авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

На правах рукописи

Мухатова Елена Михайловна

СИНТЕЗ И ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ОРГАНИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ ОЛОВА С ФЕНОЛЬНЫМИ

ФРАГМЕНТАМИ

02. 00. 03 – Органическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Астрахань - 2013

Работа выполнена в Астраханском государственном техническом университете на кафедре органической, биологической и физколлоидной химии Научные руководители: Берберова Надежда Титовна, доктор химических наук, профессор Шпаковский Дмитрий Борисович, кандидат химических наук, старший научный сотрудник

Официальные оппоненты: Сидоров Алексей Анатольевич, доктор химических наук, профессор (Институт общей и неорганической химии им. Н.С. Курнакова РАН, заместитель директора) Аксенов Александр Викторович, доктор химических наук, профессор (Северо-Кавказский федеральный университет, заведующий кафедрой химии)

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный химико-технологический университет», г. Иваново

Защита состоится «19» декабря 2013 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 307.001.04 при ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет» по адресу:

414056, г. Астрахань, ул. Татищева, 16, учебный корпус 2, ауд. 201.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного технического университета.

Автореферат разослан «18» ноября 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор химических наук, доцент Е.В. Шинкарь

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Оловоорганические соединения (ООС), применяемые в сельском хозяйстве (биоциды) и промышленности (катализаторы различных производств, добавки в антиобрастающие краски), в отличие от своих неорганических предшественников являются достаточно токсичными веществами. Токсичность RnSnX4-n обусловлена не только способностью взаимодействовать с цистеиновых и гистидиновых SH-группами аминокислотных остатков белков, но и их прооксидантной активностью, что приводит к развитию окислительного стресса и возникновению многочисленных патологий. С целью снижения побочных токсических эффектов в настоящее время активно ведутся работы по созданию новых антиокислительных ловушек для токсичных ООС, проявляющих прооксидантную активность. Недавние исследования доказали высокую цитоксическую активность производных ООС с различными N, O, C- донорными лигандами. Подавление окислительной активности ООС важно также с точки зрения поиска лекарственных препаратов цитотоксического действия, не оказывающих нежелательного побочного действия. Известными ингибиторами свободнорадикальных окислительных процессов являются пространственнозатрудненные фенолы, имитирующие активность витамина Е. С целью снижения токсичности ООС можно провести их функционализацию подобными редокс-активными фрагментами. В связи с этим, синтез органических производных олова, содержащих фрагмент пространственнозатрудненного фенола, исследование их редокс-свойств в биохимически значимых реакциях является актуальной задачей и представляет не только научный интерес, но и практическую значимость.

соединений, содержащих фрагмент пространственно-затрудненного фенола, изучении их влияния на биохимические процессы in vitro и установлении взаимосвязи структура – биоактивность. В рамках диссертационной работы решались следующие задачи:

пространственно-затрудненного фенола, и исследование их редокс-свойств.

2. Комплексное изучение анти/прооксидантной и антирадикальной активности полученных соединений на различных модельных системах.

3. Изучение влияния оловоорганических соединений на скорость разложения пероксида водорода гемолизатом эритроцитов крови человека in vitro.

4. Оценка цитотоксической активности полученных соединений на линиях раковых клеток и изучение их взаимодействия с белком тубулином, как одной из биохимических мишеней для потенциальных противораковых средств.

Научная новизна Синтезированы новые оловоорганические соединения, содержащие фрагмент 2,6-дитрет-бутилфенола.

Исследованы редокс-превращения оловоорганических соединений в растворах совокупностью физико-химических методов: циклическая вольтамперометрия (ЦВА), электронный парамагнитный резонанс (ЭПР).

Установлена антиоксидантная активность новых серосодержащих соединениий Sn(IV) и Sn(II) ферментативного окисления жирных ненасыщенных кислот на примере цис-9-октадеценовой (олеиновой) и цис-9,цис-12-октадекадиеновой (линолевой) кислот.

Впервые показано, что оловоорганические соединения, содержащие фрагменты 2,6-дитрет-бутилфенола, в отличие от хлоридов, увеличивают скорость разложения Н2О2 под действием каталазы крови in vitro. Предложены новые детоксицирующие агенты – водорастворимый мезо-тетра(4-сульфофенил)порфирин и 3,5-ди-трет-бутил-4гидрокситиофенол для снижения токсического действия оловоорганических соединений.

Установлено, что комплексы оловоорганических соединений с фрагментами 2,6-ди-третбутилфенола проявляют высокую антипролиферативную активность против линий раковых клеток MCF-7 и HeLa, при этом наблюдается корреляция с их высокой антиоксидантной активностью в процессах пероксидного окисления жирных ненасыщенных кислот, также обнаружено их высокое сродство к белку тубулину, рассматриваемому в качестве одной из Практическая ценность. В работе предложен способ диагностики стадий течения воспалительных заболеваний придатков матки с помощью определения активности каталазы.



Данный способ позволяет повысить точность диагностики и оценить динамику процесса (Патент № 2291438).

Найдены новые детоксицирующие агенты для токсических оловоорганических соединений.

противораковых агентов – фермент липоксигеназу и белок тубулин, представляет значительный интерес для поиска новых противораковых агентов, обладающих менее выраженными побочными эффектами. Данные о высокой цитотоксической активности позволяют рассматривать комплексы оловоорганических соединений с фрагментами 2,6-дитрет-бутилфенола в качестве перспективных противораковых препаратов.

Апробация работы. Основные результаты и материалы диссертационной работы представлены на Всероссийской молодежной конференции-школе, посвященной 150-летию со дня рождения А.Е. Фаворского (Санкт-Петербург, Россия, 2010), International conference «Topical problems of organometallic and coordination chemistry» V Razuvaev lectures (N. Novgorod, Russia, 2010), XI Международной конференции по физической и координационной химии порфиринов и их аналогов (ICPC-II) (Одесса, Украина, 2011); Frontiers of Organometallic Chemistry, FOC-2012. (Saint Petersburg, Russia, 2012); International Symposium «Modern Trends in organometallic chemistry and catalysis (Мoscow, Russia, 2013); International conference “Organometallic and Coordination Chemistry: Fundamental and Applied Aspects” International Youth School-Conference on Organometallic and Coordination Chemistry, (N. Novgorod, Russia, 2013); V конференции “Электрохимические и электролитно-плазменные методы модификации металлических поверхностей” 2013; Первой Российской конференции по медицинской химии (Москва, 2013).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 статей, 13 тезисов докладов, получен 1 патент.

Объем и структура работы.

Материал диссертационной работы изложен на 120 страницах, включает 8 таблиц, рисунка и состоит из введения, обзора литературы, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов и списка цитируемой литературы из 147 наименований и полностью соответствует паспорту специальности 02.00.03.

Настоящая диссертационная работа проводилась при финансовой поддержке Российского Фонда Фундаментальных Исследований (гранты № 11-03-00389, 13-03-00487), Федеральной Целевой Программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 г.г. (ГК №16.740.11.0771 от 31 октября 2011 г.).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Литературный обзор В обзоре представлены данные о свойствах, применении и механизме действия оловоорганических соединений; рассмотрены возможные пути снижения токсического действия органических производных олова, а также последние достижения в поиске цитотоксических агентов на основе производных олова.

2. Обсуждение результатов В работе описан синтез новых соединений Sn(IV) и Sn(II), содержащих фрагменты 2,6-дитрет-бутилфенола, а также результаты комплексного исследования редокс-свойств, антирадикальной и антиоксидантной активностей с использованием модельных процессов неферментативного пероксидного окисления цис-9-октадеценовой кислоты и ферментативного окисления цис-9,цис-12-октадекадиеновой кислоты под действием липоксигеназы (LOX 1-В).

Установлено увеличение скорости ферментативной реакции разложения Н2О2 каталазой крови in vitro в присутствии оловоорганических соединений с порфириновыми и тиофенольным лигандами.

Изучено связывание оловоорганических соединений с SH-группами белка тубулина потенциальной мишени для противоопухолевых препаратов. Обнаружена выраженная цитотоксическая активность оловоорганических соединений с тиолатными лигандами на линиях раковых клеток человека MCF-7 и HeLa in vitro.

2.1. Синтез и редокс - активность соединений Sn(IV) и Sn(II), содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола В работе синтезированы новые соединения олова 1-8 взаимодействием соответствующих хлоридов олова и 3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокситиофенола (RSH) в присутствии гидроксида калия (Схема 1). Соединения Sn(IV) различаются длиной и объемом заместителей (Me, Et, Bu, Ph) и числом тиолатных лигандов на основе 2,6-ди-трет-бутил-4-меркаптофенола (RSH) (10).

В качестве соединений сравнения выбраны производные олова Sn(IV) и Sn(II) (8, 9), содержащие два фенольных фрагмента. Бис-(3,5-ди-трет-бутил-4гидроксифенил)оловодихлорид (9) получен по известной методике переметаллирования из соответствующего ртутьорганического производного.

Состав и строение тиолатов Sn подтверждено данными элементного анализа, ИК спектроскопии, ЯМР и рентгеноструктурного анализа (РСА)1.

По данным РСА соединений 1, 5 структура координационного полиэдра при атоме олова представляет собой искаженный тетраэдр (Рис. 1). Длины связи Sn-S в комплексах составляют 2.40-2.42. Несмотря на пространственные препятствия ввиду наличия четырех фрагментов 2,6-ди-трет-бутилфенола молекулы 5 способны участвовать в образовании межмолекулярных водородных связей O4–H4S1, расстояние H4S1 составляет 2.936.





РСА был выполнен в лаборатории структурной химии химического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова под руководством д.х.н., проф. Л.А. Асланова.

Рис. 1. Молекулярные структуры соединений 1, 5.

В ИК-спектрах при образовании тиолатов 1-8 исчезает полоса валентных колебаний (SH) 2573 см-1 лиганда RSH. Полоса валентных колебаний неассоциированной ОН-группы наблюдается в области 3620-3640 см-1 для соединений 1-8. Сдвиги характеристичных полос (ОН) в область более высоких частот по сравнению с RSH свидетельствуют о перераспределении электронной плотности в комплексах и доказывают образование связи S-Sn.

В спектрах ЯМР 1Н 1-8 в CDCl3 отсутствует сигнал протона S-H группы в RSH при 3. м.д., а характеристичные сигналы эквивалентных протонов But и ОН группы смещены в сильное поле в спектрах комплексов по сравнению с таковыми для RSH. Наличие двух эквивалентных -связей С-Sn в 5 приводит к проявлению спин-спинового взаимодействия ароматических протонов фенольных групп с парамагнитными изотопами Sn (S = 1/2) с константой расщепления 3J(Sn-H) 84 Гц.

Далее было проведено исследование редокс-свойств соединений олова, содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола. В биологические окислительно-восстановительные процессы ООС вовлекаются с образованием реакционноспособных частиц и вторичных продуктов распада, в связи с этим методами ЭПР и электрохимии изучено участие тиолатов олова в данных превращениях.

Химическое окисление соединений 1-8 под действием PbO2 в толуоле приводит к образованию радикальных частиц. Наличие в соединениях 1-8 одной, двух или четырех 2,6-дитрет-бутилфенольных групп предполагает образование на первой стадии окисления феноксильного радикала, затем возможна генерация нескольких радикальных центров с последующей деструкцией соединений (Схема 2). Спектры ЭПР радикалов представляют собой триплеты (Рис. 2), характеризующие взаимодействие спина неспаренного электрона с двумя эквивалентными мета-протонами феноксильного кольца с константами сверхтонкого взаимодействия (СТВ) а(2Н). Введение атома Sn не оказывает значительного влияния на величину константы СТВ а(2Н) в феноксильных радикалах 1.-8., составляющую 0.15-0.16 мТл.

устойчивы в растворе в отсутствии кислорода при комнатной температуре в течение нескольких часов. Сходство общего вида и параметров спектров ЭПР радикалов, парамагнитными ядрами Sn указывает на отсутствие переноса электронной плотности от радикального центра через атом S к атому Sn. Величины изотропных g-факторов (g = 2.0041 – 2.0051) для радикалов 1.-8.близки g-фактору органического радикала и свидетельствуют о делокализации неспаренного электрона в органическом фрагменте.

Электрохимическое поведение соединений 1-9 в сравнении с 3,5-ди-трет-бутил-4гидрокситиофенолом в процессах переноса электрона изучено методом циклической вольтамперометрии (ЦВА).

Cоединения 1-9 и RSH окисляются необратимо в две одноэлектронные стадии при потенциалах 1.021.30 и 1.41.70 В (Табл. 1). Типичный вид ЦВА на Pt электроде в CH 3CN представлен на рисунке 3. На обратной ветви циклической вольтамперограммы (ЦВА) всех идентифицированный добавкой в систему кислот (HClO4, CF3COOH).

Табл. 1. Потенциалы окисления соединений 1-10.

Известно, что увеличение числа органических заместителей затрудняет восстановление оловоорганических соединений. Монозамещенные органические производные олова(IV) легче Установлено, что соединения 1-8 способны проявлять восстановительные свойства за счет тиофенольных фрагментов.

При проведении исчерпывающего электролиза соединения 6 при Епа= 1.02 В образуется продукт, который восстанавливается обратимо при потенциале Е пк= -0.8 В, в ИК-спектре колебаниям (С=О) 1720 см-1. Аналогичная картина наблюдается в результате исчерпывающего электролиза фенола 10. Продукт восстанавливается обратимо при потенциале Епк= -0.74 В, в ИК-спектре продукта также отмечена полоса поглощения, соответствующая валентным колебаниям карбонильной группы.

Спектроскопия поглощения продуктов электролиза 6 и 10 в видимой области подтверждает образование 2,6-ди-трет-бутилбензохинона, для которого характерна полоса поглощения при = 425 нм.

Использование метода ЦВА подтверждает ступенчатое окисление оловоорганического соединения 6. Наличие первого пика, обусловлено окислением фенольного фрагмента до катион-радикала, который фрагментируется с отрывом протона с образованием радикала, свидетельствуют о высокой редокс-активности данных соединений. Введение донорных заместителей в органическую часть комплексов олова облегчает их окисление. Поскольку все полученные соединения содержат структурный фрагмент тиофенола, то их редоксхарактеристики близки.

антирадикальной активности данными соединениями. В случае соединений олова(IV) предположительно происходит деструкция оловоорганического соединения, что согласуется с литературными данными.

соединений с фрагментами 2,6-ди-трет-бутилфенола В работе исследована взаимосвязь структура - активность соединений в следующих модельных реакциях: 1) перенос атома водорода от изучаемых соединений к стабильному радикалу 2,2-дифенилпикрилгидразилу 2) неферментативное пероксидное окисление цис-9октадеценовой (олеиновой) кислоты 3) ферментативное окисление цис,цис-9,12октадекадиеновой (линолевой) кислоты под действием липоксигеназы.

2.2.1. Антирадикальная активность тиолатов Sn(IV), содержащих фрагменты 2,6-дитрет-бутилфенола Одним из способов оценки антирадикальной активности органических соединений является способность таких соединений к восстановлению стабильного радикала 2,2-дифенилпикрилгидразила (ДФПГ) (схема 4). Мониторинг за ходом реакции осуществляется спектрофотометрически по уменьшению оптической плотности раствора ДФПГ ( max = 517 нм) в МеОН в присутствии исследуемых соединений.

Нами исследована антирадикальная активность2 соединений 1-9 в ДФПГ-тесте, и установлена их высокая антирадикальная активность (Табл. 2). Наиболее активным восстановителем ДФПГ в данном ряду является соединение 5, содержащее четыре фенольные группы и для которого значение эффективной концентрации EC50, восстанавливающей 50% ДФПГ составляет (8 ± 1) М. Реакция восстановления эквимолярных количеств ДФПГ и 5 (0.1 мМ) завершается в течение нескольких секунд.

Табл. 2. Значения ЕС50 для соединений 1-7 и RSH в ДФПГ тесте (MeOH, 20 oC).

Эксперименты по изучению антирадикальной активности выполнены совместно с к.х.н. Грачевой Ю.А.

Кинетические кривые восстановления ДФПГ в присутствии различных концентраций представлены на рисунке 4.

можно сделать вывод о том, что с введением фрагмента 2,6-ди-трет-бутилфенола и увеличением их числа растет антирадикальная активность.

Ингибирующая активность соединений 1-9 связана с возможностью отрыва атома водорода от фенольной группы и образованием соответствующих стабильных феноксильных радикалов, что подтверждено ранее методом ЭПР.

Таким образом, показано, что ООС, содержащие группу меркаптофенола, в отличие от соответствующих хлоридов олова – промоторов радикальных процессов, обладают антирадикальной активностью.

2.2.2. Антиоксидантная активность соединений Sn(IV) и Sn(II) в процессе пероксидного окисления олеиновой кислоты Одним из важнейших условий нормального функционирования клетки является стационарность уровня окислительных процессов в липидах. В этой части работы исследовано влияние тиолатов 1-9 на процесс окислительной деструкции цис-9-октадеценовой (олеиновой) (RH) кислоты как структурного фрагмента липидов. Данная система моделирует один из цепных радикальных биопроцессов - пероксидное окисление липидов (ПОЛ) биомембран.

Окисление проведено в течение 5 ч, при постоянном барботировании воздуха в термостатируемой установке при 65°С и 37°С. Выбор температур обусловлен тем, что 65°С моделирует состояние окислительного стресса, а 37°С является физиологической температурой. Влияние соединений 1-9 на скорость окисления олеиновой кислоты изучено в сравнении с соответствующими хлоридами RnSnCl4-n и SnCl2 как отдельно, так и совместно с 3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокситиофенолом.

Добавка всех оловоорганических соединений, не содержащих фрагмент пространственнозатрудненного фенола, способствует промотированию окислительного процесса при двух температурах, что согласуется с ранее полученными данными. Концентрация первичных продуктов окисления - изомерных гидропероксидов ROOH через 5 ч возрастает примерно в раза относительно контроля (Табл. 3) при указанных температурах. Сравнивая прооксидантное действие хлоридов Sn(IV) и SnCl2 в процессе окисления олеиновой кислоты при 65°С можно расположить их в следующий ряд по уменьшению прооксидантных свойств:

Et2SnCl2 > SnCl2> n-Bu2SnCl2> Ph2SnCl2> Me2SnCl2> Ph3SnCl > Me3SnCl Все соединения олова, содержащие тиофенольный фрагмент, ингибируют окисление олеиновой кислоты при 65°С и 37°С. Соединение 9 также проявляет ингибирующую активность, что можно объяснить наличием в структуре двух фрагментов пространственнозатрудненного фенола. Добавка RSH к соединению 9, приводит к еще большему снижению уровня накопления R''OOH.

По степени ингибирования окисления олеиновой кислоты при 65°С оловоорганические тиолаты образуют следующий ряд активности:

R2Sn(SR)2 > Et2Sn(SR)2 = Ph2Sn(SR)2 > Me3SnSR > Ph3SnSR > Sn(SR)2 > Me2Sn(SR)2 > nBu2Sn(SR) Значительное снижение уровня накопления гидропероксидов R''OOH при 65°С (на 70 - %), по сравнению с аналогичными показателями при 37°С (на 15 - 57%), объясняется, по видимому, тем, что при данной температуре скорость разложения R''OOH больше, чем скорость их образования.

Табл. 3. Влияние соединений олова на уровень накопления гидропероксидов олеиновой кислоты при 65°С через 5 ч в ходе окисления.* *Абсолютная концентрация [ROOH] в контрольном эксперименте (без добавок) мМ. В присутствии RSH концентрации ROOH составляет 14 % от контроля.

Наибольшую ингибирующую активность при данных температурах проявило соединение 5, содержащее в структуре четыре фенольных фрагмента, два из которых содержат серу. Более высокое антиокислительное действие данного соединения, вероятно, связано с его способностью реагировать с несколькими радикалами, образующимися на стадии зарождения или разветвления цепи.

Известно, что серосодержащие производные пространственно-затрудненных фенолов являются полифункциональными антиоксидантами, в которых возможно проявление внутреннего синергизма антиокислительной активности: фенольный фрагмент участвует в обрыве кинетической цепи в реакции с пероксильными радикалами, а сульфидный фрагмент молекулы разрушает гидропероксиды без образования радикалов.

индивидуальных соединений 1-8 и смеси соответствующих хлоридов и RSH, установлена более выраженная эффективность антиоксидантного действия комплексов 1-8.

Таким образом, введение в структуру оловоорганического соединения фрагмента 2,6-дитрет-бутилфенола приводит к инверсии прооксидантных свойств исходных оловоорганических соединений. Доказано, что увеличение числа фрагментов пространственнозатрудненного фенола в серосодержащей анионной части комплексов приводит к повышению их антиоксидантной активности. Полученные результаты могут быть использованы для создания фармацевтических препаратов, не оказывающих характерного для большинства подобных препаратов нежелательного побочного влияния на здоровые ткани.

2.2.3. Влияние оловоорганических соединений на ферментативное окисление линоленовой кислоты под действием липоксигеназы возникновения и/или развития заболеваний, являются ферменты липоксигеназы (LOX) – негемовые железосодержащие диоксигеназы, которые катализируют окисление полиненасыщенных жирных кислот. Ингибиторы липоксигеназ рассматриваются в качестве возможных противоопухолевых препаратов, поскольку продуктами окисления полиненасыщенных жирных кислот являются биологически активные вещества, играющие важную роль в воспалительных процессах, аллергии и раковых заболеваниях.

Нами исследовано влияние соединений олова на активность липоксигеназы (LOX 1-В).

Для этого определяли начальную скорость накопления изомерных гидропероксидов: 9гидроперокси-транс-10,цис-12 и 13-гидроперокси-цис-9,транс-11-октадекадиеновых кислот (HPOD)) – продуктов ферментативного окисления линолевой кислоты. Значение начальной скорости накопления HPOD в присутствии исследуемых соединений (v0) рассчитывали по формуле:

где c – концентрация гидропероксидов, t – время реакции, A – оптическая плотность, – молярный коэффициент поглощения, – угол наклона кинетической кривой.

Типичный вид кинетических кривых окисления линолевой кислоты представлен на рисунке 5. Исследования проводили в сравнении с RSН и соответствующими хлоридами RnSnCl4-n и SnCl2.

Все изученные нами хлорпроизводные оловоорганических соединений ингибируют активность LOX 1-В (Рис. 6). Степень ингибирования липоксигеназы определяли по формуле:

A(%) = 100-((Vo / Vo’)•100%).

По степени ингибирования (А) % оловоорганические хлориды располагаются в следующий ряд активности:

n-Bu2SnCl2 > R2SnCl2 > Ph3SnCl > SnCl2 > Ph2SnCl2 > Et2SnCl2 >Me3SnCl> Me2SnCl2, а тиолаты в следующий ряд:

Sn(SR)2 > n-Bu2Sn(SR)2 > Ph2Sn(SR)2 > Me3SnSR > Ph3SnSR > Et2Sn(SR)2 > Me2Sn(SR) Степень ингибирования фермента оловоорганическими тиолатами значительно ниже и лежит в интервале 54% - 11%. Наиболее эффективными ингибиторами среди них являются Sn(SR)2 8 и R2SnCl2 9.

Можно предположить, что ингибирование липоксигеназы в присутствии хлоридов обусловлено действием активных свободных радикалов, возникающих при взаимодействии ООС с образующимися при окислении линолевой кислоты пероксильными радикалами.

Высокая токсичность хлоридов Sn(IV) ограничивает возможность применения данных соединений в качестве потенциальных средств для регулирования симптомов, индуцируемых эндогенными метаболитами липоксигеназы. Тиолаты Sn(IV) и Sn(II), содержащие фрагменты пространственно-затрудненного фенола, проявили себя как менее выраженные ингибиторы LOX 1-B по сравнению с хлоридами Sn, что может быть связано с важной ролью фрагмента тиофенола в структуре ООС.

Таким образом, применение пространственно-затрудненного тиофенола в качестве детоксицирующей антиокислительной ловушки для оловоорганических соединений открывает возможность для поиска новых типов физиологически активных комплексов металлов.

2.3. Изучение биологической активности тиолатов Sn 2.3.1. Взаимодействие новых соединений олова с SH- группами тубулина В качестве биохимической мишени для ряда противораковых лекарственных средств выступает митотическое веретено, имеющее решающее значение в клеточном делении.

Тубулин - глобулярный димерный белок, содержащий в своей структуре более 20 свободных SH-групп. При полимеризации тубулина образуются микротрубочки, участвующие в формировании митотического веретена.

В работе изучено взаимодействие тиолатов Sn, содержащих фрагменты пространственнозатрудненного фенола, с SH-группами тубулина при взаимодействии с реактивом Эллмана дитио-бис-2-нитробензойной кислотой (ДТНБ). Метод основан на связывании доступных тиольных групп с ДТНБ в реакции тиол-дисульфидного обмена в слабощелочной среде. В результате реакции образуется анион 5-тио-2-нитробензойной кислоты (ТНБ), хиноидная форма которого имеет максимум поглощения 412 нм (Схема 5).

COOH COOH

Исследование влияния соединений олова на связывание SH–групп тубулина с ДТНБ показало, что большинство тиолатов Sn конкурируют с ДТНБ за связывание с SH-группами тубулина (Рис. 7.).

Наибольшее снижение концентрации свободных SH-групп тубулина наблюдается в присутствии соединений 5, 7 и R2SnCl2 9, что может быть обусловлено структурной комплементарностью между данными соединениями и одним из активных сайтов тубулина. В случае 9 связывание с тубулином может быть связано с комплексообразованием между Sn и SH- группами тубулина.

С целью определения эффективной концентрации (EC50) соединений 5,7 и 9, при которой наблюдается снижение реактивности тиольных групп тубулина на 50%, проведены кинетические эксперименты при различных концентрациях данных соединений (5 - 50 М) в сравнении с классическим ингибитором полимеризации тубулина - колхицином (Рис. 8).

Кинетические кривые связывания свободных SH-групп тубулина с ДТНБ в присутствии исследуемых соединений олова сходны с колхицином, что свидетельствует о взаимодействии данных соединений с колхициновым сайтом тубулина.

Значения EC50 для серии изученных соединений (Табл. 4) вычислены графически.

Антимитотический агент подофиллотоксин - лиганд колхицинового сайта тубулина, также связывается с колхициновым сайтом тубулина и оказывает аналогичное действие на полимеризацию тубулина как и колхицин. Сравнение значений ЕС 50 для подофиллотоксина и тиолатов Sn демонстрирует высокую эффективность связывания соединений R2Sn(SR) (5) и Ph3Sn(SR) (7) с тубулином.

Табл. 4. ЕС50 связывания соединений олова (1-7,9) с SH-группами тубулина в сравнении с колхицином (К) и подофиллотоксином (П) Таким образом, установлено, что исследуемые соединения олова можно рассматривать в качестве потенциальных антимитотических агентов, связывающихся с колхициновым сайтом тубулина.

Влияние соединений олова, содержащих фрагмент пространственнозатрудненого фенола, на скорость разложения пероксида водорода гемолизатом эритроцитов крови человека in vitro Одной из причин токсичности и развития окислительного стресса, промотированного ООС, может быть снижение способности эритроцитов крови разлагать пероксид водорода наиболее стабильную активированную форму кислорода, которая способна проникать через клеточные мембраны. Разложение Н2О2 с участием ионов металлов приводит к образованию активного гидроксильного радикала ОН, способного взаимодействовать с биомишенями. В живых организмах разложение Н2О2 осуществляется с участием пероксидаз. В частности, порфирины и их комплексы с металлами являются биомиметиками гемовых оксидоредуктаз.

В связи с этим важным представляется исследование влияния комплексов олова 1-9, а также водорастворимого мезо-тетра(4-сульфофенил)порфирина (H4TPPS, 11), его комплекса с триметилоловом ((CH3)3Sn)4TPPS, 12) на скорость разложения Н2О2 отмытыми эритроцитами крови человека in vitro. Изучена активность соответствующих оловоорганических соединений R'nSnCl4-n и их смесей с RSH и свободными основаниями мезо-тетра(3,5-ди-трет-бутил-4гидроксифенил)порфирина (R4PH2, 13) и мезо-тетрафенилпорфирина (TPPH2, 14).

Показано, что скорость фоновой реакции разложения пероксида водорода при рН 7.4 и температуре 25оС составляет 10% от скорости разложения Н2О2.

Табл. 5. Относительные скорости разложения Н2О2 в присутствии ООС.

Добавка к гемолизату эритроцитов хлоридов олова, не содержащих фрагмента пространственно-затрудненного фенола, а также порфиринов 13 и 14 приводит к снижению способности эритроцитов разлагать Н2О2 (Табл. 5).

В соответствии со степенью снижения скорости данного процесса, соединения олова можно расположить в следующий ряд активности:

n-Bu3SnCl > n-Bu2SnCl2 > Me3SnCl > Et2SnCl2 = Me2SnCl2 > Ph3SnCl > Ph2SnCl2 = SnCl Влияние ООС на скорость данной реакции определяется природой органической группы, а также, в случае производных c Me и Bu группами, числом этих групп. Увеличение числа алкильных заместителей приводит к снижению скорости процесса. Снижение скорости разложения Н2О2 гемолизатом эритроцитов в присутствии R4PH2 и TPPH2 составило 16% и 40%, соответственно.

Снижение скорости разложения Н2О2 в присутствии оловоорганических соединений R'nSnCl4-n можно предположительно объяснить ингибированием антиоксидантных ферментов – каталазы и пероксидазы, а также взаимодействием данных соединений с гемоглобином – основным компонентом гемолизата эритроцитов.

Добавка хлоридов дибутил- и дифенилолова в смеси с RSH приводит к возрастанию скорости разложения Н2О2 в среднем на 27% по сравнению с контролем. Еще большее повышение скорости разложения Н2О2 обнаружено при добавлении в гемолизат эритроцитов соединений олова 1-8 и (Me3Sn)4TPPS. Введение оловоорганического фрагмента в структуру сульфосодержащего порфирина приводит к увеличению скорости разложения Н2О2.

По уменьшению скорости данной реакции тиолаты Sn можно расположить в следующий ряд активности:

Ph2Sn(SR)2 > Ph3SnSR= n-Bu2Sn(SR)2 >(Me3)3Sn)4TPPS > Me3SnSR > (R)2Sn(SR)2 > Et2Sn(SR)2 > Me2Sn(SR)2 > (R)2SnCl2 = RSH > Sn(SR) Наибольшая эффективность установлена для соединения 4, скорость разложения Н2О2 в присутствии которого возрастает на 42%. Указанное влияние оловоорганических соединений, вероятно, свидетельствует о пероксидазной активности данных соединений, учитывая легкость их окисления.

Сравнивая оловоорганические соединения с тиофенольным и порфириновым фрагментами можно сделать вывод о том, что в большей степени повышение скорости разложения Н2О2 происходит в присутствии соединений, содержащих тиофенольный фрагмент (n-Bu2Sn(SR)2 (3), Ph2Sn(SR)2 (4), Ph3SnSR (7).

Известно, что одной из причин развития окислительного стресса, промотированного оловоорганическими соединениями, может быть снижение скорости разложения Н 2О гемолизатом крови человека. Введение фрагмента 2,6-ди-трет-бутилфенола в лигандное окружение комплексов приводит не только к нивелированию их негативного влияния на способность эритроцитов разлагать Н2О2, но и сопровождается увеличением скорости ферментативного разложения H2O2.

2.3.3. Цито- и нейротоксичность соединений олова с фенольными фрагментами Известно, что ООС, обладают высокой липофильностью и проявляют высокую цитостатическую активность. В данной части работы исследована цитотоксическая активность оловоорганических соединений с фенольными фрагментами на клеточных линиях рака молочной железы человека (MCF-7) и шейки матки человека (HeLa)3.

Концентрация соединений, при которой наблюдается 50% гибель раковых клеток (IC50) для соединений 1-7 представлена в Таблице 6. Наибольшую активность против обеих липофильностью.

Табл. 6. Цитотоксическая активность соединений 1-7 и R2SnCl2 на раковых клеточных линиях MCF-7 и HeLa.

Обнаружено, что соединения 2,3,4,6 и 7 проявляют более высокую активность, чем цисплатин, в отличие от гидрофильных соединений 1 и 5.

Таким образом, установлено, что все исследованные комплексы олова проявляют высокую цитотоксическую активность против раковых клеточных линий MCF-7 и HeLa, что позволяет рассматривать их в качестве перспективных цитостатиков.

Нами исследована нейротоксичность соединений олова с фрагментами тиофенола на культуре гранулярных нейронов мозжечка крыс с помощью стандартного МТТ – теста4.

Установлено, что исследуемые соединения снижают выживаемость гранулярных нейронов мозжечка (Рис. 9.). Уменьшение цитотоксичности наблюдается в ряду:

Ph3SnSR >n-Bu2Sn(SR)2 > Ph2Sn(SR)2 > RSH > Me2Sn(SR)2 > Et2Sn(SR)2 > Me3SnSR > Исследования проведены проф. S.K. Hadjikakou (Университет г. Иоаннины, Греция).

Исследования проведены к.х.н. Шевцовой Е.Ф. (Институт физиологически активных веществ РАН, г. Черноголовка).

Действие исследуемых соединений олова на выживаемость культуры клеток гранулярных нейронов зависит как от количества тиофенольных фрагментов в структуре соединения, так и от алкильного или арильного заместителя при атоме олова.

Согласно данным настоящего исследования, введение тиофенольного фрагмента в структуру оловоорганического соединения оказывает нейропротекторное действие, в присутствии соединения Me3SnSR выживаемость снижается на 43%. В ряду фенильных производных олова увеличение числа фенольных фрагментов приводит к снижению цитотоксичности, в ряду метильных производных – к увеличению.

Наименьшую цитотоксическую активность для данной культуры клеток проявило соединение (R)2Sn(SR)2, содержащее 4 фенольные группы. Следует отметить, что нейротоксичность оловоорганических тиолатов и RSH сопоставима.

Нейротоксичность может быть связана с подавлением дегидрогеназной активности митохондрий, а наличие тиофенольного фрагмента оказывает протекторное действие.

Таким образом, введение в структуру соединения пространственно-затрудненных фенольных фрагментов приводит к снижению нейротоксичности, что может найти применение в клинической практике.

ВЫВОДЫ

1. Синтезированы новые органичеcкие производные олова с фрагментами 3,5-ди-третбутил-4-гидрокситиофенола.

2. С помощью ЭПР и электрохимического метода (ЦВА) исследованы редокс-свойства соединений олова (IV) и (II), содержащих фрагмент 3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокситиофенола, окисление которых приводит к образованию феноксильных радикалов с дальнейшим гомолизом связи С-Sn.

3. Обнаружена высокая антирадикальная активность данных соединений с помощью ДФПГ-теста. Показано, что соединения олова с 2,6-ди-трет-бутилфенольными заместителями ингибируют пероксидное окисление ненасыщенных жирных кислот. При этом увеличение числа фенольных фрагментов в молекуле приводит к возрастанию ингибирующей активности.

4. Показано, что оловоорганические соединения R’nSnCl4-n (R’ = Me, Et, n-Bu, Ph) вызывают резкое снижение скорости ферментативной реакции разложения H2O2 эритроцитами крови in vitro, в то время как введение фрагмента 2,6-ди-трет-бутилфенола (R) в молекулы R’nSn(SR)4-n приводит к нивелированию их негативного влияния на эритроциты и увеличивает скорость разложения H2O2.

5. Установлено, что соединения олова ингибируют фермент липоксигеназа и связываются с SH-группами тубулина как одной из биохимических мишеней для потенциальных цитостатических агентов. Показана выраженная цитотоксичность 3,5-ди-трет-бутил-4гидрокситиофенолята трифенилолова на линиях раковых клеток человека (МСА-7 и HeLa).

6. С использованием культуры гранулярных нейронов мозжечка крыс показано, что 3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокситиофенольного оловоорганических соединений оказывает нейропротекторное действие, а увеличение числа фенольных групп в их молекулах снижает токсичность.

Основное содержание диссертации изложено в следующих работах:

Статьи по перечню ВАК и патенты:

1. Е.М. Мухатова, В.П. Осипова, М.Н. Коляда, Н.О. Мовчан, Д.Б. Шпаковский, Ю.А.

Грачева, С.И. Орлова, Е.Р. Милаева. Синтез и антирадикальная активность новых оловоорганических соединений, содержащих 2,6-ди-трет-бутилфенол // Доклады АН., 2013, T.

451, Вып. 1, с. 46-49.

2. Е.М. Мухатова, Н.Т. Лимонова, М.Н. Коляда, В.П. Осипова, Н.Т. Берберова, Ю.Т.

Пименов, Е.Р. Милаева. Протекторное влияние свободных оснований порфиринов на скорость разложения пероксида водорода гемолизатом эритроцитов крови человека в присутствии соединений ртути и олова // Макрогетероциклы, 2011, Вып. 4(3), с. 216-221.

3. М.Н. Коляда, В.П. Осипова, Н.Т. Лимонова, Н.Т. Берберова, Е.М. Лагутина (Мухатова). Влияние соединений ртути и олова на ферменты антиоксидантной защиты гемолизата эритроцитов крови // Вестник АГТУ, 2006, Вып. 6(35), с. 62-68.

4. М.Н. Коляда, В.П. Осипова, Н.Т. Пипия, Е.М. Лагутина (Мухатова), Н.Т. Берберова, Ю.Т. Пименов, Е.Р. Милаева. Влияние соединений ртути и олова на активность каталазы гемолизата эритроцитов крови человека in vitro // Вестник АГТУ, 2005, Вып. 6(29), с. 60-65.

5. М.Н. Коляда, Е.М. Лагутина (Мухатова), Н.Н. Федорова, Н.С. Алтуфьева, Ю.Т.

Пименов, Н.Т. Берберова. Биохимические механизмы влияния соединений олова и тетрафенилпорфирина на пищеварительные железы крыс // Вестник АГТУ, 2005, Вып. 3(26), с.

233-240.

6. Е.Г. Шварев, Н.Т. Берберова, Г.С. Добренькая, Е.М. Лагутина (Мухатова), М.Н.

Коляда, Л.В. Дикарева, О.Е. Зайцева. Способ диагностики стадий течения воспалительных заболеваний придатков матки // Патент РФ RU № 2291438, 10.01.2007. Бюлл. №1.

Тезисы докладов:

7. M.N. Кolyada, V.P. Osipova, E.M. Lagutina (Mukhatova), N.T. Limonova, N.T.

Berberova, Yu.T. Pimenov, E.R. Milaeva. The influence of meso-tetra(4-sulfonato-phenyl)porphine on the activity of blood ”erythrocyte”s catalase in the presence of Hg and Sn compounds // Vth Conference on cluster’s chemistry and Polynuclear Compounds (“CLUSTERS-2006”), Astrakhan, Russia, 2006, p. 44-45.

8. В.М. Игнатьева, Н.Т. Лимонова, Е.М. Лагутина (Мухатова), М.Н. Коляда, В.П.

Осипова, Н.Т. Берберова, Ю.Т. Пименов. Исследование влияния соединений ртути и олова на пероксидное окисление липидов в мембранах эритроцитов крови человека “in vitro” методом спектрофотометрии // I Международная конференция «Физико-химические методы исследования нанообъектов в химии, биологии и медицине», Туапсе, Россия, 2007, с. 65.

9. М.Н. Коляда, Е.М. Мухатова, Н.Т. Берберова. Влияние мезо-тетракис(3,5-ди-третбутил-4-гидроксифенил)-порфирина на активность каталазы гемолизата эритроцитов крови в присутствии оловоорганических соединений // Всероссийская молодежная конференция-школа, посвященная 150-летию со дня рождения А. Е. Фаворского, Санкт-Петербург, Россия, 2010, с.

198.

10. Yu.T. Pimenov, S.A. Smolyaninova, Е.М. Mukhatova, M.N. Кolyada, N.T. Limonova, V.P. Osipova, N.T. Berberova. The impact of organometallic compounds of mercury and tin at hemin // International conference «Topical problems of organometallic and coordination chemistry» (V Razuvaev lectures), N. Novgorod, Russia, 2010, P76.

11. Ю.Т. Пименов, Е.М. Мухатова, М.Н. Коляда, Н.Т. Лимонова, В.П. Осипова, Н.Т.

Берберова, Е.Р. Милаева. Влияние порфиринов на каталазную активность гемолизата эритроцитов крови человека в присутствии соединений ртути и олова // XI Международная конференция по физической и координационной химии порфиринов и их аналогов (ICPC-II), Одесса, Украина, 2011, с. 59.

12. Е.М. Mukhatova, V.P. Osipova, M.N. Kolyada, D.B. Shpakovsky, N.T. Berberova, E.R.

Milaeva. New complexes of tin with redox fragment based on 2,6-di-tert-butylphnol in sulfurcontaining ligand // Frontiers of Organometallic Chemistry (FOC-2012), Saint Petersburg, Russia, 2012, c. 98.

13. Е.М Мухатова, М.Н. Коляда, В.П. Осипова, Н.Т. Берберова, Е.Р. Милаева. Влияние оловоорганических соединений на активность липоксигеназы // Химия биологичecки активных веществ: Всероссийская школа-конференция молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием, Саратов, Россия, 2012, c.106.

14. Е.М. Мухатова, В.П. Осипова, М.Н. Коляда, Н.О. Мовчан, Н.Т. Берберова, Ю.А.

Грачева, Д.Б. Шпаковский, Е.Р. Милаева. Синтез и антиоксидантная активность новых оловоорганических соединений с 2,6-ди-трет-бутилфенольными группами // Международная междисциплинарная научная конференция «Биологически активные вещества и материалы:

фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения», Новый Свет, АР Крым, Украина, 2013, T. 2, с. 215.

15. Грачева Ю.А., Мухатова Е.М., Шпаковский Д.Б., Милаева Е.Р. Антимитотическая активность новых оловоорганических соединений с фенольными фрагментами // Международная междисциплинарная научная конференция «Биологически активные вещества и материалы: фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения», Новый Свет, АР Крым, Украина, 2013, T. 2, с. 135.

16. Е.М. Mukhatova, V.P. Osipova, M.N. Кolyada, D.B. Shpakovsky, N.T. Berberova, E.R.

Milaeva. Protective effect of 3,5-di-tert-butyl-4-hydroxythiophenolate ligand in organotin complexes on H2O2 decomposition by erythrocytes // International Symposium «Modern Trends in organometallic chemistry and catalysis, Moscow, Russia, 2013, c. 140.

17. Е.М. Мухатова, В.П. Осипова, М.Н. Коляда, Н.Т. Берберова Н.Т., Д.Б. Шпаковский, Е.Р. Милаева. Редокс-свойства новых оловоорганических соединений, содержащих фрагмент пространственно-затрудненного фенола // конференция “Электрохимические и электролитно-плазменные методы модификации металлических поверхностей”, Иваново, Россия, 2013, с. 141.

18. N.T. Berberova, Е.М. Mukhatova, V.P. Osipova, M.N. Кolyada, Y.A. Gracheva, D.B.

Shpakovsky, E.R. Milaeva. Redox properties and antiradical activity of novel organotin compounds with hindered phenol pendants // International conference “Organometallic and Coordination Chemistry: Fundamental and Applied Aspects” International Youth School-Conference on Organometallic and Coordination Chemistry, N. Novgorod, Russia, 2013. Р.12.

19. Грачева Ю.А., Мухатова Е.М., Шпаковский Д.Б., Шевцова Е.Ф., Милаева Е.Р.

Цитотоксическая активность новых оловоорганических соединений с S-лигандами // Первая Российская конференция по медицинской химии, Москва, Россия, 2013, с. 46.

Автор выражает признательность и благодарность за ценные советы и рекомендации доктору химических наук, профессору Милаевой Елене Рудольфовне, кандидату химических наук Осиповой Виктории Павловне, кандидату биологических наук Коляда Маргарите Николаевне.




Похожие работы:





Похожие работы:

«ГРИГОРЬЕВ Евгений Сергеевич МАГНИТОЭЛЕКТРИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ В СЛОИСТЫХ КОМПОЗИТАХ ФЕРРОМАГНЕТИК – ЦИРКОНАТ-ТИТАНАТ СВИНЦА Специальность: 01.04.07 – Физика конденсированного состояния АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата физико-математических наук Воронеж – 2013 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Воронежский государственный технический университет Научный руководитель доктор физико-математических наук, профессор, Калинин Юрий Егорович Официальные оппоненты :...»

«КАЛАДЗЕ Владимир Александрович ДИНАМИЧЕСКИЕ МОДЕЛИ СЛУЧАЙНЫХ ПРОЦЕССОВ СО СТАЦИОНАРНЫМИ ПРИРАЩЕНИЯМИ Специальность 05.13.18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора технических наук Воронеж – 2013 Работа выполнена в НОУ ВПО Международный институт компьютерных технологий. Официальные оппоненты : Алексеев Владимир Витальевич, доктор технических наук, профессор, ФГБОУ ВПО Тамбовский...»

«Ластовина Татьяна Александровна Pt-Cu/C ЭЛЕКТРОКАТАЛИЗАТОРЫ С РАЗЛИЧНЫМ ХАРАКТЕРОМ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАЛЛОВ В НАНОЧАСТИЦАХ Специальность: 02.00.04 – Физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Ростов-на-Дону – 2013 2 Работа выполнена в Федеральном государственном автономном образовательном учреждении высшего профессионального образования Южный федеральный университет на кафедре электрохимии Научный руководитель :доктор...»

«Морозова Елена Васильевна АНАЛИЗ КОНФОРМАЦИОННЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ДНК ПРИ КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИИ С КООРДИНАЦИОННЫМИ СОЕДИНЕНИЯМИ МЕТАЛЛОВ ПЛАТИНОВОЙ ГРУППЫ Специальность 02.00.06 – высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Санкт - Петербург 2012 Работа выполнена на Кафедре молекулярной биофизики Физического факультета Санкт-Петербургского государственного...»

«БУРАКОВА Елена Анатольевна ПРОЦЕССЫ И ОБОРУДОВАНИЕ АКТИВАЦИИ КАТАЛИЗАТОРА СИНТЕЗА МНОГОСЛОЙНЫХ УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБОК ФИЗИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ 05.17.08 – Процессы и аппараты химических технологий 02.00.05 – Электрохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Тамбов 2012 1 Работа выполнена на кафедре Техника и технологии производства нанопродуктов федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего...»

«Миренский Дмитрий Владимирович КРИЗИСЫ В ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ДИНАМИКЕ: ВОЗНИКНОВЕНИЕ, РАЗВИТИЕ И РЕГУЛИРОВАНИЕ 08.00.01 – экономическая теория АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата экономических наук Москва - 2013 Работа выполнена на кафедре основ экономической теории ФГБОУ ВПО Московский государственный институт электроники и математики (технический университет) Научный руководитель - доктор экономических наук, доцент Лебедев Константин Николаевич...»

«, H2O2 02.00.03 ( ) 002.222.01 ( )., 119991,,, 47. (499) 137-13-79 E-mail: sci-secr@ioc.ac.ru : 14 2013.., H2O2 02.00.03 – – 2013 13.. :, ( ) :, ( ),... :... 14 2013. 002.222... : 119991,.,,. 47. 13 2013. 002.222.01,. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования. Химия органических пероксидов насчитывает более ста лет своей истории. На протяжении этого периода времени кетоны и альдегиды стали ключевыми реагентами в синтезе пероксидов благодаря доступности...»

«Анциферов Александр Викторович ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ РЕШЕНИЯ ОЧИСТКИ ПРОМЫШЛЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД ОТ НЕФТЕПРОДУКТОВ (на примере ООО “Тольяттикаучук) 05.23.04 – Водоснабжение, канализация, строительные системы охраны водных ресурсов Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Самара – 2013 1 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Тольяттинский государственный университет. кандидат технических наук, доцент Научный руководитель Филенков Владимир Михайлович...»

«Руднева Валентина Евгеньевна РАЗВИТИЕ ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ УПРАВЛЕНИЯ ЭКОНОМИЧЕСКИМ ПОТЕНЦИАЛОМ КОММЕРЧЕСКОЙ ОРГАНИЗАЦИИ Специальность 08.00.12 – Бухгалтерский учет, статистика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата экономических наук Воронеж – 2013 2 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Воронежский государственный университет Научный руководитель –...»

«Смазнова Оксана Владимировна Неконвенционные факторы риска ишемической болезни сердца в открытой популяции г. Тюмени: распространенность, взаимосвязи 14.01.05 – кардиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск 2013 Работа выполнена в Филиале Федерального государственного бюджетного учреждения Научно-исследовательский институт кардиологии Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Тюменский кардиологический центр,...»

«Шкляр Татьяна Фридриховна КОНЦЕПЦИЯ МЕХАНОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО ПРЕОБРАЗОВАНИЯ В МИОКАРДЕ НА ОСНОВЕ ФИЗИКОХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЫ ЦИТОСКЕЛЕТА 03.03.01 – физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Челябинск – 2012 2 Работа выполнена в Центральной научно-исследовательской лаборатории ГБОУ ВПО Уральская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации. Научный консультант : Цывьян...»

«Печенкин Михаил Александрович МУЛЬТИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТНЫЕ МИКРОЧАСТИЦЫ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОЙ ДОСТАВКИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ИНСУЛИНОВ 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии) 02.00.06 – Высокомолекулярные соединения АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва – 2012 Работа выполнена на кафедре химической энзимологии Химического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова. Научные...»

«Донсков Дмитрий Геннадиевич РЕКОНСТРУКЦИЯ МОРФОГЕНЕЗА ЛИСТА МХОВ И ЕГО СВЯЗЬ С ФОРМОЙ ЛИСТА И ОСОБЕННОСТЯМИ БИОЛОГИИ ВИДОВ 03.02.01 – Ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2012 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор Игнатов Михаил Станиславович Официальные оппоненты : доктор...»

«Тютюнников Андрей Сергеевич ФОРМИРОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ОБЕСПЕЧЕНИЯ КОНКУРЕНТОСПОСОБНОСТИ ОРГАНИЗАЦИЙ ТУРИСТСКО-РЕКРЕАЦИОННОЙ СФЕРЫ 08.00.05. – экономика и управление народным хозяйством (рекреация и туризм) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата экономических наук Сочи – 2013 Работа выполнена в Кубанском институте международного предпринимательства и менеджмента Научный руководитель : доктор экономических наук, профессор Жуков Борис Михайлович Официальные...»

«БУЛГАКОВА Светлана Юрьевна СТРАТЕГИИ ДЕЛАКУНИЗАЦИИ ВО ФРАНЦУЗСКИХ ПЕРЕВОДАХ ПРОЗЫ И.А. БУНИНА Специальность 10.02.05 – романские языки АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Воронеж – 2013 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Воронежский государственный университет Научный руководитель : доктор филологических наук, доцент Фененко Наталья Александровна Официальные оппоненты : Алферов Александр Владимирович доктор филологических наук,...»

«Давыдов Яков Игоревич ЭВОЛЮЦИЯ КОПИЙНОСТИ БЕЛКА L12 В РИБОСОМАХ БАКТЕРИЙ И ОРГАНЕЛЛ ЭУКАРИОТ Специальность 03.01.03 — Молекулярная биология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва — 2013 Работа выполнена в Научно-техническом центре Биоклиникум Научный руководитель : доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент РАН Тоневицкий Александр Григорьевич Федеральное государственное бюджетное учреждение...»

«ТКАЧЕВ Александр Анатольевич ФОРМИРОВАНИЕ СОЦИАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ ГОСУДАРСТВЕННЫХ ГРАЖДАНСКИХ СЛУЖАЩИХ 22.00.08 – социология управления АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата социологических наук Белгород – 2012 Работа выполнена в федеральном государственном автономном образовательном учреждении высшего профессионального образования Белгородский государственный национальный исследовательский университет доктор социологических наук, профессор...»

«ЗОЛИНА Ольга Михайловна СОВЕТСКО-БРИТАНСКОЕ ПОЛИТИЧЕСКОЕ СОТРУДНИЧЕСТВО (КОНЕЦ 1970-х – НАЧАЛО 1990-х гг.) Специальность 07.00.02 – Отечественная история АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата исторических наук Воронеж – 2012 2 Работа выполнена на кафедре гуманитарных и социально-юридических дисциплин Воронежского института кооперации (филиал) АНОУ ВПО Белгородский университет кооперации, экономики и права доктор исторических наук, профессор Научный...»

«РАБАЕВ РУСЛАН УРАЛОВИЧ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИЙ ИЗГОТОВЛЕНИЯ КОМПОЗИЦИОННОЙ АНОДНОЙ МАССЫ НА ОСНОВЕ ОСТАТКОВ ВТОРИЧНЫХ ПРОДУКТОВ НЕФТЕХИМИИ И НЕФТЕПЕРЕРАБОТКИ Специальности: 07.00.10 – История наук и и техники 02.00.13 – Нефтехимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Уфа - 2012 2 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Уфимский государственный нефтяной технический университет Научный руководитель доктор технических наук, профессор...»

«25.00.16 –,, 2013 2 e-mail: kuzstu@kuzstu.ru d60 d50,, 1,7-1,75, -, -,, ;,, -, -,, -., - : - ( ), - - -,. : - - ; ; -. - - -. -, - - -. - - - -.. - -.. XII XV... (., 2008., 2011.), VII - (., 2004.), VII - - (., 2009.), - - - (., 2009.), V,, - X XI (. -., 2010.), III - - (.,.), XI, (. -, 2012.), (2010-2012..).,, II - (2009.) - - (2010.).. 13 -, 4,.. -,4,, 112, 17, 22 90., -,. 2012 200., 60%. - 255-300., -...»

 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.