авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Министерство здравоохранения Республики Казахстан

Казахский научно-исследовательский институт онкологии и радиологии

ОТЧЕТ

по I–ой фазе

клинических испытаний иммунобиологического, противоопухолевого

препарата широкого спектра действия "Нормоген", представленного в виде лиофилизи-

рованного стерильного порошка в ампулах, по 100 мг, для внутривенного введения, со-

гласно Договора № 3 от 20 января 2006 г. между "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ он кологии и радиологии МЗ РК.

Заказчик: ТОО "Real Ned Company", Республика Казахстан, г. Алматы.

Исполнитель: Казахский научно-исследовательский институт онкологии и радиологии, Республика Казахстан, г. Алматы.

Протокол клинических исследований: "Протокол клинических испытаний лекарст венной формы противоопухолевого иммунобиологического препарата "Нормоген", представленного в виде стерильного, лиофилизированного порошка, для внутривен ных инъекций, в ампулах, содержащих в каждой по 100 мг лекарственной субстан ции", согласованный и утвержденный Национальным Центром экспертизы лекарствен ных средств Республики Казахстан, РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии и ТОО "Real Med Company" от 23 ноября 2005 г.

Вид/фаза клинических испытаний: I – ая фаза Дата начала клинических испытаний: 23 января 2006 г.

Дата окончания клинических испытаний: июль 2006 г.

Нормативные документы определяющие требования, к проведению клинических испытаний: Приказ Министерства Здравоохранения РК № 53 от 14 февраля 2005 года "Инструкция по проведению клинических исследо ваний и (или) испытаний фармакологических и лекарственных средств, в Республике Казахстан".

"Протокол клинических испытаний лекарственной формы противоопухолевого имму нобиологического препарата "Нормоген", представленного в виде стерильного, лио филизированного порошка, для внутривенных инъекций, в ампулах, содержащих в каждой по 100 мг лекарственной субстанции" от 23 ноября 2005 г.

Область науки: медицинские науки, онкология.

Приоритет: проект является приоритетным.

г. Алматы, 2006 г.

Клинические испытания препарата "Нормоген", проводятся при финансовой поддерж ке Национального Инновационного Фонда, Республика Казахстан, г. Алматы.

Содержание 1. Перечень сокращений и определение терминов 5 стр.

2. Нормативная база и требования к организации проведения КИ 8 стр 3. Резюме 9 стр.

4. Введение 12 стр.

5. Данные клинических исследований 13 стр.

6. Цель испытания лекарственного средства "Нормоген" 14 стр.

7. Материалы и методы исследования 14 стр.

8. План испытания 15 стр.

9. Изучаемые курсы лечения 15 стр.

10. Изучаемый контингент испытуемых и их количество 16 стр.

11. Обоснование плана (дизайна) испытания 16 стр.

12. Формирование группы информированных больных 17 стр.

13. Критерии исключения испытуемых из испытания или анализов 17 стр.

14. Описание лекарственного средства 18 стр.

15. Выбор доз для изучения 19 стр.

16. Обсуждение и обобщающие выводы 22 стр.

17. Выводы 23 стр.

18. Список использованной литературы 24 стр.

1. Приложение 1 "Отчет о работе по теме "Изучение кинетики и фармакодинамики антител образующихся в организме при введении препарата "Нормоген".

2. Приложение 2 "Результаты изучения эффективности иммунобиологического препарата "Нормоген" у онкологических больных по данным исследования им мунного статуса".

Перечень сокращений и определение терминов Аудит - систематическая и независимая проверка документации и деятельности, вовле ченных в проведение клинического испытания сторон, которая проводится для под тверждения факта осуществления этой деятельности, а также для оценки соответ ствия процедур сбора, обработки и представления данных, требованиям протокола исследования, стандартных операционных процедур, Приказа МЗ РК № 53 и надле жащей клинической практики Европейского экономического сообщества (далее – ICH GCP), в случае проведения клинических испытаний в соответствии с надлежа щей клинической практикой (далее – GCP);

Альфа-фетопротеин (-фетопротеин), АФП – фетальный белок, присутствующий в сыво ротке крови плода, а также в крови самки, во время беременности. Обычно отсутст вующий в крови взрослых особей, но появляющийся при репаративных процессах, некоторых видах рака и гепатитах. Используется как онкомаркер, при весьма агрес сивных гепатоцеллюлярной карциномы и гепатобластомы печени, а также при нали чии клеток эмбрионально-клеточных опухолей и гепатитов. Основной функцией АФП является транспорт в клетку ПНЖК, необходимых для строительства клеточ ных стенок;

Антиген, Аг – соединение способное вызвать синтез нейтрализующих антител в организ ме реципиента;

Антитела (иммуноглобулины) Ат1 – белки, синтезируемые В-лимфоцитами иммунной сис темой в ответ на введение в организм реципиента антигена, для человека известно 5 видов иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgD, IgE, IgA ;

Антиидиотипические антитела (иммуноглобулины), Ат2 – антитела к Fab1 и Fab2 фрагмен там молекул Ат1, (идиотипам), Fab1 и Fab2 фрагменты которых структурно соответ ствуют структуре участка молекулы антигена, вызвавшего синтез Ат1;

Брошюра исследователя – реферативное изложение результатов доклинического и кли нического изучения исследуемого лекарственного препарата, значимых для его ис следования на человеке;

Вторая фаза клинических испытаний — испытание лекарственного средства с целью ус тановления терапевтической эффективности и кратковременной безопасности у ис пытуемых соответствующего профиля, изучение фармакокинетики, а также опреде ление оптимальных терапевтических доз, режима введения, зависимости эффекта от дозы;

Заказчик клинических испытаний — юридическое или физическое лицо, которое является заявителем клинического испытания лекарственного средства и отвечает за его ор ганизацию, контроль и/или финансирование;

Индивидуальная регистрационная форма (далее ИРФ) – печатный и электронный доку мент, предназначенный для внесения в него информации по каждому испытуемому, предусмотренный Протоколом клинического исследования;

Инспекция клинического испытания – процедура официальной проверки уполномоченным органом в области здравоохранения (далее – уполномоченный орган) c привлечени ем специалистов и экспертов Республиканского государственного предприятие «Национальный центр экспертизы лекарственных средств, изделий медицинского назначения и медицинской техники» Министерства здравоохранения Республики Казахстан (далее - Национальный центр) материальной базы (помещений, оборудо вания и оснащения) и документов, относящихся к клиническому испытанию, для оценки качества проведения клинического испытания и полученных данных;

Информация для испытуемого – документ, описывающий общие цели испытания, риск и пользу участия в нем, а также процедуры, в которых потребуется участие испытуе мого;

Информированное согласие — документально оформленное добровольное согласие ис пытуемого на участие в клиническом испытании после ознакомления со всеми его особенностями, подписанное и датированное пациентом;

Испытуемый – пациент, принимающий участие в клиническом испытании, который полу чает исследуемый лекарственный препарат или препарат сравнения;

Исследователь - врач, прошедший подготовку по вопросам проведения клинических ис пытаний, который непосредственно проводит и отвечает за порядок проведения клинических испытаний лекарственного средства в медицинской организации. В слу чае если испытание проводится коллективом сотрудников клинической базы, иссле дователем (ответственным исследователем) является руководитель коллектива;

Исследуемое лекарственное средство — готовое лекарственное средство или плацебо, которое изучается или используется для контроля во время клинических испытаний;

Клиническая база - медицинская организация, определенная уполномоченным органом, осуществляющая проведение клинических испытаний лекарственного средства на основании рекомендации Национального центра;

Клиническое испытание лекарственного средства, КИ - исследование с участием челове ка в качестве испытуемого, проводимое для выявления или подтверждения клини ческих, фармакологических и/или фармакодинамических эффектов исследуемого лекарственного препарата, и/или выявления всех побочных реакций на него, и/или с целью изучения его всасывания, распределения, биотрансформации и выведения в целях установления его безопасности и эффективности;

Комиссия по вопросам этики — независимый экспертный орган, в состав которого входят специалисты в области здравоохранения, науки, представители общественных ор ганизаций, осуществляющая защиту прав, безопасности и благополучия испытуе мых и исследователей, а также этическую и нравственно-правовую оценку материа лов клинического испытания;

Комплемент – многокомпонентный (11 субъединиц и факторов) протеолитический фер мент, сборка которого в активную форму осуществляется между Fc- фрагментами двух близко расположенных молекул IgG, или одной молекулы IgM;

Контрактная исследовательская организация – физическое или юридическое лицо, кото рое в рамках договора с заказчиком или исполнителем выполняет одну или несколь ко его функций, связанных с проведением клинического испытания;

Лиганды – вещества, способные избирательно связываться с соответствующими рецеп торами на клеточных поверхностях;

Многоцентровые клинические испытания — испытания лекарственного средства, которые осуществляются в нескольких клинических базах (более чем одним исследовате лем) соответственно единому протоколу;

Монитор – лицо, назначаемое заказчиком, контролирующее проведение клинического ис пытания в соответствии с протоколом;

Моноклональные антитела, МкАт1 – иммуноглобулины, полученные биотехнологическими методами, проявляющие избирательность к одному эпитопу, из множества иммуно генных участков антигена;

Мониторинг клинического испытания – процедура контроля, за ходом клинического испы тания и обеспечения его проведения, сбора данных и представления результатов исследования согласно протоколу, стандартным операционным процедурам, на стоящей Инструкции и GCP;

Непредвиденное побочное действие – побочная реакция/явление, характер или степень выраженности которой не отвечает существующей информации о лекарственном средстве, представленной в брошюре исследователя;

Ограниченные клинические испытания (по сокращенной программе) – испытания на огра ниченном количестве больных;

Онкомаркеры – соединения различной природы (белки, полисахариды, гормоны и т.д.) выделяемые опухолевыми клетками в окружающую среду. Онкомаркеры позволяют выявить наличие опухолевых заболеваний на самых ранних фазах их возникнове ния;

Отчет о клиническом испытании — предоставленные в письменной форме результаты клинического испытания и их анализ, в соответствии с требованиями "Инструкция по проведению клинических исследований и (или) испытаний фармакологических и ле карственных средств в Республике Казахстан";

Оценка материалов клинического испытания — проверка и рассмотрение Национальным центром доклинического и материалов клинического испытания лекарственного средства с целью вынесения рекомендации о возможности или отказе в проведении клинического испытания, утверждения его результатов;

Пациент, участвующий в клинических испытаниях (далее – пациент) – лицо, имеющее или не имеющее заболеваний, которое участвует в клинических испытаниях в качестве субъекта исследования по причине как медицинского, так и немедицинского харак тера, с прямой пользой для своего здоровья или без нее;

Первая фаза клинических испытаний — испытание, которое проводится с целью предва рительной оценки безопасности исследуемого лекарственного средства, а также оп ределение предварительной схемы дозирования путем исследования фармакокине тики и фармакодинамики на испытуемых;

Побочное действие при клиническом испытании (далее побочное действие) - отрицатель ная или непредвиденная реакция, связанная с введением любой дозы лекарствен ного препарата;

Побочное явление - любое неблагоприятное клиническое проявление, обнаруженное у испытуемого, который принимал лекарственный препарат, независимо от наличия причинно-следственной связи с его применением;

Поликлональные антитела ПкАт1 – набор, обычно природных по происхождению, моно клональных внтител (МкАт1), каждое из которых специфично к различным иммуно генным участкам антигена;

Полиненасыщенные жирные кислоты, ПНЖК – кислоты, входящие в состав липидов, об разующих двухслойные клеточные мембраны;

Полипотентность – способность лекарственного средства оказывать избирательное воз действие на различные штаммы культур опухолевых клеток и виды спонтанных опу холей;

Поправка к протоколу — письменное описание изменений или формальное разъяснение текста протокола клинического испытания, подписанное заказчиком и исследовате лем и утвержденное/одобренное Национальным центром и Комиссией по вопросам этики;

Протокол клинических испытаний (далее — Протокол КИ) — документ, в котором изложе ны основные задачи, методология, процедуры, статистические аспекты и организа ция клинического испытания, а также ранее полученные данные относительно ис следуемого лекарственного средства и обоснования испытания;

Рандомизация – процесс отнесения участников испытания к основным и контрольным группам случайным образом, позволяющий свести к минимуму систематическую ошибку;

Резюме исследователя (Curriculum Vitae) – документ, подтверждающий образование, профессиональную подготовку и опыт исследователя;

Рецепторы, Ре – белковые, гликопротеиновые, липопротеиновые или гликолипопротеи новые структуры на поверхности клеточной стенки, предназначенные для избира тельного связывания соответствующих им лигандов. Часто используются в иммуно логии как антигены для получения антител (Ат1) к ним;

Рецепторы к -фетопротеину, РеАФП – рецепторы, предназначенные для избирательно го связывания с -фетопротеином;

Серьезное побочное действие - любое неблагоприятное клиническое проявление, неза висимо от дозы лекарственного средства представляющее угрозу для жизни испы туемых, приводящее к смерти, стойкой или выраженной нетрудоспособности / инва лидности, госпитализации / продления срока госпитализации, врожденным анома лиям/порокам развития;

Стандартные операционные процедуры – подробные письменные инструкции, обеспечи вающие единообразие выполнения определенных функций;

Третья фаза клинических испытаний — испытание лекарственного средства с целью под тверждения терапевтической эффективности, безопасности и выявление отдален ных эффектов, включая побочные реакции;

Четвертая фаза клинических испытаний — испытание лекарственного средства, которое осуществляется после регистрации лекарственного средства и поступления его на рынок, с целью определения терапевтической эффективности лекарственного сред ства, стратегии его дальнейшего использования, а также для получения дополни тельной информации о спектре и частоте побочных действий и взаимодействии ис следуемого лекарственного средства с другими лекарственными средствами;

Эпитоп – минимальный иммуногенный участок антигена, способный вызвать синтез спе цифичных антител;

Этическая оценка материалов клинического испытания — рассмотрение Комиссией по вопросам этики этических и нравственно-правовых аспектов материалов клиничес ких испытаний с целью вынесения рекомендации о возможности или отказе в прове дении испытания;

Fab1 и Fab2 фрагменты иммуноглобулина – вариабельная часть антитела, определяющая избирательное взаимодействие с иммуногенным участком антигена;

Fc- фрагмент – константная часть антитела, единая по структуре для всех молекул IgG иммуноглобулинов данной особи;

Нормативная база и требования к организации проведения К И Проведение I -ой фазы клинических испытаний (КИ) нового иммунобиологического препарата "Нормоген" осуществлялось согласно Договора № 3 от 20 января 2006 года, заключенного между ТОО "Real Med Company" (РК, г. Алматы) и и РГКП Каз.НИИ онколо гии и радиологии".

Основанием для заключения Договора № 3 от 20 января 2006 года является Приказ Комитета фармации Министерства Здравоохранения РК № 154 от 17 ноября 2005 года о проведении клинических испытаний препарата "Нормоген" на клинической базе РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии" (г. Алматы).

Организация и выполнение исследований по I – ой фазе клинических испытаний препарата "Нормоген", проводились на клинической базе РГКП Каз.НИИ онкологии и ра диологии", согласно требований Приказа Министерства Здравоохранения РК № 53 от февраля 2005 года "Инструкция по проведению клинических исследований и (или) испы таний фармакологических и лекарственных средств в Республике Казахстан".

Практическим руководством для проведения клинических испытаний служат "Бро шюра исследователя" и "Протокол клинических испытаний лекарственной формы проти воопухолевого иммунобиологического препарата "Нормоген", представленного в виде стерильного, лиофилизированного порошка, для внутривенных инъекций, в ампулах, со держащих в каждой по 100 мг лекарственной субстанции", согласованные и утвержден ные Национальным Центром экспертизы лекарственных средств Республики Казахстан, РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии и ТОО "Real Med Company" (Протокол КИ).

Использовалась экспериментальная партия препарата "Нормоген" № 01.06, по 100 мг, в лиофилизированной форме, изготовленная в промышленных условиях, представлен ная группой разработчиков фирмы"Real Med Company" (Паспорт – сертификат произво дителя - ТОО "Нормоген" на экспериментальную партию препарата "Нормоген" № 01.06, в дозировке 100 мг).

Согласно Приказа Комитета фармации Министерства Здравоохранения РК № 154 от 17 ноября 2005 года, препарат "Нормоген", в виде стерильного порошка для внутривен ных инъекций, в ампулах, в дозе по 50 и 100 мг, включен в Реестр лекарственных средств Республики Казахстан, рекомендованных к проведению клинических испытаний.

Исследования фармакокинетики и фармакодинамики препарата "Нормоген", проводи лось в лаборатории лимфообращения Института физиологии человека и животных со гласно Договора № 02 от 26 мая 2006 г. между РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии и ДГП "Институт физиологии человека и животных" ЦБИ МОН РК.

Определение гематологических и иммунологических параметров крови больных, уча ствующих в КИ и их анализ проводились в отделении иммунологии Центральной клини ческой больницы медицинского Центра управления делами Президента РК, согласно До говора № 8 от 06 февраля 2006 г. между РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии и ЦКБ медицинского Центра управления делами Президента РК.

Источник финансирования I -ой фазы клинических испытаний – Гранд НИ и ОКР На ционального Инновационного Фонда Республики Казахстан, полученный ТОО "Real Med Company".

Период проведения I -ой фазы клинических испытаний с 23 января 2006 г., оконча ние работ:

- определяется завершением поставленной задачи, согласно пунктов 3.1 и 3. Договора № 3 от 20 января 2006 г.

Резюме (краткое описание клинического испытания):

Первая фаза клинических испытаний — испытание, которое проводится с целью пред варительной оценки безопасности исследуемого лекарственного средства, а также опре деление предварительной схемы дозирования путем исследования фармакокинетики и фармакодинамики на испытуемых1.

I – ая фаза КИ отечественного, иммунобиологического противоопухолевого препарата "Нормоген" проводилась на клинической базе Каз.НИИ О и Р г. Алматы.

Клиническому исследованию подлежал новый иммунобиологический противоопухо левый препарат "Нормоген", разработанный и представленный ТОО "Real Med Company", Республика Казахстан, г. Алматы.

Авторы препарата – Францев А.П., Францева И.А. и Медведева Е.М. Препарат "Нормоген" представляет собой стерильный, лиофилизированный порошок, помещенный в ампулы из бесцветного стекла, в дозе 100 мг, предназначенный для внут ривенного введения. Действующим компонентом препарата "Нормоген" являются имму ноглобулины сыворотки крупного рогатого скота, обогащенные антиидиотипическими ан тителами к -фетопротеину (Ат2АФП)3.

Фармакологическое действие препарата "Нормоген" основано на избирательном свя зывании Ат2АФП с соответствующими рецепторами на поверхности трансформированных клеток4. Такое избирательное взаимодействие Ат2АФП с клеточными рецепторами для связывания -фетопротеина (РеАФП) запускает два основных молекулярных механизма:

Останавливает процесс деления клеток из-за избирательного блокирования 1.

Ат2АФП РеАФП и нарушения, тем самым, доставки в клетку полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) 5, необходимых для формирования клеточных мембран;

При высокой плотности РеАФП6 на клеточных поверхностях, и соответственно 2.

Ат2АФП, запускается механизм связывания и активации субъединиц комплемента, что ведет к избирательному комплемент зависимому лизису опухолевых клеток7.

На экспериментальной базе Каз.НИИ О и Р в 2003 – 2004 г. были успешно проведены доклинические исследования препарата "Нормоген" на трех видах животных – мышах, крысах и собаках, результаты которых отражены в "Отчете по экспериментальным иссле дованиям активности и токсичности нового иммунологического препарата "Нормоген" со гласно Договору ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии".

Исследования показали высокую противоопухолевую активность препарата "Нормо ген" в отношении большого числа штаммов клеточных культур опухолевых клеток, раз личных типов перевиваемых и спонтанных опухолей, без потери терапевтических свойств, обусловленных природой, локализацией опухоли или видовой принадлежности реципиентов.

В ходе проведения определения острой и хронической токсичности препарата "Нор моген" были выявлены - отсутствие токсичности и его высокая безопасность. Экспери ментаторам, при изучении острой и хронической токсичности, не удалось установить ве личину LD-50 и LD-100.

Цитологические исследования показали высокую безопасность исследуемого препа рата для клеток печени, почек, легких и сердца. При экстремально высоких дозах препа рата "Нормоген" обнаруживались незначительные, обратимые изменения в клетках мио карда.

Исходя из данных "Отчета по экспериментальным исследованиям активности и ток сичности нового иммунологического препарата "Нормоген", согласно Договора ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии" и требований положений Прото кола и "Брошюры исследователя", строилась стратегия КИ, с участием в них информиро ванных, о положительных и возможных отрицательных последствиях применения препа рата "Нормоген", больных - добровольцев.

В исследуемую группу больных набирались информированные пациенты – добро вольцы с различными, верифицированными диагнозами и, в основном, в 80% из них, с III и IV степенью тяжести опухолевого заболевания в запущенной стадии, жизненный статус которых находился в диапазоне 80 – 40% по шкале Карновского.

В исследуемую группу больных включались пациенты с "сигнальными" опухолями, наиболее часто встречаемые на территории Республики Казахстан:

На каждого больного, включенного в группу, были открыты – Карта наблюдения паци ента, Форма добровольного участия в КИ, дневник наблюдения и другие документы, оп ределяемые требованиями Приказа МЗ РК № 53, одобренные Комиссией по этике.

Исходное состояние больных регистрировалось по результатам гематологических, им мунологических и биохимических показателей (гемоглобин, лейкоциты, нейтрофилы, тромбоциты, соотношение лейкоцитов CD4/CD8, активность комплемента, величина СОЭ, креатинин, билирубин, белок, альбумин, АСТ, АЛТ, щелочная фосфатаза) а также по данным рентгенографии, УЗИ и ЯМ томографии, КТ, МРП и др. (по показаниям).

Лабораторные анализы проводились в отделении иммунологии Центральной клини ческой больницы медицинского Центра управления делами Президента РК.

Инструментальные исследования выполнялись в Каз.НИИ О и Р.

Для предотвращения образования нейтрализующих антител8 к препарату "Нормоген" использовались ежедневные относительно высокие дозы исследуемого лекарственного средства9, а для минимизации вторичного иммунного ответа минимальный курс лечения препаратом составлял 7 – 10 дней10. В течение указанного курса лечения пациенты сда вали комплекс анализов, показанных при их диагнозе на 4 и 10 день. Через 2 – 3 недели после окончания курса терапии проводили оценку общего статуса по шкале Карновского, рентгенографию, УЗИ и ЯМ томографию, КТ и МРП (по показаниям).

Было установлено, что в период 7 – 12 -ти дневного курса лечения происходят замет ные, положительные изменения в показателях лабораторных анализов и инструменталь ных исследований состоянии больных.

Негативных побочных действий препарата "Нормоген" не отмечалось ни в течение курса терапии, ни при дальнейшем наблюдении за больными – добровольцами. У трех больных побочные действия препарата "Нормоген" оценены в 1 балл, так как у 2-х из них, при отсутствии озноба отмечалась субфебрильная температура через 3 – 4 часа после введения препарата "Нормоген". У одного пациента отмечалась головная боль, не свя занная с изменением артериального давления.

Токсичность таргетных препаратов, к которым может быть отнесен и препарат "Нор моген", своеобразна и отличается от токсичности большинства классических цитостати ков. При меньшем угнетении гемопоэза они чаще вызывают аллергические реакции, на рушения общего состояния больных, носящие кратковременный характер11..

Иммунологические реакции обычно проходят самостоятельно, в период от 1,5 до 2, часов, и, могут быть значительно снижены, при временной остановке введения изучаемо го лекарственного средства, снижении скорости инфузии препарата "Нормоген" или при предварительном введении пациентам десенсибилизирующих средств.

Препарат "Нормоген" значительно легче переносится больными по сравнению со мно гими химиотерапевтическими средствами.

Противоопухолевая активность препарата "Нормоген", объективно оцениваемая инст рументальными методами (рентген, КТ, УЗИ и др.), показанными для данной локализации опухоли, в период 7 – 12 –ти дневного курса терапии приводила у 6,67% пациентов к час тичному эффекту, с уменьшением размеров опухоли более 50%. У 26,67% больных от мечалась стабилизация с положительной динамикой (уменьшение объема опухолей на 30 – 40%). В 40% случаев отмечалась стабилизация, без динамики опухолевого процес са. У 4 пациентов (26,66%) отмечалась прогрессирование заболевания на фоне лечения.

Полной регрессии не было отмечено ни в одном из случаев применения препарата "Нормоген".

Необходимо отметить, что заметная противоопухолевая активность препарата "Нор моген" по отношению к различным по локализации опухолям, носит несколько отдален ное проявление, которое, в большинстве случаев, выходит за рамки 7 – 12 дневного кур са лечения и отмечается при обследовании пациентов на 2 – 3-ю неделю, от окончания первого курса терапии. Реальные результаты уменьшения опухоли на 40 – 50% наблю даются при нескольких курсах применения препарата "Нормоген", в суммарной дозе – 7200 мг.

Таким образом, результаты I – ой фазы КИ препарата "Нормоген" показали, что иссле дуемое лекарственное средство не обладает токсичностью и безопасно при применении его в высоких дозах. Исследователям не удалось определить предельную суточную и предельную курсовую дозу препарата "Нормоген", которая может значительно варьиро вать в зависимости от степени поражения организма опухолевой болезнью.

Подтверждена способность препарата "Нормоген" оказывать цитотоксическое воздей ствие на опухоли различной нозологии и локализации, без предварительного типирова ния или какого-либо специального подбора больных.

Необходимо отметить, что заметное уменьшение геометрических размеров опухолей, метастазов или лимфатических узлов под действием препарата "Нормоген", используе мого в качестве монотерапевтического средства, наблюдалось у больных, по отношении к которым были исчерпаны все используемые лекарственные препараты и методы лечения современной онкологии.

Введение В настоящее время, наиболее перспективными иммунобиологическими противоопухо левыми препаратами являются иммуноглобулины (антитела, Ат1), избирательно взаимо действующие с одним или несколькими элементами - антигенами (Аг), рецепторами (Ре) стенок опухолевых клеток. К таким таргетным (target – мишень) препаратам относятся, например, "Герцептин", "Мабтера", "Панорекс", "ABX-ECF", "Provenge" и др., представляю щие собой моноклональные антитела (МкАт1), специфичные только к одному из эпитопов (иммуногенный участок) антигенов (Аг) одного типа опухолевых клеток.

Достоинством таких иммунобиологических препаратов является высокая избиратель ность по отношению к патологическим клеткам и полная безопасность лекарственного средства по отношению к обычным клеткам организма. Недостатком всех существующих иммунобиологических препаратов, созданных на базе МкАт1, является их высокая спе цифичность только к одному из многих иммуногенных участков целевого Аг или Ре, кото рая не позволяет использовать их против Аг или Ре других видов опухолей, кроме тех, ко торые имеют соответствующий данному Ат1 клеточный Аг (Ре). Таким образом, любой препарат, содержащий МкАт1, например, против Аг аденокарциномы ободочной кишки 17 1А12, не может быть применен против рака другой локализации, скажем, рака легких.

Имеются попытки создать универсальный противоопухолевый препарат на базе фе тального белка – -фетопротеина (АФП)13,. Известно, что Ре, связывающие АФП, имеются на клеточных стенках всех делящихся клеток, но наибольшая плотность таких Аг находит ся на поверхности трансформированных, опухолевых клеток14.

Существует международный научный проект МНТЦ 1878, в котором предполагается разработать универсальный, высокоэффективный противоопухолевый препарат на базе нативного, трансгенного или рекомбинанантного АФП человека, который бы эффективно разрушал любые опухолевые клетки и был бы абсолютно безопасным для нормальных клеток организма15.

Противоопухолевый препарат широкого спектра действия - "Нормоген", представлен ный на клинические испытания ТОО "Real Med Company" (г. Алматы, Республика Казах стан), также относится к таргетным иммунобиологическим препаратам, действующим на чалом которого являются антиидиотипические антитела к -фетопротеину (Ат2АФП).

Ат2АФП способны имитировать структуру нативной молекулы фетального белка АФП и вступать в избирательное взаимодействие с соответствующими клеточными ре цепторами на поверхности клеток.

Фармакологическое действие препарата "Нормоген" основано на избирательном взаимодействии Ат2АФП с клеточными рецепторами (РеАФП), предназначенными для связывании АФП (Приложение 1 : "Отчет о работе по изучению фармакокинетики и фармакодинамики ДГП "Института физиологии человека и животных" ЦБИ МОН РК).

Таким образом, Ат2АФП, взаимодействуя с клеточными рецепторами к -фетопроте ину (РеАФП), способны запустить некоторые16 молекулярные механизмы, характерные для нативной молекулы АФП и восстановить иммунную активность организма (Приложе ние 2 : Результаты иммунологических исследований гематологических и иммунологиче ских параметров больных раком. Отделения иммунологии Центральная клиническая больница медицинского Центра управления делами Президента РК).

АФП осуществляет транспорт полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК), необходимых клетке для строительства клеточной стенки17. РеАФП присутствуют на поверхности всех клеток, однако максимальная плотность их обнаруживается на трансформированных клетках, так как именно они нуждаются в большом количестве ПНЖК, необходимых для процесса деления и формирования мембран дочерних клеток.

Антипролиферативное действие Ат2АФП базируется на хорошо известной в иммуно логии реакции связывания комплемента. В ходе этой реакции Ат2АФП, связанные с по верхностными клеточными Аг, привлекают и активируют компоненты комплемента, кото рый вызывает избирательный лизис клеток.

В течение 2004 – 2005 годов, препарат "Нормоген" успешно прошел доклинические испытания на экспериментальной базе Казахского научно-исследовательского Института онкологии и радиологии Министерства Здравоохранения Республики Казахстан. Резуль таты доклинических испытаний препарата "Нормоген" отражены в "Отчете по экспери ментальным исследованиям активности и токсичности нового иммунобиологического препарата "Нормоген" согласно Договору ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ он кологии и радиологии" (г. Алматы).

Настоящий Отчет содержит результаты иммунологических исследований, изучения фармакодинамики, фармакокинетики, безопасности, дозовой зависимости, выявления оп тимальной схемы применения препарата "Нормоген", определения курсовой дозы испы туемого лекарственного средства, в режиме монотерапии, в объеме и рамках требований "Инструкции по проведению клинических исследований и (или) испытаний фармакологи ческих и лекарственных средств в Республике Казахстан" для I -ой фазы клинических ис пытаний и положений Протокола КИ.

Данные клинических исследований:

"Нормоген" – принципиально новый, иммунобиологический противоопухолевый препа рат, разработанный и представленный для проведения I – ой фазы клинических испыта ний ТОО "Real Med Company" (г. Алматы, Республика Казахстан).

Действующим началом препарата "Нормоген" являются нативные иммуноглобулины сыворотки крупного рогатого скота, обогащенные природными антиидиотипическими ан тителами (Ат2АФП) к -фетопротеину (АФП).

Принципиальное отличие препарата "Нормоген" от существующих таргетных препара тов на основе моноклональных антител заключается в том, что его иммуноглобулины на правлены против рецепторов, связывающих АФП, которые имеются на поверхности лю бых делящихся клеток. Такая специфичность иммуноглобулинов препарата "Нормоген" предопределяет его способность взаимодействовать с любыми опухолевыми клетками18.

Такое избирательное взаимодействие Ат2АФП с РеАФП запускает два основных моле кулярных механизма:

1. Останавливает процесс деления клеток из-за избирательного блокирования РеАФП специфичными к ним Ат2АФП, и нарушения, тем самым, доставки ПНЖК, необходи мых для формирования клеточных стенок;

2. При высокой плотности РеАФП и, соответственно, специфичных к ним Ат2АФП на поверхности клеточных стенок, что характерно для интенсивно делящихся клеток, реализуется механизм связывания и активации субъединиц комплемента, что ве дет к избирательному комплемент зависимому лизису опухолевых клеток.

На экспериментальной базе Каз. НИИ О и Р в 2004 -2005 годах были проведены док линические исследования препарата "Нормоген" на трех видах животных – мышах, кры сах и собаках, результаты которых отражены в "Отчете по экспериментальным исследо ваниям активности и токсичности нового иммунологического препарата "Нормоген" со гласно Договору ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии".

Исследования показали высокую противоопухолевую активность препарата "Нормо ген" по отношению к большому числу штаммов клеточных культур опухолевых клеток, различных видов перевиваемых опухолей без потери терапевтических свойств препара та, обусловленных природой, локализацией опухолей или видовой принадлежности ре ципиента.

В ходе проведения экспериментов по определению острой и хронической токсичности препарата "Нормоген" проявилось отсутствие токсичности и его высокая безопасность.

При изучении острой и хронической токсичности экспериментаторам не удалось устано вить величины LD -50 и LD-100.

Морфологические исследования показали высокую безопасность исследуемого лекар ственного средства по отношению к клеткам печени, почек, легких и сердца. Необходимо отметить, что при экстремально высоких дозах препарата "Нормоген" отмечались незна чительные и обратимые изменения в клетках миокарда.

Основываясь на данных "Отчета по экспериментальным исследованиям активности и токсичности нового иммунологического препарата "Нормоген" согласно Договора между ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии" и требований поло жений "Брошюры исследователя", а также Протокола КИ, строилась стратегия клиниче ских испытаний, с участием в них информированныъх о положительных и возможных от рицательных последствиях применения препарата "Нормоген", больных-добровольцах.

Цель испытания лекарственного средства "Нормоген" Целью I – ой фазы КИ являлась - предварительная оценка безопасности исследуемо го препарата "Нормоген", а также определение предварительной схемы дозирования пу тем исследования фармакокинетики и фармакодинамики на испытуемых.

Поставленная цель достигалась при участии в КИ группы больных – добровольцев, путем использования внутривенного введения различных по величине суточных и курсо вых доз препарата "Нормоген".

Критериями клинического проявления действия препарата "Нормоген", как монотера певтического средства, являлось субъективные ощущения больными результатов приме нения препарата "Нормоген", а также объективные результаты различных анализов и данные инструментальных методов исследования – рентгена, УЗИ, КТ. и др.

Материалы и методы исследования КИ препарата "Нормоген" проводились с февраля по июль 2006 года. Изучению под вергался новый иммунобиологический препарат отечественного производства – "Нормо ген", представленный ТОО "Real Med Company" (г. Алматы).

В исследования были включены 15 информированных больных-добровольцев. Крите рием включения больных в исследуемую группу были: морфологически подтвержденный диагноз злокачественного заболевания, наличие местно распространенного или десси минированного процесса, относительно удовлетворительное состояние больного (по ВОЗ не более 3 баллов, по шкале Карновского жизненный статус в диапазоне 80 – 40%), на личие опухоли поддающейся оценке в двух измерениях, удовлетворительные показатели функционирования печени и почек, отсутствие специфического лечения в течение двух последних месяцев и подписанное информированное согласие на лечение.

У всех больных, перед началом лечения, проводилась оценка распространенности опухолевого процесса, назначались лабораторные и инструментальные исследования по показаниям (ОАК+тр, ОАМ, БАК, КТ, ЭФГС, УЗИ, рентген и др.) Кроме переносимости препарата "Нормоген" проводилась предварительная оценка его эффективности.

Оценка результатов лечения проводилась по субъективным и объективным призна кам. Оценку субъективного эффекта давали комплексно по двум критериям:

1. По изменению статуса (Perfomance status):

0 – нет симптомов;

1 – умеренные симптомы;

2 – средне выраженные симптомы;

3 – тяжелые симптомы;

4 – особо тяжелые симптомы, угрожающие жизни.

2. Общее состояние пациентов оценивалось по модифицированной шкале ECOG (ВОЗ) следующими баллами:

0 – полная активность, способность выполнять работу без ограничений;

1 - испытываются трудности при выполнении физической работы, способен выпол нять легкую работу;

2 – обслуживает себя полностью, но не способен к выполнению работы;

3 – обслуживает себя с ограничениями;

4 – полная инвалидность.

Объективная оценка эффективности лечения проводилась по следующим критериям:

1 – Полный эффект – исчезновение всех опухолевых образований, определяемых дважды на срок не менее чем 4 недели;

2 – Частичный эффект – уменьшение всех измеряемых опухолей на 50% или более, измеряемые дважды на срок не менее чем 4 недели;

3 – Стабилизация процесса – к этой категории больных относят тех, у которых от мечается уменьшение опухоли менее чем на 50% или увеличение менее чем на 25%. Так как препарат "Нормоген" не относится к цитостатическим препаратам, ре шено было под термином "стабилизация" отмечать больных, закончивших лечение с положительной динамикой т.е. с регрессией опухолевого процесса на 30 - 40%.

4 – Прогрессирование – увеличение размеров опухоли на 25: и более, появление новых опухолевых очагов.

Оценка побочных действий препарата "Нормоген" проводилась согласно рекоменда циям ВОЗ, в которых учитывается четыре степени проявления токсичности:

0 – Изменений нет;

I – Минимальные изменения, не влияющие на общую активность больного. Данные лабораторных исследований незначительно изменены по сравнению с нормой и не требуют специального лечения;

II – Умеренные изменения, нарушающие нормальную активность и жизнедеятель ность больного, вызывающие заметные изменения лабораторных показателей. Ино гда требует дополнительную терапию, но переносится удовлетворительно;

III - Резкие нарушения, требующие активного дополнительного лечения, отсрочки или прекращения специальной терапии;

IV – Опасные для жизни, непереносимые. Могут оказаться необратимыми или ле тальными. После их ликвидации можно продолжать специфичную терапию, только в значительно сниженных дозах.

План испытания Общий план (дизайн) КИ, схематично, выглядел так:

- исследователи подбирали пациентов для участия в КИ из числа онкологических больных, соответствующих критериям отбора добровольцев в исследуемую группу;

- каждый пациент получал от врачей - исследователей или представителей Заказчика всю необходимую информацию об ожидаемых положительных или отрицательных по следствиях применения препарата "Нормоген";

- представители Комиссии по этике и исследователи проводили разъяснительную бе седу об условиях добровольного участия в КИ, для получения от них заверенной подпи сью Формы информированного участия;

- на каждого пациента оформлялись требуемые Приказом МЗ РК №53 документы, оп ределяющие процедуру проведения КИ;

- каждый пациент сдавал, в обязательном порядке, гематологические, биохимичес кие, иммунологические анализы, а также направлялся на инструментальные исследова ния (рентген, КТ, УЗИ и др.), показанные для данной локализации опухолевого заболева ния, которые использовались как исходные, при сравнении с полученными позже резуль татами;

- пациенты, сдавшие необходимые анализы и прошедшие назначенные инструмен тальные исследования получали внутривенные инфузии препарата "Нормоген" в дозах и периодичностью, в соответствии с изучаемыми курсами терапии;

- каждый пациент вел Дневник, в который записывал субъективные ощущения от те рапии препаратом "Нормоген", с которыми ежедневно знакомился врач - исследователь;

- врачи – исследователи вели всю необходимую отчетную документацию;

Изучаемые курсы лечения;

Известно, что внутривенное введение в организм реципиента чужеродного белка вы зывает синтез нейтрализующих Ат1. Кроме того в организме формируются клоны клеток Т- и В- лимфоцитов, для мощного, вторичного иммунного ответа, при последующих вве дениях исходного, чужеродного белка. Для предотвращения синтеза нейтрализующих ан тител и формирования предпосылок для вторичного иммунного ответа, в организм паци ентов вводились разные, но относительно высокие дозы препарата "Нормоген"19.

Кроме того, учитывалась кратная 7 дням циклическая смена синтеза иммунной систе мой пациентов нейтрализующих антител (Ат1) на антиидиотипические антитела (Ат2)20.

Перед проведением курса лечения препаратом "Нормоген" проводилось внутрикож ная проба, для выяснения степени сенсибилизации и переносимости больным исследуе мого лекарственного средства. Для этого, содержимое ампулы (100 мг препарата "Нормо ген") разводили в 200 мл физиологического раствора, затем 0,5 мл полученного раствора вводили внутрикожно на внутреннюю поверхность предплечья. Через 20 – 30 минут оце нивали результаты пробы. При пятне гиперемии диаметром 2 – 3 см проба считалась по ложительной, что должно быть основанием для исключения пациента из КИ.

Проведение внутрикожной пробы показало отрицательные результаты у всех больных, отобранных для участия в КИ.

Препарат "Нормоген" растворялся в физиологическом растворе и вводился внутри венно со скоростью 40 – 60 капель в минуту.

Начальная доза исследуемого препарата составляла от 100 до 300 мг, затем доза препарата повышалась до 700 – 1000 мг. В ходе проведения КИ применялись две схемы применения препарата "Нормоген":

1.Препарат вводился ежедневно с начальной дозой 100 – 300 мг с постепенной эска лацией до 700 – 1000 мг в день, до суммарной (курсовой) дозы 1500 – 7200 мг (10 больных).

2. Препарат вводился в дозе 1000 мг каждые 3 – 4 дня до суммарной дозы от 3000 до 6000 мг (5 больных).

Длительность курса лечения составляла 7 – 12 дней. Указанная длительность курса терапии обусловлена данными фармакодинамики и фармакокинетики препарата "Нормо ген" (Приложение 1). Установлено, что время деградации препарата "Нормоген" иммун ной системой реципиента составляет, в среднем, 6 – 8 дней, что регистрировалось по числу образованных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Продукты деградации иммуноглобулинов утилизируются ретикулоэндотелиальной системой организма, как это отмечено в литературе для всех типов иммуноглобулинов. При высоких дозах препарата "Нормоген" его иммуноглобулины персистируют в крови реципиентов в течение 27 – дня21.

Местом приложения иммуноглобулинов препарата "Нормоген" являются рецепторы клеточных стенок, предназначенные для связывания АФП. Предотвратить иммунный от вет организма пациента на введение препарата "Нормоген" возможно при использовании высоких доз лекарственного средства.

Таким образом, закономерности, проявляемые в иммунологических реакциях, предоп ределили основную схему применения препарата "Нормоген", которая заключалась в массированном введении препарата, в течение 7 – 12 дней, при суммарной курсовой дозе 6000 - 7200 мг.

Изучаемый контингент испытуемых и их количество, которые необходимо включить в исследование;

Контингент испытуемых, участвующих в КИ представлял собой больных с различными диагнозами опухолевых заболеваний. В исследуемую группу были включены пациенты обоего пола (мужчины 5, женщины 10), средний возраст больных составил 52 года. Тя жесть заболевания пациентов, участвующих в КИ, соответствовала III - IV – стадии, паци енты получили, в свое время, различные виды лечения основного заболевания и, в на стоящем, им рекомендовано симптоматическое лечение.

Больные, отобранные для участия в КИ, имели гистологически верифицированные диагнозы, которым в разные сроки проводились курсы химиотерапии, оперативное лече ние в комплексе с химио- и лучевой терапией. Одна больная с кардиоэкзофагеальным раком поступила на КИ после пробной лапаротомии. Интервал между проведением спе цифической терапией и терапией препаратом "Нормоген" составил минимум два месяца.

Исходное состояние больных, участвующих в КИ, регистрировалось по результатам гематологических ( гемоглобин, лейкоциты, нейтрофилы, тромбоциты, соотношение лей коцитов CD4/CD8, активность комплемента, величина СОЭ), а также по данным изменения иммунологических и биохимических показателей, и результатам инструментальных ис следований – рентгенографии, УЗИ, КТ и др.

На каждого больного, включенного в исследуемую группу, была открыта "Карта на блюдения".

Результативность терапевтического действия препарата "Нормоген", позволили огра ничить число испытуемых до 15 человек.

Обоснование плана (дизайна) испытания, в том числе выбор контрольных групп;

План (дизайн) проведения КИ продиктован закономерностями протекания иммуноло гических реакций в организме реципиентов, которые необходимо было учитывать при те рапии опухолевых заболеваний иммунобиологическими препаратами. Этими закономер ностями были обусловлены как длительность курса лечения (7 – 12 дней), так и относи тельно высокие (6000 – 7200 мг) курсовые дозы препарата "Нормоген".

В качестве контрольной группы служили больные, находивщиеся в клинике Казахско го НИИ О и Р, с диагнозами, соответствующими диагнозам пациентов исследуемой груп пы, получавшие стандартные методы лечения с использованием официальных иммуно биологических препаратов.

По этическим аспектам и рекомендации Комиссии по этике, в проведенных КИ, не применялся метод контроля с плацебо, так как потеря 7 – 12 дней лечения для онкологи ческого больного, с прогрессирующей формой течения заболевания, может привести к драматическим последствиям.

Формирование группы информированных пациентов:

Отбор пациентов в исследуемую группу был обусловлен следующими обстоятельст вами:

- в качестве пациентов КИ препарата "Нормоген", набирались больные с верифициро ванным диагнозом заболевания – рак;

- жизненный статус пациентов, по шкале Карновского, составлял 80 – 40%;

- степень тяжести заболевания III – IV стадия, при прогрессировании заболевания;

- ожидаемая продолжительность жизни больных – не менее трех месяцев;

- добровольным участием пациента в КИ.

Особого подбора или типирования больных для включения в исследуемую группу не проводилось. В КИ включались больные с диагнозами заболеваний, оговоренными Про токолом КИ, являющимися "сигнальными" опухолями.

В группу больных были включены 15 пациентов с различными локализациями рака.

Количество мужчин в группе составляло 5 человек, женщин 10. Средний возраст пациен тов составлял 52 года. По локализации опухолей больные распределялись следующим образом:

1. мезателиома плевры – 1;

2. первично множественный рак (сигмовидная кишка, щитовидная железа, РМЖ) - 3. рак кардиоэзофагеального отдела пищевода и рак желудка – 2;

4. рак легкого – 1;

5. рак молочной железы – 3;

6. рак околоушной слюнной железы – 1;

7. рак почки – 1;

8. рак ректосигмоидного отдела толстой кишки – 1;

9. рак шейки матки – 1;

10. рак яичка – 1;

11. рак яичника – 1;

12. хондросаркома позвоночника – 1;

Участие больных с такими разнообразными диагнозами в КИ препарата "Нормоген" преследовало две цели:

1. Проверка безопасности препарата и определение дозовой зависимости;

2. Предварительное выяснение спектра действия препарата "Нормоген" на опухоли различной локализации и определение терапевтических доз, в зависимости от ви да опухолевого заболевания.

О влиянии препарата "Нормоген" на различные параметры (увеличение продолжи тельности жизни животных, коэффициент торможения роста опухоли, показатель проти воопухолевой активности и т.д.) опухолей разнообразной локализации и видовой принад лежности, указывалось ранее, в "Отчете по экспериментальным исследованиям активно сти и токсичности нового иммунологического препарата "Нормоген" согласно Договору ТОО "Real Med Company" и РГКП Каз.НИИ онкологии и радиологии" (г. Алматы, 2004 г.).

Критерии исключение испытуемых из испытаний или анализов;

Критериями исключения пациентов из КИ препарата "Нормоген" служили:

- несоответствие объективного и субъективного состояния больного требованиям па раметров отбора добровольцев, определяемых Протоколом КИ.

- наличие в анамнезе пациента или "при проведении кожной пробы" аллергических реакций на компоненты препарата;

- добровольный отказ пациента от участия в КИ на любой фазе его проведения;

- умышленное нарушение пациентом правил и условий проведения КИ, или не выпол нение им требований врача – исследователя.

Описание лекарственных средств :

В качестве испытуемого лекарственного средства в режиме монотерапии, применялся препарат "Нормоген", разработанный специалистами ТОО "Real Med Company" (г. Алма ты, РК), изготовленный в заводских условиях ТОО "Normogen" (г. Алматы, РК). В исследо ваниях применялась экспериментальная партия препарата "Нормоген" 01.06 (срок годно сти до 04.08 г.), предназначенная только для КИ.

Препарат "Нормоген" представлял собой стерильный порошок лиофилизированных иммуноглобулинов сыворотки крупного рогатого скота, обогащенных Ат2АФП, помещен ный в ампулы из прозрачного, бесцветного стекла, в дозе 100 мг. Ампулы были маркиро ваны этикетками с указанием:

- Заказчика КИ – ТОО "Real Med Company", - Изготовителя - ТОО "Normogen", - наименования лекарственного препарата – Normogen, - количества лекарственной субстанции – 100 мг - номера партии 01.06.

Ампулы с препаратом "Нормоген", в количестве 10 шт., помещались в картонные ко робки, снабженные этикеткой, содержащей следующие данные:

- наименование, адрес, телефон изготовителя - ТОО "Normogen" (г. Алматы, РК);

- наименование Заказчика препарата - ТОО "Real Med Company (г. Алматы, РК);

- указания: "Экспериментальная партия", "Только для клинических испытаний";

- название препарата – противоопухолевый препарат Normogen;

- число ампул в коробке - 10;

- количество лекарственного средства в каждой ампуле – 100 мг;

- номер партии – 01.06;

- срок годности – 04.08 г.;

- рекомендации по хранению препарата – "В сухом, прохладном месте";

- краткая инструкция по применению лекарственного средства;

- зарегистрированный товарный знак:

- надпись: "Клинические испытания проводятся при поддержке Национального Инова ционного Фонда;

- в каждую коробку была вложена Инструкция по применению препарата "Нормоген".

Поставка препарата "Нормоген" клинической базе Каз.НИИ Ои Р, осуществлялась представителем ТОО "Real Med Company", получение препарата проводил уполномо ченный на то, представитель Каз.НИИ О и Р. Процесс передачи лекарственного средства подтверждался Актом приема – передачи препарата "Нормоген", который заверялся под писями и печатями с обеих Сторон. При приемке препарата "Нормоген" проводился визу альный контроль качества упаковки, герметичности ампул, количества и внешнего вида содержимого ампул, а также соответствия номера партии указанного на ампулах, с номе ром партии на коробках.

Общее количество переданных на КИ ампул препарата "Нормоген" составляет (одна тысяча) штук. Брака и боя ампул не отмечено.

Специфических требований к условиям хранения препарата "Нормоген" Заказчиком не предъявлялось. Запасы препарата "Нормоген" хранились в Отделе химиотерапии, при комнатной температуре в сейфе, под замком.

Источником получения иммунобиологических препаратов, на основе моноспецифиче ских антител, которые использовались в контрольной группе больных, принимавших стандартное лечение, служили Государственные закупки противоопухолевых препара тов.

Недостаток комплемента в крови пациентов или его низкая функциональная актив ность компенсировались внутривенным введением свежезамороженной плазмы, которая поставлялась Казахским Республиканским Центром крови.

Выбор доз для изучения;

Всего за время проведения I – фазы КИ у 15 пациентов проведено 22 цикла 10 – дневной терапии препаратом "Нормоген".

Осложнений III и IV степени и токсических смертей не было. Ни у кого из больных не проводилось снижение доз препарата в связи с токсичностью. У 12 пациентов отмечен ные осложнения оценены II –ой степенью токсичности, так как во время инфузии препа рата, спустя 30 – 40 минут от начала введения отмечалась лихорадка с последующим по вышением температуры тела от 37,5 до 39,0 С, сопровождающаяся тахикардией, учаще нием дыхания, причем эти проявления не зависели от дозы введенного препарата и оди наково часто встречались как при дозах 100 мг, так и при дозах 1000 мг.

Известно, что схожие реакции наблюдаются в практике онкологии, при введении таких иммуномодулирующих препаратов как Интрон А, ПегИнтрон, Роферон, Интерферон22 и таргетных, как Герцептин23, Панорекс24, Мабтера25 и др.

Токсичность таргетных препаратов на основе специфичных антител, как указывалось выше, своеобразна и принципиально отличается от токсичности большинства классиче ских цитостатиков. При значительно меньшем угнетении гемопоэза, они чаще вызывают кожные сыпи, аллергические реакции, нарушения общего состояния, носящие обычно, временный характер26.

Побочные эффекты, наблюдаемые при введении препарата "Нормоген", проходили самостоятельно при временной остановке инфузии или снижении скорости введения изучаемого лекарственного средства, но после продолжения лечения они не возобновля лись. При более продолжительных реакциях данный вид осложнения эффективно купи ровался назначением десенсибилизирующих средств – димедрола с анальгином, супра стина или дексаметазона. Гиперэргические реакции наблюдались, в основном, при пер вых 3 – 4 введениях препарата "Нормоген", но при последующих введениях эти реакции были выражены гораздо слабее.

Необходимо отметить, что величина и спектр осложнений не нарастали при эскалации доз препарата и, при этом, не были отмечены такие реакции, как аллергические (бронхо спазм, снижение артериального давления, сыпь, кожный зуд и др.), или осложнения со стороны печени, почек, и сердечно-сосудистой системы (аритмия, изменения артериаль ного давления).

У трех больных степень проявления побочных эффектов оценена I – степенью ток сичности, так как у двоих из них при отсутствии озноба отмечалось лишь субфебрильная температура через 3 – 4 часа после инфузии, которая самостоятельно купировалась, а у третьего пациента после введения изучаемого препарата отмечалась головная боль, не связанная с повышением артериального давления.

В результате проведения лечения препаратом "Нормоген", у 10 (66,7%) больных улуч шилось самочувствие, уменьшились или отступили полностью боли, повысился аппетит.

У 3 (20%) пациентов состояние осталось без существенного изменения, а у 2(13,3%) от мечено ухудшение самочувствия. Показатели динамики качества жизни пациентов пред ставлены в таблице 2.

Таблица Динамика качества жизни больных по ECOG (ВОЗ) и шкале Карновского ВОЗ Этапы Кол-во (в баллах) 0 1 2 3 наблюдения больных По Карнов скому в % 100 80-90 70 60-40 До лечения 15 8 2 (53,3%) (13,3%) (33,4%) После лечения 15 10 1 - (66,7%) (6,7%) (26,6%) Как видно из данных таблицы 2, общее состояние у большинства больных до и после завершения курса лечения улучшилось, т.е. они стали более активными и меньше нахо дились на постельном режиме. Показатели качества жизни, оцененные 1 – ой степенью повысились с 53,3 до 66,7% т.е. в 1,2 раза, и наоборот, уменьшилось число больных с оценкой качества жизни в 2 и 3 балла (в 1,9 и 1,2 раза соответственно).

По окончании терапии препаратом Нормоген" проводилась оценка результатов лече ния. В таблице 1 приведены параметры крови пациентов, принимавших препарат "Нор моген" (согласно данным Приложения 2).

Таблица Клинические параметры крови испытуемых до и после применения препарата "Нормоген" Основн.

№ Параметр группа Основн. группа p до лечения после лечен.

(гр.1) (гр.2) 1- Гематологические показатели:

135,07 ± Гемоглобин 1 36,1 131,37 ± 36,44 0, Эритроциты 2 4,64 ± 1,24 4,65 ± 1,29 0, Среднее содержание Hb в Эритроците 3 29,99 ± 8,66 29,15 ± 8,42 0, Цветной показатель 4 0,91 ± 0,26 0,87 ± 0,24 0, 40,41 ± Гематокрит 5 11,66 40,47 ± 11,68 0, Средний объем эритроцита 6 90,77 ± 26,2 88,73 ± 25,61 0, 309,92 ± Тромбоциты 7 82,83 258,49 ± 71,69 0, Лейкоциты 8 6,84 ± 1,83 26,67 ± 7,4 0, 64,76 ± Нейтрофилы сегментояд.

9 17,31 70,99 ± 19,69 0, Эозинофилы 10 3,86 ± 1,29 3,14 ± 1,11 0, Базофилы 11 8,56 ± 3,5 6,02 ± 3,48 0, Моноциты 12 8,17 ± 2,58 8,06 ± 2,33 0, Лимфоциты 13 28,14 ± 7,52 23,84 ± 6,61 0, СОЭ 14 30,04 ± 8,03 33,97 ± 9,42 0, Показатели клеточного иммунитета:

58,54 ± Т-лимфоциты (относ.) 15 15,65 64,41 ± 17,22 0, Т-лимфоциты (абсол.) 16 0,93 ± 0,25 1,28 ± 0,34 0, Т-хелперы (Tµ) (относ.) 17 36,74 ± 9,82 40,61 ± 10,85 0, Т-хелперы (Tµ) (абсол.) 18 0,75 ± 0,2 0,92 ± 0,25 0, Т-супрессоры (T( )относ.) 19 22,5 ± 6,01 27,62 ± 7,38 0, Т-супрессоры (T( )абсол.) 20 0,4 ± 0,11 0,58 ± 0,16 0, Тх/Тс 21 1,9 ± 0,51 2,01 ± 0,54 0, В-лимфоциты (ЕАС) (относ.) 22 9,4 ± 2,51 11,52 ± 3,08 0, В-лимфоциты (ЕАС) (абсол.) 23 0,13 ± 0,04 0,2 ± 0,05 0, 39,31 ± 0-ые лимфоциты (относ.) 24 10,51 33,52 ± 8,96 0, 0-ые лимфоциты (абсол.) 25 0,69 ± 0,18 0,74 ± 0,2 0, Ауто-лимфоциты (относ.) 26 8,92 ± 2,47 9,79 ± 2,71 0, Ауто-лимфоциты (абсол.) 27 0,16 ± 0,04 0,21 ± 0,06 0, Показатели гуморального иммунитета:

328,93 ± lgA (Иммуноглобулин А) 28 87,91 338,09 ± 90,36 0, 147,68 ± lgМ (Иммуноглобулин М) 29 39,47 179,05 ± 47,85 0, 1146,55 ± 30 IgG (Иммуноглобулин G) 306,43 1165,26 ± 311,43 0, 135,84 ± СЗ (Фракция комплемента 3) 31 36,3 139,05 ± 37,16 0, С4 (Фракция комплемента 4) 32 33,08 ± 8,84 31,88 ± 8,52 0, 57,47 ± Гемолитич. активность системы комплемента 33 53,92 ± 14,41 0, 15, Противотканевые аутоантитела к тканям:

Противоткан. аутоантитела к тканям: Сердца 34 20,24 ± 6,4 22,61 ± 7,99 0, Противоткан. аутоантитела к тканям: Легкого 35 22,65 ± 6,83 30,66 ± 10,84 0, Противоткан. аутоантитела к тканям: Печени 36 10,43 ± 3,69 11,65 ± 4,76 0, Противоткан. аутоантитела к тканям: Кишеч ника 37 19,39 ± 6,13 25,7 ± 8,13 0, Циркулирующие иммунные комплексы 38 2,5 ± 0,67 2,85 ± 0,76 0, НСТ-Тест НСТ-Тест - Спонтанный 39 11,16 ± 2,98 8,68 ± 2,32 0, НСТ-Тест - Индуцированный зимозаном 40 23,1 ± 6,17 26,58 ± 7,1 0, Показаны средние показатели по группе пациентов ± среднее абсолютных значений отклонений.

У пациентов, на 3 – 4-ый день от начала приема препарата "Нормоген" отмечалось:

значительное уменьшение или полное исчезновение болей, появление аппетита, улуч шение самочувствия и настроения, нормализация температуры, уменьшение или исчез новение отечности конечностей (лимфостаз), имеющей место, например, при раке мо лочной железы, нормализация параметров крови, нормализация физической активности больного, восстановление естественной работы органов выделительной системы орга низма;

Было установлено, что полная регрессия (100%) не была отмечена ни в одном из слу чаев применения исследуемого лекарственного средства. Частичный эффект, (уменьше ние МТС более чем на 50%) отмечен в одном (6,67%) случае (рак яичка), который выра жался в уменьшении лимфоузлов за брюшинной области,.

У четырех (26,67%) больных, в том числе и у больной с множественным первичным раком, отмечена положительная динамика, связанная с уменьшением размеров лимфа тических узлов. Это проявилось, также, в значительном снижении отека конечностей (лимфостаз) – у двух пациенток при раке молочной железы (верхняя конечность слева) и у одной больной с раком прямой кишки – уменьшение отека нижней левой конечности из за МТС в лимфоузлы левой подвздошной области, что, в конечном счете, привело к уве личению степени подвижности в конечностях.

Необходимо отметить, что объективный эффект у больных наблюдался отсроченно, после окончания курса лечения. У 6 (40%) больных выявлена стабилизация онкологиче ского процесса, т.е. размеры опухоли и МТС очагов не изменились, а у 4 (26,66%) паци ентов отмечено прогрессирование заболевания (Таблица 3).

Таблица Показатели эффективности препарата "Нормоген" Препарат Количество Степень регрессии опухоли больных Полный Частич- Стабилиза- Стабилиза- Про эффект ный ция с поло- ция без ди- гресс эффект жительной намики 100% 50% динамикой 30 – 40% 15 - 1 4 6 "Нормоген" 6,67% 26,67% 40% 26,66% Приведенные выше показатели эффективности препарата "Нормоген", используемого в качестве моно-терапевтического средства, носят предварительный характер, выходя щие за пределы требований I – фазы клинических исследований. Более детальное изу чение спектра действия и терапевтических свойств нового лекарственного средства, бу дет проводиться в рамках требований II – фазы клинических испытаний.

Совокупность выявленных терапевтических свойств препарата "Нормоген", позволяет рассматривать его как перспективное, безопасное, противоопухолевое лекарственное средство.

Обсуждение и обобщающие выводы.

Таким образом, результаты проведенной I – фазы клинических испытаний отечест венного иммунобиологического противоопухолевого препарата "Нормоген" выявили ряд интересных свойств разработанного казахстанскими учеными лекарственного средства.

Необходимо отметить, что указанные свойства лекарственного средства предопреде лялись абсолютно новым подходом как при теоретическом обосновании механизма дей ствия препарата "Нормоген", так и при практическом создании технологии получения ле карственной субстанции и доведения ее до лекарственной формы.

Большим достоинством препарата "Нормоген" является высокая безопасность, пол ное отсутствие токсичности, а выявленные побочные проявления связаны с реакцией ор ганизма реципиента на введение чужеродного белка. Аналогичные реакции отмечаются при использовании большинства белковых иммуномодулирующих препаратов и лекарст венных средств на базе специфичных антител.

Из наиболее необычных свойств нового лекарственного средства, прежде всего, сле дует отметить полипотентность препарата "Нормоген", заключающуюся в способности его воздействовать на различные по локализации онкологические заболевания. Кроме то го, препарат оказался эффективным при множественных сочетанных формах первичного рака. Таким свойством полипотентности не обладает ни один из известных иммуномоду лирующих или таргетных препаратов, используемых в практической онкологии.

Противоопухолевая активность препарата "Нормоген" изучалась у пациентов с раз личными видами заболеваний раком, причем лечебный эффект отмечался у больных не прошедших какого либо специального отбора или иммуногистохимического типирования на наличие онкомаркеров или иных целевых белков-антигенов на поверхности мембран опухолевых клеток.

Отмечено, что применение препарата "Нормоген" улучшает гематологические показа тели, снижает число лейкоцитов суппрессоров, улучшает соотношение CD4/CD8, в пользу лейкоцитов хелперов, повышая тем самым, иммунологический статус организма.

Следует отметить, что препарат "Нормоген" проявляет цитолизирующую активность в присутствии функционально активного комплемента, что предопределяет необходимость периодического контроля, в процессе лечения, содержания и функциональной активно сти комплемента в сыворотке крови пациентов и, при необходимости, коррекции пара метров комплемента путем введения свежезамороженной плазмы.

ВЫВОДЫ Препарат "Нормоген" является безопасным лекарственным средством. Спектр 1.

побочных проявлений (озноб, повышение температуры тела, тахикардия) соот ветствует таковым, наблюдаемым при применении известных иммуномодули рующих препаратов и моноклональных антител. Интенсивность проявления по бочных эффектов не зависит от величины разовой дозы и одинаковы по степени проявления как при дозе 100 мг, так и при дозе 1000 мг;

При применении препарата "Нормоген" в двух режимах (ежедневный или 3 раза 2.

в неделю) предпочтительным является режим ежедневного введения лекарст венного средства в суммарной курсовой дозе выше 5000 мг;

Субъективный эффект после терапии препаратом "Нормоген" отмечается у 3.

66.7% больных и выражается в улучшении самочувствия, улучшения аппетита, уменьшением или исчезновением полностью болевого синдрома. Показатели качества жизни оцененные 1–ой степенью, повышаются в 1,2 раза и, в следст вии этого, уменьшается число больных с оценкой качества жизни 2 и 3 балла ( в 1,9 и 1,2 раза, соответственно);

Изучение объективного эффекта при монотерапии препаратом "Нормоген" пока 4.

зало, что у 1 (6,67%) больного отмечался частичный эффект с уменьшением размеров опухоли и лимфатических узлов более чем на 50%. У четверых (26,67%) пациентов достигнута стабилизация процесса с положительной дина микой (с оценкой 30 – 40%), выражающаяся в уменьшении лимфостаза на ко нечностях, уменьшении забрюшинных лимфоузлов, регистрируемых при рентге нологическом и КТ исследовании. У 6 (40%) больных отмечена стабилизация опухолевого процесса без динамических сдвигов. У четырех (26,66%) пациентов отмечалось прогрессирование заболевания на фоне проводимого лечения;

Терапия препаратом "Нормоген" положительно влияет на содержание гемогло 5.

бина, числа эритроцитов, лейкоцитов, сегментноядерных нейтрофилов, тромбо цитов крови, а также на показатели гуморального и клеточного иммунитета;

На основании выше перечисленных положительных результатов проведенного исследования, в рамках I – фазы клинических исследований, РГКП Казахский.НИИ онкологии и радиологии" рекомендует:

- Провести II–ю фазу клинических испытаний препарата "Нормоген".

Список использованной литературы:

Приказ Министерства Здравоохранения РК № 53 от 17 февраля 2005 года "Инструкция по проведению клинических исследований и (или) испытаний фармакологических и лекарственных средств в Республике Казахстан".

Францев А.П., Францева И.А., Медведева Е.М. Патент Республики Казахстан " № 14142 "Способ использования антиидиотипических антител к -фетопротеину для избирательного лизиса транс формированных клеток" Францев А.П., Францева И.А Евразийский Патент № 006649 "Способ получения антиидиотипи ческих антител к -фетопротеину для избирательного лизиса трансформированных клеток" Северин С.Е., А.В. Родина, М.Б. Ницветов, Е.Ю. Москалева, Г.А. Посыпанова, и др. "Изучение возможности использования моноклональных антител (МоАт) к рецептору Альфа-Фетопротеина (РеАФП) для регуляции противоопухолевого иммунитета" Данные из Интернета Smith С., Kelleher Ph. Biological Activities of Alpha-Fetoprotein. Eds G. Mizejeweski, H. Jacobson.

1989;

v 2, pp. 35-43.

Takayma H. A case of bladder cancer producing alpha-fetoprotein (AFP). Hinyokika Kyio 1995;

v 41, p 5, pp. 387-389.

Э. Купер Сравнительная иммунология "Мир", М., 1980, стр. 351 – 352.

Францев А.П., Гильманов М.К. Закономерность негативно - позитивного отражения свойств анти гена на вариабельных участках антител. Заявка в Государственный комитет по делам изобрете ний и открытий при Совете Министров СССР № 32- ОТ - 10301 от 15.09.1979 г. (отказ).

Jerne N.K. Towards a network theory of the immune system Ann. Immunol. (Paris), 1974, 125 c, pp.

373 - 389.

Францев А.П., Гильманов М.К., Волкош Л.П. Молекулярные основы иммунитета. Здравоохране ние Казахстана, г. Алма- Ата, 1981 г., № 6, стр. 19-22.

Профессиональная помощь при онкологических заболеваниях. Онкология химиотерапия, гормо нотерапия рака. Онкологи-профессионалы.htm Ruethmuller G., Holz E., Schlimok G. et al. Monoclonal antibody therapy for resected Duke's C colorec tal cancer: seven-year outcome of a multicenter randomized trial. JCO, vol.16, 5, 1998: pp.1788- Nunez E., Benassayag C., Crysteff N. et al. Estrogen and fatty acid binding properties of murine AFP: a guide to explain some biological activities of this protein. Biological Activities of Alpha-Fetoprotein. Eds G.

Mizejewski, H. Jacobson. 1987;

v 1, pp. 3-18.

Решетников С.С., Иммуноферментный анализ альфа-фетопротеина, использование в диагно стике заболеваний человека. Новости "Вектор-Бест" N 6, Декабрь 1998.

Проект МНТЦ 1878, Изучение избирательного АФП-индуцированного апоптоза раковых клеток:

возможное приложение для моделирования антираковых препаратов. Руководитель Проекта Ду дич Елена, E-mail: abramo01@ssw.alcoa.com Решетников С.С., Иммуноферментный анализ альфа-фетопротеина, использование в диагно стике заболеваний человека. Новости "Вектор-Бест" N 6, Декабрь 1998.

Smith С., Kelleher Ph. Biological Activities of Alpha-Fetoprotein. Eds G. Mizejeweski, H.

Jacobson. 1989, v 2, pp. 35-43.

A.P. Frantsev, V.S. Tolmachev, I.A. Frantseva, E.M. Medvedeva. Using antiidiotipic antibodies to al pha-fetoprotein for selective destruction of transformed cells. TOO "Real Med Company", Almaty, Repub lic of Kazakhstan. II –World congress on immunopftology & respiratory fllergy, Moscow, May, 14 – 17, 2004, Internationai Journal on Immunorehabilitation, M, 2004, v 6, No 2, p. 258.

Клиническая иммунология и аллергология. Под редакцией Л. Йегера, В трех томах, М., "Медици на", 1990, том I, стр. 91 -101.

Францев А.П., Гильманов М.К., Волкош Л.П. Молекулярные основы иммунитета. Здравоохране ние Казахстана, г. Алма- Ата, 1981 г., № 6, стр. 19-22.

Клиническая иммунология и аллергология. Под редакцией Л. Йегера, В трех томах, М., "Медици на", 1990, том I, стр. 66.

О. А. Рукавицын, В. П. Поп Иммунотерапия при лечении больных с заболеваниями системы крови., Гематологический центр главного военного клинического госпиталя им. акад. Н. Н. Бурден ко, Москва, Журнал Мистецтво лiкування, htm И.П. Ганьшина, Е.В. Степанова., Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, Место Герцептина в онкологической практике., М., РМЖ, Том 11 № 11, 2003 г.

Ruethmuller G., Schneider-Gadicke E., Schlimok G. et al. Randomized trial of monoclonal antibody for adjuvant therapy of resected Duke's C colorectal carcinoma. Lancet 1994, v 343, pp 1177- В.М.Моисеенко, Применение моноклональных антител для лечения злокачественных солидных опухолей., НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова, Санкт-Петербург, 1999 htm Профессиональная помощь при онкологических заболеваниях. Онкология химиотерапия, гормо нотерапия рака. Онкологи-профессионалы.htm

 














 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.