Реакция физиологических систем организма на химические соединения смазочно-охлаждающих жидкостей

На правах рукописи

КОШКИНА ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА РЕАКЦИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ ОРГАНИЗМА НА ХИМИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ СМАЗОЧНО-ОХЛАЖДАЮЩИХ ЖИДКОСТЕЙ 03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тюмень, 2007 2

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтиче ская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному разви тию» Научный руководитель доктор медицинских наук, профессор Юшкова Татьяна Александровна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Ананьев Владимир Николаевич Доктор медицинских наук Ерохин Александр Николаевич Ведущая организация – Институт иммунологии и физиологии УрО РАН

Защита диссертации состоится «_» 2007 года в часов на заседании диссертационного совета ДМ 212.274.07 при Тюменском государствен ном университете, по адресу: 625043, г. Тюмень, ул. Пирогова,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тюменского государствен ного университета.

Автореферат разослан «_» _ 2007 года

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор Е.А. Чирятьев -3

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние годы на предприятиях металлооб рабатывающего комплекса отмечается неуклонный рост заболеваемости кон тактными дерматитами (Антоненко Т.Н., 1997;

Евдокимов А.Ю., 2000). Од ним из факторов, способствующих их возникновению, являются смазочно охлаждающие жидкости (Филатов Н.Н., 2001;

Коростылева И.А., 2001), ко торые представляют собой сложные многокомпонентные композиции раз личных химических продуктов и применяются в машиностроительной и ме таллообрабатывающей промышленности.

Широкое использование смазочно-охлаждающих жидкостей не толь ко способствовало современному обеспечению технологических процессов промышленных предприятий (Титуренко С.Г., 2001), но и вскрыло проблему возникновения профессиональной патологии у рабочих, имеющих постоян ный контакт со смазочными материалами (Думский Ю.В., 2001, Юшков В.В., 2002), в частности, поражение кожи.

В связи с высокой частотой и тяжелыми последствиями возникающих дерматитов (Антоненко Т.Н., 1997) приоритетным направлением наших ис следований было изучение влияния смазочно-охлаждающих жидкости и ее сырьевых компонентов на физиологические системы организма эксперимен тальных животных, а также поиск средств, которые могли бы защищать ор ганизм человека от патогенного действия смазочно-охлаждающих жидко стей.

Актуальность решения данной проблемы несомненна. Существую щие сведения о реакции физиологических систем организма на СОЖ не по зволяют понять роль СОЖ в возникновении профессиональных заболеваний.

Это выводит в ранг актуальных исследования особенностей функционирова ния физиологических систем при их контакте с СОЖ и ее структурными компонентами. Кроме того, возникает необходимость поиска новых концеп туальных подходов и, прежде всего, к оценке безопасности смазочно -4 охлаждающих жидкостей и контролю их качества (Прусаков В.М.. 1989;

Юшков В.В., 2004).

Цель исследования. Изучение влияния смазочно-охлаждающей жидко сти и ее составных компонентов (аминоспирты и их производные, масло тал ловое и масло индустриальное, борная кислота, неонол, полигликоли, олеи новая кислота) на физиологические системы лабораторных животных и по иск возможных путей предупреждения развития неблагоприятных сдвигов крови, иммунной системы и кожи.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Изучить влияние смазочно-охлаждающей жидкости на физиологи ческие системы организма экспериментальных животных.

2. Изучить влияние основных компонентов, входящих в состав сма зочно-охлаждающей жидкости на физиологические системы орга низма экспериментальных животных 3. Изучить влияния смазочно-охлаждающей жидкости на физиологи ческие системы организма экспериментальных животных при при менении средств индивидуальной защиты кожи рук.

Научная новизна. Получены новые данные о влиянии СОЖ и ее ком понентов на эритроциты, лейкоциты, иммунную систему и кожу лаборатор ных животных.

Впервые проведен сравнительный анализ влияния основных компонен тов СОЖ: производных аминоспиртов (моноэтаноламин, 2,2 иминодиэтаноламин, триэтаноламин), поверхностно-активных веществ (олеиновая кислота, неонол, полиэтиленгликоли), кислот (борной кислоты), масел (индустриального и таллового), антикоррозийной присадки на эритро циты, лейкоциты, иммунную систему и кожу лабораторных животных. Вы -5 явлены различия в реагировании физиологических систем на СОЖ и ее ос новные компоненты.

Впервые оценена эффективность защиты физиологических систем от влияния СОЖ и ее основных компонентов.

Создан новый концептуальный подход к контролю качества СОЖ.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты расширя ют наши представления о реакции физиологических систем на действия СОЖ и ее основных компонентов. Критерии реагирования физиологических систем организма на химические компоненты СОЖ целесообразно использо вать при оценке безопасности смазочно-охлаждающих жидкостей и при оценке эффективности защиты физиологических систем вновь создаваемы ми средствами индивидуальной гигиены у лиц, имеющих постоянный кон такт с СОЖ.

На основании полученных данных создан способ оценки биологиче ского действия СОЖ как на этапе разработки нового продукта смазочно охлаждающей жидкости, так и на этапе ее технологического контроля каче ства и безопасности при серийном производстве. Разработанный способ вне дрен на Пермском заводе смазок и СОЖ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Влияние смазочно-охлаждающей жидкости на физиологические систе мы организма экспериментальных животных проявляется эритропени ей, лейкопенией, лимфопенией с увеличением количества атипичных и больших гранулярных и широкоплазменных лимфоцитов, нейтрофиле зом, моноцитозом и эозинофилией. Реакция иммунной системы на СОЖ характеризуется угнетением фагоцитоза, снижением уровня Т лимфоцитов, увеличением уровня В-лимфоцитов и иммунных ком плексов, активизацией клеток, принимающих участие в специфическом -6 лиганд-рецепторном взаимодействии с гистамином и серотонином, стимуляцией клеточно-опосредованных процессов (ГЗТ).

2. Направленность и выраженность реакции физиологических систем (крови, иммунной системы и кожи) обусловлена особенностью хими ческого вещества.

3. Средства индивидуальной защиты кожи от СОЖ не полностью обеспе чивают стабильность состояния физиологических систем организма.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на конфе ренции молодых ученых Пермской государственной фармацевтической ака демии (2001), на национальной научно-практической конференции «Пробле мы в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия населения и пути их решения в Волго-Вятском регионе и Поволжье (Чебоксары, 2001), на научно-практических конференциях «Смазочные материалы в промыш ленности: теория и практика применения» (Пермь, 1999, 2001), на научно практической конференции «Абразивные инструменты и материалы» (Волго град, Волжский, 2001), на 2-й научно-практической конференции иммуноло гов Урала (Пермь, 2002), научно-практической конференции с международ ным участием «Дни иммунологии в С.-Петербурге» (С.-Петербург, 2003), на учно-практической конференции Пермской государственной фармацевтиче ской конференции (Пермь, 2004), международной научно-практической конференции «Медицина и здоровье» (Пермь, 2005).

Публикации. По материалам исследований опубликовано 9 работ, 1 мо нография.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, об зора литературы, описания материалов и методов исследования, двух глав собственных результатов и обсуждения, выводов и указателя цитируемой ли тературы. Работа изложена на 156 страницах машинописного текста, содер жит 41 таблицу, 35 рисунков. Библиографический список включает 245 ис точников, из них 27 на иностранном языке.

-7 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперименты проведены на 204 беспородных крысах обоего пола мас сой 280-320 г (питомник лабораторных животных РАМН «Столбовая»). Все животные содержались в виварии на обычном рационе. В эксперименте ис пользовались животные с чистой здоровой кожей без механических повреж дений.

О реакции физиологических систем организма на химические соедине ния СОЖ судили по изменению кожи, крови и иммунной системы.

О реакции кожи в зоне аппликации судили по выраженности эритемы, величине отека, наличию струпов и петехий, их количеству, общей площади некроза. Измерение площади повреждения проводили с помощью миллимет ровой бумаги.

За 1-2 дня до эксперимента у животных тщательно выстригали, а затем выбривали шерсть на участке аппликации (без применения депиляториев).

Шерсть выстригали на симметричных участках боков по обе стороны от по звоночника. Правый бок служил для аппликации изучаемого вещества, левый для контроля внешнего состояния кожи.

Исследование биологического действия СОЖ проводили согласно МУ № 2102-79, так на предварительно выстриженный участок кожи, площадью 2х2 см, смазыванием наносили исследуемую СОЖ в количестве 0,3 мл при температуре окружающей среды 18-24оС. На контрольный участок кожи жи вотного, площадью 2х2 см наносили изотонический раствор натрия хлорида.

Время экспозиции - 1 час. После окончания экспозиции остатки СОЖ смыва ли теплой водой. Реакцию кожи регистрировали через 24 часа после одно кратной аппликации. Оценку функционального состояния кожи проводили по выраженности эритемы и величине отека. Оценку степени эритемы и оте ка суммировали для каждого животного, вычисляли среднюю оценку выра женности раздражающего свойства СОЖ для группы экспериментальных животных.

-8 Для получения более полного представления о биологических свойствах СОЖ проводили исследование по определению влияния СОЖ при много кратных аппликациях. Эти исследования проводили в соответствии с МУ № 2102-79 - 20 аппликаций в течение 30 дней. Техника нанесения СОЖ и время экспозиции были такие же, как и в опытах с однократной аппликацией.

Учет биологического действия СОЖ проводили через 5 и 20 аппликаций.

О реакции крови на действие СОЖ и ее компонентов судили по измене нию эритроцитарного и лейкоцитарного звена крови.

О реакции эритроцитарного звена крови на СОЖ и ее компонентов су дили по изменению количества эритроцитов, уровня гемоглобина, цветного показателя крови и скорости оседания эритроцитов: данные исследования проводили по общепринятым методикам (Западнюк И.П. и др., 1983;

Ронин В.С. и др., 1989).

О реакции лейкоцитарного звена крови на СОЖ и ее компонентов суди ли по количеству лейкоцитов и изменению морфологического состава пери ферической крови: количество базофилов, эозинофилов, лимфоцитов, моно цитов и нейтрофилов с учетом сегментированности их ядер;

нормальных, атипичных, бластных форм лимфоцитов и количество плазматических клеток (Юшкова Т.А., 2002).

Реакцию иммунной системы на СОЖ и ее компонентов оценивали по изменению клеточного и гуморального звена иммунитета. Состояние клеточ ного звена определяли по количеству Т-, В-лимфоцитов и фагоцитоза (фаго цитарной активности и интенсивности) (Stelzner A., 1987). Реакцию гумо рального звена иммунитета оценивали по уровню циркулирующих иммун ных комплексов. Функциональное состояние лимфоцитов оценивали по сте пени участия этого типа клеток в реакции антигенспецифического распозна вания на гистамин и серотонин (Юшков В.В., Юшкова Т.А., 1993).

Реакцию иммунной системы на СОЖ и ее компонентов оценивали по их способности модулировать реакцию гиперчувствительности замедленного типа (рис.1).

-9 Сенсибилизация Разрешение Регистрация выраженности ГЗТ 0,3 мл 0,3 мл 0,3 мл 0,3 мл 1 2 0 1234 5 6 дни Рис. 1. Схема проведения опытов при изучении реакции иммунной системы по спо собности модуляции СОЖ и ее компонентов ГЗТ С этой целью осуществляли сенсибилизацию лабораторных животных путем нанесения на выстриженный участок кожи площадью 4 см2 испытуе мого образца СОЖ или компонента СОЖ (в концентрированном виде) в ко личестве 0,3 мл. Нанесение образца СОЖ производили смазыванием 1 раз в день. На контрольный участок кожи животного наносили изотонический рас твор натрия хлорида. Сенсибилизацию проводили в течение 3-х дней. На 5-е сутки после последней сенсибилизирующей дозы вводили разрешающую до зу. Для этого выстриженный участок кожи животного, куда наносили обсле дуемый образец, вновь смазывали данным компонентом в количестве 0,3 мл.

Учет выраженности реакции организма осуществляли через 24 часа после нанесения разрешающей дозы.

Регистрация выраженности ГЗТ по истечении суток у животных на коже включала оценку поражения кожи с описанием ее внешнего вида, определе ние количества струпов, площади одного струпа и общей площади повреж дения, с помощью миллиметровой бумаги.

Для изучения влияния смазочно-охлаждающей жидкости на физиологи ческие системы организма экспериментальных животных при применении средств индивидуальной защиты кожи рук были использованы рекомендо ванные Министерством здравоохранения (Санитарные правила при работе с СОЖ № 3935-85) – «Биологические перчатки» (СТП ОАО «Пермские мото - 10 ры», г. Пермь) и «Крем силиконовый» (ГОСТ 29189-91 пр-во ОАО Концерн «Калина», г. Екатеринбург).

Оценку протективных свойств у средств индивидуальной защиты кожи рук («Биологические перчатки» и «Силиконовый крем») от воздействия эмульсии и компонента СОЖ, биологического действия защитных средств проводили по схеме, описанной ранее (рис. 2).

Сенсибилизация Разрешение Регистрация выраженности * * * * ЗС СОЖ ЗС СОЖ ЗС СОЖ ЗС СОЖ ГЗТ 1 2 0 1 2 3 4 5 6 дни * ЗС - защитное средство.

Рис. 2. Схема проведения оценки протективных свойств у средств защиты кожи рук Статистическую обработку результатов экспериментов с определением критериев Стьюдента проводили путем математической обработки с помо щью пакета компьютерных программ (Windows Excel).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ При изучении состояния периферической крови установлено, что уже пятидневное ежедневное накожное применение СОЖ приводило к снижению уровня гемоглобина (табл.1). Эти изменения сохранялись в течение 30-ти дневного воздействия СОЖ на кожу. Следует отметить, что у всех подопыт ных лабораторных животных (самок и самцов) уменьшалось количество эритроцитов как на 5-е, так и 30-е сутки опыта. Скорость оседания эритроци тов была увеличена лишь на 5-е сутки ежедневного применения СОЖ, при чем независимо от пола крыс. Цветной показатель практически не изменялся.

- 11 Таблица 1.Влияние СОЖ на периферическую кровь Показатели, Контроль Опыт % Самки Самцы 5-е сутки 30-е сутки Самки Самцы Самки Самцы Гемоглобин, 174,7±2,2 175,3±2,1 132,3±1,6 139,5±0,6 125,3±0,9 130,0±0, г/л 1 Эритроциты, 5,2±0,07 5,1±0,08 3,9±0,10 3,9±0,06 3,7±0,06 3,6±0,, 1012/л Цветной 1,0±0,02 1,0±0,02 1,0±0,05 1,0±0,02 1,0±0,03 1,1±0, показатель СОЭ,м/час 3,7±0,6 3,3±0,2 18,4±1,4 18,9±1,6 4,5±1,3 4,8±1, 2 Лейкоциты, 12,9±0,2 12,6±0,2 8,9±0,3 8,7±0,3 14,3±0,2 14,3±0,, 109/л 2 Базофилы, % 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0, Эозинофилы, 1,0±0,4 1,3±0,2 0,8±0,3 1,0±0,3 3,5±0,5 3,8±0, % 2 Нейтрофилы Юные,% 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0, Палочко- 1,7±0,2 1,7±0,2 1,0±0,3 3,7±0,2 4,7±0,3 4,0±0, ядерные, % Сегменто- 20,3±0,6 18,7±0,5 36,7±0,9 39,3±0,5 46,5±0,9 46,3±0, ядерные, % 2 Лимфоциты Нормальные, 69,7±1,1 69,3±1,4 12,3±0,5 12,2±0,3 0,0±0,0 0,0±0, % 2 Атипичные, % 2,0±0,4 2,7±0,2 33,0±1,3 30,8±0,8 21,7±1,6 23,0±0, 2 Широко- 4,0±0,4 4,7±0,5 6,3±0,6 5,8±0,5 1,8±0,2 1,5±0, плазменные % 2 Большие 0,0±0,0 0,0±0,0 6,0±0,9 7,7±0,6 10,3±0,5 10,2±0, гранулярные, % Моноциты, 1,3±0,2 1,7±0,2 6,2±0,6 5,7±0,3 5,5±0,6 5,3±0, % Плазматиче- 0,2±0,2 0,0±0,0 4,0±0,6 3,5±0,3 6,3±0,4 5,5±0, ские клетки. % Примечание: = р 0,001 = р 0,01 = р 0, 1 - по сравнению с исходными показателями;

2 – по сравнению с 5 - ми сутками На 5-е сутки опыта у подопытных крыс-самок и крыс-самцов выявлялась лейкопения, а к 30-тым суткам – количество лейкоцитов у животных возрос - 12 ло до нормального значения. При анализе морфологического состава пери ферической крови выявлено, что ежедневное тридцатидневное применение СОЖ сопровождалось увеличением эозинофилов к 30-тым суткам опыта.

Изменение этого показателя достоверно отличалось от контроля. Количество базофилов у всех животных во все сроки наблюдения не изменялось. Еже дневное применение СОЖ приводило к появлению палочкоядерных нейтро филов. Так, у крыс-самцов произошло достоверное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов уже на 5-е сутки опыта, а к 30-тым суткам их количество составило 4,0%. У крыс-самок увеличение количества палочкоя дерных нейтрофилов произошло только к 30-м суткам и достигло 4,7%. Что же касается сегментоядерных нейтрофилов, то их уровень также возрастал и составил на 5-е сутки наблюдения у самок - 36,7 %, у самцов – 39,3%, а на 30-е сутки - 46,5% и 46,3%, соответственно.

Ежедневное применение СОЖ как у самок, так и у самцов сопровожда лось уменьшением количества нормальных лимфоцитов с одновременным увеличением количества атипичных и больших гранулярных лимфоцитов.

Уровень широкоплазменных лимфоцитов достоверно возрастал лишь на 5-е сутки и значительно снижался на 30-е сутки опыта. Применение СОЖ сопро вождалось также увеличением числа моноцитов и плазматических клеток.

Следует отметить, что уровень моноцитов увеличился к 5-м суткам в 4,7 раза у самок и в 3,3 раза у самцов. К 30-м суткам количество моноцитов составило 5,5% у самок и 5,3% у самцов (табл. 1).

Количество плазматических клеток на 5-е сутки наблюдения у крыс самок составило 4,0%, а на 30-е сутки – 6,3%. У крыс-самцов на 5-е сутки 3,5%, на 30-е сутки – 5,5% (табл. 1). Все изменения морфологического соста ва периферической крови были практически одинаковыми как у крыс-самок, так и у крыс-самцов.

Реакция иммунной системы на СОЖ характеризуется угнетением фаго цитоза (рис.3, 4), снижением уровня Т-лимфоцитов (рис.5), увеличением уровня В-лимфоцитов (рис.6) и иммунных комплексов (рис.7), активизацией - 13 клеток, принимающих участие в специфическом лиганд-рецепторном взаи модействии с гистамином и серотонином (табл.2), стимуляцией клеточно опосредованных процессов ГЗТ. Аналогичная картина наблюдается у самцов.

Фагоцитирующая активность нейтрофилов, % 40 *** *** контроль 5-е сутки 30-е сутки Самки Примечание: = р 0, Рис.3. Влияние СОЖ на фагоцитарную активность нейтрофилов (крысы – самки) Фагоцитирующая активность нейтрофилов, % *** *** контроль 5-е сутки 30-е сутки Самцы Примечание: = р 0, Рис.4. Влияние СОЖ на фагоцитарную активность нейтрофилов (крысы – самцы) - 14 Т-лимфоциты, % *** *** контроль 5-е сутки 30-е сутки Самки Примечание: = р 0, Рис.5. Влияние СОЖ на Т-лимфоциты В-лимфоциты, % *** *** контроль 5-е сутки 30-е сутки Самки Примечание: = р 0, Рис. 6. Влияние СОЖ на В-лимфоциты - 15 Циркулирующие иммунные комплексы, у.е.

*** *** контроль 5-е сутки 30-е сутки Самки Примечание: = р 0, Рис.7. Влияние СОЖ на образование иммунных комплексов Таблица 2. Реакция лимфоцитов на гистамин и серотонин под воздействием СОЖ Показате- Контроль Опыт ли, % Самки Самцы 5-е сутки 30-е сутки Самки Самцы Самки Самцы 3,6 ± 0,6 28,5 ± 1,0 28,4 ± 1,1 42,5 ± 1,3 44,6 ± 1, РОЛ-Г 4,0 ± 0, 1 2 3,3 ± 0,5 3,4 ± 0,7 20,5 ± 1,0 21,1 ± 1,1 38,5 ± 0,3 39,3 ± 0, РОЛ-С 1 2 Примечание: = р 0, 1 - по сравнению с контролем;

2 - по сравнению с 5-ми сутками Через 24 часа после нанесения разрешающей дозы СОЖ в зоне воздейст вия исследуемого компонента регистрировалась гиперемия, отек, много численные петехии, струпы желтого цвета. В обследуемой зоне в среднем ре гистрировалось три струпа, площадь одного составляла 0,54±0,03 см2, а об щая площадь некроза - 1,62+0,05 см2.

При исследовании реакции крови на компоненты СОЖ оказалось, что моноэтаноламин, 2,2-иминодиэтаноламин, олеиновая кислота, борная кисло та, индустриальное масло вызывали эритропению, лейкопению, лимфопению - 16 с увеличением количества атипичных, больших гранулярных и широкоплаз менных лимфоцитов, нейтрофилезом, моноцитозом и эозинофилией. Неонол, полиэтиленгликоли, талловое масло не вызывали эритропению. Следует от метить, что талловое масло не вызывало лейкопению, а триэтаноламин, АКП и полиэтиленгликоли вызывали лейкоцитоз с увеличением количества ати пичных, больших гранулярных и широкоплазменных лимфоцитов.

Реакция иммунной системы на компоненты СОЖ характеризуется акти визацией клеток, принимающих участие в специфическом лиганд рецепторном взаимодействии с гистамином и серотонином (рис.8, 9), стиму ляцией клеточно-опосредованных процессов ГЗТ (рис.10).

Контроль %РОЛ-Г *** Неонол *** Полигликоли *** Триэтаноламин *** Масло талловое *** Борная кислота *** 2,2-иминодиэтаноламин *** Присадка АКП *** Олеиновая кислота *** Моноэтаноламин *** Масло индустриальное 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Примечание: = р 0, Рис. 8. Реакция лимфоцитов на гистамин при воздействии компонентов СОЖ - 17 Контроль %РОЛ-С *** Полигликоли *** Неонол *** Присадка АКП *** Масло талловое *** Триэтаноламин ** Борная кислота ** 2,2-иминодиэтаноламин ** Олеиновая кислота ** Масло индустриальное *** Моноэтаноламин 0 5 10 15 20 25 30 35 Примечание: = р 0, Рис. 9. Реакция лимфоцитов на серотонин при воздействии компонентов СОЖ АКП ** Полиэтиленгликоли *** 2,2-иминодиэтаноламин *** Моноэтаноламин *** Масло индустриальное *** Борная кислота *** Триэтаноламин *** Масло талловое *** Олеиновая кислота *** *** Неонол 0 20 40 60 80 100 120 % общей площади некроза, мм Примечание: = р 0,005 Общая площадь некроза (контроль) составляет 0,00 мм.

Рис.10. Сравнительное влияние основных компонентов СОЖ на кожу - 18 Проведенные нами исследования показали, что существующие на сего дняшний день средства защиты не оказывают должного протективного эф фекта на физиологические системы организма при воздействии на него СОЖ и ее компонентов (табл. 3, рис. 10).

Необходимо отметить, что силиконовый крем практически не влиял на периферическую кровь у интактных животных. Однако, данное средство за щиты кожи от СОЖ не препятствовало развитию изменений со стороны красной крови, которые наблюдаются при ГЗТ на АКП. К сожалению, отсут ствует протективный эффект у силиконового крема на АКП.

Что же касается биологических перчаток, то при их применении обна ружены следующие изменения со стороны периферической крови: лейкоци тоз, эозинофилия, уменьшение нормальных лимфоцитов, возрастание моно цитов и плазматических клеток.

Это свидетельствует об отсутствии индеферентности у биологических перчаток на периферическую кровь.

Таблица 3. Характеристика протективного эффекта средств индивидуальной защиты от влияния смазочно-охлаждающей жидкости на кожу Серии опытов Количество Площадь одного Общая площадь струпа, см2 некроза, см струпов Контроль 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0, Биологические перчатки 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0, Силиконовый крем 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0, 4,0 ± 1,01 0,40 ± 0,061 1,6 ± 0, Присадка АКП 8,3 ± 0,71 0,26 ± 0,11 6,7 ± 2, Биологические перчатки 2 +присадка АКП 5,33 ± 2,31 0,23 ± 0,11 1,06 ± 0, Силиконовый крем + присадка АКП 2,6 ± 0,41 0,012 ± 0,011 0,036 ± 0, Эмульсия СОЖ 3,6 ± 1,01 0,15 ± 0,03 Биологические перчатки 0,04 ± 0, 3 + эмульсия СОЖ 4,0 ± 0,7 1 0,026 ± 0,011 0,10 ± 0,02 Силиконовый крем + 3 эмульсия СОЖ Примечание: = р 0,001;

= р 0,01;

= р 0, 1 – по сравнению с контролем;

2 – по сравнению с присадкой АКП 3 – по сравнению с эмульсией СОЖ - 19 У лабораторных животных, подвергнутых воздействию эмульсии СОЖ и применяемых при этом «Силиконового крема» и «Биологических перчаток», выявляются и повреждения кожи.

*** *** Общая площадь некроза *** Контроль АКП Силиконовый Силиконовый Биологические Биологические крем крем + АКП перчатки перчатки + АКП Примечание: = р 0, Рис. 11. Площадь одного струпа на коже в тесте клеточно-опосредованной реакции ГЗТ, вызываемой АКП Об этом покраснение кожи и ее отечность, появление струпов, петехий и очагов некроза в зоне контакта с компонентом СОЖ.

К сожалению, нам не удалось выявить у защитных средств выраженного антигистаминного действия при изучении биологического действия компо ** ** ** ** ** ** РОЛ-Г,% ** ** ** Конт роль АКП Силиконов ый крем Силиконов ый Биологические Биологические крем+А КП перчат ки перчат ки+А КП фон 1 сутки 5 сутки 6 сутки Примечание: = р 0, Рис. 12. Влияние средств индивидуальной защиты на реакцию лимфоцитов на гистамин - 20 нента СОЖ, так как на 5-е сутки уровень лимфоцитов, специфически реаги рующих на гистамин и серотонин оставался повышенным (рис. 12, 13).

*** *** *** *** *** РОЛ-С,% 15 *** *** *** *** Контроль АКП Силиконовый Силиконовый Биологические Биологические крем крем+АКП перчатки перчатки+АКП фон 1 сутки 5 сутки 6 сутки Примечание: = р 0, Рис. 13. Влияние средств индивидуальной защиты на реакцию лимфоцитов на серотонин Применение защитных средств не привело к восстановлению уровня Т лимфоцитов, циркулирующих в крови.

В результате проведенных исследований впервые направленность и вы раженность реагирования физиологических систем на СОЖ и ее компоненты.

Наличие достоверных отличий у всех обследованных объектов по изучаемым показателям свидетельствует о высокой информативности разработанной ме тодики оценки биологических свойств СОЖ и возможности объективного выявления наиболее безопасных для человека СОЖ.

- 21 ВЫВОДЫ 1. Влияние смазочно-охлаждающей жидкости на физиологические систе мы организма экспериментальных животных проявляется эритропени ей, лейкопенией, лимфопенией с увеличением количества атипичных и больших гранулярных и широкоплазменных лимфоцитов, нейтрофиле зом, моноцитозом и эозинофилией.

2. Реакция иммунной системы на СОЖ характеризуется угнетением фа гоцитоза, снижением уровня Т-лимфоцитов, увеличением уровня В лимфоцитов и иммунных комплексов, активизацией клеток, прини мающих участие в специфическом лиганд-рецепторном взаимодейст вии с гистамином и серотонином, стимуляцией клеточно опосредованных процессов (ГЗТ).

3. В повреждающем действии физиологических систем важную роль иг рают составляющие элементы СОЖ, представляющие собой: поверх ностно-активные вещества, аминоспирты и их производные, минераль ные масла, борная кислота.

4. Направленность и выраженность реакции физиологических систем (крови, иммунной системы и кожи) обусловлена особенностью хими ческого вещества.

5. Средства индивидуальной защиты кожи от СОЖ не полностью обеспе чивают стабильность состояния физиологических систем организма.

6. Критерии реагирования физиологических систем организма на химиче ские компоненты СОЖ целесообразно использовать при оценке безо пасности смазочно-охлаждающих жидкостей и при оценке эффектив ности защиты физиологических систем вновь создаваемыми средства ми индивидуальной гигиены у лиц, имеющих постоянный контракт с СОЖ.

- 22 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 1. Критерии реагирования физиологических систем организма на химиче ские компоненты СОЖ целесообразно использовать при оценке безо пасности смазочно-охлаждающих жидкостей и при оценке эффектив ности защиты физиологических систем вновь создаваемыми средства ми индивидуальной гигиены у лиц, имеющих постоянный контракт с СОЖ.

2. Моделирование клеточно-опосредованных процессов на СОЖ и ее компоненты целесообразно использовать при поиске и создании средств индивидуальной защиты у лиц, профессионально контакти рующих со смазочно-охлаждающими жидкостями СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Публикации в изданиях, рекомендованных ВАК РФ 1. Юшкова, Т.А. Об иммунологическом действии смазочно-охлаждающих жидкостей / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков, Т.А. Кошкина // Медицинская иммунология, 2002. - Т. 4. - № 2. - С. 341-342.

Монографии 1. Юшкова, Т.А. Биологические свойства смазочно-охлаждающих жидко стей / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков, Т.А. Кошкина. – Пермь: Изд-во ЭИС ОЦНТИ ПРУ, 2006. – 145 с.

Материалы выступлений на съездах и международных конференциях 1. Юшкова, Т.А. Характеристика экотоксикологических свойств СОЖ / Т.А. Юшкова, Т.А. Кошкина, В.В. Юшков // Актуальные проблемы фар мацевтической науки и образования: итоги и перспективы. - Пермь, 2001.

С. 179-180.

2. Юшкова, Т.А. Об иммунотоксическом действии смазочно охлаждающих жидкостей / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков, Т.А. Кошкина // Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы. - Пермь, 2001. – С. 180-181.

- 23 3. Юшкова, Т.А. Сравнительная оценка токсико-гигиенических свойств некоторых полупродуктов смазочных материалов / Т.А. Юшкова, В.В.

Юшков, Т.А. Кошкина // Смазочные материалы в промышленности. Ма териалы 2-й научно-практической конференции. - Пермь, 2001. - С. 35-37.

4. Юшкова, Т.А. Об аллергенных свойствах масел и кислот, входящих в состав смазочно-охлаждающих жидкостей / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков, Т.А. Кошкина // Иммунология Урала. Материалы 2-й конференции имму нологов Урала. - Пермь, 2002. - № 1 (2). - С. 69-70.

5. Юшков, В.В. Об аллергенных свойствах этаноламинов / В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, Т.А. Кошкина //Современные проблемы аллергологии, им мунологии и иммунофармакологии: Тез. докл. 5-го конгресса РААКИ, 12-14 ноября 2002 года. - Москва, 2002.-Т.2. - С. 688.

6. Юшкова, Т.А. Реакция лимфоцитов на СОЖ / Т.А. Юшкова Т.А.Кошкина // Фармация и здоровье: Мат. междунар. науч.-практ. конфе ренции (9-12 ноября 2005). – Пермь, 2005. – С.216-216.

7. Юшкова, Т.А. Характеристика влияния смазочно-охлаждающей жид кости на физиологические системы / Т.А. Юшкова, Т.А. Кошкина, В.В.

Юшков //Химия, технология, экология неорганических соединений: Сб.

науч.тр. РАН: НП «Неорганические материалы». – Пермский ун-т. – Пермь, 2006. – вып.7. – С.122-131.

8. Юшкова, Т.А. Модуляция ГЗТ компонентами СОЖ и влияние на нее средств индивидуальной защиты / Т.А. Юшкова, В.В. Юшков, Т.А. Кош кина // Russian Journal of Immunology. Российская научно-практическая конференция «Современные технологии в иммунологии: иммунодиагно стика и иммунотерапия». - Курск, 2006. - Volume 9. - Supplement 3. С. 90.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ГЗТ – гиперчувствительность замедленного типа ЗС – средство защиты кожи рук РОЛ-г – розеткообразующие лимфоциты, специфичные гистамину РОЛ-с – розеткообразующие лимфоциты, специфичные серотонину СОЖ – смазочно-охлаждающая жидкость СОЭ – скорость оседания эритроцитов уе – условные единицы ФАН – фагоцитарная активность нейтрофилов ФИ – фагоцитарный индекс ФЧ – фагоцитарное число ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы