Производство кормовых добавок и ветеринарных средств на основе донных осадков и минерализованной воды содовых озер
На правах рукописи
КУЛЫРОВА АННА ВАЛЕРОВНА ПРОИЗВОДСТВО КОРМОВЫХ ДОБАВОК И ВЕТЕРИНАРНЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ДОННЫХ ОСАДКОВ И МИНЕРАЛИЗОВАННОЙ ВОДЫ СОДОВЫХ ОЗЕР 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)
Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
Москва 2011
Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) Н а у ч н ы й к о н с у л ь т а н т : доктор биологических наук, профессор Тихонов Игорь Владимирович О ф и ц и а л ь н ы е о п п о н е н т ы : доктор биологических наук, профессор Мирзаев Микаиль Нурбагандович;
доктор биологических наук, профессор Еремец Владимир Иванович;
доктор биологических наук, профессор Цыбанов Содном Жамьянович В е д у щ а я о р г а н и з а ц и я : ФГУ «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ ВГНКИ)
Защита состоится 8 декабря 2011 года в « 14 » часов на заседании диссертационного совета Д.220.042.01 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) по а д р е с у : 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23;
тел.: (495)-377-93-
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) Автореферат разослан «_» _ 2011 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор биол. наук, профессор Т.Н. Грязнева 1.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. В Забайкалье степень континентальности составляет 85-90% в связи с тем, что оно расположено на юге Восточной Сибири в поясе умеренных широт, в самом центре обширного Евроазиатского континента на значительном удалении от морей и океанов (Обязов, 1994, 1996;
Власов и др., 1967;
Шабынин и др., 2002;
Ульзетуева, 2006;
Намсараев и др., 2007). В последние годы на данной территории наблюдается тенденция аридизации климата, и одной из причин является засыхание водных объектов, соответственно, для поддержания водного баланса в природе этой провинции необходимо сохранять их, и в том числе содовые озера.
В Забайкалье, кроме климатической продолжает сохраняться экономическая нестабильность, и сельское хозяйство данного региона в своем развитии терпит определенные хозяйственные затруднения. Поэтому актуальными остаются поиск, изучение и оценка возможности использования природных ресурсов для нужд сельского хозяйства и ветеринарии, в частности, животноводческих хозяйствах проблема заболеваний мочеполовой системы, обмена веществ, травмы кожных покровов животных встречаются достаточно часто и достигают 40-60% (Намсараев, Очиров и др., 1999;
Зюбин и др., 2007;
Субботин, Данилевская, 2011).
Актуальность данной работы заключается в установлении причины засыхания содовых озер и разработке пути их устранения с помощью методов промышленной биотехнологии с пользой для сельского хозяйства, в оценке возможности использования природных ресурсов для нужд ветеринарии.
В настоящей работе представлены результаты осуществленного поиска природных ресурсов, содержащих сбалансированные биологически активные вещества, к которым относится содержимое содовых озер – микробные маты, донные осадки и минерализованные воды. Также результаты разработки технологии добычи этих ресурсов и промышленного производства из них эффективных биологически активных кормовых добавок и ветеринарных средств, полученных в природных условиях без искусственной стимуляции фармакологическими препаратами, т.е. с сохранением их природной биоструктурной особенности, микробиологических и физико-химических параметров.
Себестоимость этих ресурсов на 1-2 порядка ниже, чем те средства, которые в настоящий момент используются в ветеринарной практике на сельхозпредприятиях. Кроме того, результаты данной работы дали начало новому научному направлению в биотехнологии – водная биотехнология, которое использует водные биологические объекты (донные осадки, минерализованные воды, микробные маты, бактерии и т.д.) для промышленного производства биологически активных кормовых добавок и ветеринарных средств.
Целью работы является разработка технологии производства биологически активных добавок и ветеринарных средств на основе минерализованной воды и донных осадков содовых озер Забайкалья.
Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи.
1. Провести гео-экологические исследования содовых озер Забайкалья для установления причины их высыхания и сделать описание местоположения озер.
2. Изучить физико-химические параметры, химический и микробиологический состав минерализованной воды, донных осадков и микробных матов, скорость деструкционных процессов в осадках содовых озер Забайкалья для оценки их биологической активности.
3. Исследовать сезонные динамики физико-химических параметров минеральной воды, донных осадков с микробными матами и численности микроорганизмов для установления наиболее эффективного времени их добычи.
4. Изучить токсичность минерализованной воды, донных осадков и микробных матов содовых озер Забайкалья по отношению к организму животного.
5. Оценить эффективность лечебно-профилактических свойств донных осадков с микробными матами содовых озер Забайкалья для применения их в качестве кормовой добавки и ветеринарного аппликационного средства при алиментарной дистрофии незаразной этиологии, эндометритах и порезах кожи животных.
6. Оценить эффективность минерализованной воды содовых озер Забайкалья как лечебно оросительного раствора при эндометритах и порезах кожи животных.
7. Разработать щадящую технологию добычи минерализованной воды и донных осадков с микробными матами из содовых озер Забайкалья.
8. Разработать технологию производства из донных осадков и микробных матов содовых озер Забайкалья биологически активной кормовой добавки и ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО вода» с сохранением их природной биоструктурной особенности, физико-химических параметров, микробиологических и химических свойств.
9. Разработать методы контроля на биологически активную кормовую добавку и ветеринарное аппликационное средство «ДОСО» и биологически активную минеральную воду «ДОСО-вода» для животных и установить сроки их годности при процессе хранения.
10. Изучить экономические эффективности технологии: добычи воды и донных осадков из содовых озер Забайкалья, производства из них «ДОСО» и «ДОСО-вода» и применения их при алиментарной дистрофии незаразной этиологии, эндометритах и порезах кожи животных.
11. Разработать нормативную документацию на созданные технологии по добыче донных осадков и минеральной воды из содовых озер Забайкалья и производство из них «ДОСО» и «ДОСО-вода» (Регламент, ТУ), методические указания и рекомендации по их применению.
12. Произвести пробную партию опытных серий и получить заключение о соответствии препаратов техническим условиям.
Научная новизна.
1. Впервые проведено описание местоположения 25 содовых озер Забайкалья (из числа представленных в диссертации) и анализ физико-химических, химических и микробиологических параметров воды, донных осадков и микробных матов, также доказано, что содовые озера являются природными биореакторами, действие которого основано на жизнедеятельности алкалофильных микроорганизмов.
2. Опытным путем впервые доказано лечебно-профилактическая эффективность донных осадков с микробными матами и минерализованной воды содовых озер Забайкалья на овцах, козах и коровах с алиментарной дистрофией, эндометритами и ранами, также их не токсичность на белых беспородных мышах и овцах. На основании исследования предложен биотехнологический путь использования в промышленных масштабах донных осадков с микробными матами в качестве кормовых добавок и ветеринарно-аппликационного средства, а минерализованной воды в качестве лечебно-оросительного раствора.
3. Впервые разработана технологическая линия производства «ДОСО» из донных осадков с микробными матами и «ДОСО-вода» из минерализованной воды содовых озер Забайкалья с сохранением природной биоструктурной особенности, микробиологических и физико биохимических параметров, а также методы их контроля.
4. Впервые доказана стабильность физико-химических параметров, химических и микробиологических свойств донных осадков с микробными матами и минерализованной воды содовых озер Забайкалья в процессе хранения.
5. Доказана экономическая эффективность технологии добычи из содовых озер Забайкалья минерализованной воды и донных осадков, производства кормовой добавки и лечебно-ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода» и их применения в качестве лечебно-профилактических средств для животных.
6. На основании настоящих исследований определено новое направление в биотехнологии – «Водная биотехнология», где в полной мере используются составляющие водного объекта (вода, донные осадки, микробные маты, микроорганизмы, соли, ионы и т.д.) в качестве кормовых добавок и ветеринарных средств в лечебно-профилактических целях.
Практическая значимость.
1. В результате проведенных более 20 научных экспедиций по содовым озерам Забайкалья (из них международных и 9 всероссийского значения) установлено, что многие содовые озера засыхают или заболачиваются от высокой минерализации воды и избыточного количества донных осадков, из-за забивания жил, которые питают озера подземными водами.
2. Предложенный вид ограниченной добычи донных осадков и минерализованной воды с содовых озер Забайкалья разработан в качестве природоохранного аспекта для сохранения данных озер как важного участника круговорота воды в атмосфере этого региона, характеризующегося аридным климатом.
3. Разработана щадящая производственно-технологическая линия фасовки и розлива донных осадков и минерализованной воды содовых озер Забайкалья, которая сохраняет их природные биоструктурные особенности, микробиологические и физико-биохимические параметры, а также лечебно-профилактические свойства.
4. Впервые разработанная из донных осадков с микробными матами содовых озер Забайкалья «Биологически активная кормовая добавка и ветеринарно-аппликационное средство «ДОСО»» (ТУ 9365-001-00497182-2008 Гос. Рег. №001033 в группе КГС-С 14 и ОКС 65120, код ОКП 936500 от 25.11.08г.) применена в качестве кормовой добавки при алиментарной дистрофии и аппликационного средства при эндометритеах и ранах.
5. Впервые разработана из минерализованной воды содовых озер «Биологически активная минеральная вода «ДОСО-вода» для животных» (ТУ 9337-002-00497182-2009 Гос. регистрация № 046/001048, гр. КГС-Р3, ОКС 11.220, ОКП 933740, 16.11.09 г.) и применена в качестве лечебно оросительного средства для промывания ран, шейки матки и влагалища при эндометрите.
6. Произведена пробная партия промышленных серий «ДОСО» и «ДОСО-вода», имеется заключение о соответствии препаратов техническим условиям.
7. Разработаны и утверждены 2 комплекта нормативных документов, регламентирующих опытное производство, контроль и применение биологически активных кормовой добавки и ветеринарного аппликационного средства «ДОСО» и минеральной воды «ДОСО-вода» для животных.
8. Разработаны и утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН (от 16.03.10) методические рекомендации по применению биологически активной кормовой добавки «ДОСО» для сельскохозяйственных животных, биологически активного ветеринарно-аппликационного средства «ДОСО», биологически активной минеральной воды «ДОСО-вода» для животных.
9. Разработаны и утверждены на заседании секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол №1 от 26 марта 2009 г.) и в ФГОУ ВПО МГАВМиБ имени К.И. Скрябина (от 31.03.2010 г.) методические указания по применению биологически активной кормовой добавки «ДОСО» для сельскохозяйственных животных, биологически активного ветеринарно-аппликационного средства «ДОСО», биологически активной минеральной воды «ДОСО-вода» для животных.
10. Результаты научных исследований по разработке производства кормовых добавок и ветеринарных средств на основе минерализованной воды и донных осадков содовых озер используются в учебном процессе по дисциплине «Биотехнология» в ФГОУ ВПО МГАВМиБ.
На защиту выносятся следующие положения и результаты 1. Теоретическое и экспериментальное обоснование состава и лечебно-профилактические свойства донных осадков с микробными матами и минерализованной воды содовых озер Забайкалья в качестве кормовой добавки и лечебно-ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода».
2. Результаты исследования физико-химических параметров воды, химического и микробиологического состава воды, донных осадков и микробных матов и их сезонные динамики.
3. Результаты исследования скорости деструкционных процессов в донных осадках и микробных матах содовых озер Забайкалья как основы их биологической активности.
4. Технологии добычи воды и донных осадков с микробными матами с содовых озер Забайкалья и производства из них «ДОСО» и «ДОСО-вода» с сохранением природной биоструктурной особенности, микробиологических и физико-биохимических параметров.
5. Результаты разработки методов контроля биологически активной кормовой добавки и ветеринарного аппликационного средства «ДОСО» и биологически активной минеральной воды «ДОСО-вода» для животных.
6. Результаты оценки применения «ДОСО» и «ДОСО-вода» в качестве лечебно-профилактических средств при алиментарной дистрофии незаразной этиологии, эндометритах и порезах кожи животных.
7. Результаты оценки экономической эффективности технологии добычи с содовых озер Забайкалья воды и донных осадков, производства из них кормовой добавки и лечебно-ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода» и применения их в качестве лечебно-профилактических средств.
Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертационной работы изложены в отчетах НИР ФГОУ ВПО МГАВМиБ имени К.И. Скрябина и в 54 печатных работах, а также доложены и утверждены на секции и президиуме «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины РАСХН (2009,2010, 2011). Материалы диссертации доложены на 2-й Международной конференции «Забайкалье на пути к устойчивому развитию: экология, ресурсы, управление» (Чита, 2001);
Всероссийской научной конференции с международным участием «Биологически активные добавки и здоровое питание» (Улан-Удэ, 2001);
Международной научно практической конференции «Научное обеспечение устойчивого развития АПК Восточного Забайкалья» (Чита, 2002);
Всероссийской конференции «Биоразнообразие и функционирование микробных сообществ водных и наземных систем Центральной Азии» (Улан-Удэ, 2003);
Всероссийской конференции «Шаг в будущее» (Москва, 2004);
на Молодежном академическом форуме «Молодежь и наука Сибири» (Чита, 2005);
Научно-исследовательской конференции по проблемам развития овцеводства и козоводства в Сибирско-дальневосточном регионе (Чита, 2004, 2005, 2006, 2007);
Международной конференции «Стратегия ведения овцеводства, козоводства, коневодства и других традиционных отраслей животноводства Сибири в современных экономических условиях» (Чита, 2004, 2005, 2006, 2007);
Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию ФГОУ ВПО МГАВМиБ имени К.И. Скрябина «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Москва, 2009);
Международной научно-практической конференции «Роль мелиорации в обеспечении продовольственной и экологической безопасности России» (Москва, 2009);
Международной научно-практической конференции «Адаптация и становление физиологических функций у животных» (Москва, 2010).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 54 научных работ, в том числе в научных журналах рекомендованных ВАК;
3 методических рекомендации, утвержденных Отделением ветеринарной медицины РАСХН;
3 методических указания, утвержденных на секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины РАСХН и ФГОУ ВПО МГАВМиБ имени К.И. Скрябина.
Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены в машинописном тексте, состоят из введения, обзора литературы, результатов исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Объект и материалы исследования: минерализованная вода, донные осадки и микробные маты содовых озер Забайкалья. Всего было исследовано более 100 озер Селенгинской Даурии, Ононской и Борзинской долины;
представлены в диссертации 47 озер, в реферате – 11 озер с наиболее яркими показателями физико-химических, микробиологических и др. параметров.
Работа выполнена в период с 1998 по 2011 гг. на кафедре Биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ имени К.И. Скрябина (г. Москва), Агинском филиале ВСГТУ – ФГОУ ВПО ВСГТУ (пос.
Могойтуй, АБО), Агинском филиале БГСХА – ФГОУ ВПО БГСХА (пос. Могойтуй, АБО), Забайкальском аграрном институте – филиал ФГОУ ВПО ИрГСХА. Эксперименты на животных проводились в хозяйствах Агинского Бурятского округа (Забайкальский край).
Исследования по теме диссертации были проведены в 4 этапа:
I этап –Гео-экологические исследования содовых озер Забайкалья и изучение физико-химических, микробиологических и токсикологических параметров воды, донных осадков и микробных матов и их сезонные динамики;
II этап - Оценка эффективности лечебно-профилактических и токсикологических свойств воды и донных осадков с микробными матами на животных;
III этап - Разработка технологии добычи минерализованной воды, донных осадков с микробными матами из содовых озер Забайкалья и производства из них кормовых добавок и ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода»;
IV этап - Изучение экономической эффективности технологии добычи, донных осадков с микробными матами и воды из содовых озер Забайкалья, производства и применения «ДОСО» и «ДОСО-вода».
Методы исследований Температуру воды и донных осадков измеряли стеклянным ртутным (Россия) и сенсорным (Португалия) термометрами. Значение рН и Eh в придонном иле измеряли при помощи полевого иономера Prima Checkmate (фирмы «Mettler Toledo»), также использовали походный иономер И-102, стеклянный и стандартный игольчатый платиновый электрод ЭПВ-1 в паре с насыщенным хлорсеребряным электродом сравнения 90-02. Соленость и общую минерализацию определяли кондуктометром ОК-104. Кислород в воде определяли методом Винклера (Резников и др., 1970).
Содержание растворенного в воде СО3, НСО3-2 и общую щлочность определяли титрованием 0,05 Н НCl в присутствии индикаторов фенолфталеина и метилового оранжевого с метил-красным (Кузнецов, Романенко, 1974). Радиоактивность меченых соединений определяли на жидкостном сцинтилляционном счтчике Rakbeta (Швеция). Интенсивность метаногенеза измеряли с помощью С-веществ: бикарбоната, ацетата Nа, метиламина и формиата Nа (Беляев, Иванов, 1975). Для определения скорости сульфатредукции использовали радиомеченый 35S-Na2SO4. Лабораторная обработка радиоизотопного эксперимента была проведена в Институте микробиологии РАН по известной методике (Иванов, 1959). Химический анализ воды содовых озер проводили общепринятым в гидрохимии методом (Алекин и др., 1986), сульфаты – турбидиметрическим методом с BaSO4, хлориды – аргентометрическим методом Мора (Аринушкина, 1970), сульфиды – колориметрическим с парафенилендиамином (Trper, Schlegel, 1989). Концентрации ионов Na+ и К+ – атомно-абсорбционным спектрометром SOLAAR M6 (США), Ca2+ – комплексометрическим методом с Трилоном Б в присутствии мурексида, Mg2+ – по разнице между результатами титрования суммы Ca2+ и Mg2+ в присутствии эриохрома и результатами определения Ca2+ (Резников и др., 1970).
Химический анализ донных осадков проводили по методу валового анализа минеральной части почвы (Аринушкина, 1980);
карбонаты, гидрокарбонаты, хлориды, катионы кальция определяли титрованием (Резников и др., 1970), сульфаты – турбидиметрическим (Аринушкина, 1980), сульфиды – колориметрическим (Truper, Schlegel, 1964). Органический углерод (Сорг) - по методу мокрого сжигания (Терентьев, 1966) и Тюрина в модификации Никитина (Аринушкина, 1980). Содержание общих углеводов определяли колориметрически с использованием фенол-сернокислого реактива (Орлов Д.С., Гришина А.А. Практикум по химии, 1981) и по реакции с дифениламином и соляной кислотой (Методы химии углеводов, 1967;
Захарова, Косенко, 1982). Содержание целлюлозы анализировали колориметрическим методом по Даи и Апдейграф (Daju, 1932;
Updegraff, 1966).
Классификацию вод содовых озер Забайкалья проводили на основе максимального содержания ионов по Алекину (Алекин и др., 1987). Учет биологической концентрации микроорганизмов проводили методом кратных разведений. Значения рН и минерализации, соответствующие гидрохимии озер, устанавливали 10%-ным карбонат-бикарбонатным буфером (9:1) и NaCl. Учт численности целлюлозоразлагающих, протеолитических, амилолитических, липолитиков, бродильщиков и метанобразующих бактерий вели на среде Пфеннига (1965). Численность сульфатредукторов определяли на жидкой среде Видделя (1981). Сапрофитные бактерии определяли (г/л) на среде РПА (2,5%). Температурные диапазоны развития бактерий устанавливали в градиентном термостате.
Амилолитическую активность определяли по образованию зон деструкции крахмала в реакции с йодсодержащими реагентами. Протеолитическую активность определяли по разжижению желатиновых дисков и разложению и использованию в качестве ростового субстрата белка казеина.
Скорость разложения белка и целлюлозы определяли аппликационным методом Мишутина и Петровой с использованием в качестве белкового субстрата желатины фотобумаги, целлюлозы – фильтровальной бумаги (Носова, Гельцер, 1984;
Теппер и др., 1987). Статистическую обработку при определении численности бактерий проводили по таблице Мак-Креди (Большой практикум по микробиологии, 1962). Определение внешнего вида донных осадков и цвета воды содовых озер производили визуально. Определение токсичности донных осадков, воды и матов содовых озер проводили на белых беспородных мышах и на овцах. Определение массовой доли влаги проводили по ГОСТ 24061. Определение адсорбционной способности проводили по ГОСТ 4453-74. При определении антагонистической активности были использованы тест-штаммы Shigella sonnei, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Candida albicans на плотных питательных средах (испытания проводят по ГФ XI, вып. 2), контроль визуальный. Контаминации бактериями семейства Enterobacteriaceae устанавливали по ГОСТ 29184 и стафилококковой микрофлорой определяли по ГОСТ 10444.2, сапрофитной и дрожжевой микрофлорой – по ГОСТ 30518 (ГОСТР 50474), ГОСТ 10444.12, ГОСТ 10444.15 и СТ СЭВ 4247. Диагностику дистрофии, эндометритов и ран у животных проводили общеизвестными клиническими и лабораторными методами (Попов, 1969;
Дюденко, 1974;
Алтухов и др.,1990;
Тимофеев и др.,2006), ГОСТ 7763-71, 2874-82, 18691-73, 7937-74 и т.д. При лечении гинекологических заболеваний (эндометриты) и ран применяли по известной методике:
аппликационный – грязелечение по физиотерапевтическим методам В.К. Копылова (1973), А.Н.
Вяткина (1978) и оросительный –метод рефлекторной физиотерапии (Зюбин, 2007), алиментарной дистрофии – общеизвестные методы (АА. Кунаков и др., 1990). При переработке сырья из воды, донных осадков и микробных матов содовых озер в препарат «ДОСО» и «ДОСО-вода» использовались стандартные методы ГОСТов.
Результаты собственных исследований Гео-экологические исследования содовых озер Забайкалья Забайкалье относится к провинции с резко континентальным и аридным климатом. В данной провинции континентальные воды, в том числе воды содовых озер, принимают активное участие в кругообороте воды в природе, и циклические изменения их в виде усыхания и возобновления делают климат Забайкалья еще более экстремальным и сухим, и наоборот. Соответственно, современное состояние содовых озер является важным экологическим фактором этой провинции, а их донные осадки и минерализованные воды относятся к возобновляемым природным ресурсам.
В результате многолетних экспедиционных исследований было проведено описание географического местоположения содовых озер Забайкалья и установлено, что их образование и распространение зависят от геологии рельефа местности и образуются в замкнутых понижениях суши, имеют округло-овальные формы, низкие и пологие берега, ровное и слабо понижающееся к центру дно.
Наблюдения за климатическими факторами данной провинции показали, что минимум атмосферных осадков приходится на третью декаду июня и длится до второй декады августа. И в этот же период времени года в содовых озерах донные осадки имеют высокую дисперсность (коллоидность) и биологическую активность, а водная толща – высокую щелочность (до рН 11-12) и минерализацию.
Экологические исследование содовых озер Забайкалья показали, что многие озера находятся в состоянии усыхания или их воды выведены из природного кругооборота, что делает климат этой провинции более аридным. Причиной этих негативных экологических процессов являются высокая щлочность и минерализация воды, а также интенсивное накапливание донных осадков, из-за которых происходит забивание водных жил, питающих их грунтовыми водами. В основе всех этих причин является своеобразный климат провинции, где годовой объем атмосферных осадков составляет 250-350 мм, и резкие перепады высоких положительных (+30…45С) и отрицательных ( 30…-50С) температур, осенне-весенние ветра (хиусы), которые сносят в озера остатки прибрежной растительности, соли и т.д. В связи с чем, для сохранения этих озер в Забайкалье необходимо высвобождать их от донных осадков и деминерализовать воду за счет добычи донных осадков и минерализованной воды. Наиболее оптимальным периодом добычи воды и донных осадков с содовых озер Забайкалья являются июнь–июль, т.к. в этот период времени года донные осадки и минерализованные воды наиболее биологически активны, пологие берега озер сухие и не требуют особой подготовки при процессе их добычи.
Характеристика воды содовых озер Забайкалья Воды содовых озер Забайкалья имеют экстремально высокие значения рН (8,5-11,9) в сочетании с высокой минерализацией (до 88,6 г/л), щелочностью (до 9,6 г/л) и низким окислительно восстановительным потенциалом (до 102), при этом основное количество исследованных озер по минерализации вод (по классификации Валяшко) относится к солоноватым. Цвет воды в озерах варьирует от прозрачного (Хилганта, Дабаса, Борзинское соленое и т.д.) до белесо-молочного цвета (Цайдам, Цаган-Нор, Кункурское и т.д.). Результаты исследования физико-химических параметров воды представлены в табл. 1.
Т абл и ца 1. Физико-химическая характеристика водной толщи содовых озер Забайкалья Общая Название Еh, T, О2, Соленост Минерализ рН щелочность, мВ С мг/л ь, г/л озера ация, г/л г/л Шубутэ-Нур 11,9 102 25,0 5,8 0 10,0 8, Борзинское Соленое 10,15 60 22,0 6,9 76 88,61 9, Горбунка 9,91 97 23 5,3 0 6,1 1, Хилганта 9,47 70 25,9 6,2 40 41,5 1, Безымянное 9,16 88 21,9 6,2 0 7,05 0, Ножей 8,87 103 24,0 5,3 0 4,72 0, Вонючее 9,90 79 26,5 4,9 0 7,91 2, Саган-Нур (Орловское) 9,06 87 25,3 7,3 0 8,11 2, Гурбан-Нур Цаганольское 10,3 86 24,5 5,1 1,7 8,21 6, Барун-Хонге Нур 11,0 98 25,2 8,7 0 7,1 5, Верхнее Белое 10,13 45 24,7 8,5 0 7,54 3, И тем самым в экосистеме содовых озер созданы условия среды, ограничивающие развитие высших форм биоты, при этом данные условия благоприятны для развития алкалофильного прокариотного сообщества.
В воде содовых озер Забайкалья концентрации макроионов (натрия, калия, кальция, сульфатов, карбонатов, гидрокарбонатов и хлора) варьируют от 0,01 до 36,7 г/л, а микроионов (меди, цинка и марганца) – от 0,024 до 2,150 мг/л, свободной серы – от 0,07 до 7,49 г/л (табл. 2). В исследованных озерах, по классификации Алекина, было установлено 13 типов вод, и в основном это карбонатно гидрокарбонатно-натриевые типы вод.
Т абл и ца 2. Макроэлементный состав водной толщи содовых озер Забайкалья Название озера Химический состав воды (г/л) Na+ K+ Са2+ Mg2+ CO32- HCO-3 S0 SO4-2 Cl Шубутэ -Нур 1,41 0,02 0,03 0,61 1,44 0,43 0,27 0,81 0, Борзинское Соленое 29,8 0,05 0,01 1,50 0,33 2,07 7,49 19,9 36, Горбунка 3,90 0,02 0,02 0,25 7,50 4,25 0,13 0,40 4, Хилганта 16,8 0,03 0,01 1,21 0,18 2,07 0,13 0,40 10, Безымянное 3,22 0,02 0,03 0,09 0,08 0,39 0,10 0,81 0, Ножей 4,11 0,01 0,03 0,15 0,02 0,37 0,10 0,30 0, Вонючее 5,51 0,04 0,01 0,45 0,22 0,96 0,49 1,41 0, Саган-Нур Орловское 0,36 0,02 0,07 0,02 0,21 1,41 0,07 0,18 0, Гурбан-Нур (Цаганольское) 0,71 0,01 0,06 0,04 0,19 0,91 0,09 0,14 0, Барун-Хонге Нур 3,93 0,03 0,04 0,29 8,50 1,05 0,23 4,67 4, Верхнее Белое 2,9 0,01 0,01 0,04 0,75 3,23 0,47 1,40 0, Исследования сезонной динамики физико-химических параметров воды показали, что в содовых озерах рН воды в весенне-летнее время повышается до 11,9, что вызвано переходом карбонат гидрокарбонатных солей в раствор, а повышение рН в донных осадках происходит в осенне-зимнее время в связи с оседанием вышеназванной соли из водной толщи в донные осадки. Сравнение соотношения данных по общей щелочности и минерализации в воде озер показало их увеличение к осени.
Поступают вышеперечисленные ионы в воду содовых озер Забайкалья в основном в виде солей с атмосферными осадками, водными потоками и за счет минерализации растительных и органических остатков микроорганизмами.
Таким образом, в течение года рН воды в исследованных озерах варьирует от 8,5 до 11,9 и она всегда насыщена макро- и микроэлементами, где наиболее распространнными ионами являются ионы натрия, карбонатов и гидрокарбонатов, поэтому вода в озерах Забайкалья относится к минерализованно-содовой.
Исследования микробиологического состава воды в содовых озерах Забайкалья показали наличие разных физиологических групп аэробных и анаэробных бактерий деструкторов I (протеолитиков, амилолитиков, целлюлолитиков, липолитиков) и II (сульфатредукторов, метаногенов) порядков, и их численность варьировала в пределах от 10 до 106 кл./мл (табл. 3).
Т абл и ца 3. Максимальная численность психрофильных и мезофильных алкалофильных бактерий в воде содовых озер Забайкалья Максимальная численность бактерий, кл./мл Название Протеолит. Амилолит. ЦРБ Липолит. СН4 озера СРБ аэр. анаэр аэр анаэр аэр анаэр аэр анаэр гены 106 105 105 105 10 10 103 102 103 Шубутэ-Нур 104 106 104 103 102 10 10 10 102 Борзинское соленое 106 105 105 104 10 102 103 104 10 Горбунка 106 106 105 105 10 10 103 104 10 Хилганта 106 106 106 105 10 10 104 103 102 Безымянное 106 104 106 105 103 102 104 104 102 Ножей 105 106 105 106 103 102 10 10 102 Вонючее 105 104 103 106 102 10 103 10 10 Саган-Нур (Орловское) Гурбан-Нур Цаганольское 106 106 105 106 103 10 103 102 102 106 105 105 106 103 10 102 103 102 Барун-Хонге Нур 106 105 106 105 103 10 102 102 10 Большое Белое Примечание: ЦРБ – целлюлолитики;
СРБ – сульфатредукторы;
СН4-гены- метаногены Исследование сезонной динамики численности бактерий в воде содовых озер Забайкалья показало наличие как психрофилов (от 10 до 105 кл./мл), так и мезофилов (от 102 до 106 кл./мл). Кроме того, исследование воды содовых озер на наличие патогенных микробов и яиц гельминтов показало их отсутствие.
Таким образом, вода в исследованных озерах относится к самородной (ювенильной), по типу – к минерализованной и химическому составу – к содовой. Озера по водному балансу относятся к бессточным, и расход воды происходит за счет испарения. Наличие в водной толще живых форм разных физиологических групп аэробных и анаэробных, мезофильных и психрофильных алкалофильных бактерий деструкторов I (наиболее распространенные микроорганизмы) и II порядков, также продуктов их жизнедеятельности в течение года дает основание отнести воды содовых озер Забайкалья биологически активным.
Характеристика донных осадков с микробными матами содовых озер Забайкалья Исследование структурных особенностей донных осадков содовых озер Забайкалья показали, что они относятся к новейшим четвертичным образованиям, мощность которых достигает 1-6 м, а их механические качества характеризуются вязкостью и имеют развитую поверхность, что обуславливает большую абсорбционную способность.
В связи с высокой дисперсностью (коллоидностью) и минерализованностью донные осадки исследованных озер отличаются хорошей пластичностью, влагоемкостью и теплоемкостью. По внешнему виду эти осадки представляют собой однородную, тонкодисперсную, аморфную массу маслянистой и мазеподобной консистенции с запахами сероводорода, черного или серого цвета. Их естественная влажность варьирует в пределах 60-97% (иловая вода), а с увеличением глубины залегания (ниже 6 м) наличие воды в нем резко снижается и повышается содержание песка.
Обнаруженные в разных содовых озерах Забайкалья алкалофильные микробные маты представляют собой разные структурные образования с ясно выраженными слоями, окраска которых определяется цветом пигментов микроорганизмов и минералов.
Т абл и ца 4. Макроэлементный состав донных осадков с микробными матами содовых озер Забайкалья Химический состав донных осадков, г/г Название озера Si2+ Ca2+ Mg2+ K+ Na+ S0 P5+ Донные осадки Шубутэ-Нур 0,4 0,06 0,0003 0,03 0,02 0,005 0, Борзинское соленое 0,4 0,07 0,0092 0,09 0,11 0,019 0, Горбунка 0,4 0,03 0,02 0,01 0,02 0,004 0, Хилганта 0,4 0,01 0,01 0,02 0,01 0,006 0, Безымянное 0,4 0,01 0,0002 0,01 0,01 0,0011 0, Ножей 0,3 0,03 0,01 0,01 0,03 0,0004 0, Вонючее 0,4 0,01 0,001 0,02 0,01 0,0018 0, Саган-Нур (Орловское) 0,5 0,03 0,011 0,009 0,02 0,0012 0, Гурбан-Нур (Цаганолькое) 0,4 0,06 0,001 0,01 0,02 0,0015 0, Барун-Хонгэ Нур 0,4 0,02 0,020 0,02 0,02 0,004 0, Большое Белое 0,3 0,04 0,001 0,001 0,01 0,0002 0, Микробные маты Горбунка - 0,001 0,01 - - 0,004 0, Хилганта - 0,001 0,01 - - 0,005 0, Нижнее Белое - 0,04 0,01 - - 0,002 0, Барун-Торей - 0,02 0,01 - - 0,006 0, Примечание: «-» – не исследовалось В донных осадках с микробными матами содержание макроионов (кремния, кальция, магния, натрия, фосфора и свободной серы) варьирует от 0,0002 до 0,5 г/г, концентрации микроионов (алюминия, железа, титана и марганца) изменялись в пределах от 0,0003 до 0,09 г/г (табл. 4).
Т абл и ца 5. Содержание органического вещества в донных осадках и бактериальных матах содовых озер Забайкалья Содержание органического вещества (на сухое вещество), % Озера Донные осадки Бактериальные маты Сорг. Углеводы Целлюлоза Сорг. Целлюлоза Барун-Торей 0,08 0,02 0,011 8,27 1, Дабаса 0,42 0,25 0,100 8,33 Илим-Торум 0,02 0,01 0,006 8,23 Хилганта 0,202 0,083 0,031 7,50 3, Горбунка 1,5 0,582 0,193 7,83 3, Ножей 0,03 0,01 0,002 4,01 Селендумовские 0,69 0,51 0,35 8,27 Нижнее Белое 0,31 0,2 0,03 5,50 3, В донных отложениях содержание органического вещества (табл. 5) варьирует от 0,02 до 1,5%, а в бактериальных матах – от 2,26 до 8,33%.
Т абл и ца 6. Максимальная численность психрофильных и мезофильных алкалофильных бактерий в донных осадках содовых озер Забайкалья Максимальная численность бактерий, кл/мл Название Протеолит Амилолити Липолитик Броди ЦРБ СН4 озера ики ки и СРБ льщик гены и аэр. анаэр. аэр. анаэр аэр. анаэр. аэр. анаэр Донные осадки 107 105 106 104 104 103 103 102 102 105 Шубутэ-Нур Борзинское Соленое 107 106 108 104 105 102 103 103 103 105 107 105 106 106 103 102 106 105 105 106 Горбунка 105 105 104 104 10 102 104 103 105 104 Хилганта 105 104 103 104 102 10 105 104 104 105 Безымянное 105 105 107 106 104 104 103 103 105 Ножей 106 105 106 104 102 102 105 106 104 106 Вонючее 105 105 105 105 102 102 105 105 102 105 Саган-Нур Орловское 107 105 107 106 102 10 104 105 104 106 Гурбан-Нур (Ц-о) 105 105 106 105 103 102 103 104 105 106 Барун-Хонгэ Нур 104 106 105 106 105 105 103 104 1 03 105 Большое Белое Микробные маты 104 104 105 105 104 102 104 104 102 103 Барун-Торей 105 105 105 106 105 102 103 104 102 104 Горбунка 105 105 105 104 102 103 105 105 Хилганта 0 105 104 104 106 103 102 104 103 Нижнее белое 10 Примечание: ЦРБ – целлюлолитики, СРБ – сульфатредукторы;
Ц-о -Цаганольское Уровень естественной радиоактивности в исследованных озерах ниже или в пределах допустимых норм, и исследование химического состава воды и донных осадков с микробными матами показало, что содержащиеся в них ионы не превышают нормы, указанные в ПДК для ветеринарных объектов.
Все основные этапы деструкции органических веществ в донных осадках и микробных матах содовых озер – от гидролиза полимеров до образования газообразных веществ – осуществляются разными группами аэробных и анаэробных алкалофильных бактерий: протеолитиков, амилолитиков, целлюлолитиков, липолитиков, бродильщиков, сульфатредукторов и метаногенов (табл. 6). При этом наиболее распространенной группой микроорганизмов так же, как в воде, являются деструкторы I порядка, а наименее – деструкторы II порядка, и их численность варьирует в пределах от 10 до кл./мл.
Исследования сезонной динамики активности микроорганизмов в донных осадках и микробных матах содовых озер показали наличие как психрофилов (максимум численности был выявлен весной и осенью) от 103 до 105 кл./мл, так и мезофилов (максимум численности был выявлен летом) от 104 до 1011 кл./мл. В пробах донных осадков патогенной микрофлоры и яиц гельминтов не обнаружено, что соответствует требованиям санитарно-бактерио-логического контроля природных объектов.
Т абл и ца 7. Скорость деструкционных процессов в донных осадках и микробных матах содовых озер Забайкалья Скорость деструкции Процесс ДО ММ Сульфатредукция Расход Сорг., мг С/кг сут. 0,11 – 50,92 1,0 – 9, Скорость сульфатредукции, S/кг сут. 0,14 – 67,9 1,34 – 12, Бактериальная продукция H2S, мкгS(H2S)м2сут. 5,7 – 937, 5 – Метаногенез Расход Сорг., мг С/кг сут. 0,0005 – 0,0262 0,0003 – 0, Метаногенез, мкл. СН4/л сут. 0,14 – 6,1 0,09 – 8, Суточная продукция метана, мкл. СН4 м2 /сут. 3,4 – 30,0 – Примечание: ДО- донные осадки;
ММ- микробные маты В донных осадках содовых озер Забайкалья среднесуточная скорость разложения белка и целлюлозы в % составляет 0,41–4,71 и 0,08–1,83 соответственно. Результаты исследования количественной оценки скорости деструкционных процессов в донных осадках и микробных матах содовых озер Забайкалья показали (табл. 7), что скорость сульфатредукции (0,02 до 67, мгS/кг сут.) выше, чем суммарная скорость метаногенеза (0,14–6,1 мкл.СН4/кг сут.). При этом оценка расхода органического углерода в донных отложениях и микробных матах содовых озер показывает, что для синтеза метана используется меньше органического углерода, чем при бактериальном восстановлении сульфатов. Из всего вышеизложенного следует, что в водной толще, матах и донных осадках содовых озер в течение года идут деструкционные процессы, и разница состоит в их скорости.
Таким образом, донные осадки содовых озер Забайкалья генетически относятся к сульфидно иловым грязям, по категории – материковым, а накапливание солей в них происходит за счет выщелачивания и сноса с окружающих берегов поверхностными и грунтовыми водами. В составе этих осадков можно выделить три основных компонента: скелет (кристаллические соли кальция и магния, глинистые и песчаные частицы), раствор (растворенные соли водной толщи, соли органических кислот, которые образуются за счет разложения микрофлоры под влиянием алкалофильных микробов-грязеобразователей) и коллоидный комплекс (гумус, органические вещества). Кроме того, в течение года живые формы алкалофильных бактерий обогащают минеральную фракцию донных осадков продуктами и веществами собственной жизнедеятельности, как в процессе естественного метаболизма, так и отмирания, что дает основание отнести донные осадки содовых озер Забайкалья к биологически активным бактериальным илам или «активным илам».
Механизм действия «природного биореактора» при образовании биологически активных веществ в содовых озерах Забайкалья Из вышеописанных результатов исследования видно, что содовые озера Забайкалья являются своеобразными «природными биореакторами» биологически активных веществ и их накопителем.
Механизм действия данного реактора основано на жизнедеятельности алкалофильных микроорганизмов, а субстратами для них служат биополимеры.
В содовых озерах метаболические процессы начинаются в микробных клетках с биохимического окисления органических веществ. Это относится к внутриклеточным процессам, которым предшествует передача большого количества органических и неорганических веществ из толщи воды к поверхности микробных клеток. Также происходит перенос веществ через цитоплазматическую мембрану клетки, тем самым они разлагают сложные органические вещества на менее сложные. На поверхности бактериальных клеток располагаются гидролитические экзоферменты, которые не позволяют переносить продукты микробного гидролиза в окружающую среду.
Высокая гидролазная активность донных осадков содовых озер обусловлена как ферментами живых клеток, так и гидролазами, попадающими в воду в результате гибели и лизиса микробных клеток. Гидролитическому расщеплению подвергаются коллоидные, нерастворимые примеси и растворимые вещества. Благодаря действию экзоферментов образуется сложный комплекс исходных веществ, ферментов и продуктов ферментативных реакций. Одновременно с началом переноса веществ через цитоплазматическую мембрану начинаются их метаболические превращения внутри клетки. Для огромного числа гетеротрофных бактерий, населяющих активный ил содовых озер, органические вещества представляют собой источник энергии и основных биогенов, необходимых для синтеза клеточного вещества микробов.
Цитоплазматическая мембрана алкалофильных бактерий содовых озер, как и у бактерий, обитающих в других экстремальных средах, трудно проницаема как для ионов водорода, так и для гидроксильных групп. Поэтому концентрации ионов водорода внутри клетки не уравновешиваются с рН внешней среды и остаются достаточно постоянным даже при значительных колебаниях рН среды в сторону щелочности. Но, тем не менее, метаболизм микроорганизмов содовых озер зависит от уровня рН в среде. Поэтому алкалофильные микробы, у которых оптимум роста приходится на рН ниже 10, относятся к факультативным, а у тех, у которых рН выше 10 – к облигатным.
В результате аэробного дыхания микроорганизмы разлагают белки, жиры, углеводы до аминокислот, простых сахаров, глицерина и высших жирных кислот. Далее эти вещества разлагаются до ацетил KоA, этанола, этиловой кислоты, альдегидов, алканов, ароматических углеводородов, янтарной, щавелевой, фумаровой и яблочной кислот и т.д. Многие бактерии растут на ацетате.
Используя ацетат, клетка переводит его в ацетил KоA;
при использовании этилового спирта он подвергается двойному дегидрированию и гидролизу с образованием карбоновых кислот.
Образовавшаяся в результате этой реакции уксусная кислота вступает в реакцию обмена углеводов.
Аналогичные превращения претерпевают высшие спирты и альдегиды, но будучи более сложными соединениями, чем ацетат и этанол, они включаются в обменное русло на более раннем этапе.
Соответственно аэробное окисление в донных осадках озер приводит к образованию аминокислот, простых сахаров, глицерина и высших жирных кислот.
В содовых озерах у алкалофилов значительно сложнее происходит подготовительный метаболизм углеводородов, продуктами подготовительного метаболизма – алканов – являются высшие жирные кислоты, ароматические углеводороды – ацетил КоА и янтарная кислота, вступающие в цикл Кребса. Подготовительные метаболические реакции с высшими спиртами и альдегидами приводят к образованию жирных высших кислот и НАД х H2. Образовавшиеся в ходе подготовительного метаболизма НАД х H2, поступает в дыхательную цепь ферментов, по которой перенос водорода приводит к запасанию клеткой энергии в виде АТФ. Кроме этих реакций происходит множество других превращений органического вещества, в результате которых образуются такие же вещества, которые были перечислены ранее. Также в донных осадках содовых озер наблюдаются процессы биохимического окисления с использованием химически связанного кислорода в минеральных соединениях, т.е. полуаэробный процесс.
Минеральные соединения, содержащие химически связанный кислород, исполняют роль конечных акцепторов водорода. Происходит восстановление кислородсодержащих соединений в водной толще, удаление их в донные осадки и одновременное окисление органических веществ. При процессе полуаэробного дыхания в донных осадках наблюдается восстановление ряда кислородсодержащих анионов: нитратов, нитритов, хроматов, бихроматов, сульфатов, иодатов, броматов, фосфатов, хлоратов, перхлоратов и т.д. Отсюда следует, что полуаэробный процесс приводит к восстановлению кислородсодержащих анионов.
Биохимические процессы, происходящие в содовых озерах для стабилизации концентрированных органических субстратов, осуществляются в анаэробных условиях ила, где в основном происходят процессы брожения. Бактериальное население донных осадков анаэробного ила чрезвычайно разнообразны: протеолитики, амилолитики, целлюлолитики, бродильщики, сапрофиты, липолитики, метаногены и сульфатредукторы. Условно их можно разделить на 2 группы, т.е. все вышеперечисленные микроорганизмы, кроме метаногенов, составляют 1-ю группу кислотообразующих бактерий, так как основными конечными продуктами их жизнедеятельности являются жирные кислоты. Во 2-ю группу входят метаногены, способные превращать метаболиты кислотообразующих бактерий в конечные продукты метанового брожения: метан и диоксид углерода. Данный процесс еще называют стадиями щелочного или собственно метанового брожения.
Благодаря большому видовому разнообразию и взаимному влиянию видов друг на друга группа кислотообразующих бактерий содовых озер Забайкалья в целом может осуществлять процесс брожения сложных субстратов в достаточно широком диапазоне значения pH и окислительно восстановительного потенциала.
Все метаногенные бактерии – облигатные анаэробы, очень чувствительные к окислительно восстановительным условиям и реакции среды. В присутствие нитратов и сульфатов синтез метаногенов задерживается, а в энергетических реакциях используются простые соединения, такие как низшие жирные кислоты и соответствующие спирты. Неспособность метаногенных бактерий к сбраживанию сложных субстратов обуславливает их развитие в естественных условиях только в сообществе с гетеротрофными микроорганизмами (симбиотики). Анаэробные гетеротрофные микроорганизмы обеспечивают необходимым субстратом метаногены, создавая при этом благоприятные окислительно-восстановительные условия. Биологическая роль образования метана в содовых озерах состоит в получении клеткой метаногенов необходимой энергии. Все известные пути получения метана сводятся к реакциям 2-х типов: первый – восстановление уксусной кислоты и метанола, и второй – восстановление углекислого газа, исполняющего роль конечного акцептора водорода. Метановое брожение всегда сопровождается образованием витаминов группы В.
Таким образом, в содовых озерах Забайкалья последовательность различных окислительно восстановительных процессов определяется кинетикой поглощения субстратов алкалофилов в разнообразных метаболических нишах водной толщи и донных осадков. Поэтому все имеющиеся деструкционные и продукционные процессы в данной экосистеме основаны на экзо- и эндоклеточном метаболизме алкалофильных микроорганизмов, что и составляет механизм образования биологически активных веществ и основу для функционирования «природного биореактора».
Изучение токсичности донных осадков и микробных матов содовых озер Забайкалья и установление дозы их потребления на 1 гол. животного Токсичность донных осадков и микробных матов 47 содовых озер Забайкалья были изучены на белых беспородных мышах и на валухах шерстно-мясной Забайкальской тонкорунной породы. Дозы потребления донных осадков с микробными матами содовых озер Забайкалья (в дальнейшем – «ДОСО») на одну голову животного были установлены на валухах.
1 опыт – на мышах. У мышей, участвовавших в опыте по исследованию токсичности донных осадков и микробных матов содовых озер, в течение 3-4 суток наблюдалась некоторая слабость при дозе 0,4 и 0,6, при дозе 0,6 на 2-3 сутки был жидкий кал, затем все прекратилось. При сравнительных патоморфологических исследованиях внутренних органов опытных и контрольных групп мышей патологических изменений не было обнаружено. Все мыши были клинически здоровыми на протяжении двух недель перорального введения проб и последующих десяти дней наблюдения за состоянием их организма. Итак, у мышей клинические симптомы интоксикации организма при потреблении «ДОСО» не отмечались.
2 опыт – на овцах. В период экспериментальных исследований на валухах по установлению дозы потребления «ДОСО» на 1 гол. были проведены одновременные исследования на токсичность.
Донные осадки с микробными матами были взяты с озер Горбунка, Хилганта, Барун-Хонгэ Нур и Гурбан-Нур (Цаганольское). Перед началом экспериментальной работы валухи были разделены на опытные группы, а затем на 4 подгруппы. Опытным животным группы №1 добавляли в корм «ДОСО» жидкой консистенции, №2 – сухой консистенции «ДОСО» в следующих дозах на 1 гол. по подгруппам: 1 – по 1 кг «ДОСО»;
2 – по 0,5 кг «ДОСО»;
3 – по 0,25 кг «ДОСО»;
4 – по 0,1 кг «ДОСО». Об изменениях, происходящих в организме валухов, судили по общему состоянию организма, каловой массе, температуре тела и по количеству съедаемости «ДОСО».
В ходе эксперимента валухи подгрупп, где получали «ДОСО» по 1 и 0,5 кг, были сняты с эксперимента через 7-10 дней из-за того, что не съедали всю дозу «ДОСО». Валухи подгрупп, где получали «ДОСО» по 0,1 кг, также были сняты с эксперимента через 15 дней в связи с вялотекущими физиологическими показателями. Для продолжения эксперимента были оставлены валухи подгрупп, где получали «ДОСО» по 0,25 кг, в связи с тем, что съедали всю дозу «ДОСО» и имели положительные физиологические показатели. Далее при наблюдении за состоянием организма валухов как в период эксперимента, так и последующих 2 недель, они оставались клинически здоровыми: хорошо поедали корм;
их поведенческие реакции не нарушались;
состояние каловой массы и температура тела (39,5-40,5С) были в пределах нормы;
симптомы интоксикации организма не отмечались.
Таким образом, наиболее оптимальной лечебно-профилактической дозой на 1 гол. валухов является 0,25 кг «ДОСО», и установлено, что при применении животными «ДОСО» (жидкой и сухой консистенции) в качестве кормовой добавки противопоказаний нет.
Исследование лечебно-профилактических свойств «ДОСО» как биологически активной кормовой добавки при алиментарной дистрофии Экспериментальные исследования свойств «ДОСО» проводились течение 2 месяцев на валухах шерстно-мясной Забайкальской тонкорунной породы (в возрасте 9-12 месяцев).
Ветеринарные, клинические и лабораторные исследования кормов, кала, мочи, крови и шерсти показали наличие в стаде валухов с диагнозом алиментарная дистрофия незаразной этиологии. На основании диагноза заболевания валухи были разделены на 2 экспериментальные группы: больные алиментарной дистрофией №1, №3 – для изучения лечебных свойств «ДОСО» и здоровые – №2, №4 – для изучения профилактических свойств «ДОСО», затем на контрольные и опытные группы.
Валухам опытных групп №1 и №2 добавляли в корм «ДОСО» жидкой консистенции, а №3 и №4 – «ДОСО» сухой консистенции из расчета по 0, 25 кг на одну голову, а контрольным – только основной рацион корма. Сравнительные клинико-лабораторные исследования валухов до и после эксперимента показали улучшение и нормализацию основных показателей организма у опытных групп, как у здоровых, так и больных алиментарной дистрофией, результаты представлены в табл. 8.
Т абл и ца 8. Результаты клинико-лабораторного исследования валухов до и после эксперимента с «ДОСО» Состояние организма валухов Показатели До эксперимента После эксперимента организма Норма Дистроф Здоров Дистрофные Здоровые ные ые К О К О Вес тела, к г 4 3 -4 5 2 8 -3 0 3 8 -3 9 3 2 -3 3 3 5 -3 7 4 0 -3 1 4 2 -4 Температура тела,С 39,5-40,5 36,8-38 38-39 39-39,6 39,1-39,9 39,5-40 39,2- Общий Р в крови,г% 4,5 -6,0 4,6-6,2 4,4-4,9 4,8-6,3 5,5-5,9 4,5-5,0 5,5-5, Эритроциты, г/л 1012 7,0-12,0 4,9-6,1 6,8-7,6 5,0-6,0 7,6-9,0 7,8-8,6 7,0-12, Лейкоциты, г/л 109 6,0-14,0 3,2-5,1 7,8-8,9 3,5-6,0 6,1-10,0 6,9-11,0 8,0-12, Гемоглобин, г% 7,9-11,0 4,9-7,2 7,8-8,9 5,2-6,9 6,0-11,7 8,0-8,8 8,0-11, Качество шерсти не Выход мытой мериносовая, разной 46,9 58,7 55,7 66, шерсти, % толщены кремовы белый, бело- кремов Цвет жиропота белый белый белый й низкий желтый ый Дефекализация, р/сут 6-7 10-14 8-10 9-11 7-9 6-8 7- рН кала 7,0-7.2 4,9-6,2 6,1-6,5 6,0-6,2 6,5-8,1 6,4-7,2 6,7-8, Влажность кала, % 80-90 70-75 65-68 69-70 64-65 63-65 61- буро- темно- темно- светло светло- темно- светло Цвет мочи коричнев коричн коричн коричнев желтый желтый желтый ый евый евый ый рН мочи 8,0-8,5 6,5-7,0 8,0-8,2 7,5-7,8 7,9-8,1 8,0-8,1 8,0-8, Примечание: К – контроль;
О- опытные Были проведены патоморфологические обследования внутренних органов: до эксперимента у валухов, больных алиментарной дистрофией, были уменьшены в размере мышцы, почки и печень, в брыжейке, сальниках и подкожной клетчатке имелись водянистые образования, подкожный жир отсутствовал и т.д. После эксперимента состояние органов в опытных группах нормализовалось, кроме брыжейки, где все еще сохранялось небольшое количество водянистых образований, появился подкожный жир. У здоровых валухов до эксперимента содержание подкожного жира и упитанность были ниже среднего, а после эксперимента в опытных группах они нормализовались.
После эксперимента в опытных группах лечебный эффект составил от 80 до 100%, а профилактический – 100%, результаты представлены на табл. 9. Взвешивание валухов показало, что валухи с дистрофией в живой массе не нагнали изначально здоровых, хотя, в конечном счете, привес валухов в обеих опытных группах превышал привес валухов с контрольных групп. Кроме того, в ходе исследования было установлено, что «ДОСО» как жидкой, так и сухой консистенции, имеет одинаковое положительное действие на организм животных в качестве кормовой добавки.
Т абл и ца 9. Результаты ветеринарного обследования валухов до и после эксперимента с «ДОСО» (жидкой и сухой консистенции) Диагностика Результаты исследования свойств Состояние организма валухов при недостаке «ДОСО» на валухах, % витаминов, до эксперимента дистрофных- здоровых микро- и лечебные профилактические макроэлемент Дистрофные Здоровые К О К О ов Рост по Всех Темпы роста, Дистрофия экстерьерны Рост микроэлемент Изм. Изм. экстерьерные органов, рост м средний ов (кроме Со и нет нет показатели ниже среднего, показателям F2), вит. А, В улучшились ниже сред.
Взъерошенност Орг. в-в, Fe, 80 - ь, Взъерошеннос Изм.
NaCl, Co, Cu, 70-90 недоразвитость ть шерсти нет F2, вит. В, D шерсти Аппетит NaCl,Р, Co, Изм. 80- Плохой аппетит 10-30 средний вит. В6, D нет Потеря массы Средний вес NaCl, Co, орг. Изм.
85-90 50 тела тела в-в, вит. А, D нет Неподвижность Медленное Cа, Р, Fe, Cu, Изм. Изм.
80- суставов, продвижение F2, вит. В6, А, нет нет хромота при пастьбе D Извращение аппетита NaCl,Co,Р, Cu 90-95 Изм.
Анемия Нач. стадия Изм.
Fe, Cu, Co, нет 90-100 анемии нет вит. В Жидкий стул Мягкий стул 90-95 60 Шатающаяся Походка в Вит. А, D 90 100 походка норме Слюнотечение Слюнотеч. нет Вит. А Изм. 85 100 Нарушение коо Координ. дви Fe, Cu, вит. А, нет 95 100 рдин. движения жения в норме D Состояние ше Fe, Co, Cu, F2, Аллопеция 80 100 рсти в норме вит. А, В Таким образом, в результате применения в качестве кормовой добавки «ДОСО» в лечебно профилактических целях у валухов (больные и здоровые) произошло восполнение в организме дефицита витаминов, макро- и микроэлементов, что привело их к оздоровлению.
Оценка лечебной эффективности «ДОСО-вода» и «ДОСО» Изучение лечебно-профилактических свойств минерализованной воды и донных осадков с микробными матами из содовых озер Забайкалья (в дальнейшем – «ДОСО-вода», «ДОСО») было проведено на коровах мясомолочной породы (7-8 лет), овцематках шерстно-мясной Забайкальской тонкорунной породы (4-5 лет) и беспородных козоматках (3-5 лет).
Схема лечения при эндометритах. Постановка диагноза животным острый (выделения желтого цвета с гноем, хлопьями и крапинками крови, шейка матки приоткрыта, флюктуируют, матка не сокращается, стенки утолщены и болезненные) и хронический (выделения период течки в виде слизи с гноем) эндометрит осуществлялась клинически по наличию заболевания.
Контрольные группы: острые эндометриты (схема 1): 1 и 3 день – 3мл 1% синестрола п/к;
1, 3, дни – 10 мл тривитамина в/м;
1день – 100-200 мл 1% новокаина в/аортально;
со 2 по 7 день – 150 мл взвеси 5% трициллина на рыбьем жире, подогретом до 39С в/маточно;
3 день – 30-40 ЕД окситоцина в/м. Хронические эндометриты (схема 2): 1 день – 3мл 1% синестрола, п/к;
2 и 8 дни – 0,5 мл 0,5% новокаин на 1 кг живой массы, надплевральная блокада;
с 3 по 6 день – 30-40 ЕД окситоцина, в/м;
1, 3, 5, 7 дни – 80-100 мл суспензии из сульфаниламидов, антибиотиков, трициллина, в/маточно;
1, 4, 7, 8 дни – 30, 35, 40, 45 мл цитрированной крови, в/м;
1, 8 день – витамины А, D и Е, в/м.
Опытные группы лечили путем внутривлагалищных грязевых аппликаций «ДОСО» подогретой до 40С при острых эндометритах – по методу Копылова В.К 1-3 дни, а затем через 2 дня;
подогретой до 45С при хронических эндометритах – по методу Вяткина А.Н. 1-3 дни, а затем через 1 день.
Количество «ДОСО» при аппликации зависело от объема полости вагины и шейки матки животных:
козы и овцы – до 250-300 г, коровы – до 700-1300 г, продолжительность сеанса длилась для коров 30 50 мин., а коз и овец – 30-40 мин.
Спринцевание влагалища проводили до и после грязелечебных процедур, а орошения 1 раз в день растворами «ДОСО-вода» (природный и стерильный) и физраствором в зависимости от заболевания горячим (45С) и теплым (40С) в количестве 1-3 литров.
На основании диагноза животные были разделены на экспериментальные группы по заболеванию: острый и хронический эндометриты, затем на контрольные и опытные группы.
Изучение лечебной э ффективности «ДОСО» в качестве аппликационного средства и «ДОСО-в ода» в качестве ра створа для спринцевания влагалища при эндометритах. Лечение животных в контрольных и опытных группах проводили согласно вышеописанным схемам, результаты представлены в табл. 10.
В контрольных группах в результате лечения животных, больных эндометритом, как острым, так и хроническим по стандартным схемам 1 и 2 показано 100%-ное выздоровление. При этом после 4-й охоты из числа выздоровевших животных забеременели всего 50-70%, были самопроизвольные аборты у 2-коров, 3 овцематок и 2 козоматок. В опытных группах в результате грязелечения «ДОСО» методом внутривлагалищной аппликации (физиотерапия) животных, больных острым и хроническим эндометритами, выздоровело 75-95% животных, при этом все излечившиеся животные после 4-й охоты были беременные, и разница была только во времени охоты, абортов и выкидышей не было.
Все виды раствора для спринцевания влагалища (физраствора (до 85%), стерильного (80-90%) и природного (80-95%) «ДОСО-вода») показали положительный эффект, соответственно, их можно применять при подобных процедурах.
Т абл и ца 1 0. Результаты лечения животных больных эндометритом при помощи «ДОСО» в сравнении с контролем Результаты исследований Кол-во Схема Выздор Вид Группы Виды растворов для беременных лечения овело (по 10 голов) спринцевания голов после голов, охоты, % % 1 2 3-4 Всего Диагноз: острый эндометрит №1/1 контр. Схема 1 Содово-солевой 100 10 10 30 Коро №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 85 60 25 - вы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 80 50 20 10 №1/4 опыт. Физ. раствор 75 - 60 15 №1/1 контр. Схема 1 Физ. раствор 100 - 25 40 №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 90 60 30 - Овцы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 85 55 20 10 №1/4 опыт Физ. раствор 80 - 50 30 №1/1 контр. Схема 1 Физ. раствор 100 - 25 40 №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 80 60 20 - Козы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 80 50 20 10 №1/4 опыт Физ. раствор 75 - 25 50 Диагноз: хронический эндометрит №1/1 контр. Схема 2 Содово-солевой 100 - 20 30 Коро №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 95 60 35 - вы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 85 30 40 15 №1/4 опыт Физ. раствор 75 - 60 15 №1/1 контр. Схема 2 Физ. раствор 100 - 10 50 №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 90 50 40 - Овцы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 90 35 50 5 №1/4 опыт Физ. раствор 85 - 50 35 №1/1 контр. Схема 2 Физ. раствор 100 - 10 60 №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 95 45 50 - Козы №1/3 опыт. «ДОСО» «ДОСО-вода» стерильная 90 40 40 10 №1/4 опыт Физ. раствор 80 - 50 30 Таким образом, оценка лечебной эффективности «ДОСО» в качестве аппликационного средства при эндометритах показала достаточно высокий результат (до 95%), при этом в отличие от контрольной группы все излечившиеся животные беременели до 4-й охоты.
Оценка э ффективности «ДОСО -вода» в качестве лече бно-оросительного раствора на животных больных эндоме тритом.
Лечение животных в контрольных и опытных группах проводили согласно вышеописанным схемам, результаты представлены в табл. 11.
В контрольных группах при лечении животных, больных эндометритом, показало 100%-ное выздоровление как с острым, так и хроническим эндометритом, но при этом после 4-й охоты из числа выздоровевших животных всего 60-65% забеременели, кроме того, после 2 и 3 месяцев беременности были самопроизвольные аборты у 4 овцематок и 3 козоматок.
Т абл и ца 11. Результаты лечения животных больных эндометритом при помощи «ДОСО-вода» в сравнении с контролем Результаты исследований Вид Схема Виды растворов Выздор Кол-во беременных животн Группы лечения для орошения овело голов после охоты, % ых гол., % 1 2 3-4 Всего Диагноз: острый эндометрит Коров №1/1 контр. Схема 1 Содово-солевой 100 15 20 35 ы №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 85 65 20 №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 85 50 20 15 №1/1контр. Схема 1 Физ. раствор 100 20 25 20 Овцы №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 85 60 25 №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 80 50 30 №1/1контр. Схема 1 Физ. раствор 100 10 25 30 Козы №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 85 65 20 №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 80 50 30 Диагноз: хронический эндометрит №1/1 контр. Схема 2 Содово-солевой 100 - 45 20 Коров №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 85 40 45 - ы №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 85 30 55 - №1/1 контр. Схема 2 Физ. раствор 100 - 30 40 Овцы №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 80 50 30 - №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 75 35 40 - №1/1 контр. Схема 2 Физ. раствор 100 - 20 40 Козы №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 80 40 40 - №1/3 опыт. «ДОСО-вода» стерильная 80 30 40 10 В опытных группах в результате лечебного орошения (рефлекторная физиотерапия) растворами «ДОСО-вода» (природная и стерильная) влагалища животных с острым и хроническим эндометритом выздоровели 75-85% животных, при этом все излечившиеся животные после 4-й охоты были беременные, и разница была только во времени охоты, абортов и выкидышей не было.
Таким образом, оценка эффективности «ДОСО-вода» (природная и стерильная) в качестве лечебно-оросительного раствора при эндометритах показала достаточно высокий результат (85%), при этом в отличие от контрольной группы все излечившиеся животные беременели до 4-й охоты.
Изучение лечебной э ффективности «ДОСО» в качестве аппликационного средства при порезах кожи и «ДОСО -вода» в качестве раствора для дезинфекции и туалета ран живо тных. Постановка диагноза осуществлялась клинически по наличию неинфицированных и инфицированных ран: поверхностно-резанные раны у овец и коз были получены в период стрижки шерсти - механическое повреждение кожи;
у коров – колото ушибленные и рвано-комбинированные раны около входа во влагалище-ранения острыми предметами. Инфицированные раны животных очищали от экссудата и червей путем механической чистки. На основании диагноза заболевания животные были разделены на экспериментальные группы с неинфицированными и инфицированными ранами, затем на контрольные и опытные группы.
В контрольной группе животных лечение ран проводили (схема 1) смесью мазей стрептомицина и синтомицина (в равных долях), а для дезинфекции и туалета ран использовали раствор KMnO4. В опытных группах раны животных лечили с помощью «ДОСО» (схема 2), накладывая его виде аппликаций 2-5-мм слоем на предварительно очищенные и промытые раны. При этом для дезинфекции и туалета ран использовали растворы «ДОСО-вода» (природный и стерильный раствор) и KMnO4. Процедуры проводили ежедневно утром и вечером до выздоровления животных.
Результаты лечения представлены в табл.12 и фиксировались визуально по полному заживлению раны и до самостоятельного отпадания струпа, в установленные сроки – 14-15 суток.
В контрольных группах заживление как неинфицированных, так и инфицированных ран варьировал от 85 до 100% животных, происходило путем поверхностного натяжения. В опытных группах в результате аппликации (физиотерапия) «ДОСО» заживление как неинфицированных, так и инфицированных ран, происходило под струпом, всего выздоровело 75-95% животных, количество излечившихся животных с неинфицированными ранами выше, чем с инфицированными ранами. При этом разница в количестве излеченных животных в результате грязелечения «ДОСО» объясняется видами раствора для дезинфекции и туалета ран: раствор KMnO4 (до 85%), раствор «ДОСО-вода» стерильный (80-90%) и природный (80-95%).
Т абл и ца 12. Результаты исследования по заживлению ран на теле животных с помощью «ДОСО» в сравнении с контролем Схема Заживлен Вид Выздоро Вид Виды растворов для Группы лечения ие ран, заживле вело дезинфекции ран (табл. 13) сут. ния голов, % Диагноз: ра ны не ин фи ц иро ва нны е №1/1 контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
9-15 Кор №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 8-15 овы Под №1/3 опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 9-15 струпом №1/4 опыт. Раствор KMnO4 9-15 №1/1 контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
9-15 Овц №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 8-15 Под ы №1/3 опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 9-15 струпом №1/4 опыт Раствор KMnO4 9-15 №1/1 контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
8-15 Коз №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 9-15 Под ы №1/3 опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 10-15 струпом №1/4 опыт Раствор KMnO4 10-15 Диагноз: ин фиц иро ва н ные ра н ы №1/1 контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
10-15 Кор №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 11-15 овы Под №1/3 опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 12-15 струпом №1/4 опыт. Раствор KMnO4 12-15 №1/1 контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
10-15 Овц №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 11-15 Под ы №1/3 опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 12-15 струпом №1/4 опыт Раствор KMnO4 13-15 №1/1контр. Схема 1 Раствор KMnO4 П.Н.
10-15 Коз №1/2 опыт. «ДОСО-вода» природная 10-15 Под ы №1/3опыт. Схема 2 «ДОСО-вода» стерильная 11-15 струпом №1/4 опыт Раствор KMnO4 12-15 Примечание:П.Н. - первичное натяжение Таким образом, установлено, что «ДОСО» и «ДОСО-вода» достаточно эффективно излечивают раны как поверхностно-резанные, так комбинированные и колото-ушибленные.
Обоснование использования «ДОСО » и «ДО СО-вода» в качестве ветеринарных средств. Содовые озера в связи высокоминерализованным составом воды «ДОСО-вода», донных осадков и микробных матов - «ДОСО », а также с наличием разных групп алкалофильных непатогенных микроорганизмов являются природными резервуарами-накопителями синбиотиков. Они состоят из пробиотиков (определенные штаммы алкалофильных бактерий), симбиотиков (разные группы алкалофильных микробов: протеолитики, амилолитики, целлюлолитики, липолитики, сульфатредукторы, метаногены и т.д.) и пребиотиков (органические вещества, макро- и микроэлементы), тем самым образуют комплексную систему. При употреблении их в качестве кормовой добавки животными имеющаяся в ней комплексная система устраняет в организме дефицит макро- и микроэлементов и витаминов, усиливает на базе безусловных дополнительные условно-рефлекторные механизмы и превращает его в сложный многозвеньевой рефлекторный акт. Поэтому происходит оздоровление и излечивание организма при алиментарной дистрофии незаразной этиологии.
При эндометрите животных внутривлагалищные аппликации «ДОСО» и орошения «ДОСО-вода» вызывают активную гиперемию в половых органах, в результате происходит улучшение гиподинамики и трофики тканей, снижаются экссудативные и инфильтрационные процессы, способствуют появлению рассасывающего и противовоспалительного эффектов, что приводит к восстановлению функции половых органов. Кроме того, аппликационные и оросительные процедуры оказывают термическое, механическое, болеутоляющее и дезинфицирующее действие на половые органы животных, а также способствуют усилению кровоснабжения половых органов, повышению тонуса матки и лучшей эвакуации из нее содержимого, повышению обмена веществ в тканях, рефлекторной активизации функции сокращения матки и полового акта.
Грязевые аппликации с помощью «ДОСО» на неинфицированные раны животных приводит к процессу ее заживления фактически с момента остановки кровотечения, а на инфицированные раны – после исключения в раневой среде декомпенсированного ацидоза, т.е. образования гноя, за счет дезинфекции и туалета ран раствором «ДОСО-вода». В результате дезинфекции и туалета ран происходит устойчивое изменение рН среды в раневой среде с кислого (5,3-6,5) до нейтрального (6,9 7,5) или слабощелочного (7,6-8,9). Аппликационный материал из «ДОСО» на ране подсыхает и образует искусственный или ложный струп. При этом в раневой среде при исключении инфекции заживление раны под искусственным струпом происходит без образования гноя и достаточно быстро.
Таким образом, донные осадки и минерализованная вода содовых озер при лечении обладают адсорбционными, бактериостатическими и бактерицидными свойствами по отношению к гнойной микрофлоре. Стимулируют обменные процессы в организме, способствуют рассасыванию инфильтратов, снижают воспалительные реакции и ускоряют процесс заживления дефектов. При скармливании нормализуется и улучшается общее состояние животных, показатели крови и повышается естественная резистентность организма, а также при лечении алиментарной дистрофии, эндометритов и ран на коже в сравнении с контролем показали их излечивание с наименьшими побочными эффектами.
Методы контроля на биологически активную кормовую добавку и ветеринарное аппликационное средство «ДОСО» и биологически активную минеральную воду «ДОСО-вода» для животных и сроки их годности при процессе хранения.
На основании физико-химических, химических и микробиологических исследований донных осадков и минерализованной воды 47 содовых озер Забайкалья, а также клинической проверки их лечебно-профилактических свойств на лабораторных и сельскохозяйственных животных позволяет рекомендовать эти ресурсы в качестве лечебно-профилактических средств для ветеринарной практики.
Показатели методов контроля на «ДОСО» и «Д ОСО-вода».
Торговое название: Биологически активная кормовая добавка и ветеринарное аппликационное средство «ДОСО». Международное непатентованное название: «ДОСО» («DOSO»). Биолого фармакологическая группа: КГС-С 14, ОКС 65.120, КОД ОПК 936500. Обозначение при заказе и другой документации: Биологически активная кормовая добавка и ветеринарное аппликационное средство «ДОСО» ТУ 9365-001-00497182-2008, Гос. рег. № 046/001033 от 25.11.08.
«ДОСО» выпускается в виде двух форм – жидкой и сухой. Жидкая форма имеет вид аморфной массы маслянистой консистенции черного или темно-серого цвета, а сухая форма имеет вид мелкоизмельченного порошка черного или темно-серого цвета. Используется в качестве кормовой добавки и ветеринарно-аппликационного средства. «ДОСО» по физическим, химическим и микробиологическим свойствам должно соответствовать требованиям, указанным в табл. (выходной контроль).
Т абл и ц а 13. Методы контроля на «ДОСО» и «ДОСО-вода» для животных Характеристика и норма Наименование показателя «ДОСО» «ДОСО-вода» Аморфная маслянистая масса (жид.) или Внешний вид Жидкость мелкоизмельченный порошок (сух.) Запах, балл 1–5 0- от прозрачного до Цвет Черный или темно-серый молочно-белого рН 8,0 – 10,0 8,5 – 10, Мутность, ЕМ/Ф - 1,5 - 5, Содер-е сухого остатка, мг/дм3 - 100 - 20 – сухая консистенция, Массовая доля влаги, % Раствор 60 – жидкая консистенция Безвредность В тест-дозе на белых мышах и овцах безвредно Не допускается наличие бактерии группы кишечной палочки, количество жизнеспособных бацилл Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, дрожжевых и плесневых грибов.
Количество алкалофильных 104 – 1011 103 – микроорганизмов, кл. /см Торговое название: Биологически активная минеральная вода «ДОСО-вода» для животных.
Международное непатентованное название: «ДОСО-вода» («DOSO-water»). Биолого фармакологическая группа: КГС-Р3, ОКС 11.220, КОД ОКП 933740. Обозначение при заказе и другой документации: Биологически активная минеральная вода «ДОСО-вода» для животных ТУ 9337-002-00497182-2009. Гос. рег. № 046/001048 от 16.11.09. «ДОСО-вода» выпускается в виде раствора, цвет варьирует от бесцветного до молочно-белого. Используется в качестве ветеринарно оросительного средства. «ДОСО-вода» по физическим, химическим и микробиологическим свойствам должна соответствовать требованиям, указанным в табл. 13 (выходной контроль).
Изучение стабильности «ДОСО» и «ДОСО -вода» в процессе хранения.
Исследование стабильности «ДОСО» и «ДОСО-вода» в процессе хранения было произведено при температурах -0С, +20С, +36С, сроком до 2 лет на 2 лекарственные формы «ДОСО» (жидкая и сухая консистенции) и 1 лекарственную форму «ДОСО-вода» (раствор). Было отобрано по образцов «ДОСО» и «ДОСО-вода» от 3 серий для каждой исследуемой температуры. Проверку проводили через каждые 3-6 месяца (т.е. 1 год – через 3 месяца и 2 год – через 6 месяцев). Затем из каждой серии отбирали по 5 образцов и определяли в них запах, микробиологическую чистоту и химический состав.
В результате эксперимента было установлено, что в режиме температур от -0 до +36С микробиологическая чистота и химический состав «ДОСО» и «ДОСО-вода» сохраняется на весь период испытаний. При температуре выше 36С происходит изменение биохимического состава «ДОСО» и «ДОСО-вода» Таким образом, гарантированный срок хранения «ДОСО» и «ДОСО-вода» для животных составляет не менее 2 лет при температуре минус 10- +20С и соблюдении сохранности упаковки.
Разработка технологий для получения ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода».
Технология добычи минерализованной воды и донных осадков из содовых озер Забайкалья. В основе технологии добычи донных осадков и минеральной воды из содовых озер Забайкалья наиболее экологичным и экономичным способом является гидромеханизированный способ с использованием всасывающих, шнековых или пневматических камерных насосов (ПКН), также землесосные снаряды (со специальным погрузчиком ТО-28). При данном виде добычи представленные виды насосов с механической точки зрения имеют одинаковый принцип работы, т.е.
донные осадки вместе с водой отсасываются в бочку, расположенную на машине (цементовоз или водовоз). Затем они транспортируются на перерабатывающее предприятие, где перекачиваются в резервуары-отстойники (Бункер БД-2, мкости БСК-10) с герметично закрывающимися крышками для воды и осадков жидкой консистенции, облицованные траншеи-бункера (Бункер БД-03С) для получения сухой формы осадков.
Разработка технологической лини и фасовки «ДО СО» и «ДОСО -вода». На технологической линии №1 и №2 производится подготовка и расфасовка донных осадков с микробными матами, а на линии №3 производится подготовка и розлив минерализованной воды из содовых озер. При этом вода и осадки жидкой консистенции в ПЭТ емкости от 0,25 до 2-3 л и сухой консистенции в полиэтиленовые пакеты от 0, 1 до 1 кг. Данные линии условно разделены на несколько участков: подготовка осадков (воды), подготовка тары, расфасовка, укупорка, этикетировка и упаковка.
При получении «ДОСО» (жидкой и сухой консистенции) донные осадки с микробными матами из резервуаров-бункеров (БСК-10) по ленточному конвейеру (ЭМ-4ПК) подаются на дробильную установку, где крупные элементы методом механического дробления размельчаются и пропускаются через многоступенчатое сито с диаметром пор от 0,40 до 3,0 мм. Также возможны пастеризация «ДОСО» жидкой консистенции при +101С или заморозка при минус 10С. Далее по ленточному конвейеру поступают на дозирующие (ГДМ-1, РТ-ДШВ-01 и т.д.) и упаковочные (DXD для жидкой и полуавтомат ПУСК для сухой консистенции) установки.
При получении «ДОСО-вода» минерализованная вода из резервуаров-хранилищ (БСК-10) подается электронасосом (А9-КНА) на механический фильтр, где подвергается отчистке, т.е.
твердые механические включения и частицы оседают, и вода поступает в накопитель, где с помощью фреонового компрессора охлаждается до оптимальной температуры +4 0С. Также возможны газирование «ДОСО-вода», при этом часть минерализованной воды подается электронасосом на установку (сатуратор), куда подводятся баллоны с углекислотой (давление в баллоне 70МПа), подача углекислоты регулируется с помощью пневматического редуктора (давление на выходе для пневматического редуктора 2Мпа). Непосредственно перед розливом расходная тара - бутылки, изготавливаются на машинах для выдува бутылок из ПЭТ-преформ. Затем газированная и негазированная минерализованная вода электронасосом подается в цех на установку для розлива (УД-2), где производится розлив в ПЭТ- бутылки.
Укупорка тары с «ДОСО-вода» и «ДОСО» осуществляется пластиковыми пробками с резьбой с помощью полуавтоматического устройства (УУ-3) с электромеханическим приводом. Нанесение клеевых этикеток на цилиндрическую поверхность тары производится на полуавтоматической этикетировочной машине (ЭМ-3Ц, ЭМ-4П). Групповая упаковка готовой продукции в термоусадочную пленку - проводится на термоусадочных аппаратах (ТПЦ-450 или МП-2), а затем их транспортируют в склады для хранения и продажи. При этом конкретные марки дробильной и фильтровальной установки выбираются в процессе технической проработки.
Таким образом, была разработана щадящая технология добычи воды и донных осадков из содовых озер Забайкалья и организована из них производство ветеринарных средств «ДОСО» и «ДОСО-вода».
Экономическая эффективность технологических процессов связанных с добычей, получением и применением «ДОСО» и «ДОСО-вода» Количества содовых озер с ресурсами, пригодными для ветеринарной практики в степных зонах Забайкалья, достаточно, при этом их формирование до биологически активного состояния происходит в природных условиях без вмешательства человека. При получении сухой формы «ДОСО» процесс сушки донных осадков производился на открытом воздухе за счет естественного испарения влаги из осадков.
Т абл и ца 14. Общий сравнительный анализ финансовых затрат на добычу, фасовку 1 кг «ДОСО» и розлив 1 л «ДОСО-вода», курс лечения 1 гол. животного Затраты, руб. Затраты на лечение, руб.
Полная Уровень Средств ал.