Симптоматическое бесплодие у коров в послеродовом периоде: диагностика, лечение и профилактика
На правах рукописи
ЕПАНЧИНЦЕВА Ольга Степановна СИМПТОМАТИЧЕСКОЕ БЕСПЛОДИЕ У КОРОВ В ПОСЛЕРОДОВОМ ПЕРИОДЕ:
ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА 06.02.06 – ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук
Краснодар - 2013
Работа выполнена на кафедре диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина»
Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РСФСР, республик Дагестан и Карачаево-Черкесская, профессор кафедры физиологии, хирургии и акушерства ФГБОУ ВПО Ставропольский ГАУ Никитин Виктор Яковлевич
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный ветеринарный врач РФ, зав. кафедрой ветеринарного акушерства и хирургии ФГБОУ ВПО Кубанский ГАУ Назаров Михаил Васильевич доктор ветеринарных наук, зав. лабораторией акушерства и гинекологии с.-х. животных ГНУ Краснодарский НИВИ Россельхозакадемии Коба Игорь Сергеевич доктор ветеринарных наук, профессор, профессор кафедры ботаники, зоологии и общей биологии ФГАОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет» Мануйлов Игорь Михайлович
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Тюменская государственная сельскохозяйственная академия»
Защита состоится «19» декабря 2013 года в «10:00» часов на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044, РФ, г. Краснодар, ул. Калинина, 13.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» (350044, РФ, г. Краснодар, ул. Калинина, 13).
Автореферат размещен на сайте ФГБОУ ВПО Кубанский ГАУ - http//www.kubagro.ru « » сентября 2013 г. и на официальном сайте ВАК РФ - http//www.vak.ed.gov.ru Отзывы на автореферат просим высылать по адресу: 350044, РФ, г. Краснодар, ул. Калинина, 13.
Автореферат разослан « » ноября 2013г.
Ученый секретарь диссертационного совета, доктор ветеринарных наук, профессор И.А. Родин 1.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Проблема бесплодия крупного рогатого скота постоянно привлекает внимание исследователей (П.Г. Захаров, 1998;
А.Г. Нежданов, В.П. Иноземцев, 1999;
К.Д.
Валюшкин, Г.Ф. Медведев, 2001;
И.В. Молоканова, 2002;
С.Н. Бабицин, 2003, В.Я. Никитин с соавт., 2010 и др.). Среди основных причин, вызывающих бесплодие и снижение темпов воспроизводства животных, особое место занимают на болезни половых органов, возникающие при патологическом течении родов и послеродового периода (Г.В. Зверева, 1985;
В.Г. Турков, 1984-1994;
В.П. Иноземцев с соавт., 2000;
Н.Р. Л.К. Попов с соавт., 2003, 2005;
И.Г.
Конопельцев с соавт., 2002;
К.А. Лободин, 2002 и др.) Тенденция роста акушерско-гинекологических заболеваний и наносимый ими значительный экономический ущерб диктуют необходимость разработки и внедрения эффективных препаратов для лечения и профилактики указанных патологий ().
Высокая заболеваемость коров в послеродовой период является причиной снижения их воспроизводительной функции, увеличения времени от отела до осеменения, снижения выхода телят и производства молока, что наносит высокий экономический ущерб (В.Ф.
Воскобойников, Г.Г. Козлов, 1991;
В.П. Иноземцев и др.,1996, 2000;
А.П. Зенькин, Д.С.
Войлошников, 2001).
Изучению этиологических факторов, патогенеза, также разработке эффективных методов, средств терапии и профилактики при симптоматическом бесплодии посвящены многие работы отечественных и зарубежных ученых, но, несмотря на достижения в этой области, оно повсеместно распространено и носит массовый характер. В комплексе мер по профилактике симптоматического бесплодия решающее значение имеет контроль течения послеродового периода и своевременное применение средств для профилактики и терапии, предупреждающей возникновение патологии и обеспечивающей быстрое полное восстановление воспроизводительной функции коров (А.И. Варганов, 2000;
В.К. Копытин, 2004).
Значительное число применяемых в настоящее время лечебно-профилактических средств, не в полной мере удовлетворяет запросы практической ветеринарии. Поэтому изыскание высокоэффективных, сравнительно дешевых и технологических в применении лекарственных средств, является одной из важнейших задач ветеринарной науки и практики (М.В. Назаров с соавт., 1999;
Б.Г. Панков, 2003;
Э. Грига, 2003;
A. Karagiannidas et al., 1999;
G.Brooks, 2001).
В связи с этим выяснение причин, разработка эффективных методов и профилактики и лечения бесплодия у коров в послеродовом периоде имеет большое практическое значение при интенсификации воспроизводства скота.
Цель и задачи исследований. Основной целью настоящей научно-исследовательской работы явилось изучение клинико-эпизоотологических, макро-микроморфологических, гематологических, биохимических, гормональных особенностей организма при симптоматическом бесплодии у коров в послеродовом периоде, а также разработка рациональных методов их терапии и профилактики. Для реализации поставленной цели были поставлены следующие задачи:
1. Выяснить состояние воспроизводства, распространение и сезонную динамику акушерско-гинекологической патологии крупного рогатого скота в хозяйствах Омской области в зависимости от природно-климатических зон.
2. Установить особенности клинического и патоморфологического проявления симптоматического бесплодия у коров в послеродовом периоде.
3. Исследовать морфологию слизистой оболочки влагалища и цитологический состав цервикальной и вагинальной слизи у коров при нормальном течении послеродового периода и при его патологии.
4. Изучить видовой состав, патогенность и устойчивость микроорганизмов содержимого матки и влагалища у клинически здоровых новотельных и больных острым и хроническим эндометритом коров.
5. Провести сравнительное изучение эффективности применения средств на основе сверхмалых доз биологически активных веществ, анавидина и электрорефлексотерапии с целью восстановления воспроизводительной функции коров.
6. Дать экономическое обоснование целесообразности их применения для лечения и профилактики коров с симптоматическим бесплодием.
Тема диссертации и научный консультант утверждены решением ученого совета института ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А. Столыпина (протокол № 9 от 15.04.2004 г.).
Научная новизна работы. Впервые изучено распространение и сезонная динамика симптоматического бесплодия у коров в хозяйствах Омской области в зависимости от природно-климатических зон. Установлены особенности клинического и патоморфологического проявления симптоматического бесплодия у коров в послеродовом периоде. Определены морфологические изменения в слизистой оболочке влагалища и цитологическом составе цервикальной и вагинальной слизи у коров в послеродовом периоде, при эндометрите и дисфункции яичников. Изучен микробный пейзаж матки и влагалища у клинически здоровых и больных эндометритом коров, патогенность и устойчивость микроорганизмов. Разработаны и апробированы устройства для получения содержимого матки на основе цитощетки, и для введения жидких лекарственных препаратов в матку при лечении коров с хроническими и скрытыми эндометритами. Создано и клинически апробировано новое средство на основе сверхмалых доз биологически активных веществ «Эндометрикомп» для терапии и профилактики эндометрита у животных. Разработан новый способ лечения эндометрита у коров, схемы лечения и профилактики субинволюции матки, эндометрита и овариопатий у коров, доказана их терапевтическая и профилактическая эффективность.
Научная новизна исследований подтверждена двумя патентами РФ на изобретения (№ 2356557 на препарат эндометрикомп и № 2467746 на способ лечения эндометрита у коров) и двумя патентами на полезную модель (№ 69753 на устройство для введения жидких лекарственных препаратов в матку и № 129385 на устройство для получения содержимого матки у коров).
Теоретическая и практическая значимость работы. Диссертационная работа является самостоятельным разделом госбюджетной темы НИОКР кафедры диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А.
Столыпина «Диагностика, лечение и профилактика акушерско-гинекологической патологии у животных в Западно-Сибирском регионе» (№ гос. регистрации 01201156734).
Приведенные сведения о морфологических изменениях в яичниках, матке и влагалище, цитологическом составе цервикальной и вагинальной слизи, а также микробном пейзаже гениталий у коров при нормальном течении послеродового периода и при его патологии, имеют большое теоретическое значение в связи с тем, что помогают обосновать патогенез и морфогенез симптоматического бесплодия у коров.
Полученные данные об эффективности гистологических, цитологических, гематологических и гормональных исследований позволяют определить характер патологии, своевременно и с высокой точностью диагностировать болезни матки и яичников у коров и на их основе разработать меры борьбы, используя при лечении и профилактике симптоматического бесплодия средство на основе сверхмалых доз биологически активных веществ «Эндометрикомп», антисептик «Анавидин» и электрофизические методы.
Фактические материалы диссертации рекомендуется использовать при написании учебников в соответствующих разделах акушерства и гинекологии сельскохозяйственных животных, учебных пособий, а также в учебном процессе на ветеринарных и зооинженерных факультетах и в учебных центрах повышения квалификации специалистов сельского хозяйства вузов.
Апробация и реализация результатов исследований. Основные результаты работы доложены и обсуждены на ежегодных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А. Столыпина (Омск, 1998-2012);
Международной научно-практической конференции «Достижения эволюционной, возрастной и экологической морфологии – практике ветеринарной медицины», посв. памяти профессора Ю.Ф. Юдичева (Омск, 2001);
Международной научно-практической конференции «Проблемы акушерско-гинекологической патологии и воспроизводства с.-х. животных», посв. 100-летию А.П. Студенцова (Казань, 2003);
Сибирском международном ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2005);
Международной научно-практической конференции (Киров, 2005);
областной научно-практической конференции «Ветеринарное благополучие в Омской области» (Омск, 2005);
научно-практической конференции к 85-летию ИЗОиПК ОмГАУ «Инновационные технологии производства и переработки сельскохозяйственной продукции» (Омск, 2006);
V Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины продуктивных и непродуктивных животных» (Омск, 2006);
VI Межрегиональной научно-практической конференции «Проблемы патологии человека и животных в условиях Сибири» (Омск, 2007);
Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарного акушерства, гинекологии и биотехники размножения животных» (Ставрополь, 2007);
Межрегиональной научно-практической конференции «Диагностика, лечение и профилактика болезней животных в условиях Сибири и Урала», посвященной 180-летию аграрной науки Сибири (Омск, 2008);
Международном научно-техническом форуме «Реализация Госпрограммы развития сельского хозяйства и регулирования рынков с.-х.
продукции, сырья и продовольствия: инновации, проблемы, перспективы» (Омск, 2009);
VIII Межрегиональной научно-практической конференции «Патология продуктивных и непродуктивных животных» (Омск, 2009);
Х Межрегиональной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные аспекты ветеринарной медицины», посв.
80-летию профессора П.А. Ильина (Омск, 2010);
Международной научно-практической конференции, посв. 90-летию СибНИВИ-ВНИИБТЖ «Инфекционная патология животных» (Омск, 2011);
научно-производственной конференции, посвященной 80-летию профессора Ю.Ф.
Юдичева «Достижения сравнительной, возрастной и видовой морфологии – практике ветеринарной медицины» (Омск, 2011);
Международной конференции «Актуальные проблемы в молочном скотоводстве и пути их решения» (Омск, 2013) и отражены в опубликованных работах, на Международной научно-производственной конференции по акушерству, гинекологии и биотехнике репродукции животных, посв. 100-летию И.А. Бочарова (Санкт-Петербург, 2001);
Международной юбилейной конференции «Достижения ветеринарной медицины – ХХI веку», посв.40-летию ИВМ АСХИ (Барнаул, 2002);
Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань 2002);
Международной научно-практической конференции, посв. 70-летию В.Р.
Филиппова (Улан-Уде, 2005);
Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях» (Краснодар, 2006);
VI и VII Сибирской ветеринарной конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2006, 2007);
Всероссийской конференции «Актуальные вопросы животноводства в свете реализации национального проекта по развитию АПК» (Тюмень, 2006);
XXI Международной научно–практической конференции «Аграрная наука – с.-х. производству Республики Казахстан, Сибири и Монголии» (Новосибирск, 2009);
Международной научно-практической конференции «Достижения современной ветеринарной науки и практики в области охраны здоровья животных», посвященной 35-летию образования ФВМ (Краснодар, 2009);
Международной научно – практической конференции «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного и продуктивного здоровья животных», посвящ.
100-летию со дня рождения профессора В.А. Акатова (Воронеж, 2009);
II Сибирском международном ветеринарном конгрессе (Новосибирск, 2010);
Международной научно-практической конференции «Современная наука: тенденции развития» (Краснодар, 2012) Международной научно-практической интернет-конференции «Современные тенденции в ветеринарной медицине» (Ставрополь, 2012);
II, VII и VIII Международной научно-практической конференции «Аграрная наука – сельскому хозяйству» (Барнаул, 2007, 2012, 2013);
Международной научной конференции «Научное и кадровое обеспечение инновационного развития агропромышленного комплекса» (Казань, 2013).
Методические рекомендации, разработанные на основе материалов диссертации:
«Диагностика, лечение и профилактика послеродовых осложнений и дисфункций яичников у крупного рогатого скота» (2006), «Диагностика, лечение и профилактика симптоматического бесплодия животных» (2007), утверждены научно-техническим советом при Министерстве сельского хозяйства и продовольствия Омской области;
«Применение анавидина в ветеринарном акушерстве» (2013), утверждены подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии.
Разработанные препараты и способы профилактики и терапии симптоматического бесплодия у коров внедрены в 23 хозяйствах Омской области и трех Тюменской, подтверждены актами внедрения.
Теоретические разработки и практические рекомендации включены в учебный процесс и используются при чтении лекций и проведении лабораторных и практических занятий по ветеринарному акушерству и биотехнике размножения животных ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина», ФБГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет», ФБГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет», ФБГОУ ВПО «Тюменская государственная сельскохозяйственная академия», ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» и других вузах страны.
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано печатных работы, из которых 12 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, 4 патента Российской Федерации и 3 методических рекомендаций.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 367 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, библиографического списка (429 источников, в т.ч. зарубежных). Работа иллюстрирована 27 таблицами и 69 рисунками.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Распространение, формы акушерско-гинекологической патологии у коров в условиях Омской области и факторы, их обусловливающие.
2. Клинические и макро-микроморфологические изменения в репродуктивных органах коров и цитоморфология цервикальной и вагинальной слизи при нормальном течении послеродового периода и его патологии.
3. Микробиоценоз матки у клинически здоровых и больных эндометритом новотельных коров.
4. Разработка способов терапии и профилактики симптоматического бесплодия у коров с использованием средств на основе сверхмалых доз биологически активных веществ, анавидина и электрорефлексотерапии.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Исследования выполнены в период с 1997 по 2013 год на кафедре диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства, кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии, лаборатории резистентности молодняка сельскохозяйственных животных ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина», гистологической лаборатории ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии, в девяти хозяйствах Омской и двух хозяйствах Тюменской области.
Объектом исследований служили коровы красной и черно-пестрой голштинизированной породы в возрасте 3-7 лет массой 500-650кг со среднегодовой молочной продуктивностью 4655-6150кг. Данные о распространении акушерско-гинекологических заболеваний коров в хозяйствах получали на основании данных анамнеза и результатов акушерско-гинекологической диспансеризации маточного поголовья крупного рогатого скота.
Для изучения распространения симптоматического бесплодия и форм его проявления у коров клинико-гинекологическому осмотру было подвергнуто 3389 животных в 22 хозяйствах Омской области, трех хозяйствах Тюменской, двух хозяйствах Новосибирской и двух хозяйствах Алтайского края.
Для оценки состояния метаболитического гомеостаза организма животных при симптоматическом бесплодии от коров каждого хозяйства (n=240) проведен морфологический и биохимический анализ крови. Кровь для исследований брали в утреннее время до кормления животных из яремной вены перед началом, на 7, 14, 21-й день лечения. В качестве антикоагулянта использовали гепарин или цитрат натрия.
Гематологические исследования проводили по общепринятым методикам: гемоглобин по методу Сали, подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере Горяева, лейкограмму методом Филиппченко в мазках периферической крови, фиксированных метиловым спиртом и окрашенных по Романовскому-Гимзе, скорость оседания эритроцитов унифицированным микрометодом Панченкова (1972).
Для биохимических исследований использовали плазму крови, полученную путем центрифугирования стабилизированной гепарином крови при 3000 об/мин в течение 30 минут.
Определение общего белка, альбуминов, глобулинов, общего кальция, неорганического фосфора, резервной щелочности, каротина, креатинана и общего билирубина проводили на биохимическом анализаторе ‘’Screen Master’’ производства фирмы ‘’Hospitex’’ (Италия) с использованием реактивов ‘’Hospitex’’ (Италия) и ‘’Human’’ (Германия).
Для оценки гормонопоэтической функции яичников в послеродовом периоде и при их патологии выполнены исследования от 116 коров на содержание половых стероидов (прогестерон, эстрадиол 17 бетта) с использованием метода иммуноферментного анализа. В качестве наборов ИФА использовали тест-системы фирмы «Хема-Медика». Учет реакции проводили на анализаторе «Униплан».
При наружном и вагинальном исследовании половых органов коров обращали внимание на целостность, цвет кожи и слизистых оболочек, их отечность и гиперемию, состояние влагалищной части шейки матки, степень открытия цервикального канала, объем и характер цервикально-вагинальной слизи. При ректальном исследовании - на консистенцию и диаметр шейки матки, величину и консистенцию рогов матки, толщину их стенок, ригидность матки;
размеры, форму, подвижность и консистенцию яичников и наличие на их поверхности фолликулов, кист или желтых тел.
Для выявления скрытого эндометрита диагностические исследования были проведены у коров, предназначенных для осеменения. У всех животных осматривали наружные половые органы, проводили ректальное и выборочное вагинальное исследование, визуальный осмотр цервикально-вагинальной слизи, а также лабораторные исследования для выявления скрытой патологии эндометрия: по изменению рН цервикально-вагинальной слизи, по Н.А. Флегматову, модифицированный тест по Г.Г. Козлову.
Для гистологических исследований слизистой оболочки влагалища и эндометрия при различных патологических состояниях матки и яичников у коров, использовали пробы слизистой оболочки матки и влагалища, полученные биотомом. Материал матки и яичников от коров был получен при убое на мясоперерабатывающем холдинге «Компур». Гистологический материал фиксировали в 4%-ном забуференном растворе формальдегида, затем заключали в парафин. Для изучения гистоморфологии депарафинированные срезы окрашивали гематоксилином и эозином.
Для цитологических исследований отбирали пробы вагинальной и цервикальной слизи при помощи с помощью сконструированного нами устройства для получения содержимого матки у коров, на основе цитощетки (патент № 129385 от 27. 06. 2013 г.) при нормальном течении послеродового периода и при его патологии. Из проб готовили мазки, которые высушивали на воздухе в течение 10…15 минут, затем фиксировали 960 этиловым спиртом, окрашивали гематоксилином и эозином и по Романовского-Гимзе, подсчитывали 200-500 соматических клеток. Затем выводили цитологические критерии: индекс созревания (процентное соотношение базальных, парабазальных, промежуточных и поверхностных клеток), эозинофильный (ЭИ) и кариопикнотический (КИ) индексы. Всего приготовлено и изучено мазков. Микроскопию, морфометрию и микрофотографирование гистопрепаратов и мазков проводили с помощью микроскопа Imager А1 с биометрической обработкой в программе Axio Vision версии 4.7.
В качестве исходного материала для микробиологических исследований служили пробы содержимого матки от 213 коров, в том числе 83 пробы от клинически здоровых новотельных коров, 75 проб от коров с острым послеродовым эндометритом и 55 проб от коров, больных хроническим эндометритом. Пробы брали стерильными ватными тампонами, закрепленными на тупферах и цитощеткой (патент № 129385 от 27. 06. 2013 г.) и помещали в стерильные пробирки с МПБ или физиологическим раствором.
Первичный посев исследуемого материала производили на МПА с 5% дефибринированной крови лошади с последующим инкубированием в аэробных условиях при 37°С в течение 24… 48 ч. Микроскопию окрашенных по Граму мазков проводили в иммерсионной системе микроскопа Imager А1. Для выделения чистой культуры в зависимости от культуральных и морфологических свойств микроорганизмов производили пересевы на МПА, ЖСА, КБА, среды Левина, Сабуро, Эндо. Для определения видового состава выделенных микроорганизмов проводили биохимические исследования. На основании морфологических, культуральных и биохимических свойств микроорганизмов определяли их видовую принадлежность, используя «Определитель бактерий Берджи» (1997).
Резистентность выделенных культур микроорганизмов к антимикробным препаратам определяли дискодиффузионным методом, используя АГВ или 5%-ный кровяной агар, с помощью бумажных дисков, пропитанных антибактериальными веществами. Интерпретацию значений диаметров зон задержки роста проводили с учетом рода микроорганизма на основании таблиц инструкции к наборам дисков (Научно-исследовательский центр фармакотерапии при НИИ антибиотиков г. Санкт-Петербург). В работе были использованы диски с ампициллином, гентамицином, амфотерицином В, левомицетином, тилозином, норфлоксацином, цефазозином, стрептомицином, бензилпенициллином и клотримазолом.
Патогенность микроорганизмов изучали методом биопробы на белых мышах (самцах) одного возраста с массой тела 14-16г (n=146). Наблюдение за зараженными мышами вели в течение 10 дней. Павших и убитых животных подвергали патологоанатомическому вскрытию с последующим бактериологическим исследованием и изучением мазков-отпечатков из паренхиматозных органов и крови. LD50 определяли по методу Рида и Менча в модификации Троицкого В.Л. (1950).
Для оценки эффективности применения препаратов на основе сверхмалых доз биологически активных веществ, антисептика «анавидин» и электрорефлексотерапии для восстановления воспроизводительной функции коров и определения рациональных сроков их применения было выполнено три серии научных опытов.
В первой серии изучена сравнительная эффективность разработанного нами средства на основе сверхмалых доз биологически активных веществ с производственным названием «Эндометрикомп» для терапии и профилактики эндометрита у животных на основе препарата «Эндометриум композитум» фирмы «PlantaVet» (Германия), которое имеет следующий состав:
эндометрий бовисный D16, 1,0;
серебро металлическое D29, 1,0;
кварц D29, 1,0;
эхинацея узколистная D2, 1,0;
арника горная D2-D4, 1,0;
этиловый спирт-ректификат, 18-20мл;
раствор хлорида натрия 0,9%, до 100 мл.
Эндометрий бовисный - это слизистая оболочка матки здоровой коровы, стимулирует восстановление патологически измененной слизистой оболочки матки. Серебро металлическое, растворы которого обладают бактерицидным действием, в высоких разведениях применяется с одинаковой эффективностью при лечении острых и хронических болезней. Кварц – один из самых распространенных минералов, обладает широким терапевтическим диапазоном, позитивно влияет на течение хронических болезней. Эхинацея узколистная - содержит активные вещества (полисахариды, эфирное масло, гликозид эхинакозид, бетаин, смолы, фитостерины, органические кислоты: пальмитиновая, линолевая, черотиновая), усиливающие защитные силы организма и действующие в качестве неспецифических стимуляторов, подавляющих размножение болезнетворных микроорганизмов путем повышения количества гранулоцитов и активизирования фагоцитоза. Арника обладает выраженным стимулирующим действием на процессы свертывания крови и гемостаз, проявляет бактерицидное свойство, способствует регенерации поврежденных тканей, усиливает тонус и сокращения матки. В виде настойки используется при субинволюции, острых и хронических воспалительных заболеваниях матки, для профилактики пиемии. Этиловый спирт добавлен в качестве консерванта.
Испытания разработанного нами препарата включали экспериментальную и клиническую оценку. Экспериментальная оценка препарата предусматривала изучение его физико-химических свойств, стабильности, срока годности, специфического действия и основных фармако-токсических свойств.
При изучении физико-химических свойств «Эндометрикомпа» определяли его цвет, запах, консистенцию (органолептически), плотность (ареометром), pH (pH-метр-милливольтметром 150М, с использованием стеклянного комбинированного электрода ЭСКЛ-08М). Определение стабильности проводили по изменению внешнего вида, физико-химических свойств. Определение срока годности и старение препарата проводили в соответствии с Временной инструкцией по проведению работ с целью определения срока годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре (№ 42-2-82 Минздрава СССР, 1983г.), а также по показателям качества препарата по истечении 1,3,6 и 12 месяцев хранения.
Безвредность «Эндометрикомпа» изучали путем установления его аллергогизирующего и раздражающего действия, острой и хронической токсичности. За животными вели тщательное наблюдение. Аллергогизирующее действие препарата определяли методом сенсибилизации группы кроликов (n=12) многократными (каждые четыре часа) аппликациями препарата по 0, мл на один и тот же участок кожи диаметром 20 мм в течение четырех сут. Контролем служили кролики (n=12), которых сенсибилизировали лошадиной сывороткой по 0,1 мл каждые четыре часа в течение четырех сут. Критерием оценки служило развитие выраженного дерматита в местах капельных проб. Раздражающее действие препарата «Эндометрикомп» определяли методом конъюнктивальной пробы: морским свинкам (n=3) однократно инстиллировали одну каплю препарата на конъюнктиву верхнего века левого глаза. Правый глаз животных, на конъюнктиву которого наносили 1 каплю воды, служил контролем. Учет реакции проводили в течение 48 часов.
Острую и субхроническую токсичность препарата «Эндометрикомп» изучали на белых мышах массой 20-22 г и белых крысах массой 120-160 г. согласно «Методических указаний по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (Л.П. Маланин и др., 1988). Для определения острой токсичности было сформировано 6 групп животных по 6 голов в каждой. Перед началом эксперимента мышей выдерживали на карантине в течение 14 сут. Испытуемый препарат вводили непосредственно в желудок с помощью шприца с тупой иглой, на конце которой наплавлено олово в дозах 11, 20, 30, 50, 70, 90 мг/кг. Наблюдение за клиническим состоянием животных проводили в течение 10 сут., отмечая время наступления их гибели. За LD50 принимали промежуточную дозу препарата между минимальной летальной и максимально переносимой.
Субхроническую токсичность «Эндометрикомпа» изучали по методу R.K. Lim et al.
(1961) на 24 белых крысах-самцах массой 180-210 г., которые по принципу аналогов были поделены на две группы: контрольную и опытную. Животным контрольной группы вводили стерильный изотонический раствор хлорида натрия. В опытной группе - препарат «Эндометрикомп» внутрижелудочно ежедневно в течение 20 сут. по схеме, начиная с первоначальной дозы 0,1 от LD50, которую через каждые 4 сут. увеличивали в 1,5 раза. За животными вели ежедневное наблюдение, учитывали общее состояние, аппетит и изменение массы тела. Токсическое действие препарата оценивали по гематологическим и биохимическим показателям. Коэффициент кумуляции вычисляли по формуле: К к = LD50 (субхроническая) / LD50 (острая).
Клиническая оценка препарата предусматривала определение его терапевтической и профилактической эффективности. Исследования по определению эффективности препарата «Эндометрикомп» в комплексной терапии острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у коров проводили в трех хозяйствах Омской области.
Эффективность лечения больных коров определялась кратностью проведения курсов лечения. Результативность осеменения путем ректального исследования на стельность через 1,5-2 месяца и повторного выявления стадии возбуждения полового цикла. После диагностики беременности у каждого животного и в группах определяли количественные показатели репродуктивной функции – оплодотворяемость от первого осеменения, дни бесплодия, индекс осеменения.
Опыт по изучению профилактической эффективности препарата «Эндометрикомп» проводили в родильном отделении молочного комплекса СПК «Ачаирский». Объектами исследований служили коровы черно-пестрой породы в возрасте от трех до семи лет массой 500…600кг со среднегодовой молочной продуктивностью 4600кг. Для эксперимента было отобрано 59 коров, из которых по принципу аналогов сформировали три группы.
Новотельным коровам первой (контроль) группы (n=20) внутриаортально вводили 1%-ный раствор новокаина в дозе 100мл. Коровам второй (опыт) группы (n=19) однократно инъецировали «Эндометрикомп» по 10 мл внутримышечно. Коровам третьей (опыт) группы (n=20) инъецировали «Эндометрикомп» и внутриаортально вводили 1%-ный раствор новокаина в дозе 100мл. Животным всех групп в течение послеродового периода еженедельно вводили тетравит по 5 мл внутримышечно и с 3…4 сут. после отела, предоставляли ежедневно моцион в течение 1…1,5 ч.
Во время проведения опыта животные находились под контролем, ежедневно подвергались клиническому осмотру. Гинекологическое обследование для выявления эндометрита у коров в послеродовой период проводили по общепринятой методике.
Критериями эффективности профилактики считали отсутствие у коров осложнений в форме субинволюции матки или эндометрита, инволюцию половых органов животных в физиологические сроки и восстановление их репродуктивной функции. Результативность осеменения путем ректального исследования на стельность через 1,5…2 месяца и повторного выявления стадии возбуждения полового цикла. У каждого животного и в группах определяли количественные показатели репродуктивной функции - оплодотворяемость от первого осеменения, дни бесплодия, индекс осеменения.
Для оценки влияния препарата на гормонально-метаболитический гомеостаз животных проведен морфологический, биохимический и иммуноферментный анализ крови от коров и по выше обозначенным показателям.
Во второй серии опытов изучена сравнительная эффективность антисептика «Анавидин» для терапии и профилактики эндометрита у коров (патент № 2467746, 2012).
Антисептик «анавидин» производит ЗАО «Специализированная промышленная компания ИрИОХ» (г. Иркутск), зарегистрирован и разрешен ФГУ «ВГНКИ» России. Его действующим веществом является полигексаметиленгуанидин фосфат (ПМГМФ), который губительно действует на вирулентную грамположительную и грамотрицательную микрофлору, в том числе микобактерии туберкулеза, анаэробные и споровые бактерии, а также вирусы (в т.
ч. свиного и птичьего гриппа) и грибы (в т. ч. плесневые), сохраняет биоцидную активность после замораживания и оттаивания. По степени воздействия на организм по ГОСТ 12.1.007- антисептик «Анавидин» в жидкой и порошкообразной форме при введении в желудок относится к 3 классу умеренно опасных веществ, при нанесении на кожу - к 4 классу малоопасных соединений, при парентеральном введении – к 4 классу малотоксичных веществ;
в виде паров при ингаляционном воздействии по степени летучести средство мало опасно ( класс опасности). Средство оказывает слабое местно-раздражающее действие на кожу и выраженное – на слизистые оболочки глаз, не обладает сенсибилизирующим и кожно-резорбтивным действием. Рабочие растворы оказывают слабое раздражающее действие на слизистые оболочки глаза в концентрациях свыше 1%. Государственным Научным Центром вирусологии и биотехнологии «Вектор» (г. Новосибирск) была установлена нетоксичная концентрация препарата для лабораторных мышей на уровне 0,01% (11 мг/кг живого веса) и для цыплят 0,5%.
На поверхностях растворы анавидина образуют прозрачную малозаметную полимерную пленку, которая обладает бактерицидным действием в течение семи суток и смывается водой. Растворы анавидина применяются для профилактической дезинфекции объектов государственного ветеринарного надзора и в качестве кожного антисептика для гигиенической обработки рук ветеринарного персонала, хирургов, кожи операционного и инъекционного полей животных.
Определение оптимальной концентрации анавидина проводили по степени чувствительности микроорганизмов, выделенных из содержимого матки коров, больных острым послеродовым эндометритом, с помощью стерильных дисков, пропитанных растворами препарата с концентрацией 0,05%;
0,1%;
0,2%;
0,3%;
0,4%;
0,5%.
Влияние анавидина на течение регенеративных процессов изучали на модели экспериментально воспроизведенных инфицированных кожно-мышечных ран у белых крыс.
Животным опытной группы (n=5) проводили обработку ран 0,5%-ным раствором анавидина с интервалом 48 часов, в контрольной группе (n=5) раны у животных не обрабатывали.
Определение объема и интервала введения анавидина при остром эндометрите у коров изучали на животных с клиническими признаками послеродового гнойно-катарального эндометрита в количестве 30 голов, которые были поделены на пять групп. Животным первой группы 0,5%-ный раствор анавидина вводили внутриматочно в объеме 50 мл, второй группы – 75 мл, третьей – 100 мл, четвертой – 150 мл и пятой – 200 мл. Эффективность применения препарата определяли по наличию роста микроорганизмов через 12, 24, 36, 48, 60 и 72 часа в пробах содержимого матки.
Определение кратности внутриматочного введения анавидина изучали на 45 коровах с клиническими признаками острого послеродового гнойно-катарального эндометрита в возрасте от трех до семи лет, из которых были сформированы три группы по 15 голов. Коровам внутриматочно вводили 0,5%-ный раствор анавидина в объеме 150 мл с интервалом 48 часов: в первой группе - трехкратно;
во второй – пятикратно и в третьей группе - семь раз. Критериями клинического выздоровления служило прекращение выделения экссудата, возвращение матки в тазовую полость, уменьшение ее размеров и восстановление тонуса.
Для определения эффективности анавидина при скрытом эндометрите из числа выявленных лабораторными и клиническими исследованиями коров, больных скрытым эндометритом, по принципу аналогов были сформированы две группы, по 20 голов в каждой.
Лечение больных коров проводили в стадию полового возбуждения при визуальном выявлении течки через 8-10 часов после последнего осеменения. Животным внутриматочно однократно вводили подогретый до 38-400С 0,5%-ный раствор анавидина в объеме 20 мл с помощью устройства для введения жидких лекарственных препаратов (патент № 69753, 2009). Во второй группе дополнительно инъецировали разработанный нами препарат «Эндометрикомп» по 10 мл внутримышечно, трехкратно, с интервалом между инъекциями 48 часов.
Эффективность анавидина с целью профилактики эндометрита определяли на новотельных коровах (n=20) в возрасте от трех до семи лет, массой тела 550…600 кг, со среднегодовой молочной продуктивностью 5000-5500 кг, из которых были сформированы две группы по 10 голов. Коровам без осложнений родов и послеродового периода внутриматочно однократно вводили 0,5%-ный водный раствор анавидина объемом 100 мл. Животным с осложнениями в послеродовом периоде дополнительно применяли внутримышечные инъекции препарата «Эндометрикомп» по 10 мл один раз в 48 часов от трех до пяти раз.
В третьей серии опытов изучали эффективность применения электрорефлексотерапии в комплексе с препаратами на основе сверхмалых доз биологически активных веществ (Эндометрикомп, Овариум композитум) и анавидином для лечения и профилактики послеродовой патологии у коров.
Экспериментальные исследования по изучению эффективности электрорефлексотерапии при комплексной терапии коров с субинволюцией матки проводили на животноводческом комплексе ОПХ «Омское». Под наблюдением находились 10 коров, продуктивностью около 5500 кг молока за лактацию, живой массой 500–550кг, в возрасте от 3 до 6 лет, из которых были сформировали две группы (опыт и контроль) по пять голов в каждой.
Для лечения коров первой группы (опыт) использовали: электронейростимуляцию матки и яичников с помощью прибора ЭТНС-100–1В по 10мин. с интервалом 48ч. в течение 10 сут.;
препарат Овариум композитум, который вводили коровам внутримышечно, в дозе 10мл дважды с интервалом 5 сут.
Прибор ЭТНС-100-1В, разработанный В.И. Околеловым (1992) и представляющий собой генератор импульсов с частотой от 5 до 100 Гц и амплитудой от 10 до 100В, оказывает противовоспалительное, болеутоляющее, спазмолитическое и нейротропное действие. В зоне воздействия изменяется возбудимость нервных рецепторов, происходит нарастание активности сокращений матки, что способствует удалению экссудата из полости матки и улучшению васкуляризации.
Вначале прибор готовили к работе: матерчатый пояс с электродами накладывали на шёрстный покров, предварительно смоченный спиртом или его заменителями, в области высокой точки крестца на 5–7см ниже остистых отростков. Затем подавали импульсы с частотой 5–10Гц (регулятор А на 3-4 делении) и амплитудой 50–80В (регулятор R на 3- делении). При внешнем осмотре наблюдали сокращение промежности.
Для лечения коров второй группы (контроль) использовали экстракт сапропеля, который предварительно подогрев до 400С, вводили внутриматочно, в дозе 300мл однократно и через сут. проводили трансректальный массаж матки и яичников по 5-7 минут.
Коровам обеих групп внутримышечно вводили тетравит в дозе 5мл в первый и седьмой дни лечения. По окончанию курса лечения проводили ректальное исследование матки и яичников. При появлении признаков стадии возбуждения полового цикла проводилось искусственное осеменение визо–цервикальным способом. Контроль плодотворного осеменения осуществляли ректальным исследованием через 2-2,5 месяца.
Исследования по определению эффективности электрорефлексотерапии и препарата «Эндометрикомп» в комплексной терапии острого послеродового гнойно-катарального эндометрита у коров проводили в молочном комплексе СПК «Ачаирский». Для эксперимента было отобрано 20 коров черно-пестрой породы живой массой 500…550кг в возрасте от трех до пяти лет с симптомами послеродового гнойно-катарального эндометрита, из которых по принципу аналогов сформировали две группы (опыт и контроль) по 10 голов в каждой.
Для лечения коров использовали аналогичные схемы, применяя электронейростимуляцию с помощью прибора ЭТНС-100-1В, инъекции тетравита и внутриматочное введение фуразолидоновых палочек. Коровам второй группы (опыт), кроме того, использовали «Эндометрикомп» (табл.1). В обеих группах лечение начиналось после появления клинических признаков заболевания, которые были отмечены на 3…5 сут. после родов. Эффективность лечения определялась по числу выздоровевших коров, продолжительности лечения, времени от отела до плодотворного осеменения.
Опыт по изучению сравнительной эффективности электрорефлексотерапии и препарата Овариум композитум для профилактики бесплодия в послеродовом периоде проводили в ПСХК «Болдыревский» Абатского района Тюменской области. Объектами исследований служили коровы черно-пестрой породы (n=25), в возрасте 3–7 лет, с нормальным течением родов и послеродового периода, из которых по мере поступления были сформированы четыре опытные и одна контрольная группы, по пять голов в каждой.
Для коров первой группы (опыт) использовали Овариум композитум, который вводили внутримышечно в дозе 10мл с интервалом 5 сут. от трех до пяти раз, начиная с 10 дня после отела, в сочетании с электронейростимуляцией прибором ЭТНС–100–1В по 10 минут с интервалом 48 часов и инъекциями тривитамина в дозе 10мл с интервалом 7-10 сут. Во второй группе коров (опыт) использовали инъекции препаратов Овариум композитум и тривитамин в тех же дозах и с той же кратностью. В третьей группе коров (опыт) применяли электронейростимуляцию и тривитамин. В четвертой группе коров (опыт) применяли тривитамин и однократно, за 20 минут до осеменения, электронейростимуляцию. Коровам пятой группы (контроль) инъецировали тривитамин.
В период исследований коровы всех групп пользовались активным моционом. Течение послеродовых инволюционных процессов контролировали клиническими наблюдениями.
Исследование считалось законченным при завершении инволюции половых органов и появлении признаков стадии возбуждения полового цикла. Половую охоту у коров выявляли визуальным методом, осеменяли мано-цервикальным способом. Контроль эффективности искусственного осеменения проводили ректальным исследованием через 1,5–2 месяца.
Экономическую эффективность использованных схем лечения и профилактики рассчитывали по методике Никитина И.Н. (1999), с учетом рекомендаций, изложенных в ветеринарном законодательстве (2002).
Полученные количественные показатели обработаны математически на PC с использованием программы Excel-2010, для оценки достоверности полученных результатов использовали критерии Стьюдента с учетом рекомендаций Г.Ф. Лакина (1990) и В.А. Середина (2001).
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Состояние воспроизводства крупного рогатого скота в Омской области Омская область является регионом с развитым молочным животноводством, где разводят крупный рогатый скот, большей частью, черно-пестрой и красной породы, адаптированный к суровым сибирским условиям. Районы области расположены в трех природно-климатических зонах: северной лесной, лесостепной (северной и южной) и степной.
Основное поголовье коров в хозяйствах Омской области (71%) сосредоточено в районах южной лесостепной и степной зон. С 2001 по 2011 год количество коров сократилось на 38%.
Максимальное снижение (на 52,4%) произошло в хозяйствах северной лесостепной зоны.
Незначительное сокращение поголовья коров зарегистрировано в степной зоне (на 16,3%), исключая Одесский район (в 4,7 раза). В северной лесостепной зоне поголовье коров сократилось на 41,8%, в южной, соответственно, на 41,09%. Наибольшим сокращение поголовья коров было с 2003 по 2007 год, но с 2009 года численность коров в хозяйствах области относительно стабилизировалась на уровне 90-100 тыс. голов.
В 2012 году поголовье коров в хозяйствах Омской области составило 90400 голов, в том числе 20841 - в племенных заводах и репродукторах. В 13 из 29 племенных хозяйств разводят крупный рогатый скот красной породы сибирского и кулундинского типа, в остальных черно-пестрой голштинизированной породы. Удой за лактацию коров в общественном животноводстве составил 3936 кг, в племенных хозяйствах – 4984 кг.
Воспроизводительная способность животных в хозяйствах Омской области в период с 2001 по 2001 год находилась в пределах от 77 до 82 телят. В хозяйствах северной зоны минимальный выход телят регистрировали в 2007 году (69), а максимальный в 2002 году (85).
Относительно стабилен на протяжении всего периода этот показатель был в северной (77-83) и южной (74-80) лесостепной и степной (77,5-83) зонах области.
Количество мертворожденных телят от коров и нетелей в хозяйствах области за анализируемый период сократилось с 8222 (2001) до 4891 (2011) голов, однако в процентном выражении этот показатель в течение исследуемого периода был на уровне 4,7-5,6%.
Бесплодие в хозяйствах области с 2001 по 2004 год регистрировали у 12660-15060 коров и телок (9,3% к общему поголовью);
в 2005 году - у 18645 (14,80%).В последующие годы этот показатель постепенно снизился, до 10350 (10,32%) в 2011 году (табл. 1). В хозяйствах северной зоны, по сравнению с 2001 годом (9,3%), бесплодие у коров сократилось в 1,5-2 раза. В хозяйствах северной лесостепи количество бесплодных животных снизилось на 15,5%. Самый высокий уровень бесплодия у животных регистрировали в южной лесостепной зоне. Так, в году он составил 10,9%, а в 2005 24,7%, затем постепенно снизился до 12,9% (2011). В степной зоне количество бесплодных коров и телок в начале и в конце анализируемого периода было практически одинаковым (рис. 1).
Рис. 1. Динамика бесплодия у коров в хозяйствах Омской области с 2001 по 2011 гг.
Основными причинами бесплодия животных в хозяйствах области послужили: болезни половых и других органов;
продолжительный стойловый период и недостаточная инсоляция;
отсутствие маршрутных прогулок в большинстве хозяйств;
нарушение обмена веществ у животных вследствие несбалансированности рациона;
нарушение сроков осеменения животных. При проведении биохимических исследований сыворотки крови 4596 сухостойных коров в 15,7% проб был выявлен дефицит кальция;
в 13,8% проб дефицит, а в 3,9% проб избыток фосфора. В 15,4% проб имел место недостаток белка, а в 3,5% его избыток;
в 26,7% проб - недостаток каротина, в 24,5% проб - щелочного резерва и в 9,9% проб - витамина А.
Кроме того, в ряде хозяйствах не хватает ветеринарных специалистов, в особенности врачей-гинекологов.
Экономический ущерб, причиняемый бесплодием, в хозяйствах Омской области к году снизился на 51%, по сравнению с 2001 годом, однако это произошло, в основном, за счет сокращения поголовья крупного рогатого скота и в том числе маточного поголовья коров, в общественном животноводстве.
3.2. Распространение и сезонная динамика акушерско-гинекологических болезней у коров в хозяйствах Акушерско-гинекологическими болезнями в хозяйствах Омской области ежегодно болеют, в среднем, 26,37% коров. Низкий уровень заболеваемости коров регистрировали в районах северной (15,24%), и северной лесостепной зоны (16,67%). Такая же тенденция была установлена в районах степной (27,93%) и южной лесостепной (35,20%) зон.
Заболеваемость коров в разные годы была выражена не одинаково. В целом по области уровень акушерско-гинекологических болезней у коров составлял 24-26%, но в хозяйствах районов разных зон области он отличался.
В хозяйствах северной зоны регистрировали снижение акушерско-гинекологических болезней с 18,1% (2003) до 12,5% (2011). В северной лесостепной зоне уровень заболеваемости коров повысился с 11,6% (2002) до 17,1% (2011). В районах южной лесостепной зоны заболеваемость коров в течение всего исследуемого периода была значительной - 39,9% (2002-2003), 31,2% (2011). В районах степной зоны, напротив, минимум заболеваемости отмечали в 2002 году (20,58%), затем начался до 31,2% (2011).
В структуре акушерско-гинекологических болезней коров преобладали эндометриты (47,8%) и задержание последа (30,25%), третье место занимали болезни яичников (11,7%), из которых ведущими были их функциональные расстройства, около 10% приходилось на аборты и прочие болезни (послеродовой парез, выворот влагалища и матки, вагинит и др.) (рис. 2).
аборты, 3,9% прочие болезни, 6,3% болезни яичников, 11,7% задержание после эндометриты, 47,8% Рис. 2. Структура акушерско-гинекологических болезней у коров в хозяйствах Омской области в 2002-2011гг.
Эндометриты - самая распространенная патология послеродового периода у коров, которую регистрировали у 11,8% новотельных коров. В структуре послеродовых акушерско-гинекологических болезней у коров в районах северной и южной лесостепной зон на долю эндометритов приходилось 46,6% и 49,75%, соответственно, а в районах северной и степной зон - 50,3% и 52,7%. Заболеваемость коров эндометритом в разные годы анализируемого периода в целом по области была примерно одинакова.
Задержание последа осложняло роды у 7,1% коров области и за анализируемый период в структуре акушерско-гинекологических болезней регистрировали стабильно на уровне 29-31%, за исключением 2008 года, когда был отмечен рост патологии до 33,8%. При анализе динамики задержания последа в хозяйствах районов разных природно-экономических зон области были установлены некоторые отличия.
Болезни яичников в структуре акушерско-гинекологических заболеваний у коров области занимали всего 12,4%. Низкий процент отмечали в районах северной зоны (3,56%), средний - в районах северной лесостепной (10,16%) и степной зоны (11,5%). В районах южной лесостепной зоны болезни яичников регистрировали у 14,46%. При изучении динамики болезней яичников у коров отмечали незначительный рост в целом по области с 11,5% (2002) до 12,4% (2011) за счет повышения до 14-17% в районах степной и южной лесостепной зон.
Аборты регистрировали, в среднем, у 1% коров хозяйств, в структуре акушерско-гинекологических болезней они занимали 3,9%. Наибольшее количество абортов отмечено у коров степной (1,32%) и южной лесостепной (1,27%) зон. Ниже среднего уровня - в северной лесостепи (0,81%) и наименьшее - в северной зоне (0,34%). Нами отмечена тенденция снижения количества абортов с 2001 по 2011 годы, за исключением лесостепной (северной и южной) и степной (1–1,5%) зон.
При изучении сезонного проявления акушерско-гинекологических болезней у коров было установлено, что они значительно распространены в зимне-стойловый период и имеют коррелятивную связь с отелами. Наименьшее количество отелов и акушерско-гинекологических болезней за весь анализируемый период регистрировали с июля по ноябрь. Высокий уровень заболеваемости коров эндометритами и задержания последа наблюдали с января по май, с максимальным подъемом в марте-апреле и минимальным показателем заболеваемости эндометритами в августе, а задержания последа – в октябре. При анализе заболеваемости эндометритами новотельных коров, самый высокий уровень отмечали в августе (17,75%) и в сентябре (23,04%), минимальный – в марте и декабре (9,65%). Четко выраженной сезонности проявления болезней яичников не установлено. Аборты у коров чаще регистрировали зимой, реже летом. При этом максимальный уровень патологии наблюдали в январе (7,43%), минимальный - в июле и августе (3,7%) (рис. 3).
2300 1859 голов 1170 979 911 684 Рис. 3. Динамика акушерско-гинекологических болезней у коров хозяйств Омской области по месяцам с 353 по 2011гг.
2002 331 300 260 В хозяйствах районов северной лесостепной и степной зоны максимальные показатели эндометритов и задержания последа у коров регистрировали в марте, а в 106 районах степной зоны они были на высоком уровне и в два последующих месяца. В районах северной зоны, где задержание последа и эндометриты составляют до 80-90% всех акушерско-гинекологических - болезней у коров, максимальный уровень задержания последа у коров был отмечен в феврале, а эндометритов – в марте. Ту же закономерность, со смещением на месяц, наблюдали и в районах Эндометриты Задержание последа Болезни яичников Аборты южной лесостепи: максимальное количество случаев задержания последа у коров было в марте, а эндометритов в апреле. Осенний рост заболеваемости новотельных коров в районах северной и степной зоны отмечали в октябре, в районах северной лесостепной зоны – в сентябре, а в районах южной лесостепи – в ноябре.
При проведении диагностических исследований бесплодных коров в 22 хозяйствах Омской и Тюменской областей нами были установлены следующие акушерско-гинекологические болезни: эндометрит, дисфункции матки (субинволюция, атония или гипотония) и яичников (гипофункция одного или двух яичников, персистенция желтого тела, киста), сальпингит и овариит. При анализе полученных результатов отмечали, что в хозяйствах, расположенных в разных природно-климатических зонах, у бесплодных коров превалировали дисфункции яичников (от 37 до 90,9%), эндометриты (3,3 - 48,1%) и дисфункции матки (4,5…44,1%), нередко у животных наблюдали сочетанную патологию. Из дисфункций яичников у коров наиболее часто (60-80%) регистрировали их гипофункцию, значительно реже персистенцию желтого тела и кистозное перерождение.
3.3. Особенности клинического и патоморфологического проявления симптоматического бесплодия у коров в послеродовом периоде При клиническом исследовании животных, как правило, отмечали сочетанную патологию матки и яичников.
3.3.1. Клинические и патоморфологические изменения в матке При клиническом исследовании 19 коров с субинволюцией матки на 5…7-е сутки после родов было установлено обильное выделение вначале красно-бурого, а затем грязно-сероватого цвета, жидкой консистенции и с неприятным запахом лохий, которые наблюдали спустя 2… недели при лежании животных или после трансректального массажа матки. При ректальном исследовании установлено увеличение матки в размере, атония, дряблость, отсутствие болезненности, рога опущены в брюшную полость, флюктуируют.
При клиническом исследовании 42 коров с послеродовым гнойным эндометритом регистрировали обильные, жидкой консистенции, зеленовато-желтого цвета, гнойно-ихорозные выделения из открытого цервикального канала, отечность и гиперемию слизистой оболочки преддверия и влагалища. При ректальном исследовании регистрирование опущение матки в брюшную полость, отсутствие сокращений, дряблость, болезненность, флюктуацию. При послеубойном осмотре стенки матки истончены, непрочные, в полости большое количество зловонного жидкого экссудата, поверхность эндометрия в области карункулов светло-розовая, в остальных участках покрыта наложениями темно-бурого цвета. Яичники часто в состоянии гипофункции или с желтым телом.
При послеродовом гнойно-фибринозном эндометрите у 8 коров обнаруживали выделение экссудата желтовато-серого или желто-бурого цвета сливкообразной или жидкой консистенции с хлопьями и сгустками фибрина. При ректальном исследовании регистрировали опущение матки в брюшную полость, болезненность, флюктуацию, орган не сокращается. При послеубойном осмотре матка увеличена, гиперемирована, стенки утолщены, В полости матки большое количество экссудата.
При хроническом катаральном эндометрите у 32 коров слизистая преддверья и влагалища гиперемирована, устье шейки матки приоткрыто, из цервикального канала выделение прозрачной слизи. При ректальном исследовании: шейка матки у лонного края, матка в брюшной полости, дряблая, безболезненная. После убоя наблюдали небольшое увеличение матки, утолщение стенок, дряблость, в полости катаральный экссудат. В яичниках фиксировали желтые тела.
При хроническом катарально-гнойном эндометрите у 27 коров из наружных половых органов выделялось скудное количество экссудата. Слизистая оболочка преддверья и влагалища гиперемирована, с точечными кровоизлияниями. При ректальном исследовании рога матки безболезненные, ассимметричные, свисали в брюшную полость. При послеубойном осмотре обнаруживали матку дряблую, с утолщенными стенками, в полости которой содержалось около 200…300 мл прозрачной слизи с примесью гноя. Поверхность эндометрия бледно-розового, тусклая. Цервикальный канал приоткрыт. В одном из яичников, как правило, обнаруживали желтое тело (рис. 4).
Рис. 4. Матка коровы при хроническом катарально-гнойном эндометрите:
1 – левый рог матки;
2 – правый рог матки;
3 – яичник;
4 –шейка матки;
5 – эндометрий;
6 – катарально-гнойный экссудат. Корова 5 лет красная.
При хроническом гнойном эндометрите у 22 коров регистрировали скудные выделения гноя, которые усиливались после трансректального исследования, Цервикальный канал приоткрыт, слизистая оболочка влагалища и влагалищной части шейки матки гиперемированы.
Рога матки опущены в брюшную полость, дряблые, при пальпации слабо сокращаются или не сокращаются, флюктуируют. После убоя: матка на 2,5…3 месяца, в полости экссудат бело-желтого цвета объемом около 300мл. В одном или реже обоих яичниках желтые тела.
При скрытом эндометрите, наблюдали небольшую отечность вульвы, выделение полужидкой мутной, или с наличием хлопьев и прожилок гноя слизи. Слизистая оболочка преддверия и влагалища гиперемирована, отечная, влажная;
влагалищная часть шейки матки увеличена, ярко-розового цвета, цервикальный канал приоткрыт. При ректальном исследовании отмечали пониженную ригидность матки, стенки утолщены и слабо сплюснуты рога. Яичники часто в состоянии гипофункции, иногда регистрировали персистенцию или гипоплазию желтого тела. При послеубойном осмотре матка немного увеличена, розового с желтоватым оттенком цвета, дряблая, стенки утолщены. В полости матки иногда небольшое количество экссудата, поверхность эндометрия светло-розовая, тусклая. Яичники, как правило, уменьшены в размерах, дряблой или плотной консистенции (рис. 4).
При исследовании гистологических препаратов, полученных от коров с клиническими признаками послеродового гнойного эндометрита, установлено, что поверхность эндометрия лишена эпителия и покрыта пленкой из однородной зернистой оксифильной массы, в которой обнаруживали нейтрофилы, лимфоциты и мононуклеары. Субэпителиальная зона поверхностного слоя эндометрия отечна и сильно инфильтрирована нейтрофилами. В поверхностном слое эндометрия выражен отек, большое количество ветвящихся протоков маточных желез диаметром 56,45±2,92 нм, в которых практически отсутствуют просветы, эпителиоциты набухшие, в состоянии дистрофии, высотой 14,41±0,89 нм. Между протоками маточных желез отмечали пролиферацию мононуклеаров, среди которых большое количество нейтрофилов. В базальном слое эндометрия маточные железы диаметром 272,26±42,63 нм с расширенными до 600-800 нм просветами что, вероятно, обусловлено нарушением оттока секрета и большое количество кровеносных сосудов. Эпителий в расширенных маточных железах однорядный, низкий призматический. Под эпителием маточных желез и в их полости скопление нейтрофилов. В стенке некоторых маточных желез микрокисты с погибшими эпителиоцитами и нейтрофилами. Артерии с небольшим просветом, их адвентиция утолщена, лимфатические и венозные сосуды расширены, с большим количеством нейтрофилов, которые обнаруживали и в венозных сосудах межмышечного слоя.
При остром послеродовом гнойно-фибринозном эндометрите субэпителиальный слой эндометрия имеет четко выраженную границу с нижележащим участком. Он, в основном, лишен эпителия. В поверхностных участках субэпителиального слоя, который неравномерно инфильтрирован мононуклеарами, обнаруживали большое количество нейтрофилов (рис. 5).
Рис.5. Поверхностный слой эндометрия при послеродовом гнойно-фибринозном эндометрите: 1 – десквамация эпителия;
2 – инфильтрация нейтрофилами;
3 – отек субэпителиальной зоны;
4 – просветы маточных желез. Гематоксилин-эозин. Увел.400. Корова 5 лет, черно-пестрая.
Протоки маточных желез в субэпителиальном слое эндометрия, расширены, а у поверхности разрушены. Выстилающий их эпителий в более глубоких участках призматический, высотой 14,41±0,89 нм, ближе к поверхности кубический и даже плоский, высотой 4,51±0,67 нм. Базальный слой эндометрия имели вид плотной неоформленной соединительной ткани, волокна которой располагаются более рыхло вокруг сосудов и маточных желез. Маточные железы диаметром 158,73±7,60нм кистозно расширены, выстланы низким призматическим (7,86±0,58нм), а в некоторых железах – плоским эпителием, в их просвете - густой коллоидообразный секрет и десквамированные участки железистого эпителия. Просвет артерий сужен, их адвентиция утолщена за счет разрастания волокнистой соединительной ткани. Лимфатические и венозные сосуды расширены, некоторые из них расширены очень сильно, стенки вен утолщены.
При гистологическом исследовании эндометрия коров с клиническими признаками хронического катарального, катарально-гнойного и гнойного эндометрита, были установлены патоморфологические изменения, свидетельствующие о различной степени выраженности воспалительного процесса в эндометрии.
В слизистой оболочке матки коров, у которых наблюдали выраженные симптомы хронического катарального эндометрита, доминировали признаки атрофического катара.
Многорядный эпителий, выстилающий эндометрий, почти полностью десквамирован. В субэпителиальных участках поверхностного слоя эндометрия в области карункулов регистрировали отечность и редкое расположение мононуклеаров. В глубоко расположенных участках поверхностного слоя наблюдали отечность и интенсивную пролиферацию фибробластов и фиброцитов с образованием коллагеновых волокон В базальном слое эндометрия выражен сильный отек, сопровождающийся разволокнением рыхлой соединительной ткани, а также отмечали набухание стенок артериальных сосудов, уменьшение их просвета и спадение венозных сосудов. В маточных железах отмечали признаки атрофических изменений с уменьшением их диаметра (до 26,95±1,55нм), просвета и высоты эпителиоцитов (до 8,07±0,53 нм) или гипертрофии: высокий многорядный эпителий (17,83±0,48 нм), увеличение диаметра (32,42±1,34 нм).
При хроническом катарально-гнойном эндометрите, кроме признаков хронического катарального воспаления, в экссудате большое количество нейтрофилов, субэпителиальные участки поверхностного слоя инфильтрированы большим количеством нейтрофилов, плазматическими клетками, лимфоцитами, тканевыми базофилами и гистиоцитами. В базальном слое регистрировали клеточные инфильтраты, состоящие из интактных и дистрофически измененных нейтрофилов (гнойных телец), а также плазмоцитов и других мононуклеаров. Маточные железы базального слоя эндометрия, особенно на границе с циркулярным мышечным слоем, расширены до 59,39±1,45 нм и выстланы низко призматическим эпителием (10,02±0,75 нм). Венозные сосуды собственного слоя преимущественно спавшиеся, а стенки артерий утолщены.
На гистологических препаратах, полученных от коров с клиническими признаками хронического гнойного эндометрита, поверхность эндометрия также практически лишена эпителия, между эпителиоцитами и мононуклеарами поверхностного слоя обнаруживали большое количество нейтрофилов. В базальном слое эндометрия увеличено количество волокон соединительной ткани. В большинстве маточных железах (36,74±1,38 нм) отмечали признаки атрофии. В некоторых маточных железах (42,4±1,94 нм), окруженных рыхлой соединительной тканью, наблюдали признаки секреторной активности. В устьях маточных желез обнаруживали скопления нейтрофилов.
В слизистой оболочке матки коров с симптомами скрытого эндометрита, эпителий, выстилающий эндометрий, почти полностью десквамирован. В субэпителиальных участках поверхностного слоя эндометрия регистрировали отечность. В маточных железах, выстланных преимущественно высоким призматическим эпителием (19,89±0,96 нм), отмечали признаки атрофических изменений, сопровождающихся уменьшением их диаметра (43,13±1,14 нм) и просвета. Вокруг кровеносных сосудов и устьев маточных желез отмечали разрастание фиброцитов и фибробластов и образование коллагеновых волокон, наличие нейтрофилов и большого количества лимфоцитов. В базальном слое маточные железы также небольшого диаметра (56,63±2,03 нм), некоторые из них имеют расширенную фундальную часть (92,46±3,35 нм). Выстилающий эпителий низкий призматический (14,15±0,79 нм), в отдельных железах многорядный, в просветах гомогенный секрет. Между маточными железами и кровеносными сосудами наблюдали разрастание плотной соединительной ткани. В кровеносных сосудах всех слоев матки и на поверхности эндометрия обнаруживали отдельные нейтрофилы.
3.3.2. Патоморфологические изменения в яичниках При ректальном исследовании 316 коров с гипофункцией яичников отмечали уменьшение яичников в объеме, сглаженную поверхность, крупных граафовых пузырьков и желтых тел не пальпировали. Размеры яичников варьировали от горошины до лесного ореха.
Двустороннее поражение яичников отмечали в 22,2% случаев, гипофункцию левого или правого яичника регистрировали в равной степени.
При гистологическом исследовании поверхность яичника ровная, фолликулярная зона тонкая, выделяется базофильным оттенком фона, тяж соединительной ткани. Примордиальные фолликулы единичные, отличались по высоте эпителия, плотности ядер эпителиоцитов и их размеру, в сосудистом слое разрастание соединительной ткани. Вторичные фолликулы, имеющие по периметру неравномерную теку и пузыревидные полости в цитоплазме фолликулярного эпителия, расположены также редко. Ядра эпителиоцитов полиморфные, часто пикнотичные, непрозрачные. Третичные фолликулы единичные. Фолликулярный эпителий вторичных фолликулов в состоянии вакуольной дистрофии с образованием кист небольшого диаметра (5,5х7мм) или атрезии. При хроническом гнойном эндометрите в яичниках отмечали сильную пролиферацию соединительной ткани, особенно по ходу вен, на фоне застойной гиперемии. Примордиальных фолликулов мало. Сеть кровеносных сосудов густая, в венозных сосудах, среди клеток крови, обнаруживали большое количество нейтрофилов.
На отдельных препаратах в фолликулярной зоне яичников наблюдали кисты размером до 7-8мм, в том числе и возле третичных фолликулов у поверхности яичника, рельефно не выступающие над поверхностью. Кисты отличались наличием соединительно-тканной капсулы с большим количеством широких лимфатических и кровеносных сосудов небольшого диаметра.
Внутренняя выстилка либо отсутствовала, либо между соединительной тканью и содержимым полости имелась тонкая аморфная эозинофильная полоска.
При ректальном исследовании коров с кистозным перерождением яичников установлено, что в яичниках чаще имели место одиночные фолликулярные кисты (88,57%), реже кисты желтого тела (8,57%) или поликистоз (2,86%). Отмечали, что в правом яичнике (58%) кисты регистрировались чаще, чем в левом (42%). При послеубойном осмотре яичников их размеры варьировали 44-76 х 26-49 х 21 -39 мм. Кисты чаще были одиночными от 22 до мм диаметром, округлой или овальной формы, выступающими над поверхностью яичника, заполненными прозрачной бесцветной жидкостью.
При гистологическом исследовании установлено, что большая часть объема органа занята кистами. Белочная оболочка возле крупных кист атрофирована. В других участках регистрировали активную пролиферацию соединительной ткани. Примордиальные фолликулы расположены редко и в большинстве из них фолликулярный эпителий десквамирован. Вблизи крупных кист обнаруживали более мелкие, сдавленные, серповидной формы кисты. Третичные фолликулы, расположенные около кисты, имели неправильную овальную форму: их округлая сторона обращена к поверхности яичника, а вогнутая – к кисте. Вторичные фолликулы и белое тело из-за давления со стороны кисты также деформированы. На внутренней выстилке кисты фолликулярный эпителий с плотными непрозрачными ядрами сохранен частично. Ядра фиброцитов ориентированы в разных направлениях и имели разную плотность окраски. Ядра фибробластов оптически прозрачные, их положение и циркулярное ориентирование волокон, позволяло дифференцировать у фолликулов теку. У мелких примордиальных фолликулов тека образована 1-2 рядами фиброцитов. Более крупные примордиальные фолликулы были окружены фибробластами. Внутри полости обнаруживали неравные по размеру крупные ядра с кариолеммами и хроматином, с недифференцированными ядрышками У коров с персистенцией желтого тела в одном из яичников, чаще в правом (59%), чем в левом (41%) обнаруживали выступающую над поверхностью часть ПЖТ грибовидной формы.
Второй яичник без изменений или в состоянии гипофункции. При послеубойном осмотре яичников с ПЖТ их размеры составили 36-44 х 17-25 х 15-22 мм, диаметр выступающей части ПЖТ 12-16 мм.
При гистологическом исследовании яичников с ПЖТ установлено, что выступающая над поверхностью яичника часть, кроме мезотелия, покрыта толстой полоской волокнистой соединительной ткани, волокна которой под мезотелием сформировали рыхлую петлистую сеть, ориентированную, по преимуществу, вдоль мезотелия. Внутренняя, прилегающая к ПЖТ, часть этой прослойки более плотная, волокна в ней толще, чем в наружной. В глубине яичника окружающая ПЖТ соединительная ткань более плотная, чем под мезотелием, и в ней часто встречаются кровеносные и лимфатические сосуды, локализующиеся ближе к паренхиме.
Паренхима персистентного желтого тела по плотности неоднородная. Более плотные участки представлены крупными, преимущественно округлой формы ГЛК с умеренно плотной цитоплазмой, округлыми ядрами, расположены в центре клеток. В рыхлой паренхиме ПЖТ обнаруживали эозинофильные участки разного размера с неправильной формы полостями. На фоне интенсивно окрашенной ткани выделялись мелкие пикнотические ядра и пузыревидные полости. Также обнаруживали скопления лимфоцитов, формирующие небольшие островки.
Примордиальные фолликулы дифференцировали с трудом. Вторичные фолликулы располагались между персистентным желтым телом и серозной оболочкой яичника, а также в других участках, но вблизи ПЖТ они были деформированы, а фолликулярный эпителий атрофирован.
При ректальном исследовании коров с кистой желтого тела (КЖТ) яичника обнаруживали, что матка атоничная, дряблая, шейка матки у лонного края, рога – в брюшной полости. Яичник, с грибовидной формы и неровной вершиной кистой ПЖТ, как правило, в 1,5…2 раза больше другого. При послеубойном осмотре яичников с КЖТ (10-14 мм), диаметр вершины выступающей части ПЖТ 12-14 мм, диаметр основной части 20-24 мм, высота – до 28мм.
При гистологическом исследовании в яичниках с КЖТ обнаруживали участки с клетками фолликулярного эпителия, высота которого снижалась. В волокнах соединительной ткани, окружающих кисту, наблюдали скопления лимфоцитов. Отмечали некроз и расплавление ГЛК. Полость кисты неправильной гроздевидной формы, рядом большое количество артериальных сосудов разного диаметра, из которых даже очень мелкие имели толстую стенку, несоразмерную их диаметру. В участках, прилегающих к поверхности яичника, текалютеиновых клеток (ТЛК) больше. Примордиальных фолликулов немного, хорошо дифференцировались третичные фолликулы, но их эпителий аналогичен вторичным. Отмечали деформацию фолликулов от давления КЖТ.
3.4. Морфология слизистой оболочки влагалища и цитологический состав цервикальной и вагинальной слизи у коров при нормальном течении послеродового периода и при его патологии В первые сутки послеродового периода, через один-два часа после выведения плода слизистая оболочка влагалища отечная, коллагеновые волокна расположены рыхло, с большим количеством полиморфноядерных клеток. Эпителий на большей части слизистой десквамирован, а в сохранившихся участках клетки расположены неупорядоченно, иногда в один слой. Артериолы и венулы небольшого диаметра с незначительным просветом, в венозных сосудах большое количество нейтрофилов. Ярко выражен отек в прилегающей к эпителию базальной мембране, в отдельных участках наблюдали одноядерные клетки, небольшое количество нейтрофилов и лимфоцитов, кровоизлияния вокруг сосудов.
В мазках из влагалища и шейки матки обнаруживали большое количество эритроцитов, нейтрофилы, клетки плаценты, эндометрия, крупные эпителиальные клетки (31-46,65 нм) с двумя ядрами (17-18 нм). В мазках из влагалища коров превалировали поверхностные (35-54%) и промежуточные (36-40%) клетки, базальные в пределах 6-27% и парабазальные единичные (1-2). Реже на препаратах поверхностные и базальные клетки располагались слоями. ЭИ составил 64-79%, КИ - 65-74%. В мазках из шейки матки количество поверхностных клеток было наибольшим (59-77%), меньше промежуточных (15-30%), небольшое количество базальных (7-9%) и 1-2% парабазальных (рис. 2). ЭИ - 28-32%, КИ - 37-91%.
На вторые сутки после отела в слизистой оболочке влагалища сохранен отек и разволокнение коллагеновых волокон. Клетки базального и частично промежуточного слоев вытянуты и расположены перпендикулярно к базальной мембране. Клетки поверхностного слоя преимущественно округлые или овальные, ядра расположены параллельно базальной мембране, в отдельных видны гранулы кератогиалина. Сосуды базальной мембраны умеренно наполнены кровью. В подэпителиальном слое регистрировали разрушающиеся ядра клеток, глыбки хроматина. На некоторых препаратах отмечали десквамацию эпителия, наслоение слизи, большое количество нейтрофилов, в том числе в кровеносных сосудах, инфильтрацию участков, прилегающих к базальной мембране, мононуклеарами и нейтрофилами.
Поверхностные и промежуточные клетки в большинстве участков отсутствовали, а базальные имели вытянутую форму и располагались перпендикулярно мембране.
В мазках из влагалища обнаруживали нейтрофилы, эритроциты и мононуклеарные клетки, также преобладали промежуточные клетки (49-55%), в меньшей степени поверхностные (30-33%), базальные (14-23%) и 6-8% парабазальные. ЭИ и КИ снизились до 37-48% и 50-72%, соответственно. В мазках из шейки матки выявляли нейтрофилы, базальные клетки (7-36%), которые в отдельных участках расположены пластами и находились в состоянии митоза. Поверхностные клетки составили 13-59%, промежуточные 44-40% и парабазальные 10-11%. ЭИ – 21-28%, КИ – 71-96%.
На шестые сутки послеродового периода в слизистой оболочке влагалища признаки выраженного отека отсутствовали. Часть сосудов были синусоидно расширены с признаками отека (разволокнение), другие сужены. Эпителий слизистой многослойный, базальные клетки мелкие, вытянутые, расположены преимущественно перпендикулярно мембране, промежуточные и поверхностные клетки ориентированы также. В местах отека базальный слой выражен неотчетливо, в поверхностном слое клетки имели признаки вакуольной дистрофии.
Большое количество клеток с эксцентрично расположенными ядрами, мононуклеары с выраженной цитоплазмой (рис. 6).
В мазках из влагалища обнаруживали нейтрофилы, промежуточные (48-61%) и поверхностные (19-28%) клетки располагались слоями. Базальных и парабазальных клеток было значительно меньше: 5-8% и 6-11%, соответственно. ЭИ – 23-25%, КИ – 52-54%. В мазках из шейки матки обнаруживали преимущественно поверхностные клетки (59-61%), в меньшем количестве базальные (20-22%), промежуточные (16-17%) и единичные парабазальные (1-2%).
ЭИ – 80-82%, КИ – 82-84%.
На седьмые сутки послеродового периода отек слизистой оболочки влагалища не выражен, сосуды умеренно расширены. В некоторых участках эпителий полностью десквамирован, в других - многослойный. Базальный слой выражен нечетко, клетки веретеновидные и расположены перпендикулярно к мембране. Базальная мембрана, прилегающая к эпителию, инфильтрирована мононуклеарами и незначительным количеством нейтрофилов. Клетки промежуточного и поверхностного слоев не дифференцированы. В местах, прилегающих к десквамированным участкам, расположено большое количество нейтрофилов и мононуклеаров.
В мазках из влагалища, в которых превалировали промежуточные (68-70%) и базальные клетки (19-20%), выявляли нейтрофилы, эритроциты, а в мазках из шейки матки поверхностные (31-53%) и базальные (28-30%). ЭИ был выше в мазках из шейки матки (89-95%), чем мазках из влагалища (48-64%), а КИ, напротив, выше в мазках из влагалища (44-63%), чем в мазках из шейки матки (20-53%).
У коров в начальной стадии развития острого эндометрита на 6…7 сутки после отела слизистая оболочка влагалища характеризовалась отечностью, между эпителиоцитами значительные пространства, базальный, промежуточный и поверхностный слои не просматривались четко. Эпителий в одних местах формировали один-два слоя клеток, в других – до пяти и более. Типичные поверхностные клетки отсутствовали. На десквамированных участках, у мембраны наблюдали скопления мононуклеаров. На других участках клетки поверхностного слоя в состоянии вакуольной дистрофии, а между ними большое количество нейтрофилов, которые также обнаруживали в базальной мембране и в венозных сосудах.
Мазки содержали большое количество промежуточных клеток (64-72%), эритроциты, нейтрофилы, кокки, базальные клетки (19-28%) с эозинофильной цитоплазмой, меньше поверхностных (9-13%) и незначительное количество парабазальных (0-1%). ЭИ и КИ примерно совпадали по значению: 63-64% и 62-63%, соответственно (рис. 3). В мазках из шейки матки преобладали поверхностные (43-45%) и промежуточные клетки (33-35%). ЭИ – 36-37%, КИ – 81-82% (рис. 9).
На 14…16 сутки после родов эпителий слизистой оболочки влагалища плоский многослойный. Клетки базального слоя округлые, реже вытянутые, с гиперхромными ядрами, в промежуточном слое клетки имели более просветленные ядра. В поверхностном - у большинства клеток ядра отсутствовали, а имеющиеся были мелкие, пикнотичные и вытянутые параллельно мембране. Мазки из влагалища содержали нейтрофилы, преимущественно промежуточные (38-57%) и поверхностные (27-35%) клетки, высоким был ЭИ (72-76%) и КИ (69-78%). В мазках из шейки матки также преобладали промежуточные (53-54%) и поверхностные клетки (31-33%), которые располагались слоями, при этом значительно меньше базальных (10-11%) и единичные (1-3%) парабазальные (рис. 11). ЭИ – 34-35%, КИ – 60-62%.