Учебное учреждение “белорусский государственный медицинский университет” удк 616.127-091.8+61:340.6 туманов эдуард викторович морфофункциональные особенности миокарда в случае внезапной смерти при дил
1 Государственное ведущее высшее учебное учреждение “БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ” УДК 616.127-091.8+61:340.6 ТУМАНОВ ЭДУАРД ВИКТОРОВИЧ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МИОКАРДА В СЛУЧАЕ ВНЕЗАПНОЙ СМЕРТИ ПРИ ДИЛАТАЦИОННОЙ КАРДИОМИОПАТИИ 14.00.24. - судебная медицина Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МИНСК, 2002 2 Работа выполнена в Белорусском государственном медицинском университете Научный доктор медицинских наук, профессор, заслуженный руководитель:деятель науки Республики Беларусь Пучков Г.Ф.
Белорусский государственный медицинский университет, кафедра судебной медицины Научный кандидат медицинских наук Лазюк Д.Г.
консультант:
Научно-исследовательский институт кардиологии, лаборатория радиационной кардиологии Официальные доктор медицинских наук, профессор Яблонский М.Ф.
оппоненты:
Витебский государственный медицинский университет, кафедра судебной медицины доктор биологических наук Арчакова Л.И. Институт физиологии НАН Республики Беларусь, лаборатория электронной микроскопии Гродненский государственный медицинский Оппонирующая университет организация:
Защита состоится “27” декабря 2002 года в 14.30 на заседании совета по защите диссертаций Д 03.18.09 при Белорусском государственном медицинском университете, по адресу: 220116, г. Минск, проспект Дзержинского, 83, тел. 272 55 98.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского государственного медицинского университета.
Автореферат разослан “” 2002 г.
Ученый секретарь совета по защите диссертаций, кандидат медицинских наук, доцент А.И. Герасимович ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы диссертации. Дилатационная кардиомиопатия (ДКМП), будучи самой распространенной среди всех видов кардиомиопатий, встречается во всех странах мира (Н.М. Мухарлямов,1990, Report of the WHO/ISFC, 1980, 1996).
В соответствии с данными международной статистики для Европейского региона встречаемость ДКМП колеблется от 6 до 20 случаев на 100 населения, что в масштабах Республики Беларусь должно составлять 600 – человек (Д.Г. Лазюк, В.В. Чайковский, 2000.).
Однако, в связи с ретроспективным характером подобных исследований, предполагается, что истинное число больных ДКМП должно быть значительно выше (P. Richardson et all., Report of WHO/ISFC … 1996).
ДКМП встречается в любом возрасте, но в основном в 30 – 40 лет.
Мужчины болеют в 2,5 раза чаще, чем женщины (W.D. Edwards, 1987) Прогноз при ДКМП крайне неблагоприятный. Летальность у лиц, больных дилатационной кардиомиопатией, составляет 66 – 70 % за 10-летний период наблюдения (В.Г. Наумов, 1995, W. D. Edwards, 1987).
От момента предполагаемого первичного поражения миокарда до начала развернутых клинических проявлений, болезнь может протекать практически бессимптомно (J.L. Figlla, 1989), известны случаи наступления внезапной смерти без указаний на развитие сердечной недостаточности в анамнезе, на фоне мнимого соматического благополучия (Н.М. Мухарлямов, 1984;
Е.И.
Чазов, 1990;
E.G. Olsen, 1994;
O. Connell, 1994).
ДКМП может приводить к наступлению внезапной смерти у лиц наиболее трудоспособного возраста (от 16 до 51 года) на любой стадии болезни (А.М. Вихерт, 1989, O. Connell, 1994).
В ряде случаев, впервые диагноз ДКМП устанавливается лишь при секционном исследовании трупа (А.М. Вихерт, 1989;
O.Connell, 1994).
Так, по результатам исследования проведенного в Москве, (С.А.
Шевлягин, 1985) из числа больных, умерших в результате ДКМП, 31 % человек умерли в ВКНЦ АМН СССР, а 69 % – в других лечебных учреждениях, на работе или дома.
Из их числа 39 % больных умерли внезапно, в 13,8 % смерть наступила вследствие прогрессирования сердечной недостаточности, в 14,6 % причиной смерти явились тромбоэмболии легочной артерии и сосудов головного мозга.
Обстоятельства смерти 30 % больных не установлены.
Приводя к наступлению внезапной смерти как на работе и в быту, так и в лечебных учреждениях лиц наиболее трудоспособного возраста, дилатационная кардиомиопатия является одним из предметов изучения, как судебных медиков, так и патологоанатомов (А.М. Вихерт, 1989;
Г.Ф. Пучков, 1992).
Однако знакомство морфологов с этим разделом кардиопатологии можно признать недостаточным, что связано с трудностями диагностики дилатационной кардиомиопатии, как у секционного стола, так и при гистологическом исследовании. (А.М. Вихерт, 1989;
Г.Ф. Пучков, 1992).
Морфологические изменения в миокарде при ДКМП нередко рассматриваются как сочетание участков некроза кардиомиоцитов (КМЦ) с участками гипертрофии КМЦ с различной степенью фиброза миокарда, хотя ряд признаков (отсутствие маркеров воспаления, мозаичная картина гибели кардиомиоцитов, кальциевая перегрузка митохондрий, характер конденсации ядерного хроматина) отличают изменения в миокарде при ДКМП от классической картины некроза (Е.Н. Амосова, 1990;
С.И. Костин, 1995;
А.М.
Вихерт, 1989;
Г.Ф. Пучков, 1992).
До настоящего времени в публикациях, посвященных ДКМП, не отражен вид недостаточности миокарда при дилатационной кардиомиопатии, хотя анализ ультраструктурных исследований миокарда при различных патологических ситуациях позволяет полагать существование двух основных видов недостаточности миокарда - альтеративной и пластической (Ю.Г.
Целариус, 1980).
Во многом это обусловлено тем, что до сих пор не выявлено каких-либо общепризнанных специфических особенностей, свойственных этому заболеванию (Е.Н. Амосова 1990;
С.И. Костин 1995). Имеющиеся в настоящее время данные о гистологическом, электронно-микроскопическом и других видах исследования миокарда при ДКМП относительно незначительны по своему объему и зачастую противоречивы (Е.И. Чазов, 1989;
Е.Н. Амосова, 1990;
J. Grotz, 1989;
E.G. Olsen, 1994;
O. Connell, 1994).
Это не только затрудняет диагностику рассматриваемого заболевания, но и эффективность лечения, что во многом обусловлено недостаточностью знаний о патогенезе и этиологии данной формы поражения сердца.
В то же время только комплексное выявление органной, клеточной и субклеточной патологии при исследовании как аутопсийного материала, так и биоптатов достаточно большого количества больных ДКМП может помочь не только выявить маркеры ДКМП, но и выяснить звенья патогенеза этого и по сей день малоизученного поражения сердца.
Связь работы с научными программами. Настоящая работа выполнена в рамках Республиканской научно-технической программы «Кардиология» и является частью совместных научно-исследовательских работ кафедры судебной медицины БГМУ и НИИ Кардиологии по темам:
«Разработать методические подходы к неинвазивной диагностике и дифференцированному лечению больных дилатационной кардиомиопатией», №. Гос. регистрации –1997857, срок выполнения - 1995–1997 гг.
«Разработать методические подходы к лечению больных дилатационной кардиомиопатией с учетом противовирусного эффекта препаратов и их влияния на апоптоз кардиомиоцитов», №. Гос. Регистрации – 19982778, срок выполнения – 1998–2000 гг.
Цель и задачи исследования. Цель настоящего исследования – выявить морфофункциональные особенности миокарда при дилатационной кардиомиопатии на органном, клеточном и субклеточном уровнях.
В соответствии с поставленной целью решали следующие задачи:
1. Провести анализ ультраструктурных изменений кардиомиоцитов в биопсийном и секционном материале.
2. Определить вид недостаточности миокарда.
3. Провести качественный анализ ДНК кардиомиоцитов.
4. Выявить механизм гибели кардиомиоцитов.
Объект и предмет исследования. Объектом исследования послужил аутопсийный материал, взятый у умерших в результате ДКМП, а также биопсийный материал, полученный при трансвенозной эндомиокардиальной биопсии больных ДКМП.
Предметом исследования явилось сердце, фрагменты миокарда и ДНК кардиомиоцитов при ДКМП.
Гипотеза. На основании опыта личных наблюдений ДКМП и анализа прочитанной литературы выдвинута следующая гипотеза:
Элиминация части кардиомиоцитов при ДКМП осуществляется за счет развития процесса апоптоза.
Комплекс ультраструктурных перестроек в миокарде при ДКМП сопровождается развитием пластической недостаточности миокарда.
Методология и методы проведенного исследования. В основе работы лежит комплексное исследование, включившее в себя гистологический и электронно-микроскопический методы, а также качественный анализ характера рестрикции ядерной ДНК экстрагированной из КМЦ. Особенностью исследования явилось изучение как биопсийного и так аутопсийного материала больных ДКМП.
Научная новизна и значимость полученных результатов. В настоящей работе впервые изучены и проанализированы результаты комплексного исследования аутопсийного и биопсийного материала при ДКМП. Выявленные при этом данные развивают представление о патогенезе ДКМП и могут служить основой для объяснения появления хронической сердечной недостаточности при отсутствии препятствий кровотоку в коронарных артериях различного калибра в случае ДКМП.
Установлены стереотипные морфологические изменения кардиомиоцитов и их внутриклеточных структур, позволяющие идентифицировать выявленную недостаточность миокарда как пластическую, и связать комплекс морфологических перестроек миокарда при ДКМП с подавлением внутриклеточной регенерации и инволюцией цитоплазматических структур.
При анализе ультраструктурных изменений, а также изучения результатов качественного анализа ДНК кардиомиоцитов отмечены изменения, идентифицированные как апоптотические. Впервые показано, что в развитии ДКМП существенное значение имеет нарушение пластического обмена паренхимы сердечной мышцы, с последующей элиминацией части КМЦ путем апоптоза.
Практическая значимость полученных результатов. Полученные результаты позволяют разработать методологические подходы, направленные к дальнейшему изучению этиопатогенеза и совершенствованию морфологической диагностики ДКМП.
Материалы выполненного исследования также позволяют разработать подходы к медикаментозному лечению больных ДКМП.
На основании полученных данных разработаны методические рекомендации по секционной диагностике дилатационной кардиомиопатии, которые рекомендованы к практическому применению Белорусской государственной службой судебно-медицинской экспертизы.
Результаты исследования применяются в Бел НИИ Кардиологии для разработки методов диагностики и лечения дилатационной кардиомиопатии.
Теоретические и практические результаты исследования используются в учебном процессе, при проведении занятий по теме: «патология сердечно сосудистой системы», на кафедрах патологической анатомии с курсом судебной медицины, патологической физиологии и кафедре внутренних болезней Гомельского государственного медицинского института.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту 1. Ультраструктурные изменения кардиомиоцитов при ДКМП связаны с угнетением процессов внутриклеточного синтеза и инволюцией цитоплазматических структур.
2. Выявленная совокупность ультраструктурных изменений в миокарде при ДКМП является морфологическим эквивалентом пластической недостаточности.
3. В популяции кардиомиоцитов при ДКМП отмечается различная выраженность уровня синтетических процессов, что может быть обусловлено как неодновременным вовлечением клеток сократительного миокарда в патологический процесс, так и их физиологической гетерогенностью.
4. Элиминация части кардиомиоцитов (КМЦ) при дилатационной кардиомиопатии осуществляется путем апоптоза, о чем свидетельствуют отсутствие в миокарде воспалительной реакции, характерная морфология изменений КМЦ при ДКМП и результаты качественного анализа характера рестрикции ядерной ДНК экстрагированной из КМЦ.
Личный вклад соискателя. Автором выполнен весь комплекс (морфологических, гистологических, электрофоретических, элетронно микроскопических) исследований миокарда, написаны соответствующие разделы в совместных статьях.
Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертации доложены на: I Международном медицинском конгрессе молодых ученных. (Республика Украина, Тернополь, 1997);
Международном кардиологическом конгрессе «Кардиостим - 98» (Российская Федерация, Санкт Петербург, 1998);
Республиканской кардиологической конференции (Минск, 1997);
III Республиканской конференции сердечно-сосудистых хирургов (Минск, 1998;
, Минской городской судебно-медицинской конференции (Минск, 1998);
заседании экспертно-квалификационной комиссии при Главном государственном судебно-медицинском эксперте Республики Беларусь (Минск 2000);
совместном заседании Минского городского общества патологоанатомов и судебных медиков (Минск 2001).
Опубликованность результатов. В ходе выполнения диссертации опубликовано 15 научных работ, из них: 7 статей в рецензируемых журналах и сборниках научных трудов и 8 тезисов докладов на научных конференциях.
Лично автором опубликовано 2 статьи в сборниках научных работ и 2 тезисов докладов. Общее количество опубликованных материалов - 37 страниц.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста, состоит из введения;
общей характеристики работы с гипотезой;
основной части с обзором литературы по теме диссертации, описания общей концепции и основных методов исследования, а также изложения результатов собственного исследования;
заключения с выводами и приложения.
Список использованных источников содержит 257 публикаций, из них 120 отечественные и 137 зарубежных. Текст иллюстрирован 46 рисунками.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследовали секционный материал сердец 32 человек, умерших вследствие ДКМП и фрагменты миокарда правого желудочка, взятых прижизненно у 30 больных ДКМП.
Секционное исследование проводили на базе отдела общих экспертиз Управления Белорусской Государственной Службы Судебно-Медицинской Экспертизы по Минску и Минской области и Минского городского патологоанатомического бюро.
Вид поражения миокарда устанавливали на основании анализа клинических данных о течении болезни и результатов патологоанатомического исследования.
Прижизненные образцы миокарда, впервые в Республике Беларусь, получены на базе 4 городской клинической больницы г. Минска, в результате диагностических эндомиокардиальных биопсий 30 больных, которым на основании клинических и клинико-инструментальных данных был поставлен диагноз дилатационной кардиомиопатии по критериям J. Goodvin и в соответствии с рекомендациями ВОЗ.
Биопсии миокарда правого желудочка выполнены трансфеморальным доступом с предварительной катетеризацией направляющим катетером.
Биопсия миокарда выполнялась из трех зон: верхушка правого желудочка, межжелудочковая перегородка в средней трети и зоны выходного тракта правого желудочка.
Эндомиокардиальные биоптаты больных ДКМП исследовали путем изучения полутонких срезов и выявления ультраструктурной патологии электронно-микроскопическим методом, а также проводили качественный анализ характера рестрикции экстрагированной из КМЦ ядерной ДНК электрофорезом в агарозном геле.
Вскрытие трупов проводили методом полной эвисцерации. Для гистологического исследования брали кусочки тканей из средней трети переднебоковой стенки левого желудочка, средней трети межжелудочковой перегородки, средней трети стенки правого желудочка, из области верхушки сердца.
Для качественного изучения ДНК сердечной мышцы использовали биопсийный материал (10 наблюдений), и аутопсийный материал передней стенки левого и правого желудочков лиц умерших в результате ДКМП ( наблюдений).
Гистологические препараты окрашивались гематоксилином и эозином и пикрофуксином по Ван Гизону, с последующим изучением методами обзорной и поляризационной микроскопии при рабочих увеличениях 10 х 20 и 10 х 40.
Полутонкие срезы толщиной до 2 мкм окрашивали 2 % спиртовым раствором эозина в течение 25 - 30 минут на кипящей водяной бане. После окрашивания срезы дифференцировали, обезвоживали в спиртах, проводили через ксилол и заключали в бальзам.
Для проведения электронно-микроскопического исследования использовали биопсийный (30 случаев – 30 кусочков) и аутопсийный материал (5 случаев – 15 кусочков).
При проведении исследования кусочки миокарда размером 1 х 1 х 1 мм фиксировали в 2,5 % растворе глутаральдегида на 0,1 М фосфатном буфере.
Дофиксацию проводили в 1 % растворе четырехокиси осмия на фосфатном буфере.
Обезвоживание образцов проводили через серию спиртов восходящей концентрации.
Материал заливали смесью, состоящей из одной части пропиленоксида и одной смеси аралдитных смол Затем первую смесь сменяли второй, состоящей только из аралдитовых смол. Пропитанные кусочки переносили в пластиковые капсулы и заливали свежеприготовленной смесью аралдитных смол.
Полимеризацию осуществляли в термостате при температуре 60оС в течение 18 часов.
Контрастирование срезов в 5 % растворе уранилацетата на 70 % метаноле производили на пленке Parafilm. Ультратонкие срезы нарезали на ультратоме Reichert (Австрия) и окрашивали цитратом свинца Изучение изготовленных срезов проводили с помощью электронного микроскопа JEM - 100B (Jeol) при инструментальном увеличении в 5-30 х 103.
Для качественного изучения ДНК сердечной мышцы использовали фрагменты миокарда, полученные во время диагностических эндомиокардиальных биопсий, а также аутопсийный материал, забранный у лиц, умерших в результате ДКМП.
В качестве референтных были отобраны две группы. Первую составили больных, умерших в результате острого инфаркта миокарда. Во вторую группу были включены 5 человек, погибших в результате несчастных случаев и имевших здоровое сердце.
ДНК выделяли общепринятым в практике методом фенольной экстракции.
Экстрагированную ДНК анализировали электрофорезом в 1 % агарозном геле. В качестве анодного, катодного и гелевого буферов использовали трис ацетатный буфер. Лунки формировали с помощью пластиковой гребенки с шириной зубьев 5 мм. Электрофорез проводился в горизонтальной системе (модель Дэвиса) при комнатной температуре и постоянной силе тока 30 мА. В качестве источника питания применяли блок LKB-biochrom 2103 PS.
Агарозный гель окрашивали раствором бромистого этидия. Фрагменты ДНК визуализировали в проходящем ультрафиолетовом свете, помещая на стекло трансиллюминатора, фотографировали на негативную черно-белую пленку, используя желтый светофильтр.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ В ходе выполнения исследования проводился сбор и анализ анамнестических данных как больных, подвергнутых эндомиокардиальной биопсии, так и лиц умерших в результате ДКМП, для исключения возможного злоупотребления алкогольными напитками, наличия эндокринных заболеваний, употребления антибиотиков адриамицинового ряда, работы на вредных производствах и т. д.
В рассмотренных наблюдениях ДКМП служила фактором наступления внезапной смерти лиц наиболее трудоспособного возраста (34,4 ± 3,6 лет) как в специализированных стационарах, так и во внебольничных условиях (дома, на работе и т.д.), являясь одной из причин как патологоанатомических так и судебно-медицинских исследований.
При секционных наблюдениях ДКМП находили сердце округлой формы и со сглаженной верхушкой, увеличение массы (400 г и более) и размеров сердца (длина от основания до верхушки 13,8 ± 2,5 см, ширина у основания 13, ± 2,5 см, наибольшая окружность 35,2 ± 1,8 см). Наблюдались расширение полостей желудочков с увеличением периметра атриовентрикулярных отверстий (окружность левого - 0,7 ± 1,2 см, правого 15,6 ± 0,9 см) и преобладание дилатации желудочков над их гипертрофией. Отмечали отсутствие атеросклеротического поражения коронарных сосудов и органических изменений клапанного аппарата сердца и эндокарда, а также отсутствие системных заболеваний. Стенки коронарных сосудов интактны, либо с незначительным числом липидных пятен и полос, не препятствующих кровотоку.
При гистологическом исследовании отмечалось сохранение общей структуры ткани миокарда при отсутствии признаков острой альтерации КМЦ с развитием лейкоцитарной реакции. Склероз, гиалиноз мелких артерий и артериол миокарда при ДКМП отсутствовал или был минимальным, сосудистое русло миокарда полнокровно, иногда с явлениями престаза и стаза крови.
Показано наличие в одном поле зрения интактных, гипертрофированных КМЦ и КМЦ в различной степенью атрофии, при полиморфизме ядерного аппарата. Нарушение структуры ядер КМЦ является признаком, документирующим снижение синтеза РНК, и прямо зависит от силы действующего на клетки сократительного миокарда фактора. Формирование крупных неупорядоченных глыбок гетерохроматина возникают как при прямом подавлении повреждении матричного синтеза РНК, так и при избирательном подавлении РНК-полимеразы II (В.П. Скулачев, 1972) При изучении препаратов методом поляризационной микроскопии отмечено выраженное преобладание признаков хронической пластической недостаточности, представленных субсегментарными контрактурами в виде ярко светящихся поперечных полосок и глыбок между которыми сохранялась исчерченность миофибрилл, а также участками перинуклеарного кардиомиоцитолиза.
Признаки альтеративных повреждений не являлись доминирующими и были представлены в основном участками усиления анизотропии А-дисков без заметного укорочения изотропных дисков (контрактуры I степени) и сближения А-дисков за счет истончения изотропных дисков (контрактуры II степени).
Контрактуры III степени в виде исчезновения поперечной исчерченности и превращением миофибрилл в сплошной анизотропный конгломерат носили единичный характер. Признаки альтеративной недостаточности в виде контрактур I – II степени носили очаговый характер.
Анализ современных ультраструктурных исследований миокарда при различных патологических состояниях, выполненный в лабораториях патоморфологии Института цитологии и генетики СО АН СССР и Отдела патоморфологии и морфометрии Института клинической и экспериментальной медицины СО АН СССР, позволяет предполагать существование двух основных видов недостаточности миокарда - альтеративной и пластической.
Поиск ультраструктурных эквивалентов перестройки миокарда при различных видах его повреждения, проводившийся Новосибирской школой патоморфологов под руководством Ю. Г. Целариуса, позволил выявить стереотипные формы реакции сократительного миокарда при различных видах воздействия. Благодаря работам Ю. Г. Целариуса, Л. А. Семеновой, Л. М.
Непомнящих и др. были выделены два основных механизма развития недостаточности сердца – пластическая и альтеративная недостаточность.
Пластическая недостаточность миокарда имеет в своей основе снижение (или подавление) внутриклеточной регенерации и прогрессирующую инволюцию цитоплазматических структур. Эта форма недостаточности особенно характерна для декомпенсации сердца при хронических перегрузках и для ситуаций, связанных с некоторыми хроническими интоксикациями, например антибиотиками атрацилинового ряда Альтеративная недостаточность сердца возникает в результате ишемических или метаболических повреждений определенной группы клеток сердца.
В одном случае она возникает из-за острых повреждений КМЦ (травматического, токсического, инфекционно-аллергического характера), или опосредованного воздействия через сосудистую или нервно-эндокринную системы на сократительные клетки миокарда, которые временно или окончательно перестают участвовать в сократительной функции сердца.
Развитие и степень недостаточности сердца при этом зависят, главным образом, от общего объема поврежденного миокарда, а недостаточность сердца определяется как альтеративная.
В конкретных патологических условиях обе эти формы могут сочетаться и сменять друг друга. Тем не менее, их выделение и изучение морфологических проявлений необходимо для выяснения патогенеза сердечной недостаточности и должно способствовать разработке специальных методов диагностики, профилактики и терапии этих грозных состояний.
С целью выделения формы недостаточности миокарда при ДКМП, в выполненной нами работе особое внимание обращалось на характер ультраструктурных перестроек КМЦ при дилатационной кардиомиопатии.
При проведенном ультраструктурном исследовании сократительного миокарда при ДКМП выявлена картина сегрегации ядрышек с редукцией гранулярного компонента и распадом фибриллярной нуклеолеммы на короткие отрезки. Отмечено, что в цитоплазме КМЦ с патологическими изменениями ядрышек свободные рибосомы и полирибосомы практически не встречались.
Указанные изменения сопровождались модификацией структуры гликогена. Его -частицы вместо характерных округлых гранул с высокой электронной плотностью были представлены в виде нежной сети, образованной короткими ветвящимися цепочками частиц с низкой электронной плотностью.
Сочетание нарушений структуры ядрышек в КМЦ со значительным уменьшением свободных рибосом и полирибосом и присутствием в цитоплазме гликогена в -форме являются, в своей совокупности, морфологическим критерием, по которому можно судить о патологическом снижении синтеза белков в КМЦ при ДКМП.
Фрагментация ядрышек КМЦ, появляясь при нарушениях синтеза белка в КМЦ, четко воспроизводится в условиях дефицита АТФ, что позволяет рассматривать этот феномен как признак снижения энергетического обмена в клетках сократительного миокарда при ДКМП. Существует прямая зависимость между уровнем синтеза белков и энергетического обмена в клетках и содержанием гликогена, свободных рибосом и полирибосом в цитоплазме клеток. Уменьшение или исчезновение указанных компонентов клеточной цитоплазмы являются одними из ранних изменений, сопровождающих нарушение пластического синтеза в КМЦ (Л.М.
Непомнящих, Д.Е. Семенов, В.П. Туманов, Ю.Г. Целлариус, 1985).
При ДКМП в КМЦ наряду с изменениями ядерного аппарата обнаруживались очаговая деградация цитоплазмы как компонент патологии КМЦ, возникающий при угнетении пластического синтеза.
В цитоплазме таких КМЦ замечены плотные слоистые осмиофильные остаточные тельца, небольшие аутофагосомы и вторичные лизосомы.
Лизосомы имели округлую форму, были образованы осмиофильным зернистым компонентом в сочетании с каплевидным осмиофобным компонентом. Такие вторичные лизосомы регистрировались как на периферии, так и в центральной зоне КМЦ. В КМЦ с выраженными изменениями часть вторичных лизосом была лишена оболочки и осмиофобного компонента.
Остаточные тельца или «миелиновые фигуры», представляющие собой слоистые осмиофильные мембранные клубочки, локализовались по обе стороны сарколеммы КМЦ - в подсарколеммальном и межклеточном пространствах.
Встречались КМЦ с расширенной и запустевшей цитоплазмой в околоядерных и межфибриллярных пространствах. Наряду с КМЦ с обнажением цитоплазматического матрикса на большом протяжении и сохранившимися 2-3 миофибриллами в срезе, отмечались атрофичные КМЦ с компактной упаковкой немногочисленных сохранившихся миофибрилл и митохондрий.
Указанные изменения цитоплазмы носят инволюционный характер, что позволяет связать включение механизмов инволюции части цитоплазмы в КМЦ со снижением синтеза в них структурных белков.
На ультраструктурном уровне миофибриллы КМЦ при ДКМП отличались весьма демонстративными изменениями их организации. В части из них наблюдался различной степени выраженности лизис миофиламентов.
Отмечались как миофибриллы с менее плотной упаковкой, так и с пустотами, занимающими значительные участки саркомера. Одновременно регистрировалось увеличение расстояния между соседними миофибриллами с «оголением» цитоплазматического матрикса. Миофибриллы истончены, с контуром, напоминающим контур бамбукового ствола.
Встречались КМЦ с неправильной ориентацией истонченных миофибрилл, в части из которых выявлялись литические дефекты миофиламентов.
В другой части клеток миокарда миофибриллы приближались по толщине к норме и демонстрировали лишь фрагментированность Z-полосок со смещением Z-линий по отношению друг к другу с продольным расщеплением миофибрилл.
Изменение миофибрилл носило диффузный характер с их истончением и с сохранением ультраструктурной организации. В инволюционный процесс не вовлекалась Т-система. На электронограммах отмечались ее хорошо различимые трубочки и цистерны. Трубочки и концевые цистерны Т-системы особенно четко выделялись в цитоплазматическом матриксе из-за уменьшенного объема миофибрилл. В субмикроскопических очажках лизиса миофибрилл обнаруживались вторичные лизосомы.
Подобные изменения миофибрилл при ДКМП более всего соответствуют «диффузному миолизису», описанному при функциональной перегрузке сердца, при атрациклиновой кардиомиопатии, а также при дифтерийной интоксикации, т.е. в условиях снижения синтеза белков в КМЦ. Объясняют это подавлением ДНК-зависимого синтеза РНК и соответственно синтеза белка миофибрилл (Л.А. Семенова, Л.М. Непомнящих 1985;
Е.Н. Амосова, 1990;
Y.J.
Kang, Z.X. Zhou, G.W. Wang 2000 ).
В части КМЦ, расположенных как одиночно, так и группами, в подсарколеммальных зонах, в околоядерных пространствах отмечались неправильно ориентированные миофибриллы. Они располагались перпендикулярно, под углом к длиннику мышечных волокон или расходились веером от одной Z-линии и пересекались друг с другом. На электронограммах срезов миокарда при ДКМП среди продольно лежащих миофибрилл, при одинаковом расстоянии между Z-полосками, в одних саркомерах миофиламенты лежали параллельно, а в других, рядом расположенных саркомерах они были расположены поперечно либо под углом.
Отмеченная спирализация миофибрилл характеризует их анормальное расположение в КМЦ и является признаком, присущим пластической недостаточности миокарда.
Сопровождаемое такими изменениями внутриклеточных органелл, как фрагментация, коллапс ядрышек в ядрах КМЦ, лизис отдельных миофиламентов и саркомеров, нарушение взаимной ориентации миофибрилл являются морфологическим эквивалентом проявлений начальной стадии пластической недостаточности.
В миокарде при ДКМП наблюдались КМЦ с деконденсацией гетерохроматина в ядрах, тотальным набуханием митохондрий и лизисом целых миофибрилл в пределах одной клетки. В цитоплазматическом матриксе таких КМЦ митохондрии соприкасались друг с другом и с миофибриллами на минимальном протяжении.
Разрозненность, полиморфизм митохондрий и разобщенность их с миофибриллами и ядром – постоянно встречались в КМЦ с деградацией клеточных структур.
Тотальное набухание митохондрий с деструкцией крист и просветлением матрикса не зависело от повреждения других органелл и сочеталось как с нормальной структурой ядерного аппарата, так и с неравномерным расширением канальцев Т-системы саркоплазматического ретикулумма и значительным полиморфизмом ядер.
Если ориентироваться только на ультраструктурные изменения митохондрий, то можно было бы предполагать, что они находятся в состоянии выраженного аутолиза, однако сохранность других внутриклеточных клеточных органелл, на фоне которых отмечена деструкция митохондрий, дает основания для того, чтобы считать указанный процесс с нарушением функции самих митохондрий, а не аутолизом КМЦ в целом.
Подобный феномен отмечен при модели пластической недостаточности миокарда, вызванной действием антрациклиновых антибиотиков.
Отличительной чертой описанного феномена набухания митохондрий является отсутствие динамики процесса при статичности картины повреждения митохондрий на фоне сохраненной клеточной ультраструктуры.
Данные изменения митохондрий в виде их набухания и выраженной деструкции крист связывают с процессами, происходящими во время подготовки ткани для электронной микроскопии и связанными с прижизненным снижением стабильности митохондриальных мембран, что в свою очередь зависит от степени подавления синтеза клеточных белков, в том числе и структурных митохондриальных, в цитоплазме (Л.А. Семенова, Ю.Г.
Целариус, 1978, 1984, 1985;
В.П. Скулачев, 1996).
Если обсуждаемые изменения не выражены тотально, возникают в одной клетке или группе клеток, то можно с уверенностью утверждать, что обнаруженная морфологическая картина обусловлена возникшей прижизненно нестабильностью мембран митохондрий. Общая дестабилизация мембран происходит в КМЦ с наиболее выраженным подавлением синтеза внутриклеточных полипептидов и является более поздними проявлением пластической недостаточности цитоплазме (Л.А. Семенова, Ю.Г. Целариус, 1984, 1985).
Анализ приведенных данных позволяет обосновать следующий вывод:
комплекс морфологических перестроек миокарда при дилатационной кардиомиопатии связан с угнетением процессов внутриклеточного синтеза и прогрессирующей инволюцией цитоплазматических структур кардиомиоцитов.
Таким образом, перестройку ультраструктуры КМЦ при ДКМП можно расценить как инволютивный процесс, а совокупность изменений КМЦ рассматривать как проявление их пластической недостаточности, которая может быть использована как показатель нарушения синтеза белка в кардиомиоцитах при дилатационной кардиомиопатии.
Указанные выше изменения КМЦ были отмечены во всех исследовавшихся отделах миокарда.
Нами при электронно-микроскопическом исследовании в случае ДКМП на площади одного среза в различных КМЦ наблюдались повреждения различной степени выраженности: от минимальных изменений до глубоких необратимых изменений. КМЦ с изменениями чередовались с клетками сократительного миокарда с интактной ультраструктурой.
Выявленные мозаичность и разнообразие инволюционных изменений в КМЦ позволили нам предположить, что вовлечение отдельных КМЦ в патологический процесс при ДКМП происходит асинхронно, а инициирующий повреждения фактор действует на совокупность КМЦ разновременно, на уровне длительных подпороговых и пороговых воздействий. В результате этого уровень синтетических процессов в одних КМЦ не изменен, либо незначительно снижен, в других – выражено уменьшение этих процессов, а в части КМЦ процесс пластического синтеза подавлен полностью, что приводит к их прогрессирующей атрофии и элиминации.
В основе выявленного в проделанной нами работе различия в степени вовлечения в патологический процесс КМЦ при ДКМП может лежать так же физиологическая гетерогенность популяции КМЦ.
Отмеченные нами ультраструктурные изменения КМЦ при ДКМП в виде появления складчатости кариолеммы с маргинальной агрегацией глыбок гетерохроматина в крупнозернистые агрегаты у внутренней ядерной мембраны, инвагинаций с отшнуровкой хроматиновых фрагментов от ядра, разрежение цитоплазмы, появление остаточных телец и миелиновых фигур в цитоплазме и межклеточном пространстве идентичны описываемым при апоптозе изменениями клеток сократительного миокарда (J.F. Kerr, 1972;
M. Saton, 1985;
J. Narula, 1996, 1999).
Выявленные в выполненной работе полиморфизм, кооперация митохондрий в КМЦ при ДКМП, также позволяют расценить их как апоптотические. Это согласуется с данными, согласно которым, если в клетке количество митохондрий подвергшихся деструкции превышает некоторую критическую величину, то такая клетка элиминируется путем апоптоза (В.П.
Скулачев, 1996).
Известно, что расщепление ядерной ДНК клетки при апоптозе происходит на фрагменты, содержащие от 700, 250 - 200, 50 - 30 тысяч пар оснований до 200 - 180 пар оснований, что отлично от некроза, когда происходит рестрикция ядерной ДНК на короткие фрагменты длиной 200 - 50 и меньше пар оснований (А.А. Ярилин, 1996;
J. Namla, N. Haider, R.Virmani, 1996).
Проведенный нами качественный анализ характера рестрикции ядерной ДНК подтверждает наличие апоптоза КМЦ при ДКМП. Выявленная рестрикция ядерной ДНК части сократительных клеток миокарда при ДКМП на высоко средне- низкомолекулярные и промежуточные фракции, с распределением их согласно массе по всей длине дорожки при электрофорезе в агарозном геле, является характерной для апоптоза.
Суммируя вышеуказанные изменения, как отсутствие в миокарде воспалительной реакции, особенности ультраструктурных изменений КМЦ при ДКМП и результаты качественного анализа характера рестрикции ядерной ДНК, можно полагать, что элиминация части кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии осуществляется путем апоптоза.
Полученные нами данные могут служить основой для объяснения появления хронической сердечной недостаточности при отсутствии препятствий кровотоку в коронарных артериях различного калибра в случае ДКМП.
В выполненной работе показано, что в патогенезе ДКМП большое значение имеют нарушения пластического обмена паренхимы сердечной мышцы, приводящие к последующей элиминации части КМЦ путем апоптоза.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. Дилатационная кардиомиопатия является одной из причин наступления скоропостижной и внезапной смерти во внебольничных условиях (дома, на работе и т. д.) лиц наиболее трудоспособного возраста, что служит поводом назначения судебно-медицинских экспертиз [7;
14;
15].
2. В кардиомиоцитах при дилатационной кардиомиопатии отмечено угнетение процессов внутриклеточного синтеза белка. Морфологическим проявлением последнего является сочетание сегрегации ядрышек с редукцией гранулярного компонента и распадом фибриллярной нуклеолемы на короткие отрезки со значительным уменьшением в цитоплазме свободных полирибосом и появлением гликогена в - форме [7;
14;
11;
13].
3. Очаговая деградация цитоплазмы, аутофагоцитоз, появление плотных слоистых осмиофильных остаточных телец, небольших аутофагосом и вторичных лизосом в кардиомиоцитах свидетельствуют о подавлении пластического синтеза вследствие включения механизмов инволюции части цитоплазмы со снижением синтеза структурных белков. Выявленная совокупность изменений является морфологическим эквивалентом пластической недостаточности миокарда [7;
14;
10;
11].
4. При дилатационной кардиомиопатии наблюдается различная степень вовлечения кардиомиоцитов в патологический процесс: от минимальных до глубоких необратимых изменений. Поврежденные кардиомиоциты располагаются рядом с клетками сократительного миокарда с неизмененной ультраструктурой, что может быть обусловлено как неодновременным вовлечением их в патологический процесс, так и физиологической гетерогенностью их популяции [1;
3;
8;
11;
13].
5. Комплекс ультраструктурных перестроек в кардиомиоцитах в виде появления складчатости кариолеммы с маргинальной агрегацией глыбок гетерохроматина в агрегаты у внутренней ядерной мембраны, инвагинация и отшнуровка хроматиновых фрагментов от ядра, разрежение цитоплазмы, образование остаточных телец и миелиновых фигур в цитоплазме и межклеточном пространстве является проявлением апоптоза. Отсутствие апоптотических телец и их последующего фагоцитоза кардиомиоцитами и клетками макрофагального ряда обусловлено быстротой протекания апоптотического процесса или трудностью обнаружения всех стадий апоптотического процесса in vivo [3;
7;
6;
8;
14;
13;
15].
6. При качественном анализе характера рестрикции ядерной ДНК при дилатационной кардиомиопатии выявлено расщепление ее в сократительных клетках миокарда на высоко-, среде-, низкомолекулярные и промежуточные фракции с распределением их, в зависимости от массы, по всей длине дорожки при электрофорезе в агарозном геле. Результаты качественного анализа ДНК наряду с отмеченными ультраструктурными изменениями соответствуют апоптозу клеток сократительного миокарда при дилатационной кардиомиопатии [7;
14;
15].
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в научных журналах и сборниках научных работ:
1. Туманов Э.В., Лазюк Д.Г., Пучков Г.Ф., Крушевская Т.В., Сидоренко И.В., Петров Ю.П. / Возможности микроскопии биоптатов миокарда в дифференциальной диагностике дилатационной кардиомиопатии // Актуальные вопросы кардиологии: Сб. научн. тр. - Минск: Полибиг, 1997.- Вып.1- С. 213 217.
2. Туманов Э.В. Изменение структуры межмитохондриальных контактов кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии // Актуальные вопросы кардиологии: Сб. научн. тр. - Минск: Полибиг, 1997.- Вып. 1- С. 422-426.
3. Туманов Э.В. Ультраструктурная характеристика миокарда при дилатационной кардиомиопатии // Труды молодых ученых МГМИ. - Минск, 1998. - С.52-57.
4. Лазюк Д.Г., Туманов Э.В., Крушевская Т.В., Сидоренко И.В., Петров Ю.П., Буглова С.Е., Гайдук В.Н., Петровская М.Е. / Дилатационная кардиомиопатия: возможности консервативной терапии // Актуальные вопросы кардиологии: Сб. научн. тр. - Минск: Полибиг, 1997. - Вып.1. - С. 141-145.
5. Комиссарова С.М., Гуль Л.М., Дмитриева В.В., Губарь Е.Н., Туманов Э.В., Пучков Г.Ф., Карлович И.Л. / Сравнительная оценка клинических, функциональных и морфологических показателей для дифференциации дилатационной кардиомиопатии и ишемической болезни сердца // Актуальные вопросы кардиологии: Сб. научн. тр. - Минск: Полибиг, 1997. - Вып.1. - С. 122 126.
6. Лазюк Д.Г., Туманов Э.В., Крушевская Т.В., Петров Ю.П., Буглова С.Е., Гайдук В.Н., Петровская М.Е., Чайковский В.В. / Механизм развития дилатационной кардиомиопатии, подходы к патогенетической терапии // Актуальные вопросы кардиологии: Сб. научн. тр. - Минск: Полибиг, 1997. Вып.1. - С. 146-149.
7. Туманов Э. В., Лазюк Д.Г., Петров Ю.П. Апоптоз кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии // Мед. новости. - 1998. - N.12. - С.43-44.
Тезисы работ:
8. Туманов Э.В., Пучков Г.Ф., Лазюк Д.Г., Петров Ю.П. / Возможности электронной микроскопии биоптатов миокарда в диагностике дилатационной кардиомиопатии // Актуальные проблемы медико-биологической науки:
Материалы научн. сессии Белор. ин-та усоверш. врачей. - Минск, 1997. - С. 222 225.
9. Комиссарова К.С., Туманов Э.В., Лазюк Д.Г., Макеев В.В., Пучков Г.Ф., Губарь Е.Н., Дмитриева В.В., Дмитриева Л.М. / Морфофункциональные особенности миокарда при дилатационной кардиомиопатии // Вестн.
аритмологии. -1998.- N.8.- С. 93.
10. Туманов Э.В., Лазюк Д.Г., Пучков Г.Ф., Петров Ю.П. / Ультраструктурная характеристика патологии миокарда при дилатационной кардиомиопатии // Вестн. аритмологии. - 1998.- N.8.- С. 91.
11. Туманов Э.В. Электрономикроскопическое исследование сердца при дилатационной кардиомиопатии // 1 Междунар. конгр. студентов и молодых ученых. Тернополь, 1997.- С. 129-130.
12. Туманов Э.В. Межмитохондриальные контакты кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии // Актуальные проблемы современной медицины. - Минск, 1998. -С. 95-96.
13. Туманов Э. В., Лазюк Д.Г., Петров Ю.П. Трансвенозная биопсия миокарда в обследовании больных дилатационной кардиомиопатией // Хирургическое лечение мультифокальных поражений сердечно-сосудистой системы. - Минск, 1998. - С. 118-119.
14. Туманов Э.В., Доморацкая Т.Л., Пучков Г.Ф., Лазюк Д.Г. / Дилатационная кардиомиопатия среди причин скоропостижной смерти лиц молодого возраста // Патоморфология опухолей и инфекционных заболеваний человека:
Материалы IV Респ. Научн.-практ. конференции патологоанатомов Белоруссии.
– Минск, 2000.- С. 124-125.
15. Туманов Э.В., Пучков Г.Ф., Лазюк Д.Г., Герасимова Т.Н. Электронно микроскопическое исследование трансвенозных эндомиокардиальных биоптатов при дилатационной кардиомиопатии. // Материалы I съезда белорусской государственной службы судебно-медицинской экспертизы / БГСМ СМЭ. Минск, 2000. – С. 165 – 168.
РЭЗЮМЭ Туманаў Эдуард Вiктаравiч Морфафункцыянальныя асаблiвасцi мiякарда ў выпадку раптоўнай смерцi пры дылатацыйнай кардыямiяпатыi Ключавыя словы: дылатацыйная кардыямiяпатыя, аўтапсiя, бiяпсiя, мiякард, кардыямiяцыты, ультраструктурная паталогiя, пластычная недастатковасць мiякарда, якасны аналiз ДНК, апаптоз.
Аб‘ект даследавання: матэрыялы аутапiй мiякарда памершiх ад дылатацыйная кардыямiапатыi i бiапсiйны матэрiал, якi быў атрыманы прi трансвенознай эндамiякардыяльнай бiапсii хворых на дылатацыйнаю кардыямiапатыю.
Мэта даследавання: вывучэнне морфафункцыянальных асаблiвасцей мiякарда пры дылатацыйнай кардыямiапатыi на арганным, клетачным i субклетачным узроўнях.
Метады даследавання: марфалагiчны, гiсталагiчны, электронна мiкраскапiчны, якасны аналiз ДНК.
Апаратура: Мiкраскопы МБИ-6, МБС-10, электроны мiкраскоп JEM 100B (Jeol).
Комплексны аналiз даследаваных матэрыялаў дазволiл аргументаваць наступныя высновы:
Комплекс марфалагiчных перабудоў мiякарда пры дылатацыйная кардыямiапатыi звязан з прыгнятаннем працэсаў унутрыклетачнага сiнтеза i прагрэсiруючай iнвалюцыяй цытаплазматычных структур кардыямiацытаў.
Перабудову ультраструктуры кардыямiацытаў прi дылатацыйная кардыямiапатыi можна расценьваць як iнвалютыўны працэс, а сукупнаць змяненняў кардыямiацытаў разглядаць як праяўленне iх пластычнай недастатковасцi, якая можа быць выкарастатна ў якасцi крытэрыя парушення сiнтэзу бялка ў кардыямiацытах пры дылатацыйная кардыямiапатыi.
Уцягнене кардыямiацытаў у паталагiчны працэс пры дылатацыйнай кардыямiапатыi адбываецца асiнхронна. Ў вынiку гэтага ў папуляцыi кардыямiацытаў адзначаецца розная выяўленасць ўзроўня сiнтэтiчных працесаў у аснове чаго лежыць фiзiалагiчная гетэрагеннасць папуляцыi кардыямiацытаў.
Адсутнасць у мiякардзе запаленчай рэакцыi, асаблiвасць ультраструктурных змяненяў кардыямiацытаў пры дылатацыйная кардыямiапатыi i вынiкi якаснага аналiзу характэру рэстрыкцыi ядзернай ДНК дазваляюць меркаваць, што элiмiнацыя часткi кардыямiацытаў пры дылатацыйная кардыямiапатыi ажыцяўляецца шляхам апатозу.
Галiна выкарыстання: судовая медыцына, паталагiчная анатомiя, паталагiчная фiзiялогiя, кардыялогiя.
РЕЗЮМЕ Туманов Эдуард Викторович Морфофункциональные особенности миокарда в случае внезапной смерти при дилатационной кардиомиопатии.
Ключевые слова: дилатационная кардиомиопатия, аутопсия, биопсия, миокард, кардиомиоциты, гистология, ультраструктурная патология, качественный анализ ДНК, пластическая недостаточность миокарда, апоптоз.
Объект исследования: Материалы аутопсий миокарда умерших от дилатационной кардиомиопатии и биопсийный материал, полученный при трансвенозной эндомиокардиальной биопсии больных дилатационной кардиомиопатией.
Цель исследования: изучение морфофункциональных особенностей миокарда при дилатационной кардиомиопатии на органном, клеточном и субклеточном уровнях.
Методы исследования: морфологический, гистологический, элекронно микроскопический, качественный анализ ДНК.
Аппаратура: Микроскопы МБИ-6, МБС-10, электронный микроскоп JEM 100B (Jeol).
Комплексный анализ исследованных материалов позволил аргументировать следующие выводы:
Комплекс морфологических перестроек миокарда при дилатационной кардиомиопатии связан с угнетением процессов внутриклеточного синтеза и прогрессирующей инволюцией цитоплазматических структур кардиомиоцитов.
Перестройку ультраструктуры кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии можно расценивать как инволютивный процесс, а совокупность изменений кардиомиоцитов рассматривать как проявление их пластической недостаточности которая может быть использована как критерий нарушения синтеза белка в кардиомиоцитах при дилатационной кардиомиопатии.
Вовлечение отдельных кардиомиоцитов в патологический процесс происходит асинхронно. В результате этого в популяции кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии отмечается различная выраженность уровня синтетических процессов.
Отсутствие в миокарде воспалительной реакции, особенности ультраструктурных изменений кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии и результаты качественного анализа характера рестрикции ядерной ДНК, позволяют полагать, что элиминация части кардиомиоцитов при дилатационной кардиомиопатии осуществляется путем апоптоза.
Область применения: судебная медицина, патологическая анатомия, патологическая физиология, кардиология.
SUMMARY Tumanov Eduard Viktorovich Morphofunctional peculiarities of myocard in case of sudden death in dilated cardiomyopathy Key words: dilated cardiomyopathy, autopsy, biopsy, myocard, cardiomyocytes, ultrastructural pathology, qualitative analyses of DNA, plastic myocard insufficiency, apoptosis The object of study: Materials of myocard of autopsies of the dived persons with dilated cardiomyopathy and biopsy materials got on transvenosus endomyacardial biopsy of the patients with dilated cardiomyopathy.
The purpose of study: Investigation of morphofunctional features of myocardial muscle in dilated cardiomyopathy in the organ, cellular and subcellular levels.
The methods of study: morphological, hystological, electron microscopy and qualitative analysis of DNA.
Instruments: microscopes МБИ-6, МБС-10, electron microscope JEM - 100B (Jeol).
The complex analysis of the researched findings gives the possibility to make the following conclusions:
The complex of morphological changes in myocard in case of dilated cardiomyopathy was connected with the depression of intracellular synthetic processes and progressive involution of cytoplasm structures in cardiomyocytes.
Restructuring of cardiomyocytes ultrastructure in dilated cardiomyopathy can regarded as the feature of their plastic insufficiency which can be used as the criterion of the protein synthesis impairment in dilated cardiomyopathy.
Cardiomyocytes involvement in the pathologic process in dilated cardiomyopathy occurs asynchronously. As a result, there were different marked levels of synthetic processes in the population of cardiomyocytes in dilated cardiomyopathy.
Absence of inflammatory reaction in the myocard, peculiarities of the ultrastructural changes of cardiomyocytes in dilated cardiomyopathy and by the results of qualitative analyses of characteristic nuclear DNA restriction. Character gives the possibility to suppose the elimination population of cardiomyocytes part in dilated cardiomyopathy to be carried out by apoptosis.
Field of application: forensic medicine, pathologic anatomy, pathologic physiology, cardiology.