвазии.
Снижение содержания плазмоцитов у зараженных птиц в корковой зоне может свидетельствовать об угнетении В-звена иммунной системы, либо это может быть вызвано ускорением их дифференцировки и дальнейшей их миграцией в очаг воспаления, то есть, орган непосредственной локализации паразита – тонкий кишечник. Ранее установлено, что при инвазии лентецом в эксперименте у зараженных хомяков содержание плазмоцитов в слизистой ворсинок тощей кишки увеличивается более чем в 2 раза (Пронина и др., 2009). Разрушение предшественников В-лимфоцитов и деградация фолликулов бурсы отмечается при ряде вирусных заболеваний птиц (Abdul-Careem, et.al., 2008;
Wang et.al., 2008).
Депрессия В-звена иммунной защиты регистрировалась при гельминтозных заболеваниях и проявлялась уменьшением содержания В-лимфоцитов (Shimp, Crandall R., Crandall C., 1975;
Albrght J., Albrght J.W., Dusanic, 1978). Возможно, бурса серебристой чайки при инвазии лентецом чаечным иммунологически подвергается меньшему воздействию, нежели тимус. Об этом свидетельствует содержание плазмоцитов в медуллярной зоне фолликулов, посколькусодержан этих клеток незначительно отличается от интактных.
Снижение общего и абсолютного числа макрофагов бурсы происходит при вирусных и бактериальных инфекциях птиц (Kaiser, Underwood, Davison, 2003;
Khatri et.al., 2005). Известно, что одним из механизмов иммунодепрессии при гельминтозах является нарушение макрофагальной системы. Сбой данной системы ведет к неизбежному нарушению элиминации антигенов, кооперации иммунных клеток, морфологическим и функциональным перестройкам в иммунокомпетентных органах (Озерецковская, 1987).
Глава 5. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ СЕЛЕЗЕНКИ ПТЕНЦОВ СЕРЕБРИСТОЙ ЧАЙКИ ПРИ ЗАРАЖЕНИИ ЛЕНТЕЦОМ ЧАЕЧНЫМ Характеристика макро - и микроморфологического строения селезенки серебристой чайки. Селезенка птенцов серебристой чайки располагается в грудобрюшной полости между железистой и мышечной частью желудка, как и у других птиц. Селезенка птенцов серебристой чайки с поверхности покрыта соединительно-тканной капсулой, от которой внутрь органа идут трабекулы, в которых проходят кровеносные сосуды, что полностью согласуется с позицией о наличии трабекул в селезенке птиц (Davison, Kaspers, Schat, 2009), а не отсутствием их (Гладков, 1964).
В клеточном составе отпечатков селезенки дифференцированы следующие виды клеток: бластные клетки (8,7±0,91%), большие лимфоциты (2,3±0,29%), средние лимфоциты (44,5±0,38%), малые лимфоциты (24,0±0,40%), плазмоциты (1,0±0,09%), макрофаги (0,3±0,11%), эозинофилы (0,8±0,15%), псевдоэозинофилы (2,9±0,47%), митотически делящиеся клетки (0,3±0,09), деструктивно измененные клетки (1,0±0,17%), клетки стромы (14,0±0,88%). В селезенке серебристой чайки, как и у других птиц, выделяется красная и белая пульпа. Белая пульпа содержит следующие морфологические структуры: лимфатические узелки, периартериальные лимфоидные муфты, эллипсоидные макрофагально лимфоидные муфты.
Периартериальные лимфоидные муфты расположены вокруг мелких артерий селезенки и представляют собой плотное скопление разных форм лимфоцитов, с доминированием малых лимфоцитов (около 40%). Лимфатические узелки селезенки птенцов серебристой чайки представлены скоплением лимфоцитов разных стадий зрелости, макрофагами и делящимися клетками, которые располагаются в петлях ретикулярной ткани. Лимфатические узелки селезенки не содержат центров размножения. Эллипсоиды расположены вокруг пульпарных капилляров. Эллипсоиды образованы преимущественно ретикулярными клетками и незначительным количеством лимфоцитов разных стадий зрелости.
Структурно-функциональные изменения селезенки серебристой чайки при инвазии D. dendriticum. У зараженных птенцов увеличивается диаметр лимфатических узелков и эллипсоидов (табл.5). Увеличение площади лимфатических узелков и эллипсоидов отмечается у птиц при гельминтозных и вирусных заболеваниях (Гладков, 1964;
Тухтаев и др., 1982;
Пронина, Маласова, Фомина, 2006).
Таблица Длина лимфатических узелков и эллипсоидов у незараженных птенцов и птенцов с разной интенсивностью инвазии, мкм Интенсивность инвазии Группы птенцов Незараженные Средняя Высокая Длина лимфатического узелка:
наибольшая 225,2±8,05 268,8±9,23 229,1±8, наименьшая 181,2±6,80 141,4±7,91* 189,7±7,21* Наибольшая длина эллипсоида 73,2±4,65 87,7±3,27 87,9±4,04* Примечание: * - p0. При средней интенсивности инвазии в селезенке птенцов чайки достоверно увеличивается содержание больших лимфоцитов в периартериальных лимфоидных муфтах в 2 раза, а при высокой – в 3 раза;
в лимфатических узелках - в 1,6 и 1, раза, соответственно;
в красной пульпе – в 3 и 2,4 раза, соответственно (табл. 6, 7).
Количество бластных клеток в лимфатических узелках при средней интенсивности инвазии увеличивается в 1,3 раза, а при высокой - в 1,8 раза (табл. 6). Содержание митотически делящихся клеток возрастает при инвазии во всех функциональных зонах в 1,5 раза и более. Увеличение содержания бластных клеток и больших лимфоцитов и митотически делящихся клеток указывает на активацию пролиферативных процессов у зараженных особей. У зараженных птиц наблюдается инфильтрация эллипсоидов эозинофилами и псевдоэозинофилами.
Снижение содержания малых лимфоцитов выражено во всех функциональных зонах, за исключением красной пульпы, где, напротив, при высокой интенсивности инвазии отмечается тенденция к их увеличению. Возможно, это связано с особенностями перераспределения лимфоцитов в ходе их дифференцировки.
Содержание плазматических клеток увеличивается относительно незараженных птиц во всех функциональных зонах селезенки, за исключением периартериальных лимфоидных муфт.
Таблица Клеточный состав лимфатических узелков селезенки незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов с разной интенсивностью инвазии (в % от общей численности клеток) Интенсивность инвазии Типы клеток Незараженные Средняя Высокая интенсивность интенсивность Бластные клетки 11,3±0,69 14,5±0,87* 20,0±1,37* Большие лимфоциты 5,1±0,49 8,0±0,67 8,8±0,78* Средние лимфоциты 39,0±0,40 37,3±0,47 43,3±1, Малые лимфоциты 35,1±0,96 25,2±0,84* 10,5±0,35** Плазматические клетки 0,2±0,04 0,8±0,11* 0,5±0, Макрофаги 0,6±0,11 0,6±0,21 0,4±0, Клетки стромы 3,4±0,48 6,0±0,30* 8,8±0,48* Фагоцитирующие клетки (EAC) 0,2±0,08 0,7±0,19* 0,4±0,09* Делящиеся клетки 4,1±0,39 5,5±0,11* 5,7±0,89* Деструктивно измененные клетки 1,0±0,19 1,2±0,06 1,4±0,18* Примечания: * - p0.05;
**- р0,001.
Таблица Клеточный состав эллипсоидных макрофагально-лимфоидных муфт селезенки незараженных птенцов серебристой чайки и птенцов с разной интенсивностью инвазии (в % от общей численности клеток) Интенсивность инвазии Типы клеток Незараженные Средняя Высокая интенсивность интенсивность Бластные клетки 5,6±0,89 2,8±0,83 3,2±0, Большие лимфоциты 2,3±0,74 1,3±0,5 2,6±0, Средние лимфоциты 15,0±1,41 10,0±0,86 10,7±0, Малые лимфоциты 10,9±1,20 10,2±0,86* 13,2±0, Плазматические клетки 1,0±0,27 2,3±0,2* 3,1±0,74* Макрофаги 3,4±0,71 2,7±0,35* 3,0±0, Эозинофилы 0 0,7±0,28* 0,6±0,14* Псевдоэозинофилы 0,8±0,34 0,7±0,21 1,7±0,37* Поддерживающие клетки (SC) 56,9±1,85 60,0±1,34 51,7±1, Фагоцитирующие клетки (EAC) 1,7±0,37 3,6±0,64** 5,2±0,67** Делящиеся клетки 0,3±0,02 0,7±0,28 1,9±0, Деструктивно измененные клетки 0,9±0,21 2,7±0,57* 2,4±0, Примечания: * - p0.05;
**- р0,001.
Глава 6. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ РЕАКЦИЙ ТИМУСА И СЕЛЕЗЕНКИ РАЗНЫХ ВИДОВ ДЕФИНИТИВНЫХ ХОЗЯЕВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИФИЛЛОБОТРИОЗЕ.
Приведенные в предыдущих главах результаты собственных исследований органов иммунной системы серебристой чайки и данные литературы позволяют провести сравнение реакций тимуса и селезенки у серебристой чайки (облигатного хозяина) и сирийского хомяка (факультативного) по отношению к инвазии D.
dendriticum в лабораторных моделях (табл.8).
Морфологические изменения в органах иммунной защиты облигатного хозяина (серебристая чайка) и факультативного хозяина (сирийский хомяк) при инвазии лентецом чаечным в целом носят сходный характер. Наблюдается стаз кровеносных сосудов, гиперплазия эпителиальных клеток, стирание границы между корковым и мозговым веществом, увеличение относительной площади мозгового вещества и телец Гассаля в тимусе, увеличение относительной площади соединительнотканного компонента (тимус, селезенка) и лимфоидной ткани (селезенка) (табл8).
На основании собственных полученных и литературных данных, можно выделить два основных направления иммуномодуляции: 1. усиление клеточного иммунного ответа, на что указывает увеличение пролиферации Т-лимфоцитов и их миграция в очаг воспаления и периферические органы иммунной защиты;
2.
ингибирование В-звена иммунной защиты, на что указывает снижение содержания плазмоцитов в органах иммунной защиты и крови. Активация клеток В-звена проявляется лишь в месте наибольшего поступления антигенов – тонком кишечнике, как у облигатного, так и факультативного хозяина.
Клеточные реакции местной защиты сильнее проявляются у факультативного хозяина сирийского хомяка, а у птенцов серебристой чайки выражены преимущественно реакции клеточного иммунитета. Таким образом, супрессорное воздействие лентеца чаечного у облигатного хозяина – серебристой чайки, менее выражено по сравнению с факультативным хозяином (сирийским хомяком).
Таблица Характер и тенденции морфологических реакций в тимусе и селезенке облигатного хозяина серебристой чайки и не облигатного хозяина сирийского хомяка при инвазии лентецом чаечным Степень проявления признака у облигатного и необлигатного хозяина Сирийский хомяк Морфологические реакции Серебристая (по материалам собственных чайка исследований и сотрудников лаб.
паразитологии ИОЭБ СО РАН) В тимусе:
Увеличение относительной площади мозговой зоны Увеличение относительной площади телец Гассаля Увеличение соединительнотканного компонента Облитерация просвета сосудов Тенденция изменения содержания митотически делящихся клеток Тенденция изменения содержания малых лимфоцитов Тенденция изменения содержания бластных форм клеток и больших лимфоцитов Тенденция изменения содержания деструктивно измененных клеток Тенденция изменения содержания гранулоцитов:
- эозинофильных лейкоцитов у серебристой чайки;
- тучных клеток у сирийского хомяка В селезенке:
Увеличение относительной площади лимфоидной ткани Тенденция изменения содержания малых лимфоцитов в периартериальной зоне Тенденция изменения содержания плазмоцитов:
- в эллипсоидах серебристой чайки;
- маргинальной зоне хомяков.
Тенденция изменения содержания нейтрофильных лейкоцитов:
- в эллипсоидах серебристой чайки;
- в маргинальной зоне хомяков.
Обозначение: - слабая интенсивность проявления реакции, - средняя интенсивность проявления реакции, - высокая интенсивность проявления реакции;
направление стрелки соответствует увеличению (вверх) или снижению (вниз) реакции.
ВЫВОДЫ Впервые проведено исследование клеточного состава и структуры 1.
иммунокомпетентных органов (тимуса, бурсы и селезенки) птенцов серебристой чайки Larus argentatus mongolicus. Установлено, что топография и общий план микроморфологического строения тимуса, селезенки и бурсы незараженных птенцов серебристой чайки Larus argentatus mongolicus наряду со сходными чертами имеет ряд отличий от таковых у других видов птиц. Тимус птенцов имеет большее количество и размер долей по сравнению с домашними птицами. Для клеточного состава бурсы и селезенки серебристой чайки характерна высокая доля средних и малых лимфоцитов.
Характер изменения структурных компонентов тимуса птенцов 2.
серебристой чайки зависит от интенсивности и продолжительности инвазии Diphyllobothrium dendriticum. При высокой интенсивности заражения, а также на более поздних сроках инвазии лентецом чаечным структурные изменения в тимусе серебристой чайки проявляются сильнее, что свидетельствуют об умеренно выраженной инволюции органа. Во всех зонах тимуса чайки, как при средней, так и при высокой интенсивности инвазии, доля бластных клеток и больших лимфоцитов увеличивается, а малых лимфоцитов снижается в несколько раз.
Впервые в тимусе незараженных птиц выделено 4 стадии развития телец 3.
Гассаля: образование гипертрофированной «клетки-основателя»;
наслоение эпителиальных клеток;
дегенерация эпителиальных клеток;
формирование очагов макрофагальной активности, скопление эозинофилов и псевдоэозинофилов вокруг телец Гассаля. У зараженных птиц в мозговой зоне тимуса увеличивается площадь и количество телец Гассаля.
Установленные особенности топографии эозинофилов и их взаимодействие с тельцами Гассаля позволяют выдвинуть гипотезу об участии эозинофилов в комплексе с тельцами Гассаля в регуляции дифференцировки Т-лимфоцитов и генерации особой популяции Т-reg клеток тимуса птиц.
У зараженных птенцов серебристой чайки в корковой зоне фолликулов 4.
бурсы выявлено увеличение содержания бластных клеток и больших лимфоцитов более чем в 2 раза и снижение содержания плазмоцитов в 3 раза по сравнению с незараженными птенцами.
Во всех функциональных зонах селезенки серебристой чайки при инвазии 5.
D. dendriticum достоверно увеличивается содержание больших лимфоцитов и митотически делящихся клеток и снижается доля малых лимфоцитов.
Содержание плазмоцитов увеличивается в эллипсоидных макрофагально лимфоидных муфтах и лимфатических узелках.
Увеличение пролиферации Т-лимфоцитов, невысокое содержание 6.
макрофагов и низкая активность гуморального звена иммунитета во всех исследуемых органах дефинитивных хозяев указывают на то, что при инвазии лентецом чаечным происходит активация преимущественно Т-звена иммунной защиты (тимуса и Т-зоны селезенки). Повышение численности деструктивно измененных клеток во всех исследуемых органах, а также инфильтрация бурсы тучными клетками и эозинофилами, а тимуса и селезенки псевдоэозинофилами и эозинофилами свидетельствуют об аллергизации хозяина при заражении лентецом чаечным.
Клеточные и тканевые реакции при инвазии D. dendriticum различны у 7.
облигатного дефинитивного хозяина (серебристой чайки) и у факультативного хозяина (сирийского хомяка). У сирийского хомяка сильнее проявляются реакции местной защиты, а у серебристой чайки более выражен иммунный ответ системного характера. Содержания плазмоцитов в эллипсоидах серебристой чайки увеличивается, а в маргинальной зоне хомяков уменьшается. Вместе с тем, содержание большинства типов клеток (бластные, большие лимфоциты, средние лимфоциты, эозинофилы и псевдоэозинофилы) тимуса и селезенки увеличивается, а численность малых лимфоцитов снижается у обоих хозяев.
Список опубликованных работ по теме диссертации Статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ Пронина С.В., Фомина А.С. Морфофункциональные изменения в тимусе 1.
сирийского хомяка при экспериментальном заражении цестодой Diphyllobothrium dendriticum (Pseudophyllidea: Diphyllobothriidae) / С.В. Пронина, А.С. Фомина // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – Иркутск. – 2009. - №2(66). – С. 125- 128.
Пронина С.В. [и др.], Морфофункциональные характеристики тимуса и 2.
иммунологические показатели сирийского хомяка при экспериментальном заражении цестодой Diphyllobothrium dendriticum (Pseudophyllidea: Diphyllobothriidae) / С.В. Пронина, О.Е. Мазур, Н.М. Пронин, А.С. Фомина, Л.В. Толочко // Паразитология, 2010. – 44(2). – С.135-145.
Фомина А.С., Пронина С.В. Характеристика микроморфологического строения 3.
тимуса серебристой чайки Larus argentatus /А.С. Фомина, С.В. Пронина // Вестник БГСХА. – Улан-Удэ: Изд-во ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им В.Р. Филлипова», 2009. №2(15). – С.15-19.
Фомина А.С., Пронина С.В. Морфофункциональные изменения в тимусе 4.
серебристой чайки Larus argentatus mongolicus при заражении лентецом чаечным Diphyllobothrium dendriticum (Nitzsch, 1824) /А.С. Фомина, С.В. Пронина // Вестник БГСХА. – Улан-Удэ: Изд-во ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им В.Р. Филлипова», 2010. №2(19). – С.11-16.
Фомина А.С., Пронина С.В. Реакция эозинофилов тимуса и бурсы серебристой 5.
чайки при экспериментальном заражении лентецом чаечным Diphyllobothrium dendriticum (Nitzsch,1924) (Cestoda: Pseudophyllidea) / А.С. Фомина, С.В. Пронина // Морфология, 2010. – Том 138. - №5. – С. 36-39.
Работы в других изданиях Пронина С.В., и [др.]. Характеристика микроморфологии тимуса серебристой 6.
чайки (Larus argentatus) при глистной инвазии / С.В. Пронина, А.С. Фомина, О. Е. Мазур, Л.В. Толочко // Биоразнообразие экосистем Внутренней Азии. Тезисы Всероссийской научной конференции с международным участием. - Улан-Удэ. – 2006. – Т.2. - С. 171-172.
Фомина А.С., Пронина С. В. Реакция эозинофилов в тимусе серебристой чайки 7.
Larus argentatus в зависимости от интенсивности заражения кишечными гельминтами /А.С. Фомина, С.В. Пронина // Материалы Всероссийской конференции молодых ученых «Экология в современном мире: взгляд научной молодежи». Улан-Удэ, 24-27 апреля г. – С. 387-388.
Пронина С.В., Фомина А.С. Реакция эозинофилов в тимусе серебристой чайки 8.
Larus argentatus в зависимости от интенсивности инвазии Diphyllobotrium dendriticum (Nitsch, 1984) /С.В. Пронина, А.С. Фомина // Материалы конференции «Молодежь и наука Забайкалья», Чита 9-11 декабря 2008г. – С. 142-145.
Пронина С.В., и [др.]. Морфофункциональные изменения в органах иммунной 9.
системы золотистых хомяков, экспериментально зараженных лентецом чаечным Diphyllobotrium dendriticum Nitzsch, 1824 / С.В. Пронина, И.А. Кутырев, Н.М. Пронин, О.Е Мазур, Л.В. Толочко, А.С. Фомина // Паразитология в XXI веке: проблемы, методы, решения: Мат. IV Всероссийск. съезда Паразитологического общества при РАН. – Санкт Петербург, 2008. С. 64-69.
Фомина А.С., Пронина С.В. Изменения клеточного состава тимуса серебристой 10.
чайки при разной продолжительности инвазии лентецом чаечным Diphyllobothrium dendriticum (Nitzsch, 1824) /А.С Фомина, С.В. Пронина // Материалы III межрегиональной научной конференции «Паразитологические исследования в Сибири и на Дальнем Востоке», посвященной 80-летию проф. К.П. Федорова, Новосибирск – 2009. – С.304-306.
Фомина А.С., Пронина С.В. Морфофункциональные изменения в бурсе 11.
серебристой чайки при заражении Diphyllobothrium dendriticum (Nitzsch, 1824) / А.С.
Фомина, С.В. Пронина // Тезисы докладов Международной научной конференции и международной школы молодых ученых «Проблемы экологии. Чтения памяти проф.
М.М. Кожова», Иркутск, 20-25 сентября 2010. – С. 345.
Благодарности:
Выражаю благодарность своему руководителю – проф., д.б.н., зав.
лаборатории «Паразитологии и экологии гидробионтов» Н.М. Пронину за постановку проблемы и проведение научно-исследовательских экспедиций и экспериментов, проф. БГУ, д.б.н. С.В. Прониной за поддержку и неоценимую помощь на всех этапах работы;
к.б.н. И.А. Кутыреву, Л.В. Толочко, к.б.н. М. Д-Д.
Батуевой и к.б.н. О.Е. Мазур за помощь в проведении экспериментов;
к.б.н. Н.В.
Базовой за помощь в выборе адекватных статистических методов исследования и статистической обработке материала, а также выражаю огромную признательность всему коллективу лаборатории паразитологии за внимание к работе.
Исследование выполнено в рамках базового проекта НИР РАН VI.43. «Паразитарные системы и сообщества гидробионтов в пресноводных экосистемах» (лаборатория паразитологии и экологии гидробионтов ИОЭБ СО РАН) и грантов РФФИ № 08-04-98-98035_сибирь_а, Бурятского государственного университета «Инновации и научные исследования, 2007».